MX2008011148A - Metodo y composicion para tratar enfermedad pulmonar obstructiva cronica. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a un método para tratar enfermedad pulmonar obstructiva crónica en un sujeto mamífero, que comprende administrar una cantidad efectiva de un compuesto bicíclico específico de la fórmula (I): (ver fórmula (I)) y/o un tautómero del mismo a un sujeto en necesitad del mismo.

Description

METODO Y COMPOSICION PARA TRATAR ENFERMEDAD PULMONAR OBSTRUCTIVA CRONICA CAMPO TECNICO La presente invención se refiere a un método y composición para tratar la enfermedad pulmonar obstructiva crónica en un sujeto mamífero.

TECNICA ANTECEDENTE La enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD, por sus siglas en inglés) es un estado de enfermedad caracterizado por limitación del flujo de aire que no es totalmente reversible. La limitación de flujo de aire generalmente es progresiva y se relaciona con una respuesta inflamatoria anormal de los pulmones a partículas nocivas o gases. La COPD es un término integral frecuentemente utilizado para describir dos condiciones de enfermedad de las vías respiratorias fijas, bronquitis crónica y enfisema, pero excluye el asma (limitación de flujo de aire reversible). El factor de riesgo más importante para COPD es fumar cigarros. La pipa, el cigarro y otro tipo de tabaquismo popular en muchos países también son factores de riesgo para la COPD. Otras causas de COPD, incluyen polvos ocupacionales y químicos (vapores, irritantes y emanaciones) cuando las exposiciones son suficientemente intensas o prolongadas, contaminación por aire interno de combustible de biomasa utilizado para cocinar y calentar en viviendas pobremente ventiladas o contaminación por aire externo, agrega una carga total a los pulmones de partículas inhaladas, aunque su papel específico en provocar COPD no se entiende totalmente. La exposición pasiva al humo de cigarro también contribuye a síntomas respiratorios y COPD. Las infecciones respiratorias en niños a temprana edad se relaciona con una función reducida de los pulmones y síntomas respiratorios incrementados en adultos (Global Initiative for Chronic Obstructive Lung Disease, POCKET GUIDE TO COPD DIAGNOSIS, MANAGEMENT, AND PREVENTION, A Guide for Health Care Professional, actualizada en julio del 2005). Un doctor reporta que las terapias actuales proporcionan únicamente alivio sintomático y puede volverse un tratamiento que puede alterar el desarrollo de COPD, ya sea reduciendo la pérdida progresiva de la función pulmonar o, de manera más importante, invirtiendo la enfermedad misma establecida. Sin embargo, ninguna de las terapias emergentes ha trasladado aún estos conceptos a un beneficio clínico. Muchos agentes en varias clases terapéuticas se han investigado. Sin embargo, no se espera que dirijan la necesidad clave no satisfecha de mitigar o invertir la pérdida progresiva de la función pulmonar. Las prostaglandinas (de aquí en adelante mencionadas como PG(s)) son elementos de clases de ácidos carboxílicos orgánicos, que se contienen en tejidos u órganos de humano u otros mamíferos, y presentan una amplia gama de actividad fisiológica. Las PGs encontradas en la naturaleza (PGs primarias) generalmente tienen una estructura de ácido prostanoico como se muestra en la fórmula (A): cadena ? Por otro lado, algunos análogos sintéticos de PGs primarias tienen estructuras modificadas. Las PGs primarias se clasifican en PGAs, PGBs, PGCs, PGDs, PGEs, PGFs, PGGs, PGHs, PGIs y PGJs de conformidad con la estructura de la porción de anillo de cinco elementos, y se clasifican además en los siguientes tres tipos por el número y posición del enlace no saturado de la porción de cadena de carbono: Subíndice 1 : 13, 14-insaturado-15-OH Subíndice 2: 5,6- y 13, 14-di insaturado-15-OH Subíndice 3: 5,6-, 13,14-, y 17,18-tri insaturado-15-OH. Además, las PGFs se clasifican, de conformidad con la configuración del grupo hidroxilo en la posición 9, en un tipo a (el grupo hidroxilo tiene una configuración a) y tipo ß (el grupo hidroxilo tiene una configuración ß). PG ET y PGE2 y PGE3 son conocidas por tener vasodilatación, hipotensión, disminución de secreción gástrica, mejora del movimiento tracto intestinal, contracción uterina, diurético, broncodilatación y actividades anti- úlcera. PG F1 a, PGF2 y PGF3„ han sido conocidas por tener actividades de hipertensión, vasoconstricción, mejora del movimiento del tracto intestinal, contracción uterina, atrofia del cuerpo de luteína y broncoconstricción. Algunos 15-ceto (es decir, que tienen oxo en la posición 15 en lugar de hidroxi) -PGs y 13, 14-dihidro (es decir, que tienen un enlace sencillo entre la posición 13 y 14) -1 5-ceto-PGs son conocidas como las sustancias producidas naturalmente por la acción de enzimas durante el metabolismo de PGs primarias. La patente de E.U.A. No. 5,254,588 para Ueno et al. describe que algunos compuestos de 15-ceto-PG son útiles para el tratamiento de una disfunción pulmonar. La patente de E.U.A. No. 5,362,751 para Ueno et al. describe que algunos compuestos de 15-ceto-PGE son útiles como traqueobroncodilatadores. La patente de E.U.A. No. 6,197,821 para Ueno et al. describe que algunos compuestos de 15-ceto-PGE son un antagonista para la endotelina que se considera tiene una relación con la hipertensión, enfermedad de Buerger, asma, enfermedades del fondo del ojo, y similares. La patente de E.U.A. No. 7,064,148 y la publicación de patente de E.U.A. No. 2003/0166632 para Ueno et al. describe aberturas del compuesto de prostaglandina y activa los canales de cloruro, especialmente los canales de CIC, más especialmente el canal de CIC-2.

