MX2007016307A - Tratamiento de condiciones inflamatorias. - Google Patents

Abstract

La invencion se refiere a metodos para inhibir la produccion y funcion de 3-desoxiglucosona y otros azucares alfa-dicarbonilo en la piel con lo cual se tratan o previenen diversas enfermedades, trastornos o condiciones; adicionalmente, la invencion se refiere al tratamiento de diversas enfermedades, trastornos o condiciones asociadas o mediadas por estres oxidativo debido a que el 3DG induce ROS y AGEs, estan asociadas con la respuesta inflamatoria causada por el estres oxidativo.

Description

TRATAMIENTO DE CONDICIONES INFLAMATORIAS ANTECEDENTES DE LA SNVENC8QM Las aminas biológicas reaccionan con azúcares reductores para formar una familia de complejos de aductos covalentes rearreglados y deshidratados que incluyen muchas estructuras entrelazadas. Los químicos de alimentos han estudiado extensamente este procedimiento, referido como glucación o la reacción de Maillard, como una fuente de cambios de sabor, color, y textura en alimentos cocinados, procesados y almacenados. No obstante se conoce que este procedimiento también ocurre lentamente in vivo. En una reacción de glucación, los compuestos alfa-dicarbonilo tales como desoxiglucosona, metilglioxal, y glioxal son más reactivos que los azúcares padres con respecto a su habilidad para reaccionar con grupos amino de proteínas para formar entrelanzamientos inter e intramoleculares de proteínas, referidas como productos finales de glucación avanzada (AGEs o proteínas AGE -por sus siglas en inglés). La formación de proteínas AGE a partir de azúcares es un procedimiento de etapas múltiples, que involucra reacciones tempranas, reversibles con azúcares para producir proteínas que contienen fructosa-lisina. Estas proteinas modificadas entonces continúan reaccionando para producir proteínas AGE modificadas irreversiblemente. Las proteínas AGE no son idénticas a las proteínas que contienen residuos glucados-lisina, porque los anticuerpos que se generan en contra de las proteínas AGE no reaccionan con fructosa-lisina. Los AGEs, que se forman irreversiblemente, se acumulan con el envejecimiento, ateroesclerosis, y diabetes mellitus, y están especialmente asociados con proteínas de larga vida tales como colágenos, cristalinos, y proteínas de nervios. En el caso de complicaciones diabéticas, se piensa que las reacciones que llevan a las proteínas AGE son aceleradas cinéticamente por la hiperglucemia crónica asociada con esta enfermedad. Se ha mostrado que las proteínas de la larga vida tales como colágeno y cristalinos de sujetos diabéticos contienen un contenido significativamente mayor de proteína AGE que aquellos de edad similar de controles normales. Entonces, la incidencia inusual de cataratas en diabéticos a una edad relativamente temprana, así como la activación temprana de la rigidez de articulaciones y arterias y pérdida de la capacidad pulmonar observada en diabéticos se explica por la velocidad incrementada de modificación y entrelazamiento de estas proteínas estructurales. De igual manera, la retinopatía diabética puede explicarse por el entrelazamiento incrementado de las proteínas de nervios en el ojo. Se cree que el azúcar alfa-dicarbonilo 3-desoxiglucosona (3DG) es un intermediario clave en la trayectoria de etapas múltiples que lleva a la formación de proteínas AGE. El 3DG es un entrelazador potente de proteínas y se ha mostrado que es capaz de inducir apoptosis, mutaciones, y formación de especies con oxígeno activo.

Muchos estudios se han concentrado en la función del 3DG en la diabetes. Se ha mostrado que los humanos diabéticos tienen elevados niveles de 3DG y 3-desoxifructosa (3DF), el producto de destoxificación de 3DGs, en plasma (Niwa et al., 1993, Biochem. Biophys. Res. Commun. 196:837-843; Wells-Knecht et al., 1994, Diabetes. 43:1152-1156) y en orina (Wells-Knecht et al., 1994, Diabetes. 43:1152-1156), en comparación con individuos no diabéticos. Más aún, se encontró que los diabéticos con nefropatía tenían niveles elevados de 3DG en plasma en comparación con no diabéticos (Niwa et al., 1993, Biochem. Biophys. Res. Commun. 196:837-843). Un estudio reciente de comparación de pacientes con diabetes mellitus dependiente de insulina (IDDM -por sus siglas en inglés) y diabetes mellitus no dependiente de insulina (NIDDM - por sus siglas en inglés) confirmaron que los niveles de 3GD y 3DF estuvieron elevados en sangre y orina de ambos tipos de poblaciones de pacientes (Lal et al., 1995, Arch. Biochem. Biophys. 318:191-199). También se ha mostrado que la incubación de glucosa y proteínas in vitro bajo condiciones fisiológicas produce 3DG. A su vez, se ha demostrado que los glicatos 3DG y proteínas entrelazadas, crean productos AGE detectables (Baynes et al., 1984, Methods Enzymol. 106:88-98; Dyer et al., 1991 , J. Biol. Chem. 266:11654-11660). La trayectoria normal para la destoxificación reductiva de 3DG (conversión a 3DF) puede estar desequilibrada en humanos diabéticos debido a que su proporción de 3DG en orina y plasma difiere significativamente de individuos no diabéticos (Lal et al., 1995, Arch Biochem. Biophys. 318:191-199).

Más aún, se han encontrado niveles elevados de proteínas modificadas 3DG en riñones de ratas diabéticas comparados con riñones de ratas de control (Niwa et al., 1997, J. Clin. Invest. 99:1272-1280). Se ha demostrado que el 3DG tiene la habilidad de inactivar enzimas tales como la glutationa reductasa, una enzima antioxidante central. También se ha mostrado que los niveles de hemoglobina AGE son elevados en individuos diabéticos (Makita et al., 1992, Science 258:651-653) y se ha mostrado en modelos experimentales que otras proteínas AGE se acumulan con el tiempo, incrementando de 5-50 veces sobre periodos de 5-20 semanas en la retina, cristalino y córtex renal de ratas diabéticas (Brownlee et al., 1994, Diabetes 43:836-841). Adicionalmente, se ha demostrado que el 3DG es un factor teratogénico en la embriopatía diabética (Eríksson et al., 1998, Diabetes 47:1960-1966). Una trayectoria de formación de 3DG comprende una reacción reversible entre glucosa y los grupos e-NH2 de las proteínas que contienen lisina, formando una base Schiff (Brownlee et al., 1994, Diabetes 43:836-841). Esta base Schiff se rearregla entonces para formar una cetoamina más estable conocida como fructosalisina (FL) o el "producto Amadori." Inicialmente se creía que la producción de 3DG resultaba exclusivamente del subsiguiente rearreglo no enzimático, deshidratación, y fragmentación de la proteína que contiene fructosalisina (Brownlee et al., 1994, Diabetes 43:836-841 y Makita et al., 1992, Science 258:651-653). Pero trabajos más recientes han mostrado que también existe una trayectoria enzimática para la producción de 3DG y que esta trayectoria produce concentraciones relativamente altas de 3DG en órganos afectados por diabetes (Brown et al., Pat. E.U.A. No. 6,004,958). En la trayectoria enzimática, una cinasa específica (referida en la presente como fructosalisina cinasa) convierte la fructosa-lisina en fructosa-lisina-3-fosfato (FL3P) en una reacción dependiente de ATP, y el FL3P entonces se rompe para formar lisina libre, fosfato inorgánico, y 3DG (Brown et al., Pat. E.U.A. No. 6,004,958). También se han descrito métodos para evaluar el riesgo diabético, con base en la medición de componentes de la trayectoria 3DG (WO 99/64561). La Pat. de E.U.A. No. 6,004,958 describe una clase de compuestos que inhibe la conversión enzimática de fructosa-lisina a FL3P, con lo cual se inhibe la formación de 3DG y otros azúcares alfa-dicarbonilos producidos a través de esta trayectoria. También se han descrito los compuestos específicos que son representativos de esta clase (Brown et al., WO 98/33492). Por ejemplo, se describió en WO 98/33492 que el 3DG de orina o plasma puede reducirse por meglumina, sorbitollisina, manitollisina, y galactitollisina. También se describió en WO 98/33492 que las dietas altas en proteínas glicadas son dañinas al riñon y causan una disminución en la tasa de natalidad. Adicionalmente, la trayectoria de fructosalisina se reportó estar involucrada en la carcinógenesis de riñon (WO 98/33492) también se sugirió además que la dieta y 3DG ejercen una función en la carcinogénesis asociada con la trayectoria de fructosalisina (WO 00/24405; WO 00/62626).

Una vez formada, la 3DG puede destoxificarse en el cuerpo por lo menos por dos trayectorias, en una trayectoria, la 3DG se reduce a 3-desoxifructosa (3DF) por aldehido reductasa o aldosa reductasa, y el 3DG entonces se excreta eficientemente en la orina (Takahashi et al., 1995, Biochemistry 34:1433; Sato, et al., 1993, Arch. Biochem. Biophys. 307:286-94). Otra reacción de destoxificación oxida 3DG a ácido 3-desoxi-2-cetoglucónico (DGA -por sus siglas en inglés) por oxoaldehido deshidrogenasa (Fujii et al., 1995, Biochem. Biophys. Res. Comm. 210:852). Los resultados de los estudios a la fecha muestran que la eficiencia de por lo menos una de estas enzimas, aldehido reductasa, se afecta adversamente en la diabetes. Cuando se aisla del hígado de rata diabética, esta enzima está glucada en lisina en las posiciones 67, 84 y 140 y tiene baja eficiencia catalítica cuando se compara con la enzima normal, no modificada (Takahashi et al., 1995, Biochemistry 34:1433). Debido a que los pacientes diabéticos tienen mayores proporciones de proteínas glucadas que los individuos normoglucémicos es probable que tengan ambos niveles altos de 3DG y una habilidad reducida de destoxificar esta molécula reactiva por reducción a 3DF. También se ha encontrado que la sobreexpresión de aldehido reductasa protege a las células PC 12 de los efectos citotóxicos del metilglioxal o 3DG (Suzuki et al., 1998, J. Biochem. 123:353-357). Se ha estudiado el mecanismo por el cual trabaja el aldehido reducatsa. Estos estudios demostraron que esta importante enzima de destoxifricación se inhibe por inhibidores de aldosa/aldehido reductasa (ARIs - por sus siglas en inglés) (Barski et al., 1995, Biochemistry 34:11264). Los ARIs están actualmente bajo investigación clínica por su potencial para reducir las complicaciones diabéticas. Estos compuestos, como una clase, han mostrado algunos efectos en las complicaciones diabéticas de corto plazo. No obstante, carecen de efecto clínico en complicaciones diabéticas de largo plazo y empeoran la función del riñon en las ratas alimentadas con una dieta alta en proteínas. Este hallazgo es consistente con la trayectoria metabólica recientemente descubierta para la recuperación de lisina. Por ejemplo, una dieta alta en proteínas incrementará el consumo de fructosa-lisína, que a su vez sufre la conversión a 3DG por la trayectoria de recuperación de lisina por riñon. La destoxificación del 3DG resultante por reducción a 3DF será inhibida por la terapia de ARIs. La inhibición de la destoxificación de 3DG llevará a niveles de 3DG incrementados, con un incremento concomitante en el daño al riñon, como se compara con ratas que no recibieron ARs. Esto se debe a que la inhibición de la aldosa reductasa por los ARs podría reducir la disponibilidad de la aldosa reductasa para reducir 3DG y 3DF. Se ha demostrado que la aminoguanidina, un agente que destoxifica 3DG farmacológicamente a través de la formación de derivados covalentes que se excretan rápidamente (Hirsch et al., 1992, Carbohydr. Res. 232:125-130), reduce las patologías retínales, neuronales, arteriales, y renales asociadas con AGE en modelos animales (Brownlee et al., 1994, Diabetes 43:836-841 ; Brownlee et al., 1986, Science 232:1629-1632; Ellis et al., 1991 , Metabolism 40:1016-1019; Soulis-Liparota et al., 1991 , Diabetes 40: 1328-1334; y Edelsteín et al., 1992, Diabetologia 35:96-97). La función de los azúcares alfa-dicarbonilos y la formación de proteínas AGE en las complicaciones diabéticas se ha estudiado extensamente, como se podrá entender del análisis presentado antes. Pero la función patogénica de los azúcares alfa-dícarbonilos y las proteínas AGE no se limita a la diabetes. Por ejemplo, la glucación de proteínas se ha implicado en la enfermedad de Alzheimer (Harrington et al., Nature, 370: 247 (1994)). Adicionalmente, la formación de proteínas AGE en el colágeno de la pared vascular parece ser un evento especialmente nocivo, causando el entrelazamiento de las moléculas de colágeno entre sí y a las proteínas circulantes. Esto lleva a la formación de placa, espesor de la membrana de basamento, y pérdida de elasticidad vascular (Cerami & Ulrich, 2001 , Recent Prog Horm Res:56:1-21). También se ha observado un incremento en la fluorescencia de las proteínas con el envejecimiento. Algunas teorías relacionan al procedimiento de envejecimiento con una combinación de daño oxidativo y modificación de proteínas inducida por el azúcar. Entonces, también puede ser útil una terapia que reduce la formación de proteínas AGE al tratar otros estados de enfermedad humanos etiológicamente similares, y probablemente hacer más lento el procedimiento de envejecimiento. En particular Tobia y Kappler (Publicación de Patente de E.U.A. No. 2003/0219440 A1) describen el efecto de los azúcares alfa-dicarbonilos y las proteínas AGE en la condición y envejecimiento de la piel. La E.U.A. 2003/0219440 reporta que el 3DG está presente en la piel humana y que el gen que codifica la enzima que regula la síntesis de 3DG se expresa en la piel. La E.U.A. 2003/0219440 describe composiciones y métodos para inhibir la síntesis de 3DG inducida enzimaticamente y la acumulación en la piel, así como inhibir la función de 3DG o incrementar la velocidad de destoxificación y remoción del 3DG de la piel. Ejemplos representativos de aquellas composiciones y métodos fueron propuestos para reducir el entrelazamiento de colágeno in vitro y para mejorar la elasticidad de la piel en ratas diabéticas STZ (por sus siglas en inglés). Un enlace entre proteínas AGE y respuestas proinflamatorias también se ha establecido en enfermedades y trastornos en los cuales la inflamación es un componente por ejemplo, los AGEs contribuyen a la enfermedad del riñon debido a la diabetes o envejecimiento por medio de receptores de células mesangiales (MC -por sus siglas en inglés), tales como el receptor para AGE (RAGE), que promueve la activación de NF-kB dependiente de estrés oxidante y la expresión del gen inflamatorio (Lu et al., 2004, Proc Natl Acad Sci USA 32: 11767-11772). Se ha reportado que el entrelazamiento AGE de proteínas contribuye a la cascada patogénica de la inflamación mediada por citocina e interferón-? en la enfermedad de Alzheimer (Munch et al, 2003, Biochem. Soc. Trans. 31 : 1397-1399). Se ha reportado que una forma común de proteínas AGE (proteínas modificadas (CML) N-e(carboximetil)lisina) interconecta receptores AGE celulares (RAGE) in vitro y en in vivo para activar trayectorias de señalización de células clave tal como el factor de transcripción NF-kB, con la subsiguiente modulación de la expresión del gen (Kisslinger et al., 1999, J Biol Chem 274: 31740-31749). Estos hallazgos de la interacción de AGE-RAGE enlazados al desarrollo de complicaciones inflamatorias y vasculares aceleradas que tipifican trastornos en los cuales la inflamación es un componente establecido. También se ha reportado que la exposición corta de células mesoteliales a aún un simple producto de degradación de glucosa (por ejemplo, 3DG) resulta en la formación incrementada de AGEs, daño citotóxico incrementado y una respuesta proinflamatoria, evidenciada por un incremento en la expresión de VCAM-1 y producción elevada de IL-6 y IL-8 (Welten et al., 2003, Perit Dial Int. 23: 213-221). Como puede apreciarse del análisis anterior, las condiciones detrimentales asociadas con proteínas AGE y sus agentes causantes subyacentes, azúcares alfa- y carbonilos, en tejidos son muchos y variados, e incluyen enfermedades y trastornos inflamatorios. Aunque están disponibles tratamientos para las diversas condiciones inflamatorias, hasta ahora no se han dirigido a los factores causantes tales como las proteínas AGE y los compuestos que llevan a la formación de proteínas AGE. De conformidad, existe una necesidad que presiona para identificar y desarrollar composiciones y métodos para el tratamiento de inflamación que estén dirigidos a aquellos factores subyacentes. Adicionalmente, existe una necesidad para el tratamiento de trastornos relacionados con la inflamación, tales como dolor y comezón, que estén relacionados con las trayectorias metabólicas como se describen en la presente. La presente invención cumple estas necesidades.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La invención incluye un método para el tratamiento de una condición inflamatoria en un mamífero, el método comprende la administración al mamífero de una composición que comprende un inhibidor de una trayectopa enzimática que produce un azúcar alfa-dicarbonilo en el mamífero, la administración resulta en la reducción o eliminación del azúcar alfa-dicarbonilo en un sitio en el mamífero, el sitio estando afectado por la condición inflamatoria, con lo cual se trata la condición inflamatoria. La invención también incluye un método para el tratamiento de dolor en un mamífero, el método comprende administrar a un mamífero una composición que comprende un inhibidor de una trayectoria enzimática que produce un azúcar alfa-dicarbonilo en el mamífero, la administración resulta en la reducción o eliminación del azúcar alfa-dicarbonilo en un sitio en el mamífero, el sitio estando afectado por dolor, con lo cual se trata el dolor. La invención también incluye un método para el tratamiento de comezón en un mamífero, el método comprende administrar a un mamífero una composición que comprende un inhibidor de una trayectoria enzimática que produce un azúcar alfa-dicarbonilo en el mamífero, la administración resulta en la reducción o eliminación del azúcar alfa-dicarbonilo en un sitio en el mamífero, el sitio estando afectado por la comezón, con lo cual se trata la comezón. En otro aspecto, la composición se administra al mamífero por una ruta tópica, oral, rectal, vaginal, intramuscular, subcutánea, de transdérmica o intravenosa, o a través del consumo de un producto nutricéutico por el mamífero. En otro aspecto, una composición comprende un inhibidor de una trayectoria Amadorasa. En otro aspecto, la composición comprende un inhibidor de fructosamina cinasa. En aún otro aspecto, la composición comprende un inhibidor de la función de un azúcar alfa-dicarbonilo. En una modalidad, el azúcar alfa-dicarbonilo es 3DG. En aún otro aspecto, la composición comprende un inhibidor de fructosamina cinasa y un inhibidor de la función de un azúcar alfa-dícarbonilo. En otra modalidad, un compuesto simple puede actuar como un inhibidor de fructosamina cinasa y un inhibidor de la función de un azúcar alfa-dicarbonilo. En otra modalidad, un inhibidor de fructosamina cínasa y un inhibidor de la función de un azúcar alfa-dicarbonilo son dos o más compuestos separados. En un aspecto de la invención, una composición incluye por lo menos dos inhibidores o compuestos para el tratamiento de acuerdo con la invención. En un aspecto de la invención, se usa una composición para tratar inflamación. En otro aspecto, se usa una composición para tratar dolor, en aún otro aspecto, se usa una composición para tratar comezón. En un aspecto, se usa una composición para tratar por lo menos dos condiciones del grupo que consiste de inflamación, dolor, y comezón. En un aspecto de la invención, la administración de una composición resulta en la reducción o eliminación de 3DG en el siíio en el mamífero afectado por la condición de inflamación. En un aspecto, el mamífero es un humano. En un aspecto de la invención, la condición inflamatoria es por lo menos una de escleroderma, eczema, una condición alérgica, enfermedad de Alzheimer, anemia, agiogénesis, estenosis de válvula aórtica, ateroesclerosis, írombosis, artritis reumatoide, osteoartritis, gota, artritis gotosa, pseudogota aguda, artritis gotosa aguda, inflamación asociada con cáncer, falla cardíaca congestiva, cisliíis, fibromalgia, fibrosis, glomerulonefrilis, inflamación asociada con enfermedad gastrointestinal, enfermedades inflamatorias de intestino, falla de riñon, glomérulonefritis, infarto al miocardio, enfermedades oculares, pancrealiíis, psoriasis, lesiones o daños por reperfusión, trasíornos respiralorios, reestenosis, choque séptico, choque endotóxico, urosepsis, trastornos cerebrovascular, complicaciones quirúrgicas, lupus eritematoso sistémico, erupción polimórfica del embarazo, arteriopatía asociada con transplaníes, reacción injerto contra hospedero, rechazo de aloinjerto, rechazo de transplante crónico, vasculitis. En otro aspecto, un cáncer es por lo menos un cáncer tal como NSCLC (por sus siglas en inglés), cáncer ovárico, cáncer pancreáíico, carcinoma de mama, carcinoma de colon, carcinoma de recio, carcinoma de pulmón, carcinoma orofaríngeo, carcinoma hipofaríngeo, carcinoma esofágico, carcinoma de estómago, carcinoma de páncreas, carcinoma de higado, carcinoma de vesícula biliar, carcinoma del ducto biliar, carcinoma del intestino delgado, carcinoma del tracto urinario, carcinoma de riñon, carcinoma de vejiga, carcinoma de urotelio, carcinoma del íracto genital femenino, carcinoma de cérvix, carcinoma de útero, carcinoma de ovarios, coríocarcinoma, enfermedad trofoblástica de gestación, carcinoma del tracto genital masculino, carcinoma de próstata, carcinoma de vesículas seminales, carcinoma de testículos, tumores de células germinales, carcinoma de glándulas endocrinas, carcinoma tiroideo, carcinoma adrenal, carcinoma de glándula pituitaria, carcinoma de piel, hemangiomas, melanomas, sarcomas, sarcoma de huesos y tejido suave, sarcoma de Kaposi, tumores de cerebro, íumores de los nervios, tumores de los ojos, tumores de las meninges, asirociíomas, gliomas, glíoblaslomas, reíinoblaslomas, neuromas, neuroblasíomas, Schwannomas, meningiomas, íumores sólidos que surgen de malignidades hematopoiéíicas, y tumores sólidos que surgen de linfomas. En un aspecío, los íumores sólidos que surgen de malignidades hemaíopoiéíicas se seleccionan del grupo que consiste de leucemias, cloromas, plasmacitomas y las placas y tumores de micosis fúngicas y linfoma/leucemia de células T cuíáneas. En oíro aspecío, una enfermedad gasío ¡níeslinal se selecciona del grupo que consisle de úlceras añosas, faringiíis, esofagiíis, úlcera péplica, gingivitis, periodontítis, mucositis oral, mucositis gastrointestinal, mucositis nasal, y procíiíis. En otro aspecto, la enfermedad inflamatoria de intesíino se selecciona el grupo que consisíe de enfermedad de Chron, colitis ulcerativa, colitis indeterminada, enterocolitis necrotizaníe, y colitis infecciosa. En un aspecto de la invención, la enfermedad ocular se selecciona del grupo que consiste de conjuntivilis, retinitis, y uveiíis. En otro aspecto, el trastorno respiratorio se selecciona del grupo que consisíe de asma, lesión de pulmón dependiente de fagocito mononuclear, fibrosis pulmonar idiopáíica, enfermedad pulmonar obsírucíiva crónica, síndrome de dislrés respiralorio adulto, síndrome de pecho agudo en enfermedad de células drepanocitosas, fibrosis cística. En otra modalidad de la invención, el dolor es por lo menos uno de arácnoiditis, artritis, osteoartrilis, artritis reumatoide, espondilolisis anquilosante, gola, íendoniíis, ciáíica bursiíis, espondilolisíesis, radiculopaíía, dolor por quemadura, dolor por cáncer, dolores de cabeza, migrañas, cefalea en racimos, dolores de cabeza por íensíón, neuralgia írigeminal, dolor miofacial, dolor neuropálico, dolor asociado con neuropatía diabética, síndrome de distrofia simpática de reflejo, dolor de extremidad fantasma, dolor post amputación, tendonitis, tenosinoviíís, neuralgia postherpética, dolor asociado con Herpes zoster, síndrome de dolor ceníral, dolor asociado con írauma, vasculiíis, dolor asociado con infecciones, íumores de piel, quisíes, dolor asociado con íumores asociados con neurofibromaslosis, dolor asociado con distensiones, moretones, dislocaciones, fracturas, y dolor debido a la exposición a productos químicos. En olra modalidad de la invención, la comezón es el resulíado de una condición seleccionada del grupo que consisle de comezón cutánea, comezón neuropática, comezón neurogénica, comezón del tipo mixío, y comezón psicogénica. En una modalidad de la invención, una composición comprende además un fármaco antiinflamatorio no esteroideo (NSAID -por sus siglas en inglés). En un aspecto, un fármaco antiinflamatorio no esíeroideo (NSAID) se selecciona el grupo que consisíe de ibuprofen (ácido 2-(¡sobutílfenil)-propiónico); metotrexato (ácido N-[4-(2,4 diamino 6-pteridinil-metil]metílamino]benzoil)-L-glutám¡co); aspirina (ácido acetílsalicílico); ácido salicílico; difenhidramina (clorhidraío de 2-(difenilmeíoxí)-NN-dimetíletilamina); naproxen (ácido 2-naftalenacético, 6-metoxi-9-metil-, sal de sodio, (-)); fenilbutazona (4-butil-1 ,2-difenil-3,5-pirazolídind¡ona); ácido sulindac-(2)-5-fuoro-2-meíil-1 -[[p-(meíilsulfinil)fenil]meíilen-]-1 H-indeno-3-acético; ácido diflunisal (2',4',-difluoro-4-hidroxi-3-bifenilcarboxílico; píroxicam (4-hidrox¡-2-metil-N-2-pirídinil-2H-1 ,2-benzotiazina-2-carboxamida 1 ,1-dióxide, un oxicam; ¡ndometacin (ácido 1 -(4-clorobenzoil)-5-metoxi-2-melil-H-indol-3-acético); meclofenamato sódico (sal de sodio del ácido N-(2,6-dicloro-m-íolil) aníranílico, monohidraío); cetoprofen (ácido 2-(3-benzoilfenil)-propiónico; tolmeíin sódico (1-meíil-5-(4-meíilbenzoil-1 H-pirrolo-2-aceíaío sódico dihidraío); diclofenac sódico (sal monosódica del ácido 2-[(2,6- diclorofenil)amino]bencenoáíico); sulfato de hidroxicloroquina (2-{[4-[(7-cloro-4-quinolíl) amino]pentil]etilamino}etanol sulfato (1 :1); penicillamina (3-mercapío-D-valina); flurbiprofen (ácido [1 ,1-bifenil]-4-acéíico, 2-fluoro-alfameíil-, (+-.)); cetodolac (ácido 1-8-dieíil-13,4,9, letra hidropirano-[3-4-13]indolo-1 -acético; ácido mefenámico (ácido N-(2,3-xilil)antranílico; y clorhidrato de difenhidramina (clorhidrato de 2-difenil metoxi-N, N-di-meíileíamina). En un aspecto, el inhibidor de la fructosamina cinasa es un agente que inhibe la transcripción de un gen que codifica la fructosamina cinasa o íransducción de un mRNA que codifica la frucíosamina cínasa. En otro aspeclo, el compuesto es meglumina. En otro aspecto, la composición comprende además arginina. En un aspecto, el resullado del Iratamiento es mayor que el resultado aditivo de un íralamienío que usa meglumina sola y un íraíamienlo que usa arginina sola. En un aspecto de la invención, el compuesto se selecciona del grupo que consisíe de galacíiíol lisina, 3-desox¡ sorbiíol lisina, 3-desoxi-3-fluoro-?iliíol lisina, 3-desoxi-3-ciano sorbiíol lisina, 3-O-melil sorbilollisina, sorbitol lisina, mannitol lisina, sorbitol y xilitol. En otro aspecío, la composición comprende un compuesío que contiene cobre. En un aspecto, el compuesto que contiene cobre se selecciona del grupo que consiste de un conjugado de cobre-ácido salicílico, un conjugado de cobre-péptido, un conjugado de cobre-aminoácido, y una sal de cobre. En otro aspecto, el compuesto que contiene cobre se selecciona del grupo que consiste de un conjugado cobre-lisina y un conjugado cobre-arginina. En un aspecto de la invención, un inhibidor de 3DG quela 3DG, detoxifica 3DG. En un aspecto, el inhibidor es un compuesío similar a N-meíil-glucamina. En otro aspecto, el inhibidor comprende meglumina. En oíro aspecío, el inhibidor comprende además arginina. En oíro aspecío, el inhibidor de la función del azúcar alfa-dicarbonilo inhibe el entrelazamiento de proteínas. En otro aspecto, el inhibidor de la función azúcar alfa-dicarbonilo inhibe la formación de especies con oxígeno reactivo. En otro aspecío, el inhibidor de la función de azúcar alfa-dicarbonilo inhibe la apopíosis. En oíro aspecío, el inhibidor de la función del azúcar alfa-dicarbonilo inhibe la mutagenicidad. En otro aspecío, el inhibidor de la función del azúcar alfa-dicarbonilo inhibe la formación de proteínas modificadas de producto íerminal de glucación. En otro aspecto, el inhibidor es arginina o un derivado o modificación del mismo. La invención íambién incluye un méíodo para el íraíamiento de una condición inflamatoria en un mamífero, el método comprende administrar al mamífero una composición que comprende un inhibidor de un un azúcar alfa-dicarbonilo en el mamífero, la administración resulta en la reducción, eliminación o inhibición de la función del azúcar alfa-dícarbonilo en un sitio en el mamífero, el sitio estando afectado por la condición inflamatoria, con lo cual se íraía la condición inflamaíoria. En un aspecto, la administración de la composición resulía en la reducción, eliminación o inhibición de la función de 3DG en el silio en un mamífero afecíado por la condición inflamatoria. La invención también incluye un método para el tratamiento del dolor en un mamífero, el método comprende adminisírar al mamífero una composición que comprende un inhibidor del azúcar alfa-dicarbonilo en el mamífero, la administración resulta en la reducción, eliminación o inhibición de la función del azúcar alfa-dicarbonilo en un sitio en el mamífero, el siíio esíando afecíado por el dolor, con lo cual se írata el dolor. En un aspecío, la adminisíración de la composición resulía en la reducción, eliminación o inhibición de la función de 3DG en el sitio en el mamífero afectado por el dolor. La invención íambién incluye un método para el tratamienío de comezón en un mamífero, el mélodo comprende la adminislración al mamífero de una composición que comprende un inhibidor de un azúcar alfa-dicarbonilo en el mamífero, la administración resulta en la reducción, eliminación o inhibición de la función del azúcar alfa-dicarbonilo en un sitio en el mamífero, el sitio estando afectado por la comezón, con lo cual se trata la comezón. En un aspecto, la administración de la composición resulta en la reducción, eliminación o inhibición de la función de 3DG en el sitio en el mamífero afectado por la comezón.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS El resumen anlerior, así como la siguieníe descripción detallada de las modalidades preferidas de la invención, se entenderá mejor cuando se lea conjuntamente con los dibujos anexos. Para los propósitos de ilustración de la invención, se muestran en las modalidades de dibujos que son aclualmeníe preferidos. No obsíaníe, deberá eníenderse, que la invención no se limiía a las disposiciones precisas e inslrumentalidades mostradas. En los dibujos: La Figura 1 es una gráfica que representa un perfil urinario que muestra la variación con el tiempo de 3DF, 3DG y FL de un individuo simple alimentado con 2 gramos de FL y seguido por 24 horas. La Figura 2 es una gráfica que representa la excreción de 3DF en orina con el tiempo de siete voluntarios alimentados con 2 gramos de fructosalisina. La Figura 3 compara gráficamente los niveles de 3DF y N-acelil-ß-glucosaminidasa (NAG) en animales de conírol y en un grupo experimenial maníenido con alimeníación con un conlenido de 3% de proteína glucada (Brown). et al. La Figura 4 es una gráfica que demuestra la relación lineal entre los niveles de 3DF y 3DG en orina de ratas alimentadas ya sea con una dieta de control o con una dieta enriquecida en proteína glucada (Brown et al., Paíeníe de E.U.A. No. 6,004,958).

Las Figuras 5A y 5B, describen gráficamenle los niveles en ayuno de 3DG urinario en sujeíos normales y en pacíeníes diabéticos, fraileados en coníra el nivel en ayuno de 3DF. Las Figuras 6A y 6B describen imágenes de foíomicrografias que ilustran los efectos de una dieía que contiene altos niveles de proíeína glucada en el riñon. Las secciones de riñon teñidas con ácido periódico y Schíff (PAS) se prepararon de una rata alimenlada de una diela enriquecida en proíeína glucada levemeníe (Figura 6A) y una raía alimenlada con una dieía normal (Figura 6B). En este experimento, las ratas no diabólicas fueron alimeníadas con una dieta que contenía 3% de proteína glucada por 8 meses. Esta dieta elevó sustancialmente los niveles de FL y sus metabolitos (> 3 veces en el riñon). La Figura 6A es una imagen de una fotomicrografía de un glomérulo de una rala alimentada con la dieta glucada por 8 meses. El glomérulo muestra esclerosis segmentaria del penacho glomerular con adhesión del área escleróíica a la cápsula de Bowman (izquierda inferior). También hay meíaplasia tubular del epitelio parietal de aproximadamente 9 a 3 en punto. Estos cambios escleróticos y metaplásicos son reminiscentes de las patologías observadas en enfermedades de riñon de diabéticos. La Figura 6B es una imagen de una rata en la dieta de control por 8 meses, que comprende un glomérulo histológicamente normal. La Figura 7 es una gráfica de comparación de los niveles de 3DG y 3DF en las fracciones glomerular y tubular de riñones de rata después de la alimeníación con FL.

La Figura 8 es una imagen que describe la secuencia de ácido nucleico (SEQ ID NO:1) de amadorasa humana (fruclosamina-3- cinasa), número de acceso NCBI NM 022158. El número de acceso para el gen humano en el cromosoma 17 es NT_010663. La Figura 9 es una imagen que describe la secuencia de aminoácidos (SEQ ID NO:2) de amadorasa humana (fruclosamina-3- cinasa), número de acceso NCBI NP_071441. La Figura 10 es una imagen de un gel de poliacrilamida que demuestra los efectos del 3DG en el entrelazamienlo del colágeno y la inhibición del enírelazamienío inducido por 3DG de arginina. El colágeno íípo I se trató con 3DG en la presencia o ausencia de arginina. Las muestras se sometieron a digestión con bromuro de cianógeno (CNBr), electroforesis en un gel de Tris-tricina al 16.5%, y eníonces los geles se procesaron usando íécnicas de teñido de plata para visualizar las proleinas. La línea 1 contiene estándares de marcador de peso molecular. Las líneas 2 y 5 contienen 10 y 20 µl de la mezcla de colágeno seguida por digestión con CNBr. Las líneas 3 y 6 que contenían la mezcla de colágeno se tralaron con 3DG y enlonces por digestión con CNBr, y se cargaron a 10 y 20 µl, respectivameníe. Las líneas 4 y 7 que conlenían la mezcla de colágeno se incubaron con 5mM de 3DG y 10 mM de arginina y entonces por digestión con CNBr, y se cargaron a 10 y 20 µl, respeclivamente. La Figura 11 es una imagen de un gel de agarosa que demuestra que el mARN para amadorasa/fructosamina cinasa está presenie en la piel humana. Se utilizó RT-PCR (por sus siglas en inglés) y las secuencias de amadorasa publicadas se usaron como la base para preparar los modelos para PCR. Con base en los cebadores usados (ver Ejemplos) para la reacción de PCR, la presencia de un fragmento de 519 bp en el gel indica la presencia de amadorasa mARN. La expresión de la amadorasa, basada en la presencia de amadorasa mARN indicada por un fragmenío de 519 bp, se encontró en el riñon (línea 1) y en la piel (línea 3). Ningún fragmento 519 bp se encontró en las líneas de control, las cuales contenían cebador pero no modelo (líneas 3 y 4). La línea 5 contenía marcadores de peso molecular de ADN. La Figura 12 es una ilustración gráfica de los efectos del traíamíento con DYN 12 (3-O-metilsorbitollisina) en la elasticidad de la piel. Ratas diabéticas o normales se trataron con DYN 12 (50 mg/kg diariamente) o Salina por ocho semanas y entonces se sometieron a pruebas de elasticidad de piel. Los cuatro grupos usados incluyeron controles diabéticos (inyección de salina; barra negra sólida), diabéticas traíadas con DYN 12 (barra abierta), animales de conlrol normales (inyecciones de salina; barra puníeada), y animales normales íraíados con DYN 12 (barra sombreada). Los daíos expresan en kilopascales (kPA). La Figura 13 es una ilustración gráfica de los efectos del tratamienío con DYN 12(3-0-meíilsorbiíollisina) en la elasíicidad de la piel. Las ratas diabéticas o normales se íraíaron con DYN 12 (50 mg/kg diaríameníe) o salina por ocho semanas y entonces se sometieron a pruebas de elasíicidad de piel. Los cuatro grupos usados incluyeron controles diabéticos (inyección de salina; barra negra sólida), diabéticas traíadas con DYN 12 (barra abierta), animales de conírol normales (inyecciones de salina; barra puníeada), y animales normales íraíados con DYN 12 (barra sombreada). Los daíos expresan en kilopascales (kPA) y se muestran como promedios de los resultados obtenidos con cada grupo particular de los sujetos de prueba. Las mediciones se lomaron en la pierna posterior de los sujetos de prueba y se tomaron en un animal despierto restringido por un técnico. La Figura 14 es una ilustración esquemática de una írayectoria metabólica novedosa en el riñon. La formación de 3DG en el riñon ocurre usando cualquiera de proteína glucada endógena o proteína glucada derivada de fuentes alimenticias. Por la vía de la trayectoria endógena, la combinación química de glucosa y lisina lleva a la proíeína glucada. Alíernativamente, la proteína glucada puede lambién obtenerse de fuentes alimenticias. El catabolismo de las proteínas glucada resulta en la producción de fructosalisina, que subsiguientemente se activa por la Amadorasa. La amadorasa, una fructosamina-3-cinasa, es parte de ambas trayectorias. La amadorasa fósforilar la fructosalisina para formar fructosalisina-3-fosfato, que puede entonces convertirse a 3-desoxiglucosona (3DG), produciendo subproductos de lisina y fosfato inorgánico (una cantidad muy pequeña de fructosalisina (<5% del total de fructosalisina) puede convertirse a 3DG por vía de una trayecíoría no enzimáííca). El 3DG puede eníonces desloxifícarse por conversión a 3- desoxifructosa (3DF) o puede irse para producir especies con oxígeno reactivo (ROS -por sus siglas en inglés) y productos terminales de glucación avanzada (AGEs). Como se muestra la Figura 14, el DYN 12(3-0-meiilsorbiíollisina) inhibe la acción de Amadorasa en frucíuosalisina, y el DYN 100 (arginina) inhibe la producción de ROS y AGEs mediada por 3DG. La Figura 15 es una ilusíración esquemáíica de los esíados de enfermedad afecíados por las especies con oxígeno reactivo (ROS). Los 3DG pueden producir ROS directamenle, o puede producir producios terminales de glucación avanzada que se van a formar ROS. Los ROS son eníonces responsables por el avance de diversos eslados de enfermedad como se muestra en la figura. La Figura 16 es una gráfica que describe las puntuaciones de eritema promedio determinados por un experto clasificador de piel tratada con SLS de voluntarios humanos con cualquiera de (i) una crema de base (Crema A), (ii) una crema de base que contiene meglumina-HCI y arginina (Crema B) o (iii) sin tratamiento. La Figura 17 es una gráfica que describe las puntuaciones de eritema promedio con un cromámetro de piel tratada con SLS de voluntarios humanos y después del tralamiento con cualquiera de (i) una crema de base (Crema A), (ii) una crema de base que contiene meglumina-HCI y arginina (Crema B) o (iii) sin tratamiento. La Figura 18 es una gráfica que descpbe la pérdida de agua evaporada íransdérmicamente promedio (TEWL -por sus siglas en inglés) de piel íraíada con SLS de voluníarios humanos después del íraíamienío con cualquiera de (i) una crema de base (Crema A), (ii) una crema de base que conliene meglumina-HCI y arginina (Crema B) o (iii) sin Iralamiento. Las Figuras 19A-19C, es una serie de imágenes que ilustran secciones delgadas de piel de un individuo normal (Figura 19A) y del área inflamada de la piel de una persona con erupción polimórfica de embarazo (Figuras 19B-19C). Las Figuras 19A-19B fueron teñidas con un anticuerpo monoclonal para 3DG-imidazolona seguido por un anticuerpo secundario fluorescente y la Figura 19C está teñida con hematoxilina y eosina.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La invención se refiere en general a composiciones y métodos para el traíamienlo de condiciones nocivas que involucran inhibir la producción o efecío de azúcares alfa-dicarbonilos tales como 3DG en el tejido afectado y/o remover los azúcares del tejido afectado. Esto es porque ahora se ha descubierto, como se describe en mayor detalle en algún lugar en la presente, que la remoción de los factores causantes subyacentes de las condiciones nocivas resulla en la mejora de la condición nociva. Dicha condición nociva incluye, pero no se limita, inflamación, dolor y comezón. La invención también se refiere al descubrimiento novedoso, asentado en la presente por ppmera vez, de composiciones que comprenden ambos de un inhibidor de la formación de azúcar alfa-dicarbonilo y un inhibidor de la función a efecto del azúcar alfa-dícarbonilo, conjuntameníe exhiben un efecto sinérgico en el alivio de las condiciones asociadas con el azúcar alfa-dicarbonilo, comparado con composiciones que comprenden cualquier íipo de inhibidores solos. Una combinación particularmeníe ventajosa es la combinación de meglumina y arginina para el tralamienío de condiciones asociadas con azúcar alfa-dicarbonilo.

Definiciones A menos que se defina en conlrario, todos los términos técnicos y científicos usados en la presente íienen el mismo significado como se entiende comúnmente por una persona con conocimieníos ordinarios en la técnica a la cual pertenece esta invención. Aunque pueden usarse cualesquiera métodos y materiales similares o equivaleníes a aquellos descritos en la presente en la práclica o prueba de la preseníe invención, los méíodos y materiales preferidos se describen en la presente. Como se usa en la presente, cada uno de los siguieníes lérminos íiene el significado asociado con él en esta sección. Los artículos "un" y "uno" se usan en la preseníe para referirse a uno o más de uno (es decir, a por lo menos uno) del objeto gramatical del artículo. A manera de ejemplo, "un elemento" significa un elemento o más de un elemento. El término "acumulación de 3DG" o "acumulación de azúcares alfa-dicarbonilos" como se usa la presente se refiere a un incremento deteclable en el nivel de 3DG y/o azúcar alfa-dicarbonilo con el íiempo.

"Azúcar alfa-dicarbonilo," como se usa en la preseníe, se refiere a una familia de compuestos, que incluyen 3-Desoxiglucosona, glioxal, metil glioxal y glucosona. "Parámeíro de formación de arrugas, envejecimiento, enfermedad o trastorno de la piel asociado con azúcar alfa-dicarbonilo," como se usa en la presente, se refiere a los marcadores biológicos descriíos en la preseníe, incluyendo los niveles de 3DG, niveles de 3DF, niveles de frucíosamina cinasa, enlrelazamienío de proleínas, y oíros marcadores o parámetros asociados con la formación de arrugas, envejecimiento, enfermedades o trastornos de la piel asociados con azúcar alfa-dicarbonilo. "3-desoxiglucosona" o "3DG", como se usa en la presente, se refiere a 1 ,2-dicarbonil-3-desoxiazúcar (también conocido como 3-desoxihexulosona), que puede formarse a través de una írayecíoria enzimáíica o puede formarse a través de una trayectoria no enzimática. Para los propósitos de la presente descripción, el término 3-desoxiglucosona es un azúcar alfa-dicarbonilo que puede formarse por trayectorias que incluyen la trayecíoria no enzimálica descrita en el Esquema A y la trayectoria enzimática que resulta en el rompimiento del FL3P descrito en el Esquema B. Otra fueníe de 3DG es la dieía. El 3DG es un miembro de la familia del azúcar alfa-dicarbonilo, lambién conocidos como 2-oxoaldehídos. El esquema A es un diagrama esquemático que describe la etapa inicial involucrada en la reacción de etapas múltiples que lleva al entrelazamienío de proteínas.

El esquema B es un diagrama esquemáíico que ilusíra las reacciones involucradas en la írayecloria de recuperación de lisina. La frucíosa-lisina (FL) se fósforila por una frucíosamina cinasa íal como amadorasa para formar fructosalisina 3-fosfato (FL3P). El FL3P espontáneamente se descompone en lisina, Pi, y 3DG (Brown et al., Paíente de E.U.A. No. 6,004,958).

ESQUEMA A R ESQUEMA B H Proteína /w( |H + Q-Q Proteína -^fsj-CH C=0 c=o CH CH2 (CHOH)2 (CHOH)2 CH2OH CH2OH Base Schiff 3DG ilo Proteína «~N-CH2 R-S-CH ( (CCHH0H)2 Proieína no entrelazada CH OH Una enfermedad o trastorno "asociado con 3DG" o "relacionado con 3DG" como se usa en la presente, se refiere a una enfermedad, lesión, o írasíorno que es causado por indicado por o asociado con 3DG, incluyendo los efecíos relacionados con el incremenío en la síníesis, producción, formación, y acumulación de 3DG, así como aquellos causados por medicados por o asociados con niveles disminuidos de degradación, detoxificación, unión, y eliminación de 3DG. "Una cantidad inhibidora de 3DG" o una "cantidad inhibidora de alfa-dicarbonilo" de un compuesto se refiere a la caníídad del compuesío que suficiente para inhibir la función o procedimiento de inferes, íal como síntesis, formación acumulación y/o función de 3DG u otro azúcar alfa-dicarbonilo. "3-0- metilsorbiíollisina (3-O-Me-sorbiiollisina)," es un inhibidor de las fruclosamina cinasas, como se describen en la preseníe. Se usa ¡níercambiablemente con el término "DYN 12". Como se usa en la presente, "aliviar un síntoma de enfermedad o trastorno," significa reducir la severidad del síntoma. El íérmino "proleínas AGE" (proíeínas modificadas de producío Final de Glucación Avanzada), como se usa en la presente, se refiere a un producto de la reacción entre azúcares y proteínas (Brownlee, 1992, Diabetes Care, 15: 1835; Niwa et al., 1995, Nephron, 69: 438. Por ejemplo, la reacción entre residuos de proteína lisina y glucosa, que no se detiene con la formación de fructosa-lisína (FL). El FL puede sufrir deshidratación múltiple y reacciones de rearreglo para producir 3DG no enzimático, que reacciona de nuevo con grupos amino libres, llevando al enírelazamienío y pardeamienlo de la proteína involucrada. Los AGEs también incluyen los productos que se forman de la reacción de 3DG con oíros compueslos, íales como lípidos y ácidos nucleicos. "Amadorasa", como se usa en la presente, se refiere a una fructosamina cinasa responsable de la producción de 3-DG. Más específicameníe se refiere a una proleína que puede convertir enzimáíicamente FL a FL3P, como se definió antes, cuando se suministra adicionalmente con una fuente de fosfato de alta energía. El término "producto Amadori", como se usa en la preseníe, se refiere a una cetoamina, tal como, pero no limitado a, fructosalisina, que comprende es un producto de rearreglo que sigue la iníeracción de glucosa con los grupos e-NH2 de las proteínas que contienen lisina. Como se usa en la presente, "aminoácidos" eslán represeníados por el nombre completo de los mismos, por el código de tres letras que corresponden a los mismos, o por el código de una letra que corresponde a los mismos, como se indica en el siguiente cuadro: Nombre Completo Código de íres leíras Código de una leíra Acido Aspártico Asp D Acido Glulámico Glu E Lisina Lys K Arginina Arg R Histidina His H Tirosina Tyr Y Cisteina Cys C Asparagina Asn N Glutamina Gln Q Serina Ser S Treonina Thr T Glicina Gly G Alanina Ala A V Vaalliinnaa V Vaall V Leucina Leu L Isoleucina lie I Metionina Met M Prolina Pro P F Feenniillaallaanniinnaa P Phhee F Triptofano Trp W El término "unión" se refiere a la adherencia de las moléculas una con la otra, tal como, pero no limitado a, enzimas a sustratos, ligandos a receptores, anticuerpos a antígenos, dominios de unión de ADN de proteínas a ADN, y cadenas de ADN o ARN a cadenas complementarias. "Asociado de unión," como se usen la presente, se refiere a una molécula capaz de unirse a otra molécula.

El término "muestra biológica," como se usen la presente, se refiere a muestras obtenidas de un organismo vivo, incluyendo piel, cabello, tejido, sangre, plasma, células, sudor y orina. El término "eliminación," como se usa en la presente se refiere al procedimiento fisiológico de remover un compuesto o molécula, tal como por difusión, exfoliación, remoción a través de la corrienle sanguínea, y excreción de orina, o a Iravés de otro sudor u otro fluido. Una "región transcrita" de un gen consiste de los residuos de nucleótidos de la cadena transcrita del gen y los nucleótidos de la cadena intranscrita del gen que son homólogos con o complemenlarios a, respectivamente, la región transcrita de una molécula de mARN que se produce por transcripción del gen. "Complementario" como se usa en la presente se refiere al amplío concepto de complementariedad de la secuencia de subunidades entre dos ácidos nucleicos, por ejemplo, dos moléculas de ADN. Cuando una posición de nucleótidos en ambas de las moléculas se ocupa por nucleótidos normalmente capaces de apareamiento de bases entre sí, entonces los ácidos nucleicos se consideran que son complementarios entre sí en esta posición. Entonces, dos ácidos nucleicos son complementarios entre sí cuando un número sustancial (por lo menos 50%) de las posiciones correspondientes en cada una de las moléculas está ocupada por nucleóíidos que normalmeníe se aparean en bases eníre sí (por ejemplo, pares de nucleóíidos A:T y G:C). Eníonces, se conoce que un residuo de adenina de una ppmera región de ácido nucleico es capaz de formar enlaces de hidrógeno específicos ("apareamienío de bases") con un residuo de una segunda región de ácido nucleico que es anti paralela a la primera región si el residuo es timina o uracilo. De manera similar, se conoce que un residuo de citocina de una primera cadena de ácido nucleico es capaz de apareamiento de bases con un residuo de una segunda cadena de ácido nucleico que es anti paralela a la primera cadena y el residuo es guanina. Una primera región de un ácido nucleico es complementaria a una segunda región del mismo o diferente ácido nucleico sí, cuando las dos regiones están dispuestas en un modo anti paralelo, por lo menos un residuo de nucleótido de la primera región es capaz de apareamiento de bases con un residuo de la segunda región. Preferiblemeníe, la primera región comprende una primera porción y la segunda región comprende una segunda porción, con lo cual, cuando la primera y segunda porciones esíán dispueslas en un modo anli paralelo, por lo menos aproximadamente 50%, y preferiblemente por lo menos aproximadamente 75%, por lo menos aproximadamente 90%, o por lo menos aproximadamente 95% de los residuos de nucleólidos de la primera porción son capaces de apareamienlo de bases con residuos de nucleótidos en la segunda porción. Más preferiblemente, todos los residuos de nucleótidos en la primera porción son capaces de apareamiento de bases con residuos de nucleótidos en la segunda porción. Un "compuesto," como se usa en la presente, se refiere a cualquier tipo de sustancia o agente que es comúnmente considerado un fármaco, o un candidato para uso como un fármaco, así como combinaciones y mezclas de los anteriores, o versiones modificadas o derivados del compuesío. Como se usa en la preseníe, los iérminos "variación conservadora" o "suslitución conservadora" se refieren al reemplazo de un residuo de aminoácido por otro, residuo biológicamente similar. Las variaciones o sustituciones conservadoras no parecen cambiar significativamenle la forma de la cadena de pépíido. Ejemplos de variaciones, o susíituciones, conservadoras ¡ncluyen el reemplazo de un residuo hidrofóbico íal como isoleucina, valina, leucina o alanina por oíro, o la susíilución de un aminoácido cargado por otro, tal como la sustilucíón de arginina por lisina, ácido gluíámico por aspártico, o gluíamina por asparginina, y similares. "Desloxificación" de 3DG se refiere al rompimienío o conversión de 3DG a una forma que no permiíe desempeñar su función normal. La desloxificación provocada o estimulada por cualquier proposición o método, incluyendo "destoxificación farmacológica", o trayectoria metabólíca que puede causar la destoxificación de 3DG. La "destoxificación farmacológica" de "3DG" u otros azúcares alfa-dicarbopilos se refiere a un procedimiento en el cual un compuesto se une con o modifica 3DG, que a su vez causa que se vuelva inactivo o que sea removido por procedimientos metabólicos tales como, pero no limitados a, excreción.