Las referencias citadas anteriormente se incorporan en la presente por referencia. Se sabe cómo el compuesto bicíclico específico actúa en la COPD.

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION Un objetivo de la presente invención es proporcionar un método para el tratamiento de la enfermedad pulmonar obstructiva crónica en un paciente mamífero. En otro aspecto, un objetivo de la presente invención es proporcionar una composición farmacéutica para el tratamiento de enfermedad pulmonar obstructiva crónica en un paciente mamífero. El inventor de la presente realizó un estudio intenso y encontró que el compuesto bicíclico específico es útil para el tratamiento de COPD, lo cual ha dado como resultado la finalización de la presente invención. Principalmente, la presente invención se refiere a un método para tratar la enfermedad pulmonar obstructiva crónica en un sujeto mamífero, que comprende administrar una cantidad efectiva de un compuesto bicíclico representado por la fórmula (I): en donde ?? y A2 son átomos de halógeno ¡guales o diferentes y B es -CH3, -CH2OH, -COCH2OH -COOH, o sus sales farmacéuticamente aceptables, éteres, ésteres o amidas y/o su tautómero a un sujeto en necesidad del mismo. La presente invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva de un compuesto bicíclico representado por la fórmula anterior (I) y/o su tautómero para tratar la enfermedad pulmonar obstructiva crónica en un sujeto mamífero. La presente invención además proporciona el uso de un compuesto bicíclico representado por la fórmula anterior (I) y/o su tautómero, para fabricar una composición farmacéutica para tratar la enfermedad pulmonar obstructiva crónica en un paciente mamífero.