Una "enfermedad" es un estado de salud de un animal en donde el animal no puede mantener homeoslasís, y en donde si la enfermedad no mejora entonces la salud del animal continúa deíeriorándose. Como se usa en la presente, el envejecimiento normal está incluido como una enfermedad. Un "trastorno" en un animal es un esíado de salud en el cual el animal es capaz de manlener homeostasis, pero en el cual el estado de salud del animal es menos favorable que si estuviera en la ausencia del trastorno. Dejar sin tratar, un trastorno no necesariamente causa una disminución posterior en el estado de salud del animal. Como se usa en la presente, el término "dominio" se refiere a una parte de una molécula o estructura que comparte caraclerísticas fisicoquímicas comunes, tales como, pero no limitadas, dominios o propiedades hidrofóbicas, polares, globulares y helicoidales tales como unión de ligando, íransducción de señal, penelración celular y similares. Ejemplos específicos de dominios de unión incluyen, pero no se limitan, dominios de unión de ADN y dominios de unión de ATP. Una "cantidad efectiva" o "cantidad terapéuticamente efecíiva" de un compueslo es esa cantidad de compuesto que es suficiente para proporcionar un efecto benéfico al sujelo al cual se administra el compuesto, o da la apariencia de proporcionar un efecto terapéuíico como en un cosmético. Como se usa en la presente, el término "dominio efector" se refiere a un dominio capaz de interactuar directameníe con una molécula, compuesto químico, o estructura de efector en un citoplasma es capaz de regular una trayecíoria bioquímica. "Transcrita" se refiere a la propiedad inherente de secuencias específicas de nucleótidos en un polinucleótido, tal como un gen, un cADN, o un mARN, para servir como modelos para síntesis de otros polímeros y macromoléculas en procedimientos biológicos que lienen ya sea una secuencia de nucleótidos definida (es decir, rARN, tARN y mARN) o una secuencia definida de aminoácidos y las propiedades biológicas que resulían de los mismos. Enlonces, un gen codifica una proíeína si la íranscripción y transducción del mARN que corresponden a ese gen producen la proteína en una célula u otro sistema biológico. Ambas la cadena transcrita, la secuencia de nucleótidos de la cual es idéntica a la secuencia de mARN y es usualmeníe proporcionada en listados de secuencia, y la cadena intranscrita, usada como el modelo para la transcripción de un gen o cADN, puede referirse como codificando la proteína u otro producto de ese gen o cADN. A menos de que se especifique en contrario, "una secuencia de nucleótidos que codifica una secuencia de aminoácidos" e incluye todas las secuencias de nucleóíidos que son versiones degeneradas de cada una y que codifican la misma secuencia de aminoácidos. Las secuencias de nucleóíidos que codifican proleínas y ARN pueden incluir inlrones. El término "flotante," como se usa en la presente, se refiere a enlaces de un sustiluyente a una estructura de anillo, de manera que el sustiíuyenle puede unirse a la esírucíura de anillo en cualquier unión de carbono disponible. Un enlace "fijo" significa que un susliíuyenle eslá unido a un sitio especifico. El término "formación de 3DG" se refiere a 3DG que no necesariamente se forma a través de una trayecíoria siníéíica, pero que puede formarse a través de una trayecíoria íal como ruplura esponlánea o inducida de un precursor. Como se usa en la preseníe, el íérmino "fragmenío," como se aplica a una proteína o péptido, puede ordinariamenle ser de por lo menos aproximadamente 3-15 aminoácidos en longitud, por lo menos aproximadamente 15-25 aminoácidos, por lo menos aproximadamente 25-50 aminoácidos en longitud, por lo menos aproximadamente 50-75 aminoácidos en longitud, por lo menos aproximadamente 75-100 aminoácidos en longitud, y más de 100 aminoácidos en longitud. Como se usa en la presente, el íérmino "fragmenío," como se aplica a un ácido nucleico, puede ordinariamente ser de por lo menos aproximadamente 20 nucleóíidos en longiíud, íípicameníe, por lo menos aproximadameníe 50 nucleóíidos, más íipicamenle, de aproximadameníe 50 a aproximadamente 100 nucleótidos, preferiblemente, por lo menos aproximadamente 100 a aproximadameníe 200 nucleóíidos, aún más preferiblemente, por lo menos aproximadamente 200 nucleólidos a aproximadamenle 300 nucleótidos, aún más preferiblemente, por lo menos aproximadamente 300 a aproximadamente 350 nucleóíidos, aún más preferíblemente, por lo menos aproximadamente que 350 nucleótidos a aproximadamente 500 nucleólidos, aún más preferiblemenle de aproximadamente 500 a aproximadamente 600, aún más preferiblemente, de por lo menos aproximadamente 600 nucleótidos aproximadamente 620 nucleótidos, aún más preferiblemente, por lo menos aproximadameníe 620 a aproximadameníe 650, y más preferiblemeníe, el fragmenlo de ácido nucleico será mayor que aproximadamente 650 nucleótidos en longiíud. El lérmino "fructosa-lisina (FL) se usa en la presente para significar cualquier glicina glucada, ya sea incorporada en una proleina/pépíido o liberada de una proleína/pépíido por digestión proteolítica. Este íérmino no se limiía específicameníe a la esíructura química comúnmente referida como fructosa-lisina, que se reporta que se forma de la reacción de residuos de proíeína lisina y glucosa. Como se indicó anteriormente, los grupos amino lisina pueden reaccionar con una amplia variedad de azúcares. De hecho, un reporte indica que la glucosa es el azúcar menos reactivo de un grupo de dieciséis (16) diferentes azúcares probados (Bunn eí al., Science, 213:222 (1981)). Eníonces, la íagalosa- lisína formada de galacíosa y lisina, análogameníe a la glucosa se incluye siempre que el término fructosa-lisina se menciona en esta descripción, como el producto de condensación de todos los otros azúcares, ya sea que existan naturalmente o no. Se entenderá a partir de la preseníe descripción que la reacción enlre los residuos de proíeina-lisina y azúcares involucra múltiples etapas de reacción. Las etapas finales en esta secuencia de reacciones involucran el entrelazado de proíeinas y la producción de especies multiméricas, conocidas como proíeínas AGE, algunas de las cuales son fluorescentes. Una vez que se ha formado una proteína AGE, entonces la digestión proteolíiica de dichas proíeínas AGE no produce lisina covalentemenle enlazada a una molécula de azúcar. Eníonces, esías especies no están incluidas dentro del significado de "fructosa-lisina", como se usa el término en la presente. El término "fructosa-lisina-3- fosfaío," como se usa en la preseníe, se refiere a un compuesío formado por la Iransferencia enzimática de un grupo fosfato de alta energía de ATP a FL. El término frucíosa-lisina-3-fosfato (FL3P), como se usa en la presente, significa incluir todas las porciones de fructosa-lisina fósforiladas que pueden formarse enzimáticamente ya sea libres o unidas a proteínas. La "frucíosa-lisina-3-fosfalo cinasa" (FL3K), como se usa en la preseníe, se refiere a una o más proíeínas, íales como amadorasa, que pueden convertirse enzimáticamente de FL a FL3P, como se describe en la presente, cuando se suministran con una fueníe de fosfaíos de alta energía. El término se usa intercambiablemente con "fructosa-lisina cinasa (FLK)" y con "amadorasa". El término "Trayectoria de Recuperación de Lisina FL3P," como se usa en la presente, se refiere a la trayecloria de recuperación de lisina que exisíe en la piel y riñon humanos, y posiblemente otros tejidos, y que regeneran la lisina no modificada como un aminoácido libre o incorporado en una cadena de polipéptido.

El término "dieta glucada", como se usa en la preseníe, se refiere a cualquier dieía dada en la cual un porcentaje de proteínas normales se reemplaza con proteínas glucadas. Las expresiones "dieta glucada" y "diela de proteína glucada" se usan intercambiablemenle en la présenle. "Residuos de lisina glucados", como se usa en la presente, se refiere al residuo de lisina modificado de un aducío estable producido por la reacción de un azúcar reductor y una proíeína que conliene lisina. La mayor parte de los residuos de la proteína lisina están ubicados en la superficie de las proteínas como se espera para un aminoácido cargado posilivamente. Entonces, los residuos de lisina en las proleínas, que entran en contacto con el suero, u otros fluidos biológicos, pueden reaccionar libremente con moléculas de azúcar en solución. Esta reacción ocurre en periodos múltiples. El período inicial que involucra la formación de una base Schiff entre el grupo camino libre de lisina y el grupo ceto del azúcar. Este producto inicial entonces sufre el rearreglo de Amadori, para producir un compuesto de cetoamina estable. Esta serie de reacciones pueden ocurrir con diversos azúcares. Cuando el azúcar involucrado es glucosa, el producto de la base Schiff inicial involucrará la formación de imina entre la porción aldehido en C-1 de la glucosa y el grupo e-amino de la lisina. El rearreglo de Amadori resultará en la formación de lisina acoplada al carbono C-1 de fructosa, 1-desoxi-1-(e-aminolisina)-frucíosa, referido en la presente como fructosa-lisina o FL. Reacciones similares ocurrirán con otros azúcares aldosa, por ejemplo galactosa y ribosa (Dills, 1993, Am. J. Clin. Nutr. 58:S 779). Al propósito de la presente invención, los productos íempranos en la reacción de cualquier azúcar reducíor y al residuo e-amino de la proleína lisina están incluidos en todo el significado de residuo glucado-lisina, sin considerar la estructura exacta de la molécula de azúcar modificadora. "Homólogo" como se usen la presente, se refiere a la similitud de la secuencia de subunidades entre dos moléculas poliméricas, por ejemplo, entre dos moléculas de ácido nucleico, por ejemplo dos moléculas de ADN o dos moléculas de ARN, o entre dos moléculas de polipéplido. Cuando una posición de subunidad en ambas de las dos moléculas está ocupada por la misma subunidad monomérica, por ejemplo, si una posición en cada de dos moléculas de ADN está ocupada por adenina, entonces son homologas en esa posición. La homología entre dos secuencias es una función directa del número de posiciones equivalentes u homologas, por ejemplo, si la mitad (por ejemplo, cinco posiciones en un polímero de diez subunidades de longitud, de las posiciones en dos secuencias de compuestos son homologas entonces las dos secuencias son 50% homologas, si 90% de las posiciones, por ejemplo, 9 de 10, son equivalentes u homologas, las dos secuencias comparten 90% de homología. A manera de ejemplo, las secuencias de ADN 3?TTGCC5' y 3TATGGC comparten 50% de homología. Como se usa en la presente, "homólogo" u homología" se usan como sinónimos con "identidad". La deíerminación del porcienlo de identidad u homología entre dos secuencias de nucleótidos o aminoácidos puede efectuarse usando un algoritmo matemático. Por ejemplo, un algoritmo matemático útil para comparar dos secuencias es el algoritmo de Karlin y Altschul (1990, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:2264-2268), modificado como en Karlin y Altschul (1993, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:5873-5877). Este algoritmo se incorpora en los programas de NBLAST y XBLAST de Altschul, et al. (1990, J. Mol. Biol. 215:403-410), y puede accederse, por ejemplo en el sitio de red mundial del National Center for Biotechnology Informalion (NCBI). Las búsquedas de nucleóíidos BLAST pueden desempeñarse con el programa NBLAST (designado "blastn" en el sitio de red NCBI", usando los siguientes parámetros: penalidad de separación = 5; penalidad de extensión de separación =2; penalidad por desigualdad =3; premio por igualdad =1 ; valor de expectación 10.0; y tamaño de palabra = 11 para obíener secuencias de nucleóíidos homologas a un ácido nucleico descriío en la presente. Las búsquedas de proteínas BLAST pueden desempeñarse con el programa XBLAST (designado "blastn" en el sitio de red NCBI) o el programa "blastp" de NCBI, usando los siguientes parámetros: valor de expectación 10.0, malriz de punluación BLOSUM62 para obtener la secuencias de aminoácidos homologas a la molécula de proteína descriía en la présenle. Para obíener alineaciones separadas para propósiíos de comparación, puede utilizarse Gapped BLAST como se describe en Altschul et al. (1997, Nucleic Acids Res. 25:3389-3402). Alternalivamente, puede usarse PSI-Blast o PHI-Blast para desempeñar una búsqueda iterada que detecta relaciones distaníes eníre moléculas (Id.) y relaciones eníre moléculas que comparten un paírón común.

Cuando se uíilizan los programas BLAST, Gapped BLAST, PSI-Blasí, y PHI-Blasí, pueden usarse los parámeíros implícitos de los programas respectivos (por ejemplo, XBLAST y NBLAST). El por cienío de idenlidad entre dos secuencias puede determinarse usando técnicas similares a aquellas descritas antes, con o sin separaciones permitidas. Al calcular el por ciento de identidad, típicamente se cuentan las equivalencias exactas. El término "inducción de 3DG" o "inducir 3DG," como se usen la presente, se refiere a métodos o medios que inician o simulan una trayectoria o evento que llega a la sínlesis, producción, o formación de 3DG o que se incrementen sus niveles, o estimula un incremento en la función de 3DG. De manera similar, la frase "inducción de azúcares alfa-dicarbonilos", se refiere a la inducción de miembros de la familia de azúcares alfa-dicarbonilos, que incluyen 3DG, glioxal, meíil glioxal, y glucosona. "Inhibidor de 3DG" como se describe en la presente, se refiere a cualquier método o técnica que inhibe la sintesis, producción, formación, acumulación, o función de 3DG, así como a métodos para inhibir la inducción o estimulación de síntesis, formación, acumulación, o función de 3DG. También se refiere a cualquier trayectoria metabólica que pueda regular la función no inducción de 3DG. El término también se refiere a cualquier composición o método para inhibir la función de 3DG al desíoxificar 3DG o causar la eliminación de 3DG. La inhibición puede ser direcía o indirecia. La inducción se refiere a la inducción de síníesis de 3DG o a la inducción de la función. De manera similar, la frase "inhibidor de azúcares alfa-dicarbonilos", se refiere a miembros inhibidores de la familia de azúcares alfa-dicarbonilos, incluyendo 3DG, glioxal, metil glioxal, y glucosona. El íérmino "inhibir la acumulación de 3DG," como se usa en la presente, se refiere al uso de cualquier composición o método que disminuya la síntesis, incremente la degradación, o incremente la eliminación, de 3DG de manera que el resultado son niveles inferiores de 3DG o 3DG funcional en el tejido que se examina o traía, en comparación con los niveles en el íejido no íratado con la composición o méíodo. De manera similar, la frase "inhibidor de la acumulación de azúcares alfa-dicarbonilo", se refiere a inhibir la acumulación de miembros de la familia de azúcares de alfa-dicarbonilo, incluyendo 3DG, glioxal, meíil glioxal, y glucosona, e inlermediarios de los mismos. Como se usa en la preseníe, un "maíerial insírucíivo" incluye una publicación, un regisíro, un diagrama, o cualquier oíro medio de expresión que puede usarse para comunicar la utilidad del péptido de la invención en el equipo para efectuar el alivio de las diversas enfermedades o trasíornos reciladas en la preseníe. Opcionalmente, o alternalivameníe, el maíerial instruclivo puede describir uno o más méíodos para aliviar las enfermedades o trastornos en una célula o tejido de un mamífero. El maierial insíructivo del equipo de la invención puede, por ejemplo, estar fijo a un recipienie que coníiene el compueslo de la invención ideniifícado o ser embarcado conjuníamente con un recipiente que contiene el compueslo identificado.

Alternativameníe, el maíerial inslrucíivo puede embarcarse por separado del recipieníe con la iníención de que el material instrucíivo y el compuesío se usen cooperativamente por el recipiente. Un "ácido nucleico aislado" se refiere a un segmento o fragmento de ácido nucleico que se ha separado de la secuencias que lo flanquean en un estado de existencia natural, por ejemplo, un fragmenlo de ADN que se ha removido de la secuencias que normalmente están adyaceníes al fragmenío, por ejemplo, la secuencias adyacentes al fragmento en un genoma en el cual exisíe naluralmenie. El íérmino íambién aplica a ácidos nucleicos que han sido susíancialmeníe purificados de oíros componeníes que acompañan naturalmente al ácido nucleico, por ejemplo, ARN o ADN o proteínas, que lo acompañan naluralmenie en la célula. El íérmino por lo tanto incluye, por ejemplo, un ADN recombinante que se incorpora dentro de un vector, en un plásmido o virus replicante autónomamente, o dentro de un ADN genómico de un procariótico o eucariótico, o que existe como una molécula separada (por ejemplo, como un cADN o un genómico o un fragmento de cADN producido por PCR o digestión por enzima de restricción) independiente de otras secuencias. También incluye un ADN recombinante que es parte de un gen híbrido que codifica una secuencia de polipéptido adicional. Compuesto "modificado" como se usa en la presente, se refiere a una modificación o derivación de un compuesto, que puede ser una modificación química, lal como en una alíeración química un compuesto para incrementar o cambiar su habilidad o actividad funcional.

El término "mutagenicidad" se refiere a la habilidad de un compuesto para inducir o incremeníar la frecuencia de mulación. El íérmino "ácido nucleico" típicamente se refiere a polinucleótidos grandes. El término "oligónucleótidos" típicamente se refiere a polinucleótidos cortos, generalmente, no mayores que aproximadamente 50 nucleótidos. Se entenderá que cuando una secuencia de nucleótidos se representa por una secuencia de ADN (es decir, A, T, G, C), esto íambién incluye una secuencia de ARN (es decir, A, U, G, C) en la cual "U" reemplaza a "T". El lérmino "pépíido" íípicamenle se refiere a polipépíidos cortos. "Mejora en la permeación" y "mejoradores de permeación" como se usan en la presenie se refiere al procedimienlo y materiales añadidos que aportan un incremenío en la permeabilidad de la piel a un ageníe aclivo farmacológicameníe de pobre permeación de la piel, es decir, a manera de incrementar la velocidad a la cual el fármaco penetra a través de la piel y que entra a la corriente sanguínea. "Mejorador de permeación" se usa intercambiablemente con "mejorador de penetración". Como se usa en la presente, el lérmino "portador farmacéulicamente aceplable" significa una composición química con la cual un compuesto apropiado o derivado puede combinarse y el cual, enseguida de la combinación, puede usarse para administrar el compuesto apropiado a un sujeto.

Como se usa en la presente, el término éster o sal "fisiológicamente aceptable" significa una forma de éster o sal del ingrediente activo que es compatible con cualquier olro ingredienie de la composición farmacéulica, que no es nocivo al sujeío al cual se va a administrar la composición. "Polipéptido" se refiere a un polímero compuesto de residuos de aminoácidos, variantes estruclurales relacionadas que existen naturalmente, y análogos sintéíicos de los mismos que no existen naturalmente enlazados a través de enlaces peptídicos, variantes estructurales relacionadas que existen naturalmenle, y análogos sintéticos que no existen naíuralmenie de los mismos. Un "polinucleólido" significa una cadena simple o paralela y cadenas anli paralelas de un ácido nucleico. Entonces, un polinucleótido puede ser cualquiera de un ácido nucleico monocatenado o bicatenado. "Cebador" se refiere a un polinucleótido que es capaz de hibridizar específicamente a un modelo de polinucleótido diseñado y proporcionar un punto de inicio para la síníesis de un polinucleótido complementario. Tal síníesis ocurre cuando el cebador de polinucleólido se coloca bajo condiciones en las cuales se induce la sinlesís, es decir, en la presencia de nucleótidos, un modelo de polinucleótidos complementario, y un agente para la polimerización tal como ADN polimerasa. Un cebador es típicamente monocatenado, pero puede ser bicatenado. Los cebadores son típicamente ácidos desoxirribonucleicos, pero una amplia variedad de cebadores que existen naturalmente y sintéticos son útiles para muchas aplicaciones. Un cebador es complementario al modelo al cual se diseña para hibridar para servir como un sitio para el inicio de síntesis, pero no requiere reflejar la secuencia exacta del modelo. En tal caso, la hibridación específica del cebador al modelo depende de la severidad de las condiciones de hibridación. Los cebadores pueden etiquetarse con, por ejemplo, porciones cromogénicas, radioactivas, o fluoresceníes y usarse como porciones detectables. Como se usa en la presente, el íérmino "secuencia promoíora/reguladora" significa una secuencia de aminoácidos que se requiere para la expresión de un producto de genes enlazados operativamente a la secuencia promotora/reguladora. En algunos casos, esía secuencia puede ser la secuencia promoíora del núcleo y en oíros casos, esia secuencia puede iambién influir una secuencia mejoradora y oíros elemeníos reguladores que se requieren para la expresión del producío de los genes. La secuencia promotora/reguladora puede, por ejemplo, ser una que expresa el producío de genes de una manera específica al íejido. Un promoíor "consíitutivo" es un promolor que impulsa la expresión de un gen al cual esíá enlazado operablemeníe, de una manera constante en una célula. A manera de ejemplo, los promotores que impulsan la expresión de genes de mantenimienío se consideran como promoiores consíiluiivos.

Un promoíor "inducible" es una secuencia de nucleólidos que, cuando se enlaza operalivamente con un polinucleótido que codifica o especifica un producto de genes, causa que el producto de genes se produzca en una célula substancialmente viva únicamente cuando un inductor que corresponde al promotor está presente en la célula. Un promotor "específico del tejido es una secuencia de nucleótidos que, cuando esta enlazada operaiivamente con un polinucleótido que codifica o especifica un producto de genes, causa del produelo de genes se produzca en una célula substancialmente viva sólo si la célula es una célula del tipo de tejido correspondiente al promotor. Un traíamienío "profiláctico" es un tratamiento administrado a un sujeto que no exhibe síntomas de una enfermedad o exhibe únicameníe síntomas tempranos de la enfermedad para el propósito de disminuir el riesgo de desarrollar la patología asociada con la enfermedad. El término "proteína" se refiere típicamenle a polípépíidos grandes. Especies con Oxígeno Reactivo varias formas dañinas de oxígeno se generan en el cuerpo; oxígeno simple, radicales de superóxido, peróxido de hidrógeno, y radicales hidroxilo todos causan daño al tejido. Un término coloquial para estos y especies similares de oxígeno relacionadas es "especies con oxígeno reactivo" (ROS). El término también incluye ROS formados por la internalización de AGE dentro de las células y los ROS que se forman de los mismos.

"Remoción de 3-desoxiglucosona," como se usa en la presente, se refiere a cualquier composición o método, el uso del cual resulta en niveles disminuidos de 3-desoxiglucosona (3DG) con niveles disminuidos de 3DG funcional cuando se comparan con niveles de 3DG o el nivel de 3DG funcional en la ausencia de la composición. Los niveles disminuidos de 3DG pueden resultar de su síntesis o formación disminuida, degradación incrementada, eliminación incrementada, o cualquier combinación de las mismas. Los niveles disminuidos de 3DG funcional pueden resultar de la modificación de la molécula de 3DG de manera que pueda funcionar menos eficiente en el procedimiento de glucación o puede resultar de la unión de 3DG con otras moléculas que bloquean y miden la habilidad del 3DG para funcionar. Los niveles disminuidos de 3DG también pueden resultar de una eliminación incrementada y expresión en orina del 3DG. El término también se usa intercambiablemeníe con "inhibir la acumulación de 3DG". De manera similar, la frase "remoción de azúcares alfa-dicarbonilo," se refiere a la remoción de miembros de la familia de azúcares de alfa-dicarbonilo, incluyendo 3DG, glioxal, meíil glioxal, y glucosona. También, los términos residuo de lisina glucada, proteina glucada y proteína glucosilada o residuo de lisina se usen intercambiablemente la presente, consistentemente con el uso común en la lécnica en donde dichos términos son de uso intercambiable reconocido en la íécnica.

El íérmino "piel," como se usa en la presenie, se refiere a la definición comúnmenle usada de la piel, por ejemplo, la epidermis y la dermis, y las células, glándulas, mucosa y tejido conectivo que comprenden la piel El íérmino "estándar," como se usa en la presente, se refiere a algo usado para comparación. Por ejemplo, puede ser un agente o compuesto estándar conocido que se administra y usa para comparar resultados cuando se administra un compuesto de prueba, o puede ser un parámelro o función estándar que se mide para obtener un valor de control cuando se mide un efecto de un agente o compuesto en un parámetro o función. "Esíándar" puede iambién referirse a un "estándar interno", tal como un agente o compuesto que se añade en cantidades conocidas a una muestra que es úíil en la delerminación de dichos aspectos como purificación o velocidades de recuperación cuando una muestra se procesa o somete a procedimientos de purificación o extracción antes de que se mida un marcador de interés. Los estándares internos a menudo son pero no se limitan a, un marcador purificado de interés que ha sido etiquelado, íal como con un isótopo radioactivo, permitiendo distinguirlo de una susíancia endógena en una mueslra. Un "animal de prueba susceplible", como se usa en la presente, se refiere a una cepa de animal de laboratorio del cual, debido a por ejemplo la presencia de ciertas mutaciones genéticas, tiene una propensión mayor hacia una enfermedad trastorno o condición de selección, tal como diabetes, cáncer, y similares.

"Síntesis de 3DG", como se usa en la presente se refiere a la formación o producción de 3DG. El 3DG puede formarse con base en una írayecloria dependienie de enzima o una írayecloria no dependiente de enzima. De manera similar, la frase "síntesis de azúcares alfa-dicarbonilos", se refiere a la sínfesis o formación esponíánea de miembros de la familia de los azúcares alfa-dicarbonilos, incluyendo 3DG, glioxal, melil glioxal y glucosona, y aductos como se describen en la presente. "Pépíidos o polipépíidos siníéticos" significa un péptido o polipéptido que no existe naturalmente. Los péplídos o polipépíidos sintéticos pueden sintelizarse, por ejemplo, usando un sinleíizador de polipéptidos automáíico. Aquellos expertos en la íécnica conocen diversos métodos de síntesis de péptidos en fase sólida. Un íraíamiento "terapéutico" es un tralamienlo adminislrado a un sujeío que exhibe sínlomas de paiología, para el propósiío de disminuir o eliminar esos síníomas. Por suministro "íransdérmico" se proyectan ambas administraciones íransdérmica (o "percutánea") y transmucosal, es decir, el suministro por el paso de un fármaco a través de la piel o íejido mucosal y deníro de la corrienle sanguínea. Transdérmico iambién se refiere a la piel como un portal para la administración de fármacos o compuestos para aplicación tópica del fármaco o compuesto al mismo.

El término "aplicación tópica", como se usa en la presente, se refiere a la administración a una superficie, tal como la piel. Este lérmino se usa intercambiablemente con "aplicación cutánea". El término para "tratar", como se usa en la presente, significa reducir la frecuencia con la cual los síntomas se experimentan por un paciente o sujeío o adminislrar un agente o compuesto para reducir la frecuencia con la cual los síntomas se están experimenlando. Como se usa en la preseníe, "íratar una enfermedad o trastorno" significa reducir la frecuencia con la cual un síntoma de la enfermedad o trasíorno se experimenta por un paciente. Enfermedad y írastorno se usan intercambiablemente en la presente. Como se usa en la presente, el término "del tipo silvestre" se refiere al genotipo y fenotipo que es característico de la mayoría de los miembros de una especie que existe naiuralmenle y que conlrasla con el genotipo y fenotipo de un muíante. De conformidad, las composiciones y métodos de la presente invención se espera que encuentren uíilidad en el traíamienío de una amplia variedad de enfermedades y trasíornos en los cuales la inflamación ejerce una función. Esios incluyen, entre otros, condiciones alérgicas, enfermedad de alzheimer, anemia, agiogénesis, estenosis de válvula aórtica, aleroesclerosis, írombosis, artritis reumatoide, osleoartriíis, gola, artriíis goíosa, pseudogoia aguda, artritis gotosa aguda, inflamación asociada con cáncer, falla cardíaca congestiva, cistitis, fibromalgia, fibrosis, glomerulonefritis, inflamación asociada con enfermedad gastrointestinal, enfermedades inflamatorias de intestino, falla de riñon, glomérulonefritis, infarto al miocardio, enfermedades oculares, pancreatitis, psoriasis, lesiones o daños por reperfusión, trastornos respiratorios, reestenosis, choque séptico, choque endotóxico, urosepsis, irasiomos cerebrovascular, complicaciones quirúrgicas, lupus eritemaloso sislémico, erupción polimórfica del embarazo, arteriopaíía asociada con transplantes, reacción injerto contra hospedero, rechazo de aloinjerto, rechazo de íransplaníe crónico, vasculitis. De acuerdo con aspectos particulares de la presente invención, se ha demostrado que la aplicación íópica de la composición coniiene un inhibidor de la producción de 3DG y un inhibidor de la función de 3DG que resulta en la disminución del enrojecimiento e irritación asociados con quemadura con rastrillo. Una formulación íópica que comprende los mismos agentes activos se reportó por los participantes en una prueba de irritación de piel para disminuir el enrojecimiento asociado con el agrietamiento por detergeníe, para acelerar el proceso de curación, y causar una mejora íoíal en la lexíura de la piel comparada con una formulación que no coníenía los agenies activos. Adicionalmente, se enconíró que la aplicación íópica de esa composición se enconíró disminuía la inflamación asociada con psoriasis, eczema y policitemia y para disminuir el número y severidad de las lesiones faciales por acné. En vista de las demostraciones anleriores por los inveníores, las condiciones inflamatorias de la piel se consideran particularmente sensibles al traíamienío al apuníar a la producción y función del azúcar alfa-dicarbonilo.

Las condiciones inflamatorias de la piel contempladas para tratamiento de acuerdo con las modalidades de la presente invención incluyen, pero no se limilan a: inflamación pasajera e irritación de la piel debido a la remoción de cabello por rasurado, encerado, pinzas, electrólisis, o el uso de productos depilatorios; diversas formas de dermatitis, incluyendo dermatitis seborréica, dermatitis numular, dermatitis por contacto, dermatitis atópica, dermatitis exfoliatíva, dermatitis perioral y estasis dermatitis, para nombrar algunos ejemplos comunes; y enfermedades o trastornos inflamatorios de la piel tales como psoriasis, foliculitis, rosácea, telangiectacia, acné, impéíigo, erisipelas, paroniquia, eriirasma, eczema, erupción (erupción por pañal, hiedra venenosa, roble venenoso) y quemaduras solares, por nombrar algunas. También como se asienia en la preseníe descripción, la aplicación íópica de una composición que coníiene un inhibidor de la producción de 3DG y un inhibidor de la función de 3DG resultó en una disminución del dolor asociada con la inflamación del seno. La misma formulación también se reportó que proporcionaba alivio de hinchazón, dolor y sensibilidad en pacientes artríticos cuando se aplicó tópicamente a la piel subyacente al tejido de la articulación afecíada. En visía de estas demostraciones por los inventores, las condiciones inflamaíorias de los íejidos subyaceníes a la piel también se consideran particularmente sensibles del íraíamienio al apunlar a la producción y función del azúcar alfa-dicarbonilo. Las condiciones inflamatorias del íejido subyaceníe incluyen, pero no se limitan a: presión e inflamación del seno; inflamación del tejido de articulación asociada con diversas formas de la enfermedad artrítica, tal como artritis reumatoide, osteoartritis, goía, artriíis goíosa, pseudogota agua y artritis gotosa aguda.

Métodos para Inhibir la Síntesis, Formación y Acumulación de 3DG y Otros Azúcares Alfa-dicarbonilo Se ha descubierto en la presente invención que una enzima que está involucrada en la trayecíoria siníéíica enzimática de la producción de 3DG está presente a altos niveles en la piel (ver Ejemplo 20). Más aún, también se ha descubierto en la presente invención que el 3DG esíá presenie a altos niveles en la piel (ver Ejemplo 19). De conformidad, la invención incluye las composiciones y métodos que iníerfieren con ambas síntesis con base enzimática y no enzimálica de formación de 3DG en la piel, y la cual lambién iníerfiere con la función de 3DG en la piel. Un 3DG es un miembro de una familia de compuestos denominados azúcares alfa-dicarbonilo. Otros miembros de la familia incluyen glioxal, metil glioxal, y glucosona. La presente invención también se refiere a composiciones y métodos para inhibir la acumulación de 3DGy otros azúcares alfa-dicarbonilos en la piel y para inhibir el arrugamiento de la piel, el envejecimienío de la piel, y otras enfermedades o trastornos de la piel dependientes de 3DG, así como arrugamiento de la piel, envejecimiento de la piel, u otras enfermedades y trastornos de la piel asociados con otros azúcares alfa-dicarbonilos. La invención también incluye inhibir la acumulación de 3DG en la piel usando composiciones y méíodos para estimular las trayectorias, o componentes de las trayectorias, que llevan a la destoxificación de 3DG, degradación, o eliminación de la piel. Deberá notarse que el 3DG es un miembro de la familia de moléculas de azúcar alfa-dicarbonilo. También deberá notarse que otros miembros de la familia de azúcares alfa-dicarbonilo pueden desempeñar funciones similares a 3DG, como se describe en la presente, y funciones similares de 3DG, las funciones de otros miembros de la familia de azúcares alfa-dicarbonilo pueden también inhibirse. Entonces, debe considerarse que la invención incluye métodos para inhibir la síntesis, formación, y acumulación de oíros azúcares alfa-dicarbonilos también. La inhibición de la síntesis, formación, y acumulación en la piel puede ser directa o indirecta. Por ejemplo, la inhibición directa de la síntesis de 3DG se refiere a bloquear un evento que ocurre inmedialamente antes a o en la dirección 5' en una trayectoria de síníesis 3DG o formación, ial como el bloqueo de amadorasa o la conversión de la fruciosa-lisina-3-fosfaío (FL3P) a 3DG, lisina, y fosfato inorgánico. La inhibición indirecta puede incluir el bloqueo o inhibición en la dirección 5' de precursores, enzimas, o trayecíorias cuando llevan a la síniesis de 3DG. Los componentes de una trayecíoria en dirección 5', por ejemplo, incluyen el gen amadorasa y amadorasa mARN. No debe considerarse que la invención incluye la inhibición de únicamente las trayectorias enzimática y no enzimática descriías en la presente, sino debe considerarse que incluye métodos de inhibición de oirás trayecíorias enzimáticas y no enzimáticas de 3DG, síntesis, formación o acumulación den la piel también. También debe considerarse que la invención incluye a otros miembros de la familia de azúcar alfa-dicarbonilo, incluyendo glioxal, metil glioxal, y glucosoma en donde se aplicable. Diversos ensayos descritos en la presente pueden usarse para dirigir la medición de síntesis de 3DG o niveles de 3DG, o pueden usarse ensayos correlativos de síntesis o niveles de 3DG, tales como mediciones de su producto de ruptura, 3DF. La presente invención incluye métodos novedosos para la inhibición de la síntesis de 3DG en la piel. Preferiblemeníe, la piel es piel de mamífero, y más preferiblemente, la piel de mamífero es piel de humano. En un aspecto, el inhibidor inhibe una enzima involucrada en la síntesis de 3DG. En una modalidad la enzima es una fructosamina cinasa. En aún otra modalidad la fructosamina cinasa es amadorasa, como se describe en la Paíente de E.U.A. No. 6,004,958. En aún otro aspecto de la invención el inhibidor inhibe la síniesis y formación no enzimática de 3DG en la piel. En una modalidad de la invención, el inhibidor inhibe la acumulación de 3DG en la piel. En un aspecto, el 3DG se sintetiza o forma en la piel. No obstaníe, el inhibidor puede también inhibir la acumulación de 3DG en la piel, en donde la fuente de 3DG es diferente que la piel. En un aspecto, la fuente de la 3DG es la alimentación, es decir, se deriva de una fuenie exíerna en lugar de una fueníe iníerna, y eníonces se acumula en la piel, Eníonces, este aspecto de la invención incluye la inhibición de la síntesis de 3DG o formación en la piel y/o inhibición de la acumulación de 3DG en la piel. En el último caso, la fuente de 3DG puede ser la síntesis enzimática de 3DG directamente en la piel, la síntesis enzimática de 3DG en un tejido diferente de la piel, síntesis o formación no enzimática de 3DG en la piel o en un íejido no de piel, o la fueníe de 3DG puede ser exíerna, tal como, por ejemplo, la alimentación. Los métodos a ser usados para inhibir la acumulación de 3DG u otros azúcares alfa-dicarbonilos a través de una de estas trayeclorias se describen con mayor deíalle en algún lugar de la présenle. La presenie invención también se refiere a métodos y composiciones para el traíamienío de íejidos difereníes de la piel. Como se describe en delalle en algún lugar de la presente, y se entenderá por lo expertos en la técnica cuando se construya con la presente invención, los méíodos y composiciones de la invención son igualmente aplicables a cualquier tejido en el cual existe y puede existir 3DG. Dichos tejidos ¡ncluyen, pero no se limitan a, el riñon y el páncreas. Por lo tanto, se entenderá que las composiciones y métodos de la invención son igualmente aplicables a tejidos que contienen o pueden contener 3DG. En otra modalidad de la invención, un método para inhibir la síntesis, formación, o acumulación de 3DG en la piel, y en otros tejidos, es útil para prevenir la inflamación. Como se establece en detalle en algún lugar de la presente, la inhibición de la síntesis, formación o acumulación de 3DG contribuye a la inflamación y procedimientos inflamatorios. Por lo tanto, la presente invención caracteriza un método para disminuir o inhibir la inflamación al inhibir la síntesis, formación y/o acumulación de 3DG. En otra modalidad de la invención, se proporciona un método para el uso de una composición de la invención para el tratamiento de inflamación o de una condición relacionada con inflamación en un mamífero, en donde la condición inflamatoria está asociada con uno o más órganos principales del mamífero. En un aspecto, el mamífero es un humano. Los órganos principales incluyen, por ejemplo, la piel, corazón, ojos, riñones, páncreas, pulmones y el sistema circulatorio. En otro aspecto, se proporciona una composición de la presente invención en una forma de dosificación oral a un mamífero. Dichas composiciones útiles en un método de acuerdo con la invención se describen en detalle en algún lugar de la presente. A manera de un ejemplo no limitativo, dichas composiciones incluyen meglumina y meglumina + argínina. En aún otra modalidad de la invención, las composciones y méíodos se proporcionan para el iratamiento de dolor en un mamífero. El dolor es un procedimiento complicado que involucra la interacción de un número importante de compuestos químicos, denominados neurotransmisores, que transmiten impulsos nerviosos de una célula nerviosa a otra. Hay muchos diferentes neurotransmisores en el cuerpo humano, y, en el caso del dolor, actúan en diversas combinaciones para producir sensaciones dolorosas en el cuerpo. Algunos productos químicos gobiernan la sensación de dolor suave; otros controlan al dolor intenso o severo.

Los compuestos químicos del cuerpo actúan en la transmisión de mensajes de dolor al estimular los receptores neurotransmisores encontrados en la superficie de las células; cada receptor íiene un neurotransmisor correspondiente. Los receptores funcionan muy similarmente a compuertas o puertos y permiten que pasen los mensajes de dolor a través y a las células vecinas. Un compueslo químico cerebral de especial interés para los neurocientíficos es glutamato. Durante los experimeníos, los ratones con los receptores de glutamato bloqueados mostraron una reducción en sus respuestas al dolor. Otros receptores importantes en la transmisión del dolor son los receptores similares a opiáceos. La morfina y otros fármacos opioides funcionan cerrando estos receptores opioides, cambiando las trayectorias o circuitos de inhibición del dolor, y con lo cual se bloquea el dolor. Oíro tipo de receptor que responde al estímulo doloroso se denomina un nociceptor. Los nociceptores son fibras de nervios delgados en la piel, músculos, y otros tejidos del cuerpo que, cuando se estimulan, portan señales de dolor a la médula espinal y al cerebro. Normalmente, los nociceptores únicamente responden a estímulos físicos fuertes. No obstante, cuando los tejidos se vuelven lesionados o inflamados, ellos deberán compuestos químicos que hacen a los nocíceptores mucho más sensibles y provocan que íransmiíen señales de dolor en respuesía a un esíimulo suaves. Esta condición se llama alodinia, un estado en el cual el dolor se produce por eslimulos inocuos.

Se ha mostrado en la presente por primera vez que las composiciones y méíodos, como se establecen en la presente, son útiles para disminuir o aliviar dolor en un mamífero. En un aspecío, el mamífero es un humano. Dicha méíodo comprende administrar una composición de la invención a un mamífero, ya sea tópicamente u oralmente. Las composiciones útiles en un método para aliviar o disminuir el dolor de acuerdo con la presenie invención se describen en delalle en algún lugar en la presente. A manera de un ejemplo no limitativo, dichas composiciones incluyen meglumina y meglumina + arginina. Diversos tipos de dolor tratables por las composiciones y métodos, como se establecen en la presente, incluyen aracnoiditis; artritis, tales como osteoartritis, y artritis reumatoide; espondilolisis anquilosante; gota; tendonitis; ciática bursitis; espondilolistesis; radiculopalía; dolor por quemadura, dolor por cáncer, dolores de cabeza, migrañas, cefalea en racimos, y dolores de cabeza por tensión, neuralgia trigeminal, dolor miofacial, dolor neuropático, incluyendo neuropatía diabética; síndrome de distrofia simpática de reflejo; dolor de extremidad fantasma y dolor post ampulación; tendonitis, tenosinoviíis, neuralgia posíherpélica; dolor asociado con Herpes zosíer, síndrome de dolor ceníral, dolor asociado con írauma, vasculitis, dolor asociado con infecciones, incluyendo herpes simple; tumores de piel, quistes, dolor asociado con tumores asociados con neurofibromastosis, y dolor asociado con disíensiones, moretones, dislocaciones, fracturas, y dolor debido a la exposición a productos químicos (por ejemplo exfoliantes tales como reíinoides, ácidos Carboxílicos, ácidos beía-hidroxi, ácidos alfa-ceto, peróxido de benzoilo y fenol). En aún otra modalidad de la invención, se proporcionan composiciones y métodos para el íratamienío de comezón en un mamífero. Originalmente la comezón puede ser cutánea ("pruriíoreceplora", por ejemplo dermalitis", neuropática (por ejemplo esclerosis múlliple), neurogénica (por ejemplo colestasis), mixta (por ejemplo uraemia) o psicogénica. Aunque la comezón de origen cutáneo comparte una írayecioria neural común con el dolor, las finras C aferentes que subsirven a la comezón son un subconjunto de funcionalidad diferente: responden a la hisíamina, aceíilcolína y oíros pruritógenos, pero si no son sensibles al estímulo mecánico. Difereníes tipos de comezón han respondido diversos traíamientos. La hislamina es el principal mediador para la comezón en reacciones de mordedura de insecíos y la mayor parte de las formas de urticaria, y en estas circunsíancias la comezón responde bien a aníihisíamínicos H1. No obsíaníe, en la mayoría de las dermatosis y en enfermedades sistémicas, los anlihistamínícos H1 poco sedantes son inefectivos. Los antagonislas opioides liberan la comezón provocada por opioides espinales, coleslasis y, posiblemeníe, uraemia. El ondanesíron libera la comezón provocada por opioides espinales (pero no coelstasis y urameia). Otros tratamientos con fármacos para la comezón incluyen rifampicina, colestiramina y 17-alquil andrógenos (colestasis), talidomida (uraemia), cimetidina y corticosteroide (linfoma de Hodgkin), paroxetina (comezón paraneoplásica), aspirina y paroxetina (polcitaemia vera) e indometacina (algunos VIH + pacieníes) La terapia con Ultravioleta B, particularmente UVB de banda estrecha, se ha postulado como un tratamiento para la comezón en uraemia Esto se debe a que se ha mostrado en la presente por primera vez que las composiciones y métodos, establecidos en la presente, son útiles para disminuir o aliviar la comezón en un mamífero En otro aspecío, el mamífero es un humano Dicha méíodo comprende administrar una composición de la invención a un mamífero, ya sea tópicamente u oralmente Las composiciones útiles en un método para aliviar o disminuir la comezón de acuerdo con la presente invención se describen en detalle en algún lugar en la presente A manera de un ejemplo no limitativo, dichas composiciones incluyen meglumina y meglumina + arginina En otra modalidad, la presente invención proporciona un método para el iraíamienlo de inflamación, comezón, dolor, y oirás enfermedad osó írasíornos como se esíablece en la presente, así como aquellas que serán aparentes de la descripción, en donde el tratamiento es por medio de una composición que comprende dos o mas compuestos, además en donde la combinación de los compuestos resulta en un efecto de tratamiento smérgico Esto es, el resultado del traíamiento con la combinación de los compuestos es mayor que el efecto aditivo de los resultados del tratamiento con cada compuesto por separado En una modalidad de la invención, un méíodo para el íraíamienlo de un pacieníe incluye el traíamiento con una composición que comprende ambos de un inhibidor de formación de azúcar alfa-dicarbonilo y un inhibidor de la función o efecto del azúcar alfa-dicarbonilo, en donde los inhibidores múltiples conjunfamenle exhiben un efecto sinérgico en el alivio de condiciones asociadas con el azúcar alfa-dicarbonilo, en comparación con las composiciones que comprenden cualquier tipo de inhibidores solos. En una modalidad preferida, el método incluye la combinación de meglumina y arginina para el tratamiento de condiciones asociadas con el azúcar alfa-dicarbonilo. En tanío que no se desea limitar por ninguna teoría en particular, deberá notarse que la arginina no solamente inactiva el 3DG como se establece en detalle en algún lugar en la presente, sino que la arginina íambién alimenta la trayecíoria del óxido nílrico y esíi ula la producción de NO que causa la vasodilaíación. Esto complementa la acción antioxidaíiva, antiinflamatoria de la meglumina de manera que el efecto de la meglumina y arginina en combinación es mayor que el efecto aditivo de tratamienío con cada uno de los compuestos solos.

Métodos para el Traíamienío de Diabeíes La invención también se refiere a composiciones y métodos para el tratamiento de diabetes. La diabeíes, y en particular, la diabeles del tipo II esta asociada con el daño al páncreas. La diabetes tipo II resulla de una combinación de factores genéticos y de estilo de vida. En las personas genéticamente dispuestas a la diabetes, la sobrealimentación y falía de actividad física llevan a una resistencia de insulina con hiperglucemia postprandial caracíerísíica. La obesidad es una enfermedad inflamatoria caracíerizada por niveles elevados de las citocinas proinflamatorias TNF-alfa, IL-6 y IL-1 , todas de las cuales coníribuyen a la resisíencia la insulina (rev en Wellen, K.E. y Hotamisligil, G.S. 2005. J. Clin. Invest. 115:1111-1119). En ratas prediabélicas BB, hay niveles elevados de facíor 1 de aloinjerto inflamatorio (AIF -por sus siglas en inglés) en el páncreas (Chen Z.-W. et al. 1997. PNAS 94:13897-13884). Conjuntamente, el estado inflamatorio, niveles elevados de lípidos y estado de tensión oxidativo caracíeríslicos del 'síndrome melabólico' llevan a una función pancreática disminuida debido a la apoptosis de células beta, resultando en la diabetes del Tipo II. Esta condición puede exacerbarse además en que los diabéticos también íienen niveles incremenlados de 3DG, que también llevan a la liberación de citocinas, producción de productos terminales de glucación avanzada inflamatorios (AGEs) y estrés oxidativo incrementada. Por lo tanto, la presente invención proporciona composiciones y mélodos para el íratamiento de diabetes. En una modalidad, la invención proporciona un método que comprende adminislrar a un pacieníe una composición como se eslablece en delalle en algún lugar en la presente, en donde la composición alivia la condición diabética del paciente. En otra modalidad, un método incluye la administración a un paciente de una composición como se establece en detalle en la presente, en donde la composición evita una condición diabética en un paciente predispuesto a la diabetes. Las composiciones útiles para el tratamiento de la diabetes se describen en detalle en algún lugar en la presente con mayor detalle. Ejemplos de dichas composiciones incluyen, pero no deberá limitarse a, meglumina y meglumina + arginina. Debido a que el páncreas tiene niveles elevados de acíividad de la enzima F3K, esto causa niveles elevados de fructosalisina 3 fosfato que se rompe en 3DG. Debido a que el páncreas fabrica su propio 3DG que liene un efecto local para destruir las células beta y afecta adversamente el soporte de la matriz y vascularización exíracelular del páncreas.

Mélodos para la Remoción de 3DG de la Piel La presenie invención también se refiere a composiciones y métodos para la remoción de 3DG y otros azúcares alfa-dicarbonilo de la piel y para inhibir 3DG dependiente o asociado con el agrupamienío de la piel, envejecimiento de la piel, u otras enfermedades o írasíornos, así como el arrobamiento de la piel, el envejecimiento de la piel, u oirás enfermedades y írastornos de la piel asociados con otros azúcares alfa-dicarbonilo. Para este propósito, la invención incluye composiciones y métodos para inhibir la producción, síntesis como formación y acumulación de 3DG en la piel. La invención también incluye composiciones y métodos para estimular las trayectorias, o componentes de las trayectorias, que llevan a la destoxificación, degradación, o eliminación de la piel.

Uso de los Compuestos para Inhibir la Siníesis de 3DG En una modalidad la invención incluye un méíodo para inhibir la síníesis de 3DG en la piel de un mamífero, dicho método comprende administrar al mamífero una caníidad efectiva de un inhibidor de la síntesis de 3DG, o un derivado o modificación del mismo, con lo cual se inhibe la síntesis de 3DG en la piel de un mamífero. Preferiblemente, el mamífero es un humano. En una modalidad, el inhibidor comprende aproximadameníe 0.0001% aproximadamente 15% en peso de la composición farmacéutica. En un aspecto, el inhibidor se administra como una formulación de liberación conírolada. En otro aspecto la composición farmacéutica comprende una loción, crema, linimento, un ungüento, una pasta, una pasta deníal, un enjuague bucal, un enjuague oral, un recubrimiento, una solución, un polvo, y una suspensión. En aún oíro aspecío, la composición comprende además un humecíaníe, un hidraíante, un emoliente, aceite, agua, un emulsificante, un espesante, un adelgazador, un agente tensioactivo, una fragancia, un conservador, un antioxidante, un agente hidrotrópico, un ageníe quelante, una vitamina, un mineral, un mejorador de permeación, un adyuvante cosméíico, un ageníe blanqueador, un agenle de despigmenlador, un ageníe espumante, un acondicionador, un viscosificador, un agente amortiguante, y un protector solar. Deberá considerarse que la invención incluye diversos métodos de administración, incluyendo tópica, oral, intramuscular, iníravenosa.

En un aspecto de la invención, el inhibidor de la síniesis de 3DG es un inhibidor de fructosamina cinasa/amadorasa. El inhibidor de fructosamina cinasa puede ser un compuesto tal como N-metil-glucarnina y compuestos similares a N-metil-glucamina. En otra modalidad de la invención, un inhibidor de la síntesis de 3DG es meglumina. En un aspecto de la invención, los compuestos inhibidores representativos que tienen la fórmula anterior incluyen galacitol lisina, 3-desoxi sorbitol lisina, 3-desoxi-3- fluoro-xilitol lisina, y 3-desoxi-3-ciano sorbitol lisina y 3-0- metil sorbitollisina. Ejemplos de compuestos conocidos que pueden usarse como inhibidores en la práctica de esta invención incluyen, sin limitación, meglumina, sorbitol lisina, galacitol lisina, manitol lisina, xilitol y sorbitol. Un inhibidor preferido es 3-O-melil sorbiíol lisina. Los compuestos de la invención pueden administrarse, por ejemplo, una célula, un tejido, o un sujeío por cualquiera de diversos méíodos descriíos en la presenie y por otros que son conocidos por aquellos expertos en la íécnica. En un aspecto, un inhibidor de la invención que inhibe la síntesis enzimática del 3DG puede sintelizarse in vitro usando técnicas conocidas en la técnica (ver Ejemplo 8).

Composiciones y Métodos Uíiles para Inhibir la Función de 3DG La invención, como se describe en la presenie, se refiere al involucramienío del 3DG en la causa de diversas enfermedades y trastornos de la piel y a métodos para inhibir la función de 3DG para aliviar o íratar las enfermedades y trastornos de la piel asociadas con 3DG. La invención también se refiere al involucramiento del 3DG en otras enfermedades y trastornos, tal como enfermedades y trastornos de encías. Dichas enfermedades y írasíornos gingivales incluyen, pero no se limiían a, gingivitis, encías retraídas, y otras enfermedades y trasíornos gingivales asociados con el azúcar alfa-dicarbonilo. Como se describió aníes, la inhibición de la función de 3DG puede ser directa o indirecta. Por lo tanto, la función de 3DG puede inhibirse o causar que se disminuya usando muchos acercamientos como se describe en la preseníe. La inhibición de la función de 3DG puede ensayarse o monitorearse usando técnicas descritas en la preseníe así como oirás conocidas por aquellos expertos en la técnica. La función puede medirse directameníe o puede estimarse usando técnicas para medir parámeíros que son conocidos por ser correlativos de la función de 3DG. Por ejemplo, el entrelazado de proteínas y producción de proteinas puede medirse direcíameníe usando técnicas tales como análisis electroforético (ver Figura 10 y Ejemplos 7 y 18) así como otras técnicas (ver Ejemplos 21-24). Debe considerarse que la invención incluye no solamente los compueslos útiles para evitar el entrelazamiento de moléculas inducido por 3DG tales como colágeno, elastina y proíeoglicanos, si no que debe considerarse que incluye compuesíos que inhiben el entrelazado de otras moléculas iambién. Debe considerarse también que la invención incluye el uso de los compuestos para modular otras funciones de 3DG también, tales como la apoptosis y la formación de especies con oxígeno reaclivo. Se conoce que en la muerte celular apoptotica de células derivada por macrófagos puede inducirse por metílglioxal y 3DG (Okado et al., 1996, Biochem. Biophys. Res. Connmun. 225:219-224). En aún otro aspecto de la invención, un inhibidor de 3DG inhibe las especies con oxigeno reactivo (Vander Jagt et al., 1997, Biochem. Pharmacol. 53:1133-1140). Debe considerarse que la invención ¡ncluye otros azúcares alfa-dicarbonilo también. El 3DG y su producto de desíoxificación 3DF puede medirse por diferentes maneras usando muestras de células, tejido, sangre, plasma, y orina (ver Ejemplos 4, 5, 6, 14, 15, y 17) y FL, un producío producido durante la síntesis de 3DG, también puede medirse (ver Ejemplo 5), también un precursor, FL3P (ver esquemas A y B y Ejemplos 1 , 2 y 3). La invención describe métodos que son úíiles para inhibir la función de 3DG en la piel. Dicho método incluye la administración de una cantidad efectiva de uno o más inhibidores de la función de 3DG, o modificaciones o derivados del mismo, en una composición farmacéutica a un sujeto. En un aspecto de la invención el inhibidor de la función 3DG inhibe el entrelazamiento de proteínas. En otro aspecío, el inhibidor inhibe la formación de proíeínas modificadas de produelo terminal de glucación avanzada. En aún otro aspecto, el inhibidor de la función 3DG comprende una estructura de un compuesto similar a N-metil-glucamina, o es arginina o un derivado o modificación del mismo.

En una modalidad, el inhibidor comprende de aproximadamente 0.0001% a aproximadamente 15% en peso de la composición farmacéutica. En un aspecto, el inhibidor se administra como una formulación de liberación controlada. En otro aspecto la composición farmacéutica comprende una loción, crema, linimento, un ungüento, una pasía, una pasta dental, un enjuague bucal, un enjuague oral, un recubrimiento, una solución, un polvo, y una suspensión. En aún otro aspecto, la composición comprende además un humecíanle, un hidratante, un emoliente, aceile, agua, un emulsificaníes, un espesaníe, un adelgazador, un ageníe lensioactivo, una fragancia, un conservador, un antioxidante, un agente hidrotrópico, un agente quelante, una vitamina, un mineral, un mejorador de permeación, un adyuvante cosmético, un agente blanqueador, un agente de despigmeníador, un agente espumante, un acondicionador, un viscosificador, un ageníe amortiguaníe, y un protector solar. Debe considerarse que la invención incluye diversos métodos de adminisíración, incluyendo íópica, oral, intramuscular, e intravenosa. Deberá eníenderse que las composiciones y méíodos para inhibir las írayecíorias, eveníos, y precursores que llevan a la siníesis o producción de 3DG, pueden inhibir no solameníe la síntesis de 3DG, sino también su acumulación, y finalmente su función. Debe considerarse que la invención incluye composiciones y méíodos para inhibir lodas las írayectorias y precursores que llevan a la síntesis de 3DG (ver esquemas A y B). En otra modalidad de la invención, la descripción proporciona métodos para inhibir directamente la función de 3DG está asociada con diversas enfermedades y trastornos de la piel. En un aspecto, el método para inhibir la función de 3DG en la piel ¡ncluye la inhibición de 3DG con compuestos tales como aquellos que comprenden las fórmulas esírucíurales similares a los compuesíos similares a N-meíil-glucamina como se describe en la presenie. Los compuestos que comprenden estas fórmulas pueden unirse al 3DG y/o inhibir su función, como se describe en la presente. Adícionalmente, la invención incluye otras moléculas que pueden unirse a y bloquear la función de 3DG. Deberá entenderse que los compuesíos descriíos en la presenie no son los únicos compuestos capaces de inhibir la función 3DG o de tratar una enfermedad o trastorno de la piel asociado con 3DG o enfermedades y trasíornos de oíros tejidos y células. Deberá reconocerse por un experto en la técnica que las diversas modalidades de la invención como se describen en la presente se refieren a la inhibición de la función de 3DG, también comprenden otros métodos y compuestos útiles para la inhibición de la función de 3DG. También deberá reconocerse por un experto en la íécnica que otros compuestos y técnicas pueden usarse para practicar la invención. Deberá considerarse que la invención incluye los compuestos y métodos útiles no únicamente por su habilidad para inhibir la función de 3DG y para tratar la enfermedad o trastorno de la piel relacionada con 3DG, sino debe considerarse que incluye también la habilidad para inhibir la función de otros miembros de la familia de compuestos de azúcar alfa-dicarbonilo, incluyendo glioxal, metil gluioxal y glucosona. Deberá considerarse que la invención incluye el tratamiento de enfermedades y trastornos asociados con 3DG de las encías. En otra modalidad, la invención proporciona composiciones de componeníes múlíiples para la inhibición de 3DG y la función de 3DG. Se podrá entender por el experto en la técnica, en vista de la descripción asentada en la presente, que ciertos compuesíos activos, excipientes, adilivos, adyuvaníes, y similares, pueden añadirse la composición para mejorar o de otra manera modular la actividad de un compuesto que inhibe 3DG y/o la función de 3DG. En un aspecto, la invención incluye una composición que comprende mantequilla de cacao, maníequilla de karité, aceite de aloe, vitamina E, glicerol, agua, dimeticona y Nalipide II, junto con arginina-HCI y meglumina-HCI. Como se podrá eníender por el experto en la íécnica, con base en la preseníe descripción, las proporciones y conceníraciones de los componeníes individuales de una composición asentada en la presente pueden ajustarse para modular la aclividad de la composición con respecío al 3DG. Esto es, los ensayos y méíodos proporcionados en la presenie pueden usarse para delerminar el efecto de los componentes individuales en una composición con base en la descripción asenlada en la presente. En una modalidad, la invención también incluye un método para el traíamienío de una condición inflamatoria en un mamífero, el método comprende admínisírar al mamífero una composición que comprende un inhibidor de un azúcar alfa-dicarbonilo en el mamífero, la administración resulían la reducción, eliminación o inhibición de la función del azúcar alfa-dicarbonilo en un sitio en el mamífero. En un aspecto de la invención, la adminisíración de la composición resulía en la reducción, eliminación o eliminación de la función de 3DG en el siíio en el mamífero afecíado por la condición inflamatoria. En un aspeclo, el inhibidor de la función de 3DG comprende una estructura de un compuesto similar a N-metil-glucamina, o es arginína o un derivado o modificación del mismo. En aún otro aspecto, el inhibidor de la función de 3DG comprende la estructura de meglumina. Como se describe en detalle en algún lugar en la preseníe, "la inhibición de 3DG" se refiere, en parte, a cualquier método o técnica que inhibe la función de 3DG, así como a los métodos para inhibir la inducción o estimulación de la función de 3DG. También se refiere, en parte, a cualquier composición o método para inhibir la función de 3DG al destoxificar 3DG o causar la eliminación de 3DG. La inhibición puede ser directa o indirecta. La inducción se refiere, en parte, a la inducción de la función de 3DG. De manera similar, la frase "inhibir los azúcares alfa-dicarbonilo", se refiere a inhibir a los miembros de la familia del azúcar alfa-dicarbonilo, incluyendo 3DG, glioxal, meíil glioxal, y glucosona. El experto en la técnica entenderá que los méíodos y composiciones para tratar un pacienle por medio de la inhibición del azúcar alfa-dicarbonilo descriía en la preseníe, incluye la inhibición de 3DG, aplica ¡gualmenle al tratamiento de otras enfermedades o trastornos descritos en la presenie y relacionados con la presencia o acumulación de azúcares alfa-dicarbonilo, tal como, pero no limitado a 3DG. Esto es, otras enfermedades o trastornos escritos en la presente y relacionados con la presencia o acumulación de azúcares alfa-dicarbonilo, tal como, pero no limitado a 3DG pueden tratarse con una composición que comprende un inhibidor de 3DG. En un aspecto de la invención, las enfermedades o trastornos descritos en la preseníe se relacionan con la presencia o acumulación de azúcares alfa-dicarbonilo, íales como, pero no limitadas a 3DG, pueden tratarse con una composición que consiste de un inhibidor de 3DG. En otra modalidad, la invención lambién incluye un método para el tratamiento del color en un mamífero, el método comprende adminisírar al mamífero una composición que comprende un inhibidor de un azúcar alfa-dicarbonilo en el mamífero, la administración resulta en la reducción, eliminación o inhibición de la función del azúcar alfa-dicarbonilo en un sitio en un mamífero, para tratar el dolor. En un aspecto de la invención, la administración de la composición resulten reducción, eliminación o inhibición de la función de 3DG en el sitio en el mamífero afectado por el dolor. En aún otra modalidad, la invención también incluye un método de tratamiento de comezón en un mamífero, el método comprende administrar al mamífero una composición que comprende un inhibidor de un azúcar alfa-dicarbonilo en el mamífero, la administración resulía en la reducción, eliminación o inhibición de la función del azúcar alfa-dicarbonilo en un siíio en el mamífero, para íratar la comezón. En un aspecto de la invención, la administración de la composición resullen la reducción, eliminación o inhibición de la función de 3DG en el sitio en el mamífero afectado por la comezón.