BREVE DESCRIPCION DE LOS DIBUJOS La figura 1 indica una gráfica que muestra la translocación del citocromo c de la mitocondria A549 después de 24 horas del tratamiento de CSE en presencia o ausencia de un compuesto A de 100 nM. Las células A549 se hicieron crecer hasta confluencia y se trataron con CSE en 1 % de (E), 2.5% de (H) y 5% de (K) durante 24 horas. Después de eso, se midió la translocación del citocromo c. Ni el DMSO al 0.1 % (B) (vehículo para el compuesto A) ni el compuesto A (C) sólo significativamente afectaron al citocromo c citosólico. CSE provocó un incremento importante en la translocación del citocromo c en una manera dependiente de la dosis. En todas las dosis de CSE, 100 nM del compuesto A (E, G, I) se protegieron contra la translocación del citocromo c inducida por CSE. Los datos se expresan como media ± SEM pg/pozo, n, el número de pozos por punto se muestra arriba de cada barra. Los datos se expresan como pg/pozo de citocromo c. Cada pozo contiene células 1 .5 x 105.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION El compuesto bicíclico utilizado en la presente invención representa por la fórmula (I): en donde Ai y A2 son átomos de halógeno iguales o diferentes y B es -CH3, -CH2OH, -COCH2OH -COOH, o sus sales farmacéuticamente aceptables, éteres, ésteres o amidas. El término "halógeno" se utiliza convencionalmente para incluir átomos de flúor, cloro, bromo y yodo. Los átomos de halógeno particularmente preferidos para ?? y A2 son átomos de flúor.

Las "sales farmacéuticamente aceptables" adecuadas incluyen sales no tóxicas convencionalmente utilizadas, por ejemplo una sal con una base inorgánica tal como una sal de metal alcalino (tal como sal de sodio y sal de potasio), una sal de metal alcalino térreo (tal como sal de calcio y sal de magnesio), una sal de amonio; o una sal con una base orgánica, por ejemplo, una sal de amina (tal como sal de metilamina, sal de dimetilamina, sal de ciclohexilamina, sal de bencilamina, sal de piperidina, sal de etilendiamina, sal de etanolamina, sal de dietanolamina, sal de trietanolamina, sal de tris(hidroximetilamino)etano, sal de monometil-monoetanolamina, sal de procaína y sal de cafeína), una sal de aminoácido básico (tal como sal de arginina y sal de lisina), sal de tetraalquilamonio y similares. Estas sales pueden ser preparadas por un procedimiento convencional, por ejemplo del ácido correspondiente y base o por medio del intercambio de sal. Ejemplos de los éteres incluyen alquil éteres, por ejemplo, alquil éteres inferiores tales como metil éter, etil éter, propil éter, isopropil éter, butil éter, isobutil éter, t-butil éter, gentil éter y 1 -ciclopropil etil éter; y alquiléteres medios o superiores tales como octal éter, dietilhexil éter, laurel éter y cetil éter; éteres insaturados tales como oleil éter y linolenil éter; alquenil éteres inferiores tales como vinil éter, alil éter; alquinil éteres inferiores tales como etinil éter y propinil éter; hidroxi (inferior) alquil éteres tales como hidroxietil éter e hidroxi isopropil éter; alcoxi (inferior) alquil éteres inferiores tales como metoximetil éter y 1 -metoxietil éter; aril éteres opcionalmente sustituidos tales como fenil éter, tosil éter, t-butilfenil éter, salicil éter, 3,4-di-metoxifenil éter y benzamidofenil éter; y aril (inferior) alquil éteres tales como bencil éter, tritil éter y bencidril éter. Ejemplos de ésteres incluyen ésteres alifáticos, por ejemplo, alquil ésteres inferiores tales como metil éster, etil éster, propil éster, isopropil éster, butil éster, isobutil éster, t-butil éster, pentil éster y 1-ciclopropiletil éster; alquenil ésteres inferiores tales como vinil éster y alil éster; alquinil ésteres inferiores tales como etinil éster y propinil éster; hidroxi (inferior) alquil éster tal como hidroxietil éster; alcoxi (inferior) alquil ésteres inferiores tales como metoximetil éster y 1 -metoxietil éster; y aril ésteres opcionalmente sustituidos tales como, por ejemplo, fenil éster, tolil éster, t-butilfenil éster, salicil éster, 3,4-di-metoxifenil éster y benzamidofenil éster; y aril (inferior) alquil éster tal como bencil éster, tritil éster y bencidril éster. La amida de B significa un grupo representado por la fórmula -CONR'R", en donde cada uno de R' y R" es átomo de hidrógeno, alquilo inferior, arilo, alquil- o aril sulfonilo, alquenilo inferior y alquinilo inferior, e incluye por ejemplo alquilamidas inferiores tales como metilamida, etilamida, dimetilamida y dietilamida; arilamidas tales como anilida y toluidida; y alquil- o aril-sulfonamidas tales como metilsulfonilamida, etilsulfonilamida y tolilsulfonilamida. La modalidad preferida comprende una compuesto bicíclico de fórmula (I) en donde A-i y A2 son átomos de flúor, y B es -COOH. El compuesto bicíclico de esta invención existe como una forma bicíclica en un estado sólido, pero parcialmente forma un tautómero del compuesto anterior cuando se disuelve en un solvente. En ausencia de agua los compuestos representados por la fórmula (I) existen predominantemente en forma del compuesto bicíclico. En un medio acuoso, se cree que el enlace de hidrógeno ocurre entre, por ejemplo, la cetona en la posición C-15, impidiendo así la formación del anillo bicíclico. Además se cree que los átomos de halógeno en la posición C-16 promueven la formación del anillo bicíclico. El tautomerismo entre el hidroxi en la posición C-1 1 y la porción ceto en la posición C-15, que se muestra más abajo, es especialmente importante en el caso de compuestos que tienen un enlace sencillo 13, 14 y dos átomos de flúor en la posición C-16. De acuerdo con la presente invención, dicho "tautómero" del compuesto de fórmula (I), por ejemplo, un tautómero mono-cíclico que tiene un grupo ceto en la posición C-15 y los átomos de halógeno en la posición C-16, también pueden utilizarse para el tratamiento.