Ensayos para la Prueba de la Inhibición Síntesis, Formación.

Acumulación, y Función de 3DG y Otros Azúcares Alfa-dicarbonilo La presente descripción proporciona una serie de ensayos para identificar inhibidores de la síntesis, formación, acumulación, y función de 3DG, así como la medición de los efectos de diversos inhibidores en la síníesis, formación, acumulación, y función de 3DG. Los ensayos íambién incluyen aquellos usados para medir la degradación, desíoxicacíón, y eliminación de 3DG. Los ensayos de la invención incluyen, pero no se limiían a, ensayos de HPLC, ensayos electroforéíicos, ensayos de cromaíografía de gases-especlroscopia de masa, análisis de aminoácidos, ensayos de la actividad de enzimas, ensayos de glucación avanzada, ensayos entrelazamiento de proteínas, análisis de RMN, cromatografía de iníercambio iónico, diversos análisis quimicos, diversas técnicas de etiquetado, técnicas de disección gruesa y quirúrgica, aislamiento de ARN, RT-PCR, técnicas histológicas, diversas técnicas de síntesis química, bioquímica, y molecular, íeratogenicidad, mutagenicidad y ensayos de carcinogenicidad, ensayos de orina, ensayos excreción, y una variedad de técnicas animales, de tejidos, de sangre, plasma, células, bioquímicas, y moleculares. Las técnicas siníéiicas pueden usarse para producir compuestos, tales como: producción química y enzimática de FL3P (Ejemplos 1 , 2 y 3); poliollisina (Ejemplo 4); 3-0- metil sorbitol lisina (Ejemplo 8); fructosil espermina (Ejemplo 9); y dieta de proteínas glucadas (Ejemplo 13). Pueden usarse oirás iécnicas que no se describen en la presente, pero que son conocidas por aquellos expertos en la técnica. En una modalidad de la invención, pueden usarse estándares cuando se prueban nuevos agentes o compuestos o cuando se miden los diversos parámetros descritos en la presente. Por ejemplo, se conoce que la frucíosa-lisina es un modulador de 3DG y 3DF y puede administrarse a un grupo o sujeto como un estándar o control en contra de los cuales los efectos de un agente de prueba compuesto pueden compararse. Adicionalmente, cuando se mide un parámetro, la medición de un estándar puede incluir la medición de parámetros tales como conceníraciones de 3DG o 3DF en un íejido o fluido obíenido de un sujeío antes de que el sujeto se trate con un compuesto de prueba y los mismos parámeíros pueden medirse después del tratamiento con el compuesto de prueba. En oíro aspecío de la invención, un estándar puede ser un estándar añadido exógenamenle es un ageníe compuesto que se añade a una muestra y que es útil como un control interno, especialmente en donde una muesíra es procesada a través de numerosas etapas o procedimientos y la cantidad de recuperación de un marcador de interés en cada etapa debe determinarse. Dichos eslándares internos añadidos exógenamente a menudo se añaden en una forma etiquetada, es decir, un isótopo radioactivo.

Métodos para Diagnosticar Enfermedades o Trastornos de la Piel Asociados con 3DG La presente invención describe la presencia de 3DG en la piel y métodos para medir los niveles de 3DG en la piel y para medir una enzima responsable de la síntesis de 3DG en la piel (del Ejemplos 19:20). La invención también comprende métodos que pueden usarse para diagnosticar cambios en niveles de 3DG en la piel que pueden asociarse con el arrugamiento, envejecimiento, o diversos otros enfermedades o trasíornos de la piel. No debe considerarse que la invención incluye únicameníe métodos para diagnosticar enfermedades y trastornos de la piel asociados con 3DG, sino que debe considerarse que incluyen métodos para el diagnóstico de enfermedades y trastornos de la piel asociados con otros azúcares alfa-dicarbonilo también. Debe considerarse que la invención incluyen métodos para el diagnóstico de enfermedades o trasíornos asociados con 3DG de otras células y íejidos también, incluyendo, pero no limiíadas, enfermedades y trastornos de encías. En una modalidad de la invención, un paciente con arrugamiento de la piel, envejecimiento de la piel, u otras enfermedades o íraslornos de la piel, puede someterse a una prueba de diagnóstico para determinar, por ejemplo, los niveles de 3DG, la actividad funcional de 3DG, los niveles de 3DF, una relación 3DF/3DG, la cantidad de proíeína amadorasa o mARN preseníe, con los niveles de actividad de amadorasa en su piel. Dicha prueba se basa en los diversos métodos y ensayos escritos en la presente, o conocidos por aquellos expertos en la técnica. Un nivel más alto de 3DG o amadorasa, con sus actividades, con niveles bajos de 3DF, comparado con 1 a no afecíada de la piel o al la piel de un pacieníe normal, será una indicación de que el arrugamiento de la piel, envejecimiento de la piel, u otras enfermedades o trastornos de la piel, esíán asociadas con 3DG y que el inhibidor de 3DG de la presenie invención puede ser un íratamiento apropiado para el problema. Deberá considerarse que la invención incluye enfermedades y trastornos en la piel asociados con moléculas de la familia de azúcar alfa-dicarbonilo diferentes de 3DG. En un aspecto de la invención, pueden medirse enfermedades o trastornos de la piel asociados con 3DG, incluyendo, pero no limitado a niveles de 3DF y FL, niveles de proteína entrelazada, así como niveles de otros azúcares alfa-dicarbonilo tales como glíoxal, metil glioxal y glucosona. Una multitud de ensayos para la medición de los niveles y función de 3DG, incluyendo la medición de sus precursores, se describe a través de la presente descripción (ver Ejemplos 1-22). No obstaníe, no debe considerarse que la invención incluye únicameníe los ensayos descritos en la presente, sino que debe considerarse que incluye otros ensayos para la medición de niveles o función de 3DG, incluyendo los ensayos o técnicas que son mediciones indirectas de los niveles o acíividad funcional de 3DG. Por ejemplo, en un aspecto de la invención, la medición indirecta de los niveles y función de 3DG puede determinarse al medir dichos aspectos como niveles de 3DF, entrelazamiento de proteínas, entrelazamiento de proleoglicanos, o cualquier oíro ensayo mostrado que se correlaciona con los niveles de 3DG. En un aspecto de la invención, la muesíra puede usarse para la medición de los niveles de 3DG, etc., en una muestra de piel. Las muesíras de piel pueden obtenerse por métodos que incluyen, pero no se limilan a íécnicas de biopsia de perforación, raspado, y formación de vesículas. En otro aspecto de la invención, pueden usarse los ensayos indirectos para los niveles o función de 3DG en la piel están correlacionados con las enfermedades o trastornos de la piel asociados con 3DG. Esíos ensayos incluyen, pero no se limitan a, ensayos para la medición de niveles o función de 3DG en otros tejidos, sudor, sangre, plasma, saliva, orina. La invención describe el método para diagnosíicar una enfermedad o írastomo de la piel asociada con otros azúcares alfa-dicarbonilo que comprende adquirir una muestra biológica de un sujeto de prueba y comparar el nivel de 3DG u otro parámetro asociado de azúcares alfa-dicarbonilo de arrugamiento, envejecimiento, enfermedad, o trastorno de la piel con el nivel del mismo parámetro en una muestra biológica idéntica de un sujeto de control. El control puede ser de un área no afecíada del mismo sujeío o de un sujeto no afectado por 3DG u otra enfermedad o trastorno asociado con azúcar alfa-dicarbonilo. Un mayor nivel del parámetro en el sujeto de prueba es una indicación de que el sujeto de prueba íiene arrugamiento, envejecimiento, enfermedad, o trastorno de la piel asociado con 3DG u otro azúcar alfa-dicarbonilo. Los parámetros que pueden medirse se describen en la presente o son conocidos por aquellos expertos en la técnica, e incluyen, pero no se limitan a, 3DG, entrelazamiento de proíeinas, enlrelazamiento de proleoglicanos, proíeínas modificadas de produelo lerminal de glucación avanzada, 3DF, niveles y actividad de fructosamina cinasa/amadorasa, y fructosamina cinasa/amadorasa mARN a cambios en niveles de las especies con oxígeno reactivo. En aún otro aspecto de la invención, los 3DG u otros azúcares alfa-dicarbonilo pueden asociarse con enfermedades de la piel, condiciones de trastorno y la apariencia de estas enfermedades, trastornos y condiciones seleccionadas del grupo que consiste de envejecimiento de la piel, fotoenvejecimiento, arrugamiento de la piel, cáncer de piel, hiperqueratosis, hiperplasia, acantosis, papilomatosis, dermatosis, hiperpigmeníación, rinofima, escleroderma, rosácea, y telangiectasia. En otro aspecto de la invención, el 3DG está asociado con funciones que incluyen, pero no se limitan, el entrelazamiento de proteínas, mutagenicidad, teraíigenicidad, apoplosis, daño oxidativo causado por la formación de especies con oxígeno reacíivo, y citoíoxicidad. Deberá entenderse que e 3DG y otros azúcares alfa-dicarbonilo están asociados con funciones que causan daños no solamente proteínas, pero a lípidos y a ADN también. En un aspecío de la invención, el 3DG u oíros azúcares alfa-dicarbonilo pueden íambién asociarse con enfermedades y trastornos de la piel (incluyendo, pero no limitado a la mucosa), incluyendo, pero no limitado a, enfermedades y trasíornos de encías, enfermedades de la mucosa vaginal y anal, y similares.

En aún otro aspecto de la invención, los ensayos para la medición de niveles y función de 3DG pueden usarse conjuntameníe con otros métodos para la medición de enfermedades y trastornos de la piel, tales como la medición del espesor o elasticidad y/o humedad de la piel. Muchos de estos ensayos se describen en la presente. Un experto en la íécnica apreciará que pueden usarse oíros ensayos no descritos en la presente conjuntamente con los ensayos de 3DG para formar un diagnóstico completo del tipo de problema de la piel involucrado y si es o no un problema de la piel asociado con 3DG. No deberá considerarse que la invención incluye el diagnósíico de una enfermedad, condición o trastorno de la piel únicamente por la medición de los niveles del azúcar alfa-dicarbonilo 3DG, también deberá considerarse que ¡ncluye la medición de los niveles de oíros miembros de la familia de azúcares alfa-dicarbonilo también, así como sus producios de rompimiento, incluyendo, pero no limitado a, 3-desoxif elosa. Entonces, el uso de un ensayo de diagnóstico para determinar una asociación entre 3DG y una enfermedad o trastorno de la piel permitirá la selección de sujetos apropiados antes de iniciar el tratamiento con un inhibidor de 3DG.

Méíodos para la Inhibición o Traíamiento de Arrugamiento de la Piel, Envejecimiento de la Piel, u Oirás Enfermedades, Trasíornos o Condiciones de la Piel Asociadas con 3DG u Otros Azúcares Alfa-dicarbonilo La invención también describe métodos para la inhibición o el íratamiento de enfermedades o trastornos de la piel relacionados con 3DG. Algunos ejemplos de enfermedades o trastornos asociados con 3DG incluyen, pero no se limitan a, cáncer de piel, psoriasis, envejecimiento, arrugamiento, hiperqueratosis, hiperplasia, acantosis, papilomaíosis, dermatosis, rinofima, íelangiectasia, y rosácea. Un cáncer u otra enfermedad o írasíomo puede pertenecer a cualquiera de un grupo de cánceres u oirás enfermedades o írasíornos, que se han descrito en la preseníe, así como cualquier olro cáncer relacionado u otras enfermedades o traslornos conocidos por aquellos experíos en la íécnica. No deberá considerarse que la invención se limita únicamente a esos ejemplos, porque otras enfermedades o trastornos asociados con 3DG que se desconocen actualmeníe, una vez conocidos, podrán lambién íratarse usando los métodos de la invención. Un experto en la técnica podrá apreciar que los inhibidores de 3DG pueden usarse profilácticamente para algunas enfermedades o trastornos de la piel, en donde se conoce 3DG, o se volverá conocido, que el 3DG está asociado con una enfermedad o írasíorno de la piel. Por ejemplo, los inhibidores de 3DG pueden aplicarse para prevenir arrugas u otros problemas de la piel en sujetos que esíán expuestos a elementos severos del medio ambiente tales como el sol (fotoenvejecimienlo/fotodaño), calor, producios quimicos, o frío. Dichos problemas pueden deberse al daño de proteínas u otras moléculas tales como lípidos o ácidos nucleicos causados por 3DG o azúcares alfa-dicarbonilo. Un experto en la técnica apreciará, con base en la descripción proporcionada en la presente, que la presente invención abarca métodos para la prevención de la pérdida de microcirculación y/o neuroinervación en la piel envejecida, esclerodérmica y/o diabética debido a que el estrés oxidativo incrementa el 3DG y los AGEs y estos, a su vez, se ligan a la disfunción neuropática y circulatoria. La presente invención también comprende métodos para la prevención de pérdida del cabello asociada con o mediada por la pérdida de microcirculación y/o pérdida de neuroinervación en poblaciones de individuos envejecidos, escelrodérmicos y/o diabéticos. Esto se debe a que se conoce que el 3DG es un precursor de la formación de AGEs que se conoce que están conectados causalmente al desarrollo de neuropatía. Los datos preliminares demostraron que las ratas diabéticas tratadas con DYN 12 y medidas para resistencia muscular mientras estaban despiertas tuvieron una resistencia muscular más fuerte que las raías diabéticas no tratadas. Esto soporta el concepto de que el mantenimiento de la conducción y microcirculación nerviosa que soporta la inervación nerviosa se afecta nocivamente no sólo por AGEs, sino también por 3DG. De manera similar, en donde 3DG puede causar bloqueo de la microcirculación que soporta la inervación nerviosa del folículo del cabello, el folículo del cabello se aírofiará y morirá, como es el caso de la neuropatía. De conformidad, la presente invención incluye métodos para prevenir la pérdida del cabello, tal como la pérdida del cabello asociada con o mediada por la presencia de 3DG en la piel próxima al folículo/eje del cabello. De manera similar, la invención incluye métodos para la prevención de la formación de canas en el cabello. Esto se debe, como se discutió previamente con respecto a la pérdida del cabello, la inhibición de la presencia y/o actividad de 3DG en la piel asociada con el folículo o eje del cabello pueden evitar el efecto nocivo de 3DG en la microcirculación que afecta dicho cabello y, a su vez, evitar la formación de canas del cabello debido a dicho efecto nocivo. Entonces, un experto en la íécnica apreciará, con base en la descripción proporcionada en la preseníe, que la presenie invención comprende métodos y composiciones relacionadas con la prevención de pérdida del cabello y/o formación de canas en el cabello. Dichas composiciones y métodos comprenden, pero no se limiían, champú u olra composición que puede aplicarse el cabello y a la piel asociada con un folículo de cabello para administrar los compuestos de la invención de manera que la formación, acumulación y/o función de 3DG y/o amadorasa se inhibe con el mismo. Con base en la descripción proporcionada en la presente, los expertos en la íécnica eníenderán que dichos compuestos incluyen, pero no se limiían, meglumina. Además, la formulación de las composiciones a ser aplicadas a los folículos del cabello y los regímenes de dosificación y tratamiento de los mismos, se describen en la presente y también son bien conocidos por aquellos expertos en la técnica. La invención comprende métodos para el tratamiento de curación de heridas de la piel. Esto es porque los ROS esíán asociados con el origen de heridas. De conformidad, los experíos en la técnica apreciarán, con base en la descripción proporcionada en la presente, que cualquier inhibidor de ROS efectuará positivamente la curación de heridas. Dada la función del 3DG en el origen de ROS, la inhibición de ROS al inhibir la producción de 3DG puede resultar en métodos útiles para evitar y traíar heridas. Soporte adicional para el uso de la inhibición de 3DG en la piel como un agenle lerapéutico útil en la curación de heridas se proporciona por estudios que demuestran que los diabéticos son especialmeníe propensos para los problemas de curación de heridas, debido a que como ya se discutió en algún lugar en la presente, los diabéticos tienen niveles elevados de 3DG y desíoxifican el 3DG menos eficieníemenle que los no diabéticos. Eníonces, el hallazgo sorprendeníe de que el 3DG, así como la enzima responsable de esía síníesis enzimáíica, están presentes en la piel hace posible, por primera vez, el desarrollo de compuestos íerapéuíicos novedosos para la promoción de curación de heridas, especialmente para diabéticos. Debido a que el 3DG y la írayectoria de su formación, están presentes en la piel, y están involucrados en la producción de ROS y debido a que los ROS esíán, a su vez, involucrados con la inflamación, los expertos en la técnica apreciarán que la invención abarca métodos para el tratamiento o mejoramiento de enfermedades, trasíornos o condiciones asociadas con inflamación mucosal. La inhibición de la formación, función, y/o acumulación de 3DG en la piel puede inhibir la inflamación mucosal de manera que las condiciones asociadas con la inflamación de la mucosa (por ejemplo, pasajes nasales, vagina, recto, cavidad bucal, y similares) puede inhibirse por dicha inhibición. Por ejemplo, la inhibición de 3DG puede usarse para modular el pardeamiento de los dientes, la inflamación de la boca, gingivitis, enfermedad periodontal, úlceras de herpes, y similares. Además, debido a que la inhibición de 3DG puede evitar la inflamación mucosal y puede inducir la curación de heridas, dicha inhibición puede íambién proporcionar un compuesto terapéuíico úíil para la prevención y/tralamiento de infecciones virales, bacteriales o fúngicas en donde la infección está mediada por infección patogénica a íravés de la piel y/o mucosa. Por lo tanto, la presente invención incluye métodos y composiciones para la prevención o tratamiento de infecciones fúngicas, virales y bacteriales al proporcionar un inactividad o de amadorasa y/o 3DG a un paciente que requiera de dicho tratamienío. La invención abarca métodos de tralamiento o prevención de gingivitis, enfermedades peirodontales, amarillamiento de los dientes, y similares. Esto se debe a que los datos escritos en la presente demuesíran que el 3DG eslá presente la saliva, y está presente en la piel, indicando que está presente en la mucosa. Por lo tanto, un experto en la técnica apreciará, con base en la descripción proporcionada en la presente, que la inhibición de 3DG asociada con la mucosa en la cavidad bucal puede inhibir los efectos nocivos asociados con o mediados por la molécula, incluyendo, pero no limiíado, gingiviíis, enfermedad periodontal, y decoloración de los dientes. Esto se debe a que el estrés oxidativo y AGEs están asociados con estas condiciones y el 3DG induce el estrés oxidativo y AGEs. Además, el experto en la íécnica, armado con las enseñanzas proporcionadas en la presenie, entenderá que la presente invención abarca métodos de traíamiento de la enfermedad de Wilson, artritis reumatoide, esclerosis sistémica progresiva, enfermedad fibrótica de pulmón, fenómeno de Raynaud, conlracturas de articulaciones, síndrome de Sjogren, y similares. Esto se debe, a que el 3DG causa la inducción de especies con oxígeno reactivo y las especies con oxígeno reactivo causan la inflamación, enfermedades asociadas con la inflamación mediadas por o asociadas con ROS pueden prevenirse o tratarse por la inhibición de 3DG. Por lo tanto, la enfermedad de Wilson, artritis reumatoide, esclerosis sistémica progresiva, enfermedad fibrótica de pulmón, fenómeno de Raynaud, contracturas de articulaciones, sindrome de Sjogren, y similares pueden tralarse de acuerdo con los métodos establecidos en la presente relacionados a la inhibición de 3DG y o amadorasa. La presente invención incluye métodos de tratamienío del cáncer de mama. Esío se debe, como se establece más completamenle en algún lugar en la presenie, a que los dalos escritos en la presente demuestran que el 3DG está presente en el sudor. Debido a que las glándulas mamarias son glándulas sudoríparas altamente especializadas, los expertos en la íécnica apreciarán, con base en la descripción proporcionada en la presente, que la inhibición de 3DG en dicho tejido proporcionará un efecto benéfico dados los efectos nocivos con comerciados por 3DG. La inhibición de 3DG en la piel, como se prefiera por los expertos en la técnica con base en la descripción proporcionada en la presente, puede proporcionar compuestos terapéuticos útiles para el tralamienío de cáncer de mama debido a que el 3DG causa el estrés oxidativo y la formación de oxígeno reactivo e inhibe las enzimas que combalen el estrés oxidativo. Entonces, el 3DG agota las defensas del cuerpo en contra de la inflamación, y en particular, de los altos niveles de 3DG presentes en la piel agotan nocivamente las defensas presentes en la piel y mucosa. Entonces, sin desear unirse a ninguna teoría en particular, los efectos de 3DG se deben principalmente a su efecto en el estrés oxidativo y, a su vez, a la cascada inflamatoria completa. Esto es importante para el cáncer de mama en donde se cree que el estrés oxidativo de largo plazo, y no un punto simple de muíación, causa la enfermedad. De igual manera, un experto en la técnica, una vez armado con las enseñanzas descritas en la presente, entenderán que en donde hay un fluido corporal, lal como saliva, sudor, linfa, orina, semen, y sangre, que comprende 3DG, se produce por o se asocia con la piel, una enfermedad, trastorno o condición mediada por el contacto de dicho fluido con una célula, tejido órgano puede tratarse por la inhibición de 3DG. Dicha enfermedad, trastorno o condición mediada por o asociada con el 3DG presente en un fluido corporal incluye, pero no se limita, Linfoma no de Hodgkins, en donde el sudor que comprende 3DG satura las glándulas linfáticas. Además, la invención incluye métodos para inhibir la formación de aductos 3DG, y/o inactivar estos aductos, debido a que estos aductos contribuirán a las enfermedades, trastornos o condiciones asociadas con 3DG, incluyendo aquellas descritas en algún lugar en la presente. Esto es, así como la prevención de la formación, acumulación, y/o funcionamiento del 3DG previene el efecto nocivo del compuesto relacionado con el envejecimiento y enfermedad, y más especialmente, con los efectos nocivos de 3DG en la piel como se describe en cualquier lugar en la presente, la inhibición de los efectos nocivos de los aductos de 3DG y/o intermediarios en donde sea que se encuentren podrán de igual manera prevenir estos efectos nocivos. Los expertos en la técnica, una vez armados con las enseñanzas proporcionadas en la preseníe, eníenderán que dichos aducíos/iníermediarios de 3DG incluyen, pero no se limiían a, aquellos descritos en el Esquema C, y que dichos intermediarios/aducios que se forman de 3DG íambién coníribuirán al envejecimiento y enfermedad, en donde sea que se encuenlren. El Esquema C es una ilustración esquemática de ambos la formación de aductos y la inhibición de la formación de aducios de acuerdo con modalidades de la preseníe invención. Los 3DG pueden formar un aducto con un grupo amino primario en una proteína. La formación de aductos de proteínas 3DG crea una base Schiff, el equilibrio de la cual se describe en el esquema C. El aducto de base Schiff de proteínas 3DG puede ir a formar una proteína entrelazada, por la formación de un segundo aduclo de proteína 3DG por vía de la molécula 3DG involucrada en el primer aducto de base Schiff de proteína 3DG anterior, formando así un "puente 3DG" entre dos grupos amino primarios de una proteína simple (trayectoria "A"). Alternaíivameníe, dicho enírelazamienío puede ocurrir entre dos grupos amino primarios de proíeínas separadas, formando un "puente 3DG" entre dos grupos amino primarios de dos proteínas separadas, resultando en un par entrelazado de moléculas de proíeína. Puede evitarse que el primer aducto de base Schiff de proteína 3DG forme dichas proteínas entrelazadas como se describe en la írayecíoria "A". Por ejemplo, dicho entrelazamiento de proteínas puede inhibirse por agentes nucleofílicos tales como glutationa o penicilamina, como se ilustra en el esquema C por la trayectoria "B". Dichos agentes nucleofílicos reaccionan con el átomo de carbono de 3DG responsable de la formación de la segunda base Schiff, eviíando que el átomo de carbono forme un aducío de proíeína 3DG de base Schiff y así evitar el entrelazamiento de la proteína.

ESQUEMA C H Lisina H +ADP Fructosa-lisina FL3P HC^O C^O Lisina I FL3P HCH + I HCOH Fosfato Inorgánico HCOH CH2OH 3DG Eslos aductos son desconocidos en lo anterior, y los experíos en la lécnica apreciarán, con base en la descripción novedosa en la presenie, que al inhibir dichos aductos se inhibirá un procedimiento de enfermedad mediado por o asociado con los mismos, en la piel y en donde sea que dichos aductos estén presentes. Entonces, la presente invención abarca la inhibición de la síníesis, formación y acumulación de dichos aducios 3DG, en donde sea que se detecten usando métodos de detección descritos en la presente, conocidos en la técnica, o a ser desarrollados en el futuro. La presente invención abarca métodos para el Iratamiento o mejora de una amplia plétora de enfermedades, cuyas enfermedades esíán mediadas por o asociadas con cambios en la piel debido a las iníeracciones de 3DG con proíeínas en la piel, tales como, por ejemplo, colágeno y elastina, y con la inducción de ROS y su reacción subsiguiente con componentes de la piel. Esto es, los datos escritos en la presente demuesíran que el 3DG en la piel media o se asocia con el entrelazamiento de colágeno y, a su vez, con el espesamiento de la piel, de manera que la prevención de la acumulación, formación, función, y/o incremento de la eliminación del 3DG y/o Amadorasa, de la piel o de proporcionar un beneficio terapéutico para una enfermedad íraslorno o condición mediadas por o asociadas con dicho espezamienío. Adicionalmente, la presente invención comprende el tralamienío o mejora de una enfermedad, trastorno o condición mediada por o asociada con, estrés oxidativo. Esto se debe a que el 3DG induce el estrés oxídativo, es decir, el estrés oxidativo induce 3DG ya sea directamente o a íravés de la formación de AGEs y por lo tanto el 3DG está involucrado en la respuesta inflamatoria. Eníonces, inhibir el 3DG tratará o prevendrá una enfermedad, trastorno o condición asociada con inflamación. Dicha enfermedad, trastorno o condición incluye, pero no se limita a, gingivitis, enfermedad periodontal, pardeamiento/amarillamienío de dientes, lesiones por herpes, y fibrosidad debido a que estas están mediadas por, o asociadas con, ROS. De conformidad, al prevenir ROS, ial como por, por ejemplo, el iratamiento de los dientes y/o tejido oral (por ejemplo encías, y similares) con un inhibidor de 3DG, por ejemplo, meglumina, puede reducir los efectos nocivos de ROS en la cavidad bucal tal como las enfermedades, trastornos o condiciones antes mencionadas. La presente invención comprende además tratamientos que afectan la apariencia de la piel con base en la inhibición de 3DG, sus aducios/intermediarios, asi como la inhibición de amadorasa en la síntesis de 3DG. Entonces, aún cuando la condición, írasíorno o enfermedad no se trate o mejore, la invención incluye métodos de íratamiento que afectan la apariencia de la piel de manera que al final, la condición, traslorno o enfermedad aféela la apariencia de la piel a un menor grado que en la ausencia del íratamiento. Estos tratamientos son por lo tanto cosméticos y pueden producir una mejora en la apariencia física. La preseníe invención incluye méíodos de íraíamienío del envejecimienío de la piel relacionado con la pérdida de la elasíicidad de la piel. Esto se debe, como se esíablece más ampliamente en algún lugar en la preseníe, los datos descritos en la presente demuestran, por primera vez, que el 3DG y la enzima asociada con su síntesis, están preseníes en la piel y que la inhibición de 3DG puede eviíar o invertir la pérdida de la elasíicidad de la piel asociada con su presencia en la piel. De conformidad, el experto en la íécnica apreciará, una vez armado con las enseñanzas proporcionadas en la preseníe, que inhibir el 3DG en la piel puede reducir el envejecimiento de la piel de manera que la presente invención proporciona compuestos terapéuticos útiles en la inhibición del envejecimiento de la piel y pérdida de la elasticidad de la piel. Los expertos en la técnica entenderán además que los agentes terapéuticos de envejecimiento de la piel abarcan, pero no esíán limitados a, a diversos procedimientos de íratamienío bien conocidos en las íécnicas dermatológica y cosmetológica incluyendo, pero no limiíadas a, envolíuras de la piel, exfoliantes, mascarillas, y similares, que pueden usarse para efectuar los diversos tratamientos descritos en la presente. La invención abarca métodos para prevenir la susceptibilidad a infecciones virales, fúngicas y bacteriales en rufas oral, recial y vaginal al inhibir la Amadorasa y/o al inacíivar el 3DG. Específicamente, la susceptibilidad a la infección por, por ejemplo, VIH, virus del papiloma y virus de Epstein-Barr pueden disminuir porque los cambios en la piel afecian la recepíividad de la enfermedad y el 3DG induce la formación de ROS y AGEs y íambíén inleractúa activamente con las proteínas de la piel, en particular colágeno y elastina, por lo tanto afectan la piel de manera que se altera la receptividad. Un experto en la técnica entenderá, con base en la descripción proporcionada en la presenie, que la preseníe invención proporciona compuestos terapéuticos útiles para una amplia plétora de enfermedades, írasíornos o condiciones asociados con 3DG en la piel. Esío es porque, intera alia, como es bien conocido en la lécnica que el 3DG media la formación de ROS, los cuales, a su vez, se sabe bien que están involucrados en una amplia variedad de enfermedades, trastornos o condiciones como se establece en la presente. La invención también incluye métodos para la inhibición o tratamienío de enfermedades o trastornos de la piel asociados con miembros de la familia de compuestos del azúcar alfa-dicarbonilo diferentes de 3DG. En un aspecto de la invención, diversos cambios en la piel pueden medirse siguiendo el tratamiento con inhibidores de 3DG. La topografía de la piel puede definirse por parámelros tales como: (a) número de arrugas; (b) área total de arrugas; (c) longitud total de las arrugas; (d) longitud media de las arrugas; y (e) profundidad media de las arrugas. El tipo de arrugas puede determinarse con base en la profundidad, longitud, y área. Esías propiedades pueden usarse cuando se evalúan los cambios en la piel debido a la enfermedad o trastorno o al efecto de un tratamiento en la piel. Los efectos de los cambios en los niveles y función de 3DG en diversas calidades de piel pueden determinarse con base en técnicas conocidas en la técnica. Los métodos para medir la calidad de la piel incluyen, pero no se limilan a, medición de propiedades viscoelásticas con instrumentos tales como un balistómetro, medición de las propiedades de deformación mecánica/vertical de la piel con un instrumento tal como un cutómelro, o medir los cambios en la capacitancia de la piel resultante de cambios en el grado de hidratación usando un corneómetro.

Composiciones y Métodos para Administración La invención se refiere a la administración de un compuesto identificado en una composición farmacéutica o cosmética para practicar los métodos de la invención, la composición comprende el compuesto o un derivado o fragmento apropiado del compuesto y un portador farmacéuticamente aceptable. Por ejemplo, una composición química con la cual un inhibidor apropiado de la producción de 3DG dependiente de enzima o no dependiente de enzima, o inhibidor de la acumulación o función de 3DG, o estimulador de la remoción, destoxificación, o degradación de 3DG, se combina, se usa para administrar el compuesto apropiado a un animal. Debe considerarse que la invención incluye el uso de uno, o el uso simultáneo de más de un, inhibidor de 3DG o estimulador de la remoción, degradación o destoxificación de 3DG. Cuando se usan uno o más estimuladores o inhibidores, éstos pueden administrarse conjuntamente o pueden administrarse separadameníe. En una modalidad, las composiciones farmacéuticas útiles para practicar la invención pueden administrarse para suministrar una dosis de entre 1 ng/kg/día y 100 mg/kg/día. En olra modalidad, las composiciones farmacéuticas útiles para practicar la invención pueden administrarse para suministrar una dosis de entre 1 ng/kg/día y 100 mg/kg/día. En otra modalidad de la invención, una composición farmacéutica está en la forma de una crema de liposoma. En un aspecto, una composición comprende 23.9 gramos de Concentrado de BIOCREME (BioChemica International Inc.), mezclado con 2.9 gramos de mantequilla de cacao, 1.4 g de mantequilla de karité, 2.2 g de aceite de aloe, 1.1 gramos de vitamina E, 3.7 gramos de glicerol, 51 g de agua, 1.1 gramos de dimeticona y 10.8 gramos de Natipide II, junto con 1 g de arginína-HCI y 1 g de meglumina-HCI. No obstante, la invención no debe limitarse a un vehículo a base de liposoma. Como se entenderá por el experto en la técnica, cuando se arma con la descripción asentada en la presente, una composición útil en la presente invención puede incluir un ingrediente activo. Alternativamente, una composición útil en la presente invención puede incluir por lo menos dos ingredientes activos. En un aspecto, los ingredientes activos múltiples pueden ser activos de manera aditiva. En otro aspecto, los ingredientes activos múltiples pueden ser activos de una manera sinérgica. Esto es, los ingredientes activos múltiples en una composición de la invención pueden proporcionar un efecto terapéutico que es mayor que la adición de los efectos terapéuticos proporcionados por cada uno de los ingredientes activos solos. A manera de un ejemplo no limitativo, una composición puede comprender ambos de un inhibidor de la formación de azúcar alfa-dicarbonilo y un inhibidor de la función a efecto del azúcar alfa-dicarbonilo, conjuntamente exhiben un efecto sinérgico en el alivio de las condiciones asociadas con el azúcar alfa-dicarbonilo, en comparación con composiciones que comprenden cualquier tipo de inhibidor solo. En una modalidad, la combinación de meglumina y arginina para el tratamiento de condiciones asociadas con la azúcar alfa-dicarbonilo. Otros portadores farmacéuticamente aceptables que son útiles incluyen, pero no se limitan, glicerol, agua, salina, etanol y otras soluciones salinas farmacéuticamente aceptables tales como fosfatos y sales de ácidos orgánicos. Ejemplos de estos y otros portadores farmacéuticamente aceptables se describen en Remington's Pharmaceutical Sciences (1991 , Mack Publícation Co., New Jersey). Las composiciones farmacéuticas pueden prepararse, empacarse, o venderse en la forma de una suspensión o solución acuosa o aceitosa inyectable estéril. Esta suspensión o solución puede formularse de acuerdo con la técnica conocida, y puede comprender, adicionalmente al ingrediente activo, ingredientes adicionales tales como agentes dispersantes, agentes humectantes, o agentes de suspensión descritos en la presente. Dichas formulaciones inyectables estériles pueden prepararse usando un diluyente o disolvente parenteralmente aceptable no tóxico, tal como agua o 1 ,3-butano diol, por ejemplo. Otros eluyentes y disolventes aceptables incluyen, pero no se limitan a, la solución de Ringer, solución de cloruro de sodio isotónica, y aceites fijos tales como mono o díglicéridos sintéticos. Las composiciones farmacéuticas que son útiles en los méíodos de la invención pueden administrarse, prepararse, empacarse, y/o venderse en formulaciones adecuadas para administración oral, rectal, vaginal, parenteral, tópica, pulmonar, intranasal, bucal, oftálmica, u otra ruta. Otras formulaciones contempladas incluyen nanopartículas proyectadas, preparaciones liposomales, eritrocitos resellados que contienen el ingrediente activo, y formulaciones basadas inmunológicamente. Las composiciones de la invención pueden administrarse a través de numerosas rutas, que incluyen, pero no se limitan a, rutas de adminislración oral, rectal, vaginal, parenteral, tópica, pulmonar, iníranasal, bucal, oftálmica. La ruta(s) de adminislración será fácilmente aparente para el experto en la técnica y dependerá de cualquier número de factores incluyendo el tipo y severidad de la enfermedad que se traía, el tipo y edad del paciente veterinario o humano que se trata, y similares. Las composiciones farmacéuticas que son útiles en los métodos de la invención pueden administrarse sistemáticamente en formulaciones sólidas orales, oftálmica, supositorios, aerosoles, tópicas, u otras formulaciones similares. Adicionalmente al compuesto tal como sulfato de heparan, o un equivalente biológico del mismo, dichas composiciones farmacéuticas pueden contener portadores farmacéuticamente aceptables y oíros ingredienles conocidos para mejorar y faciliíar la administración de fármacos. Otras formulaciones posibles, tales como nanopartículas, liposomas, eritrocitos resellados, y sistemas basados inmunológícamente pueden también usarse para administrar compuestos de acuerdo con los métodos de la invención. Los compuestos que se identifican usando cualquiera de los métodos descritos en la presente pueden formularse y administrarse a un mamífero para el Iratamiento de envejecimiento de la piel, arrugamiento de la piel, y diversas enfermedades, trastornos, o condiciones relacionadas con la piel descritas en la presente. La invención abarca la preparación y uso de composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto útil para el tratamiento de diversas enfermedades, trastornos, o condiciones relacionadas con la piel descritas en la presente, incluyendo envejecimiento de la piel, fotoenvejecimienío, y arrugamiento de la piel. La invención también comprende enfermedades y trastornos asociados con 3DG diferentes de aquellos de la piel, incluyendo, pero no limitados, enfermedades y trastornos de encías. Dicha composición farmacéutica puede consistir el ingrediente activo sólo, o en una forma adecuada para administración a un sujeto, o la composición farmacéutica puede comprender por lo menos un ingrediente activo y uno o más portadores farmacéulicamenle aceptables, uno o más ingredientes adicionales, o alguna combinación de éstos. Los ingredientes activos pueden eslar presentes en la composición farmacéutica en la forma de un éster o sal fisiológicamente aceptable, tal como en combinación con un catión o anión fisiológicamente aceptable, como es bien conocido en la técnica. Un obstáculo para la administración tópica de los compuestos farmacéuticos es la capa del estrato córneo de la epidermis. El estrato córneo es una capa altamente resistente comprendida de proteínas, colesterol, esfingolípidos, así dos grasos libres y diversos otros lípidos, e ¡ncluye células (flujo) de un compuesto través del estrato córneo es la cantidad de la sustancia activa que puede cargarse o aplicarse sobre la superficie de la piel. A mayor cantidad de sustancia activa que se aplica por unidad de área de la piel, mayor el gradiente de concentración entre la superficie de la piel y las capas inferiores de la piel, y a su vez a mayor fuerza de difusión de la sustancia activa a través de la piel. Por lo tanto, una formulación que contiene una gran concentración de la sustancia activa es más probable que resulten la penetración del la sustancia activa a través de la piel, y más de ella, a una velocidad más consistente, que una formulación que tiene una concentración menor, todos los demás aspectos siendo iguales. Las formulaciones de las composiciones farmacéuticas descritas en la presente pueden prepararse por cualquier método conocido o desarrollado en lo siguiente en la íécnica de la farmacología. En general, dichos mélodos de preparación ¡ncluyen la etapa de llevar el ingrediente activo en asociación con un portador o uno o más de otros ingredientes accesorios, y entonces, si es necesario o deseable, darle forma o empacar el producto en una unidad de dosis simple o múltiple deseada. Aunque las descripciones de las composiciones farmacéuticas proporcionadas en la presente se dirigen principalmente a composiciones farmacéuticas que son adecuadas para la administración ética a humanos, deberá entenderse por los expertos en la técnica que dichas composiciones son generalmente adecuadas para la administración a animales de todo tipo.

La modificación de las composiciones farmacéuticas adecuadas para la administración a humanos para hacer las composiciones adecuadas para administración a diversos animales es bien entendida, y el farmacólogo veterinario ordinariamente experto puede diseñar y desarrollar dichas modificaciones con experimentación meramente ordinaria, si se requiere. Los sujetos a los cuales administración de las composiciones farmacéuticas de la invención se contempla incluyen, pero no se limitan a, humanos y oíros primates, mamíferos incluyendo mamíferos relevantes comercialmente tales como ganado, cerdos, caballos, ovejas, gatos, perros. Las composiciones farmacéuticas que son útiles en los métodos de la invención pueden prepararse, empacarse, o venderse en formulaciones adecuadas para administración oral, rectal, vaginal, parenteral, tópica, pulmonar, intranasal, bucal, oftálmica, intraíecal u otra ruta de administración. Otras formulaciones contempladas incluyen nanopartículas proyectadas, preparaciones liposomales, eritrocitos resellados que contienen el ingrediente activo, y formulaciones basadas inmunológicamente. Una composición farmacéutica de la invención puede prepararse, empacarse, o venderse a granel, como una dosis unitaria simple, o como una pluralidad de dosis unitarias simples. Como se usa la presente, una " dosis unitaria" es una cantidad discreta de la composición farmacéutica que comprende una cantidad predeterminada del ingrediente activo. La cantidad del ingrediente activo generalmente es igual a la dosificación del ingrediente activo que puede administrarse a un sujeto o una fracción conveniente de dicha dosificación tal como, por ejemplo, una mitad o un tercio de dicha dosificación. Las cantidades relativas del ingrediente activo, el portador farmacéuticamente aceptable, y cualquier ingrediente adicional en una composición farmacéutica de la invención variará, dependiendo de la identidad, tamaño, y condición del sujeto tratado y dependiendo además de la ruta por la cual la composición se va a administrar. A manera de ejemplo, la composición puede comprender entre 0.1% y 100% (p/p) de ingrediente activo. Adicionalmente al ¡ngredienle acíivo, una composición farmacéutica de la invención puede comprender además uno o más agentes farmacéuticamente activos. Agentes adicionales particularmente contemplados incluyen anti-eméticos y exclusores tales como exclusores de cianida y cianato. Las formulaciones de liberación controlada o sostenida de una composición farmacéutica de la invención pueden hacerse usando tecnología convencional. Las formulaciones adecuadas para la administración tópica incluyen, pero no se limitan, preparaciones líquidas o semilíquidas tales como linimentos, lociones, emulsiones aceite en agua o agua en aceite íales como cremas, ungüentos o pastas, y solucione sus suspensiones. Las formulaciones administrarles tópicamenle pueden, por ejemplo, comprender de aproximadamente 1% a aproximadamente 10% (p/p) de ingrediente activo, aunque la concentración del ingrediente activo puede ser tan alta como el límite de solubilidad del ingredienie activo en el disolvente. Las formulaciones para administración tópica pueden comprender además uno o más de los ingredientes adicionales descritos en la presente. Pueden usarse mejoradores de permeación. Estos materiales incrementan la velocidad y penetración de fármacos a través de la piel. Los mejoradores típicos en la técnica incluyen etanol, monolaurato de glicerol, PGML (polietilen glicol monolaurato), dimetil sulfóxido, y similares. Otros mejoradores incluyen ácido oléico, alcohol oléico, etoxidiglicol, laurocapram, ácidos alcanocarboxílicos, dimeíilsulfóxido, lípidos polares, o N-metil-2-pirrolidona. Un vehículo aceptable para suministro tópico de algunas de las composiciones de la invención puede contener liposomas. La composición de los liposomas y sus usos son conocidos en la técnica (por ejemplo, ver Constanza, Patente de E.U.A. No. 6,323,219). La fuente de compuesto activo a ser formulado dependerá generalmente de la forma particular del compuesto. Moléculas orgánicas pequeñas y peptidilos u oligofragmentos pueden sintetizarse químicamente y proporcionarse en una forma pura adecuada para uso farmacéutico/cosmético. Los productos de estratos naturales pueden purificarse de acuerdo con las técnicas conocidas en la técnica. Las fuentes recombinantes de compuestos lambién están disponibles para aquellos de conocimientos ordinarios en la técnica.

En modalidades alternativas, la composición farmacéulica o cosmética tópicamente activa puede opcionalmente combinarse con otros ingredientes tales como humectantes, adyuvantes cosméticos, antioxidantes, agentes quelantes, agentes blanqueadores, inhibidores de tirocinasa y otros agentes despigmentadores conocidos, agentes tensioactivos, agentes espumantes, acondicionadores, humectantes, agentes hidratanles, agentes emulsificantes, fragancias, viscosificadores, agentes amortiguadores, conservadores, protectores solares y similares. En otra modalidad, un mejorador de permeación o penetración está incluido en la composición y es efectivo en incrementar la penetración percutánea del ingrediente activo dentro y a través del estrato córneo con respecto a una composición que carece de mejorador de permeación. Diversos mejoradores de permeación, incluyendo ácido oléico, alcohol oléico, etoxidiglicol, laurocapram, ácidos alcanocarboxílicos, dimetiisulfóxido, lípidos polares, o N-2-metil-pirrolidona, se conocen por aquellos expertos en la técnica. En otro aspecto, la composición puede comprender además un agente hidrotrópico, que funciona para incrementar el trastorno en la estructura del estrato córneo, y entonces permite un transporte incrementado a través del estrato córneo. Diversos agentes hidritrópicos tales como alcohol isopropílico, propilen glicol, o sulfonato de xileno sódico, se conocen por aquellos expertos en la técnica. Las composiciones de esta invención pueden también contener cantidades acíivas de retinoides (es decir, compueslos que se unen a cualesquiera miembros de la familia de receptores retinoideos ad), incluyendo, por ejemplo, tretionína, retinol, esteres de tretionina y/o retinol y similares. La composición farmacéutica o cosmética activa tópicamente puede aplicarse en una cantidad efectiva para afectar los cambios deseados. Como se usa la presente "cantidad efectiva" deberá significar una cantidad suficiente para cubrir la región de la superficie de la piel en donde se desea el cambio. Un compuesto activo deberá estar preseníe en la cantidad de aproximadamenle 0.0001 % a aproximadamente 15% en peso del volumen de la composición. Más preferiblemente, deberá estar presente en una cantidad de aproximadamente 0.0005% a aproximadamente 5% de la composición; más preferiblemente, deberá estar presente en una cantidad de aproximadamente 0.001% a aproximadamente 1 % de la composición. Dichos compuestos pueden derivarse sintéticamente o naturalmente. Los derivados líquidos y estratos naturales hechos directamenle de fuentes biológicas pueden emplearse en las composiciones de la invención en una concentración (p/v) de aproximadamente 1 a aproximadamente 90%. Las fracciones estratos naturales e inhibidores de proteasa pueden tener una escala preferida diferente, de aproximadamente 0.01% a aproximadamente 20% y, más preferiblemente, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 10% de la composición. Por supuesto, las mezclas de los agentes activos de esta invención pueden combinarse y usarse conjuntamente en la misma formulación, o en aplicaciones seriales de diferentes formulaciones.

La composición de la invención puede comprender un conservador de aproximadamente 0.005% a 2.0% del peso total de la composición. El conservador se usa para evitar la putrefacción en el caso de un gel acuoso debido al uso repetitivo del paciente cuando se expone a contaminantes en el medio ambiente de, por ejemplo, exposición al aire o a la piel del paciento, incluyendo el contacto con los dedos usados para la aplicación de una composición de la invención tal como un gel o crema terapéutico. Ejemplos de conservadores útiles de acuerdo con la invención incluyen pero no se limitan a aquellos seleccionados del grupo que consiste de alcohol bencílico, ácido sórbico, parabenos, imidurea y combinaciones de los mismos. Un conservador particularmente preferido es una combinación de aproximadamente 0.5% a 2.0% de alcohol bencílico y 0.05% a 0.5% de ácido sórbico. La composición preferiblemente incluye un antioxidaníe y un agente quelante que inhibe la degradación del compuesto para uso en la invención en la formulación de gel acuoso. Antioxidanles preferidos para algunos compuestos son BHT (por sus siglas en inglés), BHA (por sus siglas en inglés), alfaíocoferol y ácido ascórbico en la escala preferida de aproximadameníe 0.01% a 0.3% y más preferiblemente BHT en la escala de 0.03% a 0.1% en peso del peso total de la composición. Preferiblemente, el agente quelante está presente en una cantidad de aproximadamente 0.01% a 0.5% en peso del peso total de la composición. Agentes quelaníes particularmenle preferidos incluyen sales de edetato (por ejemplo edetalo disódico) y ácido cítrico en la escala de peso de aproximadamente 0.01 % a 0.2% y más preferiblemenle en la escala de 0.02% a 0.10% en peso del peso total de la composición. El agente quelante es útil para quelar iones metálicos en la composición que pueden disminuir la vida de almacenamiento de la formulación. Mientras que el BHT y el edetato disódico son el antioxidante y agente quelante particularmente preferidos respectivamenle para algunos compuesíos, oíros antioxidantes y agentes quelanles adecuados pueden sustituirse por los mismos como se puede saber por aquellos expertos en la técnica. Las preparaciones de liberación controlada pueden también usarse y los métodos para el uso de dichas preparaciones son conocidos para aquellos expertos en la técnica. En algunos casos, las formas de dosificación a ser usadas pueden proporcionarse como liberación lenta o controlada de uno o más ingredientes activos en el mismo que usan, por ejemplo, hidroxilpropilmetil celulosa, oirás matrices poliméricas, geles, membranas permeables, sistemas ópticos, recubrimientos de etapas múltiples, micropartículas, liposomas, o microesferas o una combinación de los mismos para proporcionar el perfil de liberación deseado en proporciones variables. Las formulaciones adecuadas de liberación conlrolada conocidas por aquellos expertos en la técnica, ¡ncluyen aquellas descritas en la presente, pueden seleccionarse fácilmente para uso con las composiciones farmacéuticas de la invención. Entonces, las formas de dosificación unitaria simple adecuadas para administración oral, tales como tabletas, cápsulas, cápsulas de gel, y capletas, eslán adapladas para liberación controlada están abarcadas por la presenie invención. Los producios farmacéuticos de liberación controlada tienen un objetivo común de mejorar la terapia del fármaco sobre aquella alcanzada por sus contrapartes no controladas. Idealmente, el uso de una preparación diseñada óptimamente para liberación controlada en tralamientos médicos se caracteriza por un mínimo de sustancia de fármaco que se emplea para curar o controlar la condición en una cantidad mínima de tiempo. Las ventajas de las formulaciones de liberación controlada incluyen la actividad extendida del fármaco, la frecuencia de dosificación reducida, y conformidad incrementada del paciente. Adicionalmente, las formulaciones de liberación controlada pueden usarse para afectar el tiempo y activación de la acción otras características, tales como nivel del fármaco en la sangre, y entonces pueden afectar la ocurrencia de efectos secundarios. La mayor parte de las formulaciones de liberación controlada se diseñan para liberar inicialmente una caníidad de fármaco que produce rápidameníe el efecto íerapéuíico deseado, y gradualmeníe y continuamente libera otras cantidades de fármaco para mantener esle nivel de efeclo terapéutico sobre un período de tiempo exíendido. Para mantener este nivel consíante de fármaco en el cuerpo, el fármaco debe liberarse de la forma de dosificación a una velocidad que reemplazará la cantidad de fármaco que se metaboliza y excreta del cuerpo.