Un compuesto preferido de conformidad con la invención en su forma monocíclica puede nombrarse como 13,14-dihidro-15-ceto-16,16-d¡fluoro-18(S)-met¡l-PEGi , de acuerdo con la nomenclatura de prostanglandina convencional.

El compuesto utilizado en la presente invención puede prepararse por el método descrito en US No. 5,739,161 (la referencia citada en la presente se incorpora por referencia). De acuerdo con la presente invención, un sujeto mamífero puede ser tratado por la invención actual al administrar el compuesto utilizado en la presente invención. El sujeto puede ser cualquier sujeto mamífero incluyendo un humano. El compuesto puede aplicarse sistémica o tópicamente. Generalmente, el compuesto puede ser administrado por administración oral, administración intranasal, administración por inhalación, inyección intravenosa (incluyendo infusión), inyección subcutánea, administración intra rectal, administración transdérmica y similares. La dosis puede variar dependiendo de la cepa del animal, edad, peso corporal, síntoma a ser tratado, efecto terapéutico deseado, vía de administración, término del tratamiento y similar. Un efecto satisfactorio puede ser obtenido por administración sistémica o tópica 1-4 veces por día o administración continua en la cantidad de 0.00001 -500 pg/kg por día, preferiblemente 0.0001 -100 pg/kg, más preferiblemente 0.001 -10 pg/kg. El compuesto puede formularse preferiblemente en una composición farmacéutica adecuada para administración en una manera convencional. La composición puede ser aquella adecuada para administración oral, administración intranasal, administración por inhalación, inyección o perfusión como también puede ser un agente externo, supositorio o pesario.

La composición de la presente invención puede además contener aditivos fisiológicamente aceptables. Dichos aditivos pueden incluir los ingredientes utilizados con los compuestos de la presente, tal como excipiente, diluyente, llenador, resolvente, lubricante, adyuvante, aglutinante, desintegrador, agente de revestimiento, agente encapsulante, base de ungüento, base de supositorio, agente en aerosol, emulsificante, agente de dispersión, agente de suspensión, espesante, agente de tonicidad, agente regulador de pH, agente sedante, conservador, antioxidante, corregidor, sabor, colorante, un material funcional tal como ciclodextrina y un polímero biodegradable, estabilizador. Los aditivos son bien conocidos en la técnica y pueden ser seleccionados con aquellos descritos en los libros de referencia generales de productos farmacéuticos. La cantidad del compuesto anteriormente mencionado en la composición de la invención puede variar dependiendo de la formulación de la composición, y puede generalmente ser de 0.00001 -10.0%, más preferiblemente 0.00001 -5.0%, más preferiblemente 0.0001 -1 %. Ejemplos de composiciones sólidas para administración oral incluyen tabletas, trociscos, tabletas sublinguales, cápsulas, pildoras, polvos, gránulos y similares. La composición sólida puede prepararse al mezclar uno o más ingredientes activos con al menos un diluyente inactivo. La composición puede además contener aditivos diferentes a los diluyentes inactivos, por ejemplo, un lubricante, un desintegrador y un estabilizador. Las tabletas y pildoras pueden revestirse con una película entérica o gastroentérica, si es necesario. Pueden cubrirse con dos o más capas. También pueden absorberse en un material de liberación sostenida, o microencapsularse. Adicionalmente, las composiciones pueden encapsularse por medio de un material fácilmente degradable tal como gelatina. También pueden disolverse en un solvente apropiado tal como ácido graso o su mono-, di o triglicérido para ser una cápsula suave. La tableta sublingual puede ser utilizada si se requiere una propiedad de acción rápida. Ejemplos de dichas composiciones líquidas para administración oral, administración intranasal o administración por inhalación incluyen emulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elixires y similares. Dicha composición puede además contener diluyentes inactivos convencionalmente utilizados, por ejemplo agua purificada o alcohol etílico. La composición puede contener aditivos diferentes a los diluyentes inactivos tales como adyuvante, por ejemplo, agentes humectantes y agente de suspensión, edulcorantes, sabores, fragancias y conservadores. La composición de la presente invención puede estar en forma de una composición de aspersión que contiene uno o más ingredientes activos y pueden prepararse de conformidad con un método conocido. Ejemplos de las preparaciones intranasales pueden ser soluciones acuosas u oleosas, suspensiones o emulsiones que comprenden uno o más ingredientes activos. Para la administración de un ingrediente activo por inhalación, la composición de la presente invención puede estar en forma de suspensión, solución o emulsión que puede proporcionar aerosol o en forma de un polvo adecuado para inhalación de polvo seco. La composición para administración por inhalación puede además comprender un propelente convencionalmente utilizado. Ejemplos de las composiciones inyectables de la presente invención para administración parenteral incluyen soluciones acuosas o no acuosas estériles, suspensiones y emulsiones. Los diluyentes para la solución acuosa o suspensión pueden incluir, por ejemplo, agua destilada para inyección, solución salina fisiológica y solución de Ringer. Los diluyentes no acuosos para solución y suspensión pueden incluir, por ejemplo, propilenglicol, polietilenglicol, aceites vegetales tales como aceite de oliva, alcoholes tales como etanol y polisorbato. La composición puede además comprender aditivos tales como conservadores, agentes humectantes, agentes emulsificantes, agentes de dispersión y similares. Estos pueden ser esterilizados por filtración a través, por ejemplo, de un filtro de retención de bacterias, formación de compuestos con un esterilizador, o por medio de esterilización por irradiación de gas o radioisótopo. La composición inyectable también puede proporcionarse como una composición en polvo esterilizada a ser disuelta en un solvente esterilizado para inyección antes de su uso. Otra forma de la presente invención es un supositorio o pesario, que puede preparase al mezclar los ingredientes activos en una base convencional tal como manteca de cacao que se suaviza a temperatura corporal, y pueden utilizarse agentes tensoactivos no iónicos que tienen temperaturas de reblandecimiento adecuadas para mejorar la capacidad de absorción. El término "tratamiento" o "tratar" utilizados en la presente, incluyen cualquier medio de control tal como prevención, cuidado, alivio de la condición, atenuación de la condición y detención del progreso. Como se menciona anteriormente, el término "enfermedad pulmonar obstructiva crónica" o "COPD" incluye un estado de enfermedad caracterizado por limitación del flujo de aire que no es totalmente reversible. La COPD es un término integral frecuentemente utilizado para describir dos condiciones de la enfermedad de las vías respiratorias fijas, bronquitis crónica y enfisema. Asimismo, el compuesto de la presente es útil para el tratamiento de COPD incluyendo bronquitis crónica y enfisema. COPD con frecuencia se relaciona con exacerbaciones de los síntomas y muchas exacerbaciones son provocadas por infección del árbol traqueobronquial o un incremento en la contaminación del aire. De acuerdo con la presente invención, también se proporciona el tratamiento de la infección con base en o acompañado por COPD al utilizar la composición farmacéutica de la invención. La composición farmacéutica de la presente invención puede contener uno o más compuestos de fórmula (I) y pueden además contener uno o más ingredientes farmacológicamente activos diferentes al compuesto de fórmula (I) siempre que no contradigan el propósito de la presente invención.