La liberación controlada de un ingrediente aclivo puede estimularse por diversos inductores, por ejemplo pH, temperatura, enzimas, agua, u otras condiciones fisiológicas o compuestos. El término "componente de liberación controlada" en el contexto de la presente invención se define la presente como un compuesto o compuestos, incluyendo, pero no limitados, polímeros, matrices poliméricas, geles, membranas permeables, liposomas, o microesferas o una combinación de los mismos que facilitan la liberación controlada del ingrediente activo. Las suspensiones líquidas pueden prepararse usando métodos convencionales para alcanzar la suspensión del ingrediente aclivo en un vehículo acuoso o aceitoso. Los vehículos acuoso se incluyen, por ejemplo, agua, y salina isotónica. Los vehículos aceitosos incluyen, por ejemplo, aceite de almendras, esteres aceitosos, alcohol etílico, aceites vegetales tales como aceite de cacahuate, de oliva, sésamo, o aceite de coco, aceites vegetales fraccionados, y aceites minerales tales como parafina líquida. Las suspensiones líquidas pueden comprender además uno o más ingredientes adicionales que incluyen, pero no se limitan, ageníes de suspensión, agentes de dispersión o hidratantes, agentes emulsificantes, emolientes, conservadores, amortiguadores, sales, saborizanle, agentes colorantes, y agentes edulcorantes. Las suspensiones aceitosas pueden comprender además un agente espesante. Los agentes de suspensión conocidos incluyen, pero no se limitan a, jarabe de sorbitol, grasas comestibles hidrogenadas, alginato de sodio, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto, goma acacia, y derivados de celulosa tales como carboximetilcelulosa, meíil celulosa, hidroxilpropilmelilcelulosa. Los ageníes dispersantes o humecíanles incluyen, pero no se limiían a, fosfáíidos que existen naluralmente tales como lecitina, productos de condensación de un óxido de alquileno con un ácido graso, con un alcohol alifático de cadena larga, con un éster parcial derivado de un ácido graso y anhídrido de hexitol (por ejemplo, estearato de polioxietileno, heptadecaetilenoxiceíanol, polioxietileno sorbitol monooleato, y polioxietileno sorbitán monooleaío, respectivamente). Los agentes emulsíficantes conocidos incluyen, pero no se limitan a, lecitina, y acacia. Los conservadores conocidos incluyen, pero no se limitan, metilo, eíilo, o n-propil-para hidroxibenzoalos, ácido ascórbíco, y ácido sórbico. Los agentes edulcorantes conocidos incluyen, por ejemplo, glicerol, propilen glicol, sorbitol, sucrosa y sacarina. Agentes espesantes conocidos para suspensiones aceitosas incluyen, por ejemplo, cera de abejas, parafina dura, y alcohol cetílico. Las soluciones liquidas del ingrediente acíivo en disolventes acuosos o aceitosos pueden prepararse sustancialmente de la misma manera que las suspensiones líquidas, la principal diferencia es que el ingrediente acíivo se disuelve, en lugar de suspenderse en el disolvente. Las soluciones líquidas de la composición farmacéuíica de la invención pueden comprender cada uno de los componeníes descritos con respecto a las suspensiones líquidas, debe entenderse que los agentes de suspensión no necesariamente ayudarán a la disolución del ingredienie acíivo en el disolvente. Los disolventes acuosos incluyen, por ejemplo, agua, y salina isolónica. Los disolventes aceitosos incluyen, por ejemplo, aceite de almendras, esteres aceitosos, alcohol etílico, aceites vegetales tales como cacahuate, oliva, sésamo, o aceite de coco, aceites vegetales fraccionados, y aceites minerales íales como parafina líquida. Las formulaciones en polvo y granulares de una preparación farmacéutica de la invención pueden prepararse usando métodos conocidos. Dichas formulaciones pueden administrarse directamente a un sujeto, usando, por ejemplo, para formar tabletas, para llenar cápsulas, o para preparar suspensión o solución acuosa o aceitosa por adición de un vehículo acuoso o aceitoso a las mismas. Cada una de estas formulaciones puede comprender además uno o más agentes dispersantes o hidratantes, un agente de suspensión, y un conservador. Excipientes adicionales, tales como llenadores y edulcoraníes, saborizantes, o agentes colorantes, pueden también incluirse en estas formulaciones. Una composición farmacéutica de la invención puede también prepararse, empacarse, o venderse en la forma de una emulsión de aceite en agua o emulsión de agua en aceite. La fase aceitosa puede ser un aceite vegetal íal como aceile de oliva o cacahuate, un aceite mineral tal como parafina líquida, o una combinación de éstos, dichas composiciones pueden comprender además uno o más agentes emulsificantes tales como las gomas que existen naturalmente tales como goma de acacia o goma de tragacanto, fosfátidos que existen naturalmente tales como soya o fosfátído de lecitina, esteres o esteres parciales derivados de combinaciones de ácidos grasos y anhídridodos de hexitol tales como sorbitán monooleato, y los productos de condensación de dichos esteres parciales con óxido de etileno tal como polioxíetilen sorbitán monooleato. Estas emulsiones pueden también contener ingredientes adicionales incluyendo, por ejemplo, edulcorantes o agentes saborizantes. Como se usa en la presente, un líquido "aceitoso" es uno que comprende una molécula de líquido que contiene carbono y que exhibe un carácter menos polar que el agua. Una formulación de una composición farmacéutica de la invención adecuada para administración oral puede prepararse, empacarse, o venderse en la forma de una unidad de dosis sólida discreta incluyendo, pero no limitada, una tableta, una cápsula suave o dura, una cápsula lisa, una pastilla, o una gragea, cada una conteniendo una cantidad predeterminada de un ingrediente activo. Otras formulaciones adecuadas para administración oral ¡ncluyen, pero no se limitan a, una formulación en polvo o granular, una suspensión acuosa o aceitosa, una solución acuosa o aceitosa, una pasta, un gel, una pasta dental, un enjuague bucal, un recubrimiento, un enjuague oral, o una emulsión. Los términos enjuague oral y enjuague bucal se usan intercambiablemente en la presente. Una composición farmacéulica de la invención puede prepararse, empacarse o venderse en una formulación adecuada para administración oral o bucal. Dicha formulación puede comprender, pero no se limita, un gel, un líquido, una suspensión, una pasta, una pasta dental, un enjuague bucal o un enjuague oral, y un recubrimiento. Por ejemplo, un enjuague oral de la invención puede comprender un compuesto de la invención a aproximadamente 1.4% de gluconato de clorhexidina (0.12%), elanol (11.2%) sacarina de sodio (0.15%), Azul FD&C No. 1 (0.001 %), aceite de hierbabuena (0.5%), glicerina (10.0%), Tween 60 (0.3%), y agua a 100%. En otra modalidad, una pasta dental de la invención puede comprender un compuesto de la invención a aproximadamente 5.5%, sorbitol, 70% en agua (25.0%), sacarina de sodio (0.15%), laurilsulfato de sodio (1.75%), carbopol 934, 6% de dispersión en (15%), aceite de menta (1.0%), hidróxido de sodio, 50% en agua (0.76%), fosfato dibásico de calcio dihidrato (45%, y agua al 100%. Los ejemplos de las formulaciones descritas en la presenie no son exhaustivos y se entenderá que la invención incluye modificaciones adicionales de estas y otras formulaciones no descritas en la presente, pero que son conocidas por aquellos expertos en la técnica. Una tableta que comprende el ingrediente activo puede, por ejemplo, fabricarse por comprimir o moldear el ingrediente activo, opcíonalmente con uno o más ingredientes adicionales. Las tabletas comprimidas pueden prepararse por compresión, en un dispositivo adecuado, el ingrediente activo en una forma fluida libre tal como una preparación en polvo o granular, opcionalmente mezclada con uno o más de un aglutinante, un lubricante, un excipiente, un agente tensioactivo, y un agente dispersante. Las tabletas moldeadas pueden fabricarse por moldeo, en un dispositivo adecuado, una mezcla de un ingrediente activo, un poríador farmacéuticamente aceptable, y por lo menos suficiente líquido para humectar la mezcla. Los excipientes farmacéuticamente aceptables usados en la fabricación de tabletas incluyen, pero no se limitan a, diluyentes inertes, agentes granuladores y desintegrantes, agentes aglutinantes, y agentes lubricantes. Agentes dispersantes conocidos incluyen, pero no se limitan a, almidón de papa y almidón glicolato sódico. Los agentes tensioacíivos conocidos incluyen, pero no se limilan a, lauril sulfato de sodio. Los diluyentes conocidos incluyen, pero no se limitan a, carbonato de calcio, carbonato de sodio, lactosa, celulosa microcristalina, fosfaío de calcio, fosfato ácido de calcio, y fosfato de sodio. Los agentes granuladores y desintegradores conocidos incluyen, pero no se limitan a, almidón de maíz y ácido algínico. Los agentes aglutinantes conocidos incluyen, pero no se limilan, gelatina, acacia, almidón de maíz pre-gelatinizado, polivinilpirrolidona, hidroxilpropilmetil celulosa. Los agentes lubricantes conocidos incluyen, pero no se limitan a, estearato de magnesio, ácido esteárico, sílice, y talco. Las tabletas pueden estar no recubíertas y pueden recubrirse usando métodos conocidos para alcanzar la desintegración retardada en el tracto gastrointestinal de un sujeto, proporcionando de esta manera una liberación sostenida y absorción del ingrediente activo. A manera de ejemplo, un maíerial lal como gliceril monoestearato o gliceril diestearalo puede usarse para recubrir íableías. Además a manera de ejemplo, las íableías pueden recubrirse usando métodos descriíos en las Patentes de E.U.A. números 4,256,108; 4,160,452; y 4,265,874 para formar tabletas de liberación osmóíicamenle conlroladas. Las tabletas pueden comprender además un agente edulcorante, un agente saborizante, un agente colorante, un conservador, o alguna combinación de estos para proporcionar una preparación farmacéuticamente elegante y sabrosa. Las cápsulas duras que comprenden el ingrediente activo pueden fabricarse usando una composición fisiológicamente degradable, tal como una gelatina. Dichas cápsulas duras comprenden el ingredienie aclivo, y pueden comprender además ingredientes adicionales que incluyen, por ejemplo, un diluyente sólido inerte tal como carbonato de calcio, fosfato de calcio, o caolín. Las cápsulas de gelatina suave que comprenden el ingrediente activo pueden fabricarse usando una composición fisiológicamente degradable, tal como gelatina. Dichas cápsulas suaves comprenden el ingrediente activo, que puede mezclarse con agua o un medio de aceite tal como aceite de cacahuate, parafina líquida, o aceite de oliva. Las formulaciones líquidas de una composición farmacéutica de la invención que son adecuadas para administración oral pueden prepararse, empacarse, y venderse ya sea en forma líquida o en la forma de un producto seco proyectado para reconstrucción con agua otro vehículo adecuado antes de su uso. Una composición farmacéutica de la invención puede prepararse, empacarse, y venderse en una formulación adecuada para administración rectal. Dicha composición puede estar en la forma de, por ejemplo, un supositorio, una preparación de enema de retención, y una solución para irrigación rectal o colónica. Las formulaciones en supositorio pueden fabricarse al combinar el ingrediente activo con un excipiente farmacéuticamente aceptable no irritante que es sólido a temperaíura ambiente ordinaria (es decir, aproximadameníe 20 °C) y que es líquido a la lemperaíura recial del sujeío (es decir, aproximadamenle 37 °C en un humano saludable). Los excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados incluyen, pero no se limitan a, mantequilla de cacao, polietilen glicoles, y diversos glicéridos. Las formulaciones en supositorio pueden comprender además diversos ingredientes adicionales que ¡ncluyen, pero no se limitan a, antioxidantes, y conservadores. Las preparaciones o soluciones de enema de retención para irrigación rectal o colónica pueden fabricarse al combinar el ingrediente activo con un portador líquido farmacéuticamente aceptable. Como es bien conocido en la técnica, las preparaciones de enema pueden administrarse usando, y pueden empacarse con, un dispositivo de suministro adaptado a la anatomía rectal del sujeto. Las preparaciones de enema pueden comprender además diversos ingredieníes adicionales que incluyen, pero no se limílan a, antioxidantes, y conservadores. Una composición farmacéutica de la invención puede prepararse, empacarse o venderse en una formulación adecuada para administración vaginal. Dicha composición puede estar en la forma de, por ejemplo, un supositorio, un material marginalmente insertable impregnado o recubierío lal como un tampón, una preparación de ducha, un gel o crema o una solución para irrigación vaginal. Los métodos para impregnar o recubrir material con una composición química se conocen en la técnica, e incluyen, pero no se limitan a métodos para depositar o aglutinar una composición química sobre una superficie, métodos para incorporar una composición química dentro de la estructura de un material durante la síntesis del material (es decir, tal como con un material fisiológicamente degradable), y métodos para absorber una solución o suspensión acuosa o aceitosa en un material absorbente, con o sin secado subsiguiente. Las preparaciones o soluciones de ducha para irrigación vaginal pueden fabricarse al combinar el ingrediente activo con un portador líquido farmacéuticamente acepíable. Como es el conocido en la técnica, las preparaciones de ducha pueden administrarse usando, y pueden empacarse con, un dispositivo adaptado a la anatomía vaginal del sujeto. Las preparaciones de ducha pueden comprender además diversos ingredientes adicionales que incluyen, pero no se limitan, antioxidantes, antibióticos, agentes antifúngicos, y conservadores. Como se usa la presente, "administración parenteral" de una composición farmacéutica incluye cualquier ruta de administración caracterizada por un traspaso físico de un tejido de un sujeto y administración de la composición farmacéutica a través del traspaso en el tejido. La administración parenteral entonces incluye, pero no se límila, la administración de una composición farmacéulica por inyección de la composición, por la aplicación de la composición a íravés de una incisión quirúrgica, por aplicación de la composición a íravés de una herida no quirúrgica de penelración de tejido, y similares. En particular, la administración parenteral se contempla que ¡ncluye, pero no se limita, inyección subcutánea, intra peritoneal, intramuscular, ¡ntraesternal, y técnicas de infusión de diálisis de riñon. Las formulaciones de una composición farmacéutica adecuada para administración parenteral comprenden el ingredienie acíivo combinado con un portador farmacéuticamente aceptable, tal como agua estéril o salina isoíónica esléril. Dichas formulaciones pueden prepararse, empacarse, o venderse en una forma adecuada para adminislración de bolo o para administración continua. Las formulaciones inyectables puede prepararse, empacarse, o venderse en una forma de dosificación unitaria, tal como en ampolletas o en recipientes con dosis múltiples que contienen un conservador. Las formulaciones para administración parenteral incluyen, pero no se limilan a, suspensiones, soluciones, emulsiones en vehículos aceitosos o acuosos, pastas, y formulaciones de liberación sostenida implantables o biodegradables. Dichas formulaciones pueden comprender además uno o más ingredientes adicionales que incluyen, pero no se limitan a, agentes de suspensión, estabilizantes, o dispersantes. En una modalidad de una formulación para administración parenteral, el ingrediente activo se proporciona en seco (es decir, polvo o granular) de la reconstitución con un vehículo adecuado (por ejemplo, agua libre de pirógenos estéril) antes de la administración parenteral de la composición reconstituida. Las composiciones farmacéuticas pueden prepararse, empacarse, o venderse en la forma de una suspensión o solución acuosa o aceitosa inyectable estéril. Esta suspensión o solución puede formularse de acuerdo con la técnica conocida, y puede comprender, adicionalmeníe al ingrediente acíivo, ingredientes adicionales íales como los agentes dispersantes, ageníes hidralantes, o agentes de suspensión descriíos en la presente. Dichas formulaciones inyeclables estériles pueden prepararse usando un diluyente o disolvente parenteralmente aceptable no toxico, lal como agua o 1 ,3-buíano diol, por ejemplo. Oíros diluyentes y disolventes aceptables incluyen, pero no se limitan a, la solución de Ringe, solución de cloruro de sodio isotóníca, y aceites fijos tales, mono o diglicéridos sintéticos. Otras formulaciones administrarles parenteralmente que son útiles incluyen aquellas que comprenden el ingrediente activo en forma microcrisíalina, en una preparación liposomales, o como un componente de un sisíema polimérico biodegradable. Las composiciones para liberación sostenida o implaníación pueden comprender materiales hidrofóbicos o poliméricos farmacéuíicameníe acepíables íales como una emulsión, una resina de intercambio iónico, un polímero ligeramente soluble, o una sal ligeramente soluble. Una composición farmacéutica de la invención puede prepararse, empacarse, o venderse en una formulación adecuada para administración bucal. Dichas formulaciones pueden, por ejemplo, estar en la forma de tabletas o grageas fabricadas usando métodos convencionales, y pueden, por ejemplo 0.1 a 20% (p/p) del ingrediente activo, el balance comprendiendo una composición que se disuelve o degrada oralmente y, opcionalmente, uno o más de los ingredientes adicionales descritos en la preseníe. Alternativamente, las formulaciones adecuadas para administración bucal pueden comprender un polvo o una solución o suspensión en aerosol o atomizada que comprende el ingrediente activo. Dichas formulaciones en polvo, en aerosol o en aerosol, cuando se dispersan, preferiblemeníe lienen un lamaño de partícula o tamaño de gota en la escala de aproximadamente 0.1 a 200 nanómetros y puede comprender además uno o más de los ingredientes adicionales descritos en la presente. Como se usa en la presente, "ingredientes adicionales" incluyen, pero no se limitan, uno o más de los siguientes: excipientes; agentes tensioactivos; ageníes dispersaníes; diluyentes inertes; agentes granuladores y desintegradores; agentes aglutinantes; agentes lubricantes; agentes edulcorantes; agentes saborizantes; agentes colorantes; conservadores; composiciones fisiológicamente degradables tales como gelatina; vehículos y disolventes acuosos; vehículos y disolventes aceitosos; agentes de suspensión; agentes dispersantes o hidratantes; agentes emulsificaníes, en molientes; amortiguadores; sales; agentes espesantes; llenadores; ageníes emulsificaníes; aníio?idaníes; antibióticos; agentes antifúngicos; agentes estabilizantes; y materiales hidrofóbicos o poliméricos farmacéuticamenle aceptables. Otros "ingredientes adicionales" que pueden incluirse en las composiciones farmacéuticas de la invención son conocidos en la técnica y se describen, por ejemplo, en Genaro, ed. (1985, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA), que se incorporan en la presente para referencia. Típicamente, las dosificaciones del compuesto de la invención que pueden administrarse a un animal, preferiblemente un humano, variarán dependiendo de cualquier número de factores, incluyendo pero no limitados, el tipo de animal y tipo de estado de enfermedad que se trata, la edad del animal y la ruta de administración. El compuesto puede administrarse a un animal tan frecuentemente como numerosas veces por día, o puede administrarse menos frecuentemente, tal como una vez por día, una vez a la semana, una vez cada dos semanas, una vez al mes, o aún menos frecuentemente, tal como una vez cada muchos meses o aún una vez al año o menos. La frecuencia de la dosis será fácilmente aparente para el experto en la técnica y dependerá de cualquier número de factores, tal como, pero no limilado, el tipo y severidad de la enfermedad que se írala, el lipo y edad del animal, etc. Será reconocido por un experto en la técnica que diversas modalidades de la invención como se describen antes se refieren a métodos para inhibir 3DG o tratar enfermedades o condiciones relacionadas con 3DG, incluyen otras enfermedades y condiciones no descritas en la presente.

Equipos Deberá considerarse que la presente invención incluye equipos para inhibir o estimular 3DG, tratar enfermedades y trastornos de la piel asociados con 3DG, equipos para la medición de 3DG y parámetros relacionados con 3DG, y equipos para el diagnóstico de enfermedades y trastornos asociados con 3DG. Deberán considerarse que la invención incluye equipos para azucares alfa-dicarbonilo diferentes de 3DG también. La invención incluye un equipo que comprende un inhibidor de 3DG o un compuesto identificado en la invención, un estándar, y un material instructivo que describe la administración del inhibidor o una composición que comprende el inhibidor o el compuesío a una célula o un animal. Esto debe considerarse que incluye oirás modalidades de equipos que son conocidos por aquellos expertos en la técnica, tal como un equipo que comprende un estándar y un disolvente adecuado (preferiblemente estéril) para disolver o suspender la composición de la invención antes de adminislrar el compuesto a una célula o un animal. Preferiblemente el animal es un mamífero. Más preferiblemente, el mamífero es un humano. La invención también incluye un equipo que comprende un estimulador de la degradación, destoxificación, o eliminación de 3DG, o aún dicho compuesto estimulador identificado en la invención, un estándar, y un material instructivo que describe la administración del estimulador o una composición que comprende el estimulador o compuesto a una célula o un animal. Deberá considerarse que eslo incluye otras modalidades de equipos que son conocidos por aquellos expertos en la técnica, tales como un equipo que comprende un estándar y un disolvente adecuado (preferiblemente estéril) para disolver o suspender la composición de la invención antes de adminisírar el compuesío a una célula o un animal. De acuerdo con la presente invención, como se describió antes o como se analiza en los Ejemplos siguientes, pueden emplearse íécnicas convencionales químicas, celulares, hisloquímicas, de biología molecular, microbiología y de ADN recombinaníe que son conocidas por aquellos expertos en la técnica. Dichas íécnicas explican compleíamente la literatura ver por ejemplo Sambrook et al., 1989 Molecular Cloning - a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press; Glover, (1985) DNA Cloning: a Practical Approach; Gail, (1984) Oligonucleotide Synlhesis; Harlow el al., 1988 Antibodies - a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press; Roe el al., 1996 DNA Isolation and Sequencing: Essential Techniques, John Wiley; y Ausubel et al., 1995 Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing. Sin mayor descripción, se considera que un experto en la técnica puede, usando la descripción anterior y los ejemplos ilustrativos siguientes, fabricar y utilizar los compuestos de la presente invención y practicar los métodos reclamados. Los siguientes ejemplos funcionales por lo tanto, puntualizan específicamente las modalidades preferidas de la presente invención, y no deberán considerarse como limitativos en ninguna manera del resto de la descripción.

EJEMPLOS La invención se describirá ahora con preferencia los siguientes Ejemplos. Estos Ejemplos se proporcionan con el propósito de ilustración únicamente y no deberá considerarse de ninguna manera que la invención está limitada a eslos Ejemplos, sino que deberá considerarse que abarcan cualquier variación que sea evidente como un resultado de las enseñanzas proporcionadas en la presente.

Métodos Suministro Transdérmico de Fármacos Hay numerosas ventajas al suministrar compuestos, incluyendo fármacos u otros agentes terapéuticos, en el cuerpo a través de la piel, un procedimiento denominado suministro transdérmico de fármacos. El suministro transdérmico de fármacos ofrece una alternativa atractiva a las inyecciones y medicaciones orales. Proporciona la capacidad para terapia múltiple por día con una simple aplicación con lo cual se mejora la conformidad del paciente. Dicho suministro puede extender la actividad de los fármacos que tienen tiempos de vida cortos a través del recipiente del fármaco presente en el sistema de suministro y sus características de liberación controlada. El suministro transdérmico de fármacos evita las dificullades en el tracío gastrointestinal durante la absorción causada por las enzimas o interacciones del fármaco con el alimento. No sólo eso, evita un primer paso es decir el paso inicial de una sustancia de fármaco a través de la circulación sistémica y portal. No obstante, las aplicaciones del suminislro íransdérmico de fármacos esíá limitada únicamente a pocos fármacos como resultado de la baja permeabilidad de la piel [Prausnitz, M. R. et al. Current status and future potential of trasdermal drug delivery. 2004. Nat. Rev. Drug Discov 3(2): p.115-24], El transporte transdérmico de solutos esíá conlrolado en gran medida por las bicapas de lípido del eslraío córneo. El transporte de solutos en las bicapas de lipído del estrato córneo, como en otros sistemas de bicapas de lípido, es altamente anisotrópico y dependiente del tamaño. Específicamente, las bicapas de lípido exhiben una heterogeneidad estructural fuerte que resullan en variaciones espaciales en la partición de soluto y coeficientes de difusión. Como resultado, se cree que las moléculas se difunden a través de la piel siguiendo una trayectoria tortuosa dentro de cualquiera de regiones de grupo de cola (para moléculas hidrofóbicas) o grupo de cabeza (para moléculas hidrofílicas), en el cual el transporte entre las bicapas puede ocurrir en las inlerfases bicapa-bicapa u otros sitios de desorganización estruclural [Marrink, S.J. y Berendsen, H.J. Permeation Process of Small Molecules across Lipid Membranes Studies by Molecular Dynamics Simulations. 1996. J. Phys. Chem. 100(41): p. 16729-1 6738]. Unos pocos fármacos penetrarán la piel efectivamente. La nicotina, eslrógeno, escopolamina, feníanilo, y nifroglicerina están entre los pocos fármacos que pueden suministrarse exitosamente transdérmicameníe de parches simplemente porque son relativamente pequeños y potentes en pequeñas dosis de 0.1 mg a 15 mg/día [Kanikkannan, N. et al, Slrucíure-acíivily relalionship of chemical penelration enhancers in transdermal drug delivery. 2000. Curr. Med Chem 7(6): p.593-608]. Muchos otros fármacos pueden suministrarse únicamente cuando un sistema de mejoramiento adicional se proporciona para "forzarlas" a que pasen a través de la piel. Entre muchos métodos de suministro transdérmico de fármaco eslá la eleclroporación, sonoforesis, iontoforesis, mejoradores de permeación (ciclodextrinas) y liposomas. Los compuestos esta invención pueden administrarse a través de uso tópico de cualquiera de estos métodos de suministro transdérmico.

Liposomas Los liposomas son bolsas llenas de líquido, microscópicas, cuyas paredes están hechas de capas de fosfolípidos idénticos a aquellos que hacen las membranas celulares. Son bien conocidos y sus estrucluras y propiedades se han ¡nvesfigado exíens ¡va mente. Esencialmeníe, son esírucluras de lípido/agua pequeñas uni o multi laminares con diámetros en la escala de mieras. Los liposomas pueden formarse de una variedad de fosfolípidos naturales, tales como colesterol, estearilamina, o fosfaíidilcolinas. Pueden formularse para incorporar una amplia escala de maleriales como una carga úlil ya sea en el agua o en los compartimentos lípidos.

Los liposomas son extremadamente versátiles y son variables debido a su composición. Pueden ser usados para el suministro de vacunas denzimas), nucleótidos, plásmidos, fármacos, o cosméticos al cuerpo. Los liposomas pueden usarse como portadores para fármacos lipofílicos como los derivados aníiíumor y aníiviral de AZT [Kamps, J.A, et at. Preparation and characterization of conjugates of (modified) human serum albumin and liposomes: drug carriers with an intrinsec ant-HIV activity. 1996. Biochem Biophys Acta 1278(2): p.183-90]. La insulina también puede ser suministrada a través de liposomas [Muramatsu, K. et al. The relationship between the rigidíty of the liposomal membrane and the absorption of insulin after nasal administration of liposomes modified with an enhancer containing insulin in rabbits. 1999. Drug Dev Ind. Pharm 25(10): p. 1099-105]. Para usos médicos como portadores de fármacos, los liposomas también pueden inyectarse intravenosamente y cuando son modificados con lípídos, sus superficies se vuelven más hidrofílicas y entonces el tiempo de circulación en la corriente sanguínea puede incrementarse significativamente. Dichos liposomas denominados "robados" se usan especialmente como portadores para fármacos aníicáncer hidrofílicos (solubles en agua) como doxorubicina. El toxantron y oíros son especialmente efectivos en el tratamiento de enfermedades que afectan los fagocitos del sistema inmune porque lienden a acumularse en los fagocitos, que los reconocen como invasores foráneos [Renísch, K.M. eí al. Determination of miíoxantrone in mouse whole blood and different tissues by high- performance liquid chromatography. 1996. J.

Chromaíogr B Biomed Appl 679(1-2): p. 185-92]. También se han usado experimentalmente para aportar genes normales deniro de una célula para reemplazar genes defecluosos causantes de enfermedad [Guo, W. y Lee, R.J. Efficient gene delivery using anionic liposome-complexed poliplexes (LPDII).2000. Biosci Rep 20(5): p. 419-32]. Los liposomas se han usado algunas veces íambién en cosméíicos debido a sus cualidades humeclantes. Se ha encontrado que los fosfolípidos combinados con agua inmediatamente forman una esfera porque un extremo de cada molécula es soluble en agua, mientras que el extremo opuesto es insoluble en agua.

Sonoforesis La sonoforesis o fonoforesis se ha usado ampliamente en medicina deportiva desde los años sesentas. Esludios conlrolados en humanos in vivo han demostrado la ausencia o efectos leves de la técnica con los parámetros comúnmente usados (frecuencia 1-3 MHz, intensidad 1-2 W/cm (2), duración 5-10 mins, modo continuo o en pulsos). No obsíante, se ha demostrado en 1995 que la administración de macromoléculas con actividad fisiológica conservada fue factible en animales in vivo usando ultrasonidos de baja frecuencia. Esto llevó a una nueva investigación en este méíodo de administración transdérmica [Machet, L. y Boucaud, A. Phonophoresis: efficiency, mechanisms and skin tolerance. 2002. Int. Pharm 243 (1-2):p1-15].