Detalles adicionales de la presente invención seguirán con referencia a los ejemplos de prueba que, sin embargo, no pretenden limitar la presente invención.

EJEMPLO 1 Métodos Se expusieron conejillos de indias a humo de cigarro utilizando un sistema un sistema de tabaquismo (INH 06-CIGO1A, M.l.P.S. Inc.). Cada animal se colocó en un soporte de exposición, y el soporte se fijó en una cámara de exposición. El humo de cigarro de 30 cigarros por día (Peace®, Japan Tobacco Inc.) se extrajo de un generador de humo en la cámara de exposición, 5 días por semana, durante 25 días (días 1 a 25). En un grupo de exposición simulada, el aire atmosférico, en lugar de humo de cigarro, se introdujo en la cámara de exposición. Una solución acuosa del compuesto A (13, 14-dihídro-15-ceto-16,16-difluoro-18 (S^metil-PGE!) se evaporizó utilizando un nebulizador presurizado (LC Plus Nebulizer, Pari GmbH) y se inhaló por los animales en una cámara de un sistema de inhalación (SIS-A, Sibata Scíentific Technology Ltd.) durante 30 minutos durante 1 hora antes de la exposición al humo de cigarro. La resistencia específica de las vías respiratorias (sRaw) de animales conscientes se midió mediante una técnica pletismo-gráfica de flujo doble con un sistema de medición de la función respiratoria (Pulmos-1 , M.l.P.S Inc.) en el día 26. Después de las mediciones de sRaw, los animales se anestesiaron con cetamina (60 mg/kg) y xilazina (8 mg/kg), y la traquea se canuló. La función pulmonar se midió utilizando un sistema de medición de la función pulmonar (Biosystem Manoeuvers, Buxco Electronics, Inc.). Los parámetros de la medición consistían en un volumen residual (RV, por sus siglas en inglés) y un volumen respiratorio forzado a 100 mseg (FEV 0o)- Después de la medición de la función pulmonar, los animales se sacrificaron mediante exsanguinación bajo anestesia, y se abrió el tórax. Cinco milímetros de solución salina se instilaron en los pulmones a través de una cánula traqueal, y el fluido de lavado se recuperó mediante aspiración suave. Este procedimiento se repitió y el fluido de lavado recuperado se combinó (10 mi en total, un fluido de lavado bronquioalveolar, BALF). Se contó el número de macrófagos (monocito) en el BALF.

Resultados Como se muestra en el cuadro 1 , la resistencia específica de las vías respiratorias (sRaw) en el grupo control se incrementó mediante la exposición a humo de cigarro en comparación con el grupo de exposición simulada. El compuesto A inhibió significativamente el incremento en sRaw inducido por la exposición a humo de cigarro en comparación con el grupo de control.

Como se muestra en el cuadro 2, el volumen residual (RV) en el grupo de control incrementó y el volumen espiratorio forzado a 100 mseg (FEV 0o) disminuyó mediante la exposición a humo de cigarro en comparación con aquéllos del grupo de exposición simulada. El compuesto A inhibió significativamente estos cambios inducidos por la exposición a humo de cigarro en comparación con el grupo de control. Como se muestra en el cuadro 3, el número de macrófagos (monocito) en el fluido de lavado bronquioalveolar en el grupo control se incrementó mediante la exposición a humo de cigarro en comparación con el del grupo de exposición simulada. El compuesto A inhibió significativamente el incremento en el número de macrófagos (monocito) inducido por la exposición a humo de cigarro en comparación con el grupo de control.

CUADRO 1 Efecto del compuesto A en resistencia específica de las vías respiratorias (sRaw) en conejillos de indias expuestos a humo de cigarro p<0.01 significativamente diferente del grupo de exposición simulada ** p<0.01 significativamente diferente del grupo de control CUADRO 2 Efectos del compuesto A en un volumen residual (RV) y volumen espiratorio forzado a 100 mseg (FEV QQ) en conejillos de indias expuestos a humo de cigarro p<0.05, p<0.01 significativamente diferente del grupo de exposición simulada * p<0.05, ** p<0.01 significativamente diferente del grupo de control.

CUADRO 3 Efecto del compuesto A en un conteo celular de macrofagos (monocito) en fluido de lavado bronquioalveolar en conejillos de indias expuestos a humo de cigarro # p<0.01 significativamente diferente del grupo de exposición simulado * p<0.05 significativamente diferente del grupo de control Estos resultados muestran que el compuesto A es benéfico para tratar COPD.

EJEMPLO 2 Métodos El humo de 8 cigarros se retiró lentamente a través de 100 mi de un medio de cultivo libre de suero y la suspensión resultante se filtró a través de un filtro de 0.20 µ?p. La solución fue considerada como un extracto de humo de cigarro al 100% (CSE, por sus siglas en inglés). Las células tipo II alveolares de pulmón de humano (A549) se hicieron crecer en placas de 96 pozos durante 48 horas a una concentración final de 1 .5 x 105 células por pozo. Las células entonces se trataron de manera separada con el compuesto A 100 nM o 1 %, 2.5% y 5% de CSE. En otros grupos, el compuesto A 100 nM se agregó junto con 1 %, 2.5% o 5% de CSE. Todas las incubaciones se realizaron a 37°C durante 24 horas. Después de 24 horas de tratamiento, las células se lavaron con 0-4°C PBS tres veces. La medición del citocromo c que se translocó en el citosol, un marcador de lesión celular, se realizó de conformidad con las instrucciones proporcionadas con un equipo para pruebas ELISA de citocromo c.

Resultados CSE en la escala de 1 .08%-5% provocó un incremento dependiente de la dosis en la liberación del citocromo c de la mitocondria en el citosol de las células (translocación) medido después de 24 horas de tratamiento. Como se muestra en la figura 1 , no hubo un incremento importante en la translocación del citocromo c en CSE al 1 % comparado con el control sin DMSO al 0.1 %, pero la translocación fue importante para CSE al 2.5% y 5% (P<0.01 y P<0.005, respectivamente). Los resultados similares se observan cuando se comparan con el control de DMSO al 0.1 % para 1 %, 2.5% y 5% de CSE (NS, P<0.01 , y P<0.05, respectivamente). El compuesto A disminuyó significativamente la translocación del citocromo c comparado con el control de DMSO al 1 %, 2.5% y 5% de CSE (P<0.05, P<002 y P<0.005 respectivamente). Los resultados demuestran efectos protectores del compuesto A en las células alveolares. Estos resultados muestran que el compuesto A es benéfico para tratar COPD. Aunque la invención se ha descrito a detalle y con referencia a las modalidades específicas, será evidente para un experto en la técnica que varios cambios y modificaciones pueden realizarse a la presente sin apartarse del espíritu y alcance de la misma.

Claims (6)

NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES

1 .- Uso de un compuesto bicíclico representado por la fórmula I en donde Ai y A2 son átomos de halógeno iguales o diferentes y B es -COOH, incluyendo sus sales farmacéuticamente aceptables, éteres, éteres o amidas y/o su tautómero para fabricar una composición farmacéutica para el tratamiento de la enfermedad pulmonar obstructiva crónica en un sujeto mamífero.

2. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde Ai y A2 son átomos de flúor.

3. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 2, en donde B es -COOH.

4.- Una composición farmacéutica para tratar una enfermedad pulmonar obstructiva crónica en un sujeto mamífero, que comprende una cantidad efectiva de un compuesto bicíclico representado por la fórmula (I): en donde Ai y A2 son átomos de halógeno ¡guales o diferentes y B es -COOH, incluyendo sus sales farmacéuticamente aceptables, éteres, ésteres o amidas y/o su tautómero.

5. - La composición de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada además porque Ai y A2 son átomos de flúor.

6. - La composición de conformidad con la reivindicación 5, caracterizada además porque B es -COOH.