En esíe mélodo, una corta aplicación de ultrasonido se usa para permeabilizar la piel por un periodo de tiempo prolongado. La mejora inducida por ultrasonido es particularmente significativa a bajas frecuencias (f<100 kHz). Durante este período, la piel permeabilizada ultrasónicamente puede usarse para suministro de fármaco. Adicionalmente, una muestra de fluido intersticial o sus componentes puede extraerse a través de la piel permeabilizada para aplicaciones de diagnóstico. Estudios detallados en el suministro de fármacos pueden desarrollarse usando insulina y manitol como fármacos modelo los estudios en los diagnósticos se desarrollaron usando glucosa como un analito modelo [Mitragotri, S. y Kost, J. Low-frequency sonophoresis: a noninvasive method of drug delivery and siagnostics. 2000. Biotechnol Prog 16(3): p. 488-92]. Los estudios in vitro, in vivo así como clínicos han demostrado el efecto exitoso del ultrasonido de baja frecuencia en el suministro transdérmico de fármacos y extracción de glucosa. El entendimiento mecanísííco ganado a través de un número de investigaciones también se ha revisado [Mitragoíri, S. y Kost, J. Low-frequency sonophoresis: a review. 2004. Drug Deliv Rev 56(5): p589-601]. En la Escuela de Farmacia, Facultad de Ciencias, Universidad de Genova, se realizó un estudio para derramar luz en el mecanismo(s) por los cuales el ultrasonido de baja frecuencia (20 kHz) mejora la permeabilidad de la piel. En particular, se examinaron los efectos físicos en la barrera y en la Irayectoria de transporte. La cantidad de lípidos removida de los dominios ¡ntracelulares del estrato córneo enseguida de la sonoforesis fue determinado por espectroscopia infrarroja. El trasporte de las sondas fluorescentes rojo nilo y calceina, bajo la influencia del ultrasonido, se evaluó por microscopía confocal de exploración por láser. Los resultados se compararon con los datos de control pasivos apropiados y con los datos obtenidos experimentos en los cuales la piel se expuso simplemente a los efectos íérmicos inducidos por íraíamienlo de ultrasonido una fracción significativa (apro?imadameníe 30%) de los lípidos iníracelulares del estrato córneo, que son principalmente responsables de las funciones de barrera de la piel, se removieron durante la aplicación de sonoforesis de baja frecuencia. Aunque las imágenes confocales de los experimentos con rojo nilo no fueron particularmente informativas, el ultrasonido claramente significativamente (de nuevo, con relación a los controles correspondientes) facilitó el transporte de la calceina hidrofílica a través de regiones permeabilizadas discretas, mientras que oirás áreas de la barrera aparentemente no se afectaron. La remoción de lípidos del estrato córneo esté implicado como un factor que contribuye a los efectos mejoradores de permeación observados del ultrasonido de baja frecuencia [Alvarez-Roman, R. el al. Skin permeability enhancement by low-frequency sonophoresis: lipid extracfion and transport pathways. 2003. J Pharm Sci 92 (6):p. 1138-46]. El impacto de la sonoforesis de baja frecuencia parece ser mucho más importante que la sonoforesis de alta frecuencia, que incrementa significativamente el transporte dentro y desde la piel en seguida de su aplicación. Aunque el mecanismo de acción permanece no complelamenle definido, los procedimieníos de cavitación y térmicos están implicados fuertemente [Merino, G. et al. ultrasound-enhanced transdermal transport. 2003. J Pharm Sci 92 (6): p. 1125-37]. En otro estudio, la aplicación de ultrasonido de baja frecuencia mostró incrementar la permeabilidad de la piel, facilitando así el suministro de macromoléculas (sonoforesis de baja frecuencia. El esíudio pareció determinar una descripción teórica del íransporte íransdérmico de permeantes hidrofílicos por sonoforesis de baja frecuencia. Se investigaron los parámelros íales como la distribución del tamaño de poro, porosidad absoluta, y dependencia de la tortuosidad efectiva en las características del soluto. Piel de cerdo se expuso a ultrasonido de baja frecuencia a 58 kHz para alcanzar diferentes resistividades de la piel. Se midió el suminisíro transdérmico de cuatro permeantes [maniíol, hormona de liberación de la hormona luleinizanle (LHRH), inulina, dexírano] en la presencia y ausencia de ulírasonido. El modelo de trayectoria poroso se modificó para incorporar las características del permeanle en el modelo y para alcanzar un entendimiento deíallado de las írayectorias responsables del suministro de permeante hidrofílico. Las pendientes de las gráficas de log kp (p) en coníra de log R para solutos individuales cambió con el área molecular del soluto, sugiriendo que la correlación permeabilidad-resistividad para cada permeaníe esíá relacionada con su íamaño. La tortuosidad que experimenta un permeante al interior de la piel también depende de su tamaño, en donde moléculas más grandes experimentan una trayectoria menos tortuosa. Con el modelo de trayecíoria porosa modificado, las tortuosidades efecíivas y la porosidad de la piel se calcularon independientemente. Los resultados de este estudio mostraron que la sonoforesis de baja frecuencia crea trayectorias para el suministro de permeante con una amplia escala de tamaños de poro. El tamaño de poro ópíimo utilizado por los solutos se relaciona con su radio molecular [Tezel, A. eí al. Descriplion of íransdermal transport of hidrophilic solutos during low-frequency sonophoresís based on a modified porous pathway model. 2003 J Pharm Sci 92(2):p.381-93]. Los experimentos in vitro con piel de cerdo de espesor completo para medir las mejoras de la conductividad de la piel y permeabilidad de fármacos se desarrolló y se aplicó ultrasonido para pretratar la piel usando un sonicador que opera una frecuencia de cualquiera de 20 o 40 kHz. La picadura de láminas de aluminio también se notó que medía cavilación, que es el mecanismo principal de la sonoforesis de baja frecuencia. La mejora en la conduclividad de la piel se encontró inversamente proporcional a la distancia de la bocina desde la piel. A medida que se incrementó la intensidad, la mejora de la conductividad de la piel también se incrementó hasta cierto umbral, y entonces cayó. Las intensidades (I (max)) a las cuales ocurrió la mejora máxima son aproximadamente 14 W/cm2 para 20 kHz y 17 W/cm2 para 40 kHz. Estos hallazgos pueden ser útiles en la optimización de la sonoforesis de baja frecuencia. Sobre todo, la dependencia del íransporte en los parámetros de ultrasonido es similar a aquella de la picadura de la lámina de aluminio. Entonces, esíe resultado soporta la función de la cavitación en la sonoforesis de baja frecuencia [Terahara, T. et al. Dependence of low-frequency sonophoresis on ultrasound parameters; distance of the hom and intensiíy. 2002. Iní. J Pharm 235 (1-2): p. 35-42]. La mejora del íransporte del fármaco a través de sonoforesis de baja frecuencia se piensa que está mediada a través de la cavitación, la formación y colapso de burbujas gaseosas. Se ha hipotetizado que la eficacia de la sonoforesis de baja frecuencia puede mejorar significativamente por la provisión de núcleos para cavitación. En un esludio particular, dos resinas porosas Diaion HP20 y Diaion HP2MG (2MG), se usaron como núcleos de cavitación. Se midió el efecto de estas resinas en la cavitación usando picaduras de hojas de aluminio. El 2MG mostró una alta eficacia en mejorar la cavitación en comparación con el Diaion HP20. El 2MG también fue efectivo al mejorar el transporte transdérmico de manitol. Estos resultados confirmaron que la adición de núcleos de cavitación tales como resinas porosas incrementó adicíonalmente el efecto del ultrasonido de baja frecuencia en la permeabilidad de la piel [Terahara, T. et al. Porous resins as a cavitation enhancer for low-frequency sonophoresis. 2002. J. Pharm Sci 941(3): p.753-9]- Electroporación La electroporación es la perturbación esírucíural transiíoria de las membranas de bicapa de lípidos debido a la aplicación de pulsos muy cortos de alto voltaje (< 1 seg). Su aplicación en la piel ha mostrado incrementar el suminisíro íransdérmico de fármaco por muchos órdenes de magniíud. Más aún, la eleclroporación usada sola o en combinación con oíros métodos mejoradores, expande la escala de fármacos (de pequeñas a macromoléculas, lipofilicas o hidrofílicas, moléculas cargadas o neutrales), que pueden suministrarse transdérmicamente. El transporte molecular a íravés de la piel permeabilizada transitoriamente por electroporación resulta principalmente de la difusión mejorada y electroforesis. La eficacia del transporte depende de los parámetros eléctricos y las propiedades fisicoquímicas del fármaco. La aplicación in vivo de pulsos de alto voltaje es bien tolerada pero se induce usualmente una contracción muscular. El diseño del electrodo y parche es un punto importante para reducir la molestia del tralamiento eléctrico en humanos [Denel, A.R. et al. Skin electrporation for transdermal and topical delivery. 2004. Adv. Drug Deliv Rev 56 (5):p. 659-74]. lontoforesis La iontoforesis o Administración ElectroMotora de Fármaco (EMDA -por sus siglas en inglés) es un método muy efectivo que suministro de fármacos al sitio afectado que se usa comúnmente en muchos países incluyendo los E.U.A. en lugar de inyectar el fármaco (usualmente un esteroide) directamente en la inflamación, la iontoforesis disemina una alta concentración de fármaco aún a través de tejido aplicando una corrieníe eléclrica de baja densidad por tiempos que varían de minutos a horas de manera que atrae los iones en las moléculas del fármaco y los impulsa a través de la piel a ser absorbidos por el tejido inflamado. El suministro iontoforético transdérmico de hidrocortisona solubilizada en una solución acuosa de hidroxipropil-beta-ciclodextrina (HP-beta-CyD) se ha investigado y comparado con mejoramiento químico de formulaciones de co-disolvente [Chang, S.L. y Banga, A.K. Transdermal iontophoretic delivery of hydrocortisone from cyclodextrin solutions. 1998. J. Pharmacol 50(6):p. 635-40]. La permeación pasiva de hidrocortisona a través de piel de cadáveres humanos fue mayor cuando se suministró de propilenglicol que cuando se suminisiró después de la solubilización en una solución acuosa de HP-beta-CyD. No obstante, el suministro iontoforético de solución de 1 % de hidrocortisona-9% de HP-beía-CyD fue mayor que la canlidad suministrada pasivamente por la formulación de 1 % de hidrocortisona-propilenglicol, aún si se usó ácido oléico como un mejorador químico. El suministro iontoforético de 1 % de hidrocortisona con 3% o 15% de HP-beta-CyD fue menor que aquel de la solución al 9% de HP-beta-CyD. Estos datos sugieren que la hidrocortisona libre en lugar de complejarse es suministrada predominantemente iontoforéticamente a través de la piel y el complejo HP-beta-CyD sirve como un portador para reabastecer el agotamiento de hidrocortisona. El HP-beta-CyD previene que la hidrocortisona forme un recipiente de piel. La iontoforesis proporciona un mejor suministro transdérmico mejorado de hidrocortisona que el acercamiento químico cuando se añadió sólo lo suficiente de HP-beía-CyD para solubilizar la hidrocortisona [Chang, S.L. y Banga, A.K. Transdermal iontophoretic delivery of hydrocortisone from cyclodextrin solutions. 1998. J. Pharmacol 50(6):p. 635-40].

Meioradores de penetración Otro acercamiento antiguo para mejorar el suministro transdérmico de fármacos usa mejoradores de penetración (también denominados promotores o acelerantes de sorción), que penetran dentro de la piel para disminuir reversiblemente la resistencia de barrera. Se han evaluado numerosos compuestos para la actividad mejoradora de penetración, incluyendo sulfóxidos (tales como dimetiisulfóxido, DMSO), Azonas (por ejemplo laurocapram), pirrolidonas (por ejemplo 2-pirrolidona, 2P), alcoholes y alcanoles (etanol, o decanol), glicoles (por ejemplo propilen glicol, PG, un excipiente común en formas de dosificación aplicadas tópicamente), agentes tensioacíivos (íambién comunes en las formas de dosificación) y lerpenos. Se han identificado muchos sitios potenciales y modos de acción para los mejoradores de penetración de piel; la matriz del liquido iníracelular en la cual los acelerantes pueden desestabilizar la causa del empaque, los dominios de queratina intracelular o a través del incremento de la partición de fármacos deniro del íejido al actuar como un disolvente para el permeante deníro de la membrana. También son factibles mecanismos potenciales de acción adicionales, por ejemplo con los mejoradoras actuando en conexiones desmosomales enlre comeocitos o actividad metabólica alterada deniro de la piel, fue ejerciendo una influencia en la actividad termodinámica/solubilidad del fármaco en su vehículo [Williams, A.C. y Barry, B.W. Penetración enhancers, 2004. Adv. Drug Deliv Rev 56(5):?603-18]. Las ciclodextrinas son oligosacáridos cíclicos con una superficie exterior hidrofílica y una cavidad central de alguna manera lipofílica. Las ciclodextrinas son capaces de formar complejos de inclusión solubles en agua con muchos fármacos lipofílicos insolubles en agua. En soluciones acuosas, las moléculas de fármaco localizadas en la cavidad central están en un equilibrio dinámico con las moléculas de fármaco libres. Más aún, las moléculas lipofílicas en un medio de complejación acuoso competirán entre sí por un espacio en la cavidad. Debido a su tamaño e hidrofilicidad únicamente cantidades insignificantes de ciclodextrinas y complejos de fármaco/ciclodextrinas son capaces de penelrar deníro de las barreras lipofílicas biológicas, tal como la piel intacta. En general, las ciclodextrinas mejoran el suministro tópico de fármaco al incrementar la disponibilidad del fármaco en la superficie de barrera. En la superficie la partición de las moléculas de fármaco de la cavidad de las ciclodextrinas dentro de la barrera lipofílica. Entonces, el suminisíro de fármaco de soluciones acuosas de ciclodexírinas es ambos de controlado por difusión y controlado por membrana. Parece que las ciclodexírinas pueden sólo mejorar el suminisíro tópico de fármacos en la presencia de agua [Loftsson, T. y Masson, M. Cyclodexírins in topical drug formulations: theory and practice. 2001. Int J Pharm225(1-2):p.15-30].

Es bien conocido que las ciclodextrinas pueden mejorar la permeación de fármacos poco solubles a través de membranas biológicas. No obstanle, la permeabilidad disminuirá si se añade la ciclodexírina en exceso de la conceníración requerida para solvatar el fármaco. El efecto de las ciclodextrinas no puede explicarse como únicamente debido a la solubilidad incrementada del fármaco en la fase acuosa donante ni tampoco puede explicarse al suponer que las ciclodexírinas aclúan como mejoradores de permeación clásicos, es decir al disminuir la función de barrera de la membrana lipofílica. Las investigaciones han modelado el efeclo de las ciclodexírinas en lérminos de barreras mixtas que consisten de difusión y difusión controlada de membrana, en donde la difusión del fármaco en la capa de difusión acuosa es significativamente más lenta que en la masa del donanle. Este modelo de difusión se describe por una ecuación matemática simple en donde las propiedades y sistemas se expresan en términos de dos constantes P(M)/Kd y M1/2. Los datos para la permeación de hidrocortisona a Iravés de piel de ratón sin pelo en la presencia de diversas ciclodexírinas, y mezclas poliméricas de ciclodexírinas, se ajustó para obtener valores para estas dos constantes. Se pronosticó precisamente el incremento en el flujo con la concenlración incremeníada del complejo de ciclodexírina y la caída con el exceso de ciclodextrina. Los datos para la permeación de fármacos a través de membrana de celofán semipermeable también pueden ajusfarse a la ecuación. Se concluyó que las ciclodexírinas actúan como mejoradores de permeación portando el fármaco a través de la barrera acuosa, de la solución en masa hacia la superficie lipofílica de las membranas biológicas, en donde la partición de las moléculas de fármaco del complejo a la membrana lipofílica [Masson, M. eí al. Cyclodexírins as permeaíion enhancers: some íheorelical evaluations and in vitro testing. 1999. J. Control Reléase 59(1 ): p.107-18].

EJEMPLO 1 Aóslamieipito e ídeptoficacióipi de FLSP Los siguieníes ensayos se desarrollaron para verificar que la fruclosa-lisina (FL) podía identificarse en su esíado fósforilado, por ejemplo, FL3P. Se desarrolló un análisis de 31P RMN de un extracto de ácido perclórico de riñones de ratas diabéticas y mostró una nueva resonancia de azúcar monofosfalo a 6.24 ppm que no se observó en tejido diferente de riñon y está presente a niveles grandemente reducidos en riñon no diabético. El compuesto responsable para la resonancia observada se aisló por cromatografía del extracto en una columna de celulosa microcristalina usando ácido 1 -buíanol-acético-agua (5:2:3) como eluyente. Se determinó la estructura por 2D COSY de protón como fructosa-lisina 3-fosfalo. Esío se confirmó posteriormente al inyectar animales con FL, preparado como se describió previamente (Finot y Mauson, 1969, Helv. Chim. Acta, 52:1488), y mostrar fosforilación directa a FL3P. Usando FL específicamente deulerado en la posición 3 se confirmó la posición del fosfato en el carbono 3. Esto se desarrolló al analizar el especlro 31P RMN, íanto acoplado como desacoplado. El acoplamiento normal de P-O-C-H produce un doblete en FL3P con un valor J de 10.3 Hz; mieníras que el P-O-C-D no tiene acoplamiento y produce un singulete que tanto acoplado como desacoplado como se encontró para el FL3P 3 deuíerado. Una propiedad única del FL3P es que cuando se írató con borohidruro de sodio se convirtió en dos nuevas resonancias a 5.85 y 5.95 ppm, que corresponde a manitol y sorbitol-lisina 3-fosfaíos.

EJEMPLO.2 Síntesis de FL3P 1 mmol de dibencil-glucosa 3-fosfaío y 0.25 mmoles de a-carbobenzoxi-lisina se caleníó a reflujo en 50 ml de MeOH por 3 horas. La solución se diluyó con 100 ml de agua y se cromalografió en una columna Dow-50 (2.5 x 20 cm) en la forma piridinio y se eluyó primero con agua (200 ml) y entonces con 600 ml de amortiguador (piridina 0.1M y ácido acético 0.3M). El compuesto objetivo eluído al terminar el lavado con agua y el inicio del lavado con amortiguador. Los resulíados demostraron que la remoción de los grupos bloqueadores cbz y bencilo con 5% Pd/C a 1.40 kg/cm2 (20 psi) de hidrógeno dió FL3P con 6% de rendimiento.

EJEMPLO 3 Producción Enzimátieai de FL3P de FL y ATP y Ensayo Para ExpUorar Pos Se usó inicialmente 31P RMN para demostrar la actividad de cinasa en el contexío riñon. Una muestra fresca de corte de riñon de cerdo de 3 g se homogeneizó en 9 ml de 50 mM de Tris HCI conteniendo 150 mM de KCl, 5 mM de DTT, 15 mM de MgCI2, pH 7.5. Esto se cenírifugó a 10,000 g por 30 minutos, y entonces el sobrenadante se centrifugó a 100,000 g por 60 minutos. Se añadió sulfato de amonio a 60% de saíuración. Después de una hora a 4°C se recolectó el precipitado por centrifugación y se disolvió en 5 ml. De amortiguador original. Una alícuota de 2 ml de esía solución se incubó con 10 mM de ATP y 10 mM de FL (preparado como en el Ejemplo 1 , anterior) por 2 horas a 37°C. La reacción se templo con 300 µl de ácido perclórico, se centrifugó para remover la proteína, y se desaló en una columna de Sephadex G 10 (5 x 10 cm). El análisis 31P RMN de la mezcla de reacción detectó la formación de FL3P. Con base en la prueba de la actividad de cinasa así obtenida, se desarrolló un ensayo radioactivo. Este ensayo se diseñó para tomar ventaja del enlace a la resina de intercambio catiónico Dow-50 por FL3P. Esía caraclerísíica del FL3P se descubrió duranle los esfuerzos para aislarlo. Debido a que la mayoría de los fosfaíos no se enlazan a esla resina, se sospechó que el grueso de todos los compuestos que reaccionan con ATP así como cualquier exceso de ATP no se enlazarían. La primera etapa fue determinar la cantidad de resina requerida para remover el ATP en el ensayo. Esto se efectuó al pipetear la mezcla en una suspensión de 200 mg de Dow-1 en 0.9 ml de H20, someter a vórtice, y centrifugación para empacar la resina. De esto 0.8 ml de sobrenadante se pipetearon sobre 200 mg de resina fresca seca, se someíió a vórtice y se centrifugó. Un volumen de 0.5 ml de sobrenadante se pipeteó en 10 ml de Ecoscint A y se conló. El recuento residual fue 85 cpm. Este procedimiento se usó para el ensayo. El precipitado de 60% de precipitación de sulfato de amonio del homogénado de córtex crudo se redisolvió en el amortiguador homogenado a 4°C. El ensayo contenía 10 mM de ?33P-ATP (40,000 cpm), 10 mM de FL, 150 mM de KCl, 15 mM de MgCI2, 5 mM de DTT en 0.1 ml de 50 mM de Tris HCI, pH 7.5. La relación entre las velocidades de producción de FL3P y la concentración de enzima se determinó usando determinaciones por triplicado con 1 , 2, y 4 mg de proteína por 30 minutos a 37 °C. Las corridas en blanco concurrentemente sin FL se sustrajeron y se registraron los datos. La actividad observada corresponde a una velocidad de síntesis aproximada de FL3P de 20 nmoles/hr/mg de proteína.

EJEMPLO 4 BiphibSeiép de Ba formación de 3-desoxigiucosonga por cnegBuippgipgi y a. Síntesis general de poliollisinas El azúcar (11 mmoles), a-carbobenzoxi-lisina (10 mmoles) y NaBH3CN (15 mmoles) se disolvieron en 50 ml de MeOH-H20 (3:2) y se agitó a 25°C por 18 horas. La solución se trató con un exceso de resina de intercambio iónico Dow-50 (H) para descomponer el exceso de NaBH3CN. Esía mezcla (líquido más resina) se transfirió sobre una columna Dow-50 (H) (2.5 x 15 cm) y se lavó bien con agua para remover el exceso de azúcar y ácido bórico. La carbobenzoxi-poliollisina se eluyó con 5% de NH OH. El residuo obtenido por evaporación se disolvió en agua-metanol (9:1) y se redujo con gas hidrógeno (1.4 kg/cm2 (20 psi)) usando un catalizador de 10% de paladio sobre carbón vegetal. La filtración y estructuración produjeron la poliollisina. b. Protocolo experimeníal para la reducción de 3-desoxiqlucosona urinario y plasma por sorbitollisina, maniiollisina y galactitollisina Se recolectó la orina de seis ratas por tres horas. Una muestra de plasma también se obtuvo. Entonces a los animales se les dió 10 µmoles de cualquiera de sorbitollisina, manitollisina, o galactitollisina por inyección intraperitoneal. Se recolectó la orina por otras tres horas, y se obtuvo una muestra de plasma al final de las tres horas. a. La 3-desoxiglucosona se midió en las muestras, como se describe en el Ejemplo 5, siguiente, y volúmenes variables se normalizaron a creaíinína. La reducción promedio del 3-desoxiglucosona urinaria fue 50% por sorbitollisina, 35% por manitollisina y 35% por galactitollisina. El 3-desoxiglucosona de plasma se redujo 40% por sorbitollisina, 58% por manitollisina y 50% por galactitollisina. b. Uso de meqlumina para reducir 3-desoxiqlucosona urinaria Las ratas fueron tratadas como en b), inmediatamente antes, excepto que se inyectó meglumina (100 µmoles) intraperiíonealmeníe en lugar de los derivados del lisina antes mencionados. Tres horas después de la inyección las conceníraciones promedio de 3-desoxiglucosona en la orina disminuyeron 42%.

EJEMPLO 5 EOevación de FL, 3DG y 3DF iriipiaoo en humanos en seguid® ® Ca a. Preparación del producío alimenticio que contiene proteína qlucada 200 g de caseína, 120 g de glucosa y 720 ml de agua se mezclaron para dar una mezcla homogénea. Esta mezcla se transfirió a una placa meíálica y se calentó a 65 °C por 68 horas. La loria resultante entonces se pulverizó a un polvo grueso. Este polvo contenía 60% de proíeína como se determinó por el procedimiento de Kjeldahl. b. Medición de contenido de lisina qlucada Un gramo de polvo preparado como en la etapa a, anterior, se hidrolizó por reflujo con HCl 6N por 20 horas. La solución resultaníe se ajustó a un pH de 1.8 con solución de NaOH y se diluyó a 100 ml. El contenido de fructosalísina se midió en un analizador de aminoácidos como furosina, el producto obtenido de la hidrólisis acida de la fructosalisina. De esta manera, se determinó que la torta contenía 5.5% (p/p) de frucíosalisina. c. Protocolo experimeníal Los voluníarios estuvieron dos días con una dieta libre de fructosalisina y entonces consumieron 22.5 g del producto alimenticio preparado como se describe en la preseníe, entonces recibieron efectivamente una dosis de 2 g de fructosalisina. Se recolectó la orina a intervalos de 2 horas por 14 horas y una recolección final se hizo a las 24 horas. d. Medición de FL, 3DG y 3DF en orina Se midió el FL en HPLC con un Arreglo de diodo Waters 996 usando una columna C18 libre de aminoácidos a 46°C y un sistema de gradiente de elución de acetonitrilo-alcohol metilico-agua (45:15:40) en aceíonilrilo-acelalo de sodio-agua (6:2:92) a 1 ml/min. La cuaníificación empleó un estándar interno de meglumina. Se midió 3DF por HPLC después de la desionización de la muestra. Los análisis se desarrollaron en un sistema de HPLC Dionex DX-500 empleando una columna de PA1 (Dionex) y eluyendo con 32 mM de hidróxido de sodio a 1 ml/min. La cuantificación se desarrolló de curvas estándar obtenidas diariamente con 3DF sintético. El 3DG se midió por GC-EM después de la desionización de la muestra. El 3DG se derivatizó con un exceso a 10 veces de diaminonaftaleno en PBS. La exíracción con acéfalo de etilo dio una fracción libre de sal que se convirtió a los trimetil silil éteres con Tri-Sil (Pierce). El análisis se desarrolló en un sistema GC-EM de monitoreo de ion seleccionado Hewleíí-Packard 5890. El GC se desarrolló en una columna capilar de sílice fusionado (DB-5, 25 mx.25 mm) usando el siguieníe programa de lemperalura: puerto inyector 250 °C, temperalura inicial de columna 150 °C que se sosíuvo por 1 minuto, entonces se incrementó a 290 °C a 16 °C/minuto y se sostuvo por 15 minutos. La cuantificacíón de 3DG empleo un monitoreo de ion seleccionado usando un estándar interno de U-13C-3DG.

Los resultados de los experimentos descritos en este ejemplo se presentan ahora. La gráfica descrita en la Figura 1 représenla la producción de FL, 3DF, y 3DG en la orina de un voluntario después de consumir la proteína glucada. La aparición rápida de los tres metabolitos es claramente incipiente. Ambos 3DF y 3DG mostraron una ligera elevación aún después de veinticuatro horas. La gráfica mostrada en la Figura 2 representa la formación de 3DF en cada uno de los miembros de un grupo de prueba de siete personas. Se observó un patrón similar en todos los casos. Como se demostró en la Figura 2, los picos de excreción de 3DF aproximadamente 4 horas después del bolo de FL y una ligera elevación de 3DF es apreciable aún 24 horas después del bolo.

EJEÜPLO B Efectos de ia tom incrementada de proteicas glucadas ®ñ Ca díñete La N-acetil-ß-glucosaminidasa (NAGasa) es una enzima excrelada en la orina a una concentración elevada en diabéticos. Se concibe como un marcador temprano del daño tubular, pero la patogénesis de la NAGase incrementada en la orina no está bien entendida. La salida incrementada en orina de NAGase en diabéticos se ha propuesto que se debe a la activación de lisosomas en los íúbulos próximos inducidos por diabetes con una salida incrementada en la orina en lugar de la destrucción de células. Ratas fueron alimentadas con una diela que contenía 3% de proteína glucada o alimentadas con control durante muchos meses. Las salidas urinarias de la NAGasa y 3DF se determinaron a diversos íiempos, como se indica en la Figura 3. La caníidad de 3DG excrelado en la orina lambién se determinó. Los resultados obtenidos en este ejemplo demostraron que en todas las comparaciones los niveles de 3DF NAGasa están elevados en el grupo experimental con relación al control. Entonces, los animales alimentados con proteína glucada excretaron un exceso de NAGasa en su orina, similar a los resultados obtenidos con diabéticos. La salida de NADasa se incrementó por aproximadamente 50% en el grupo experimental, en comparación con los animales de control. Los animales experimentales también tuvieron un incremento de cinco veces de 3DF en orina en comparación con los controles. Se encontró que el 3DF urinario correlacionaba extremadamente bien con 3DG, como puede observarse en las Figuras 3 y 4.

EJEMPLO 7 Análisis eEectiroforético de proteinas de Dos ratas fueron inyectadas diariamente con 5 µmoles de cualquiera de FL o manitol (usado como un control) por 5 días. Los animales fueron sacrificados y se removieron los riñones y se disecíaron en el córtex y médula. Los tejidos se homogeneizaron en 5 volúmenes de 50 mM de Tris HCl conteniendo 150 mM de KCl, 15 mM de MgCI2 y 5 mM de DTT, pH 7.5. Los restos celulares se removieron por centrifugación a 10,000 x g por 15 minutos, y el sobrenadante entonces se centrifugó a 150,000 x g por 70 minutos. Las proteínas solubles fueron analizadas por SDS PAGE en 12% de geles de poliacrilamida así como en 4-15 y 10-20% de geles de gradiente. En todos los casos se encontró, que las bandas de bajo peso molecular estaban ausentes o reducidas visualmente del exíracto de riñon del animal inyectado con FL cuando se comparó con el animal infectado con manítol.

EJEMPLO 8 Síntesis de 3-O-metñlsorbStoiiis?na 3-OMe glucosa (25 gramos, 129 mmoles) y a-Cbz-lisina (12 gramos, 43 mmoles) se disolvieron en 200 ml de agua-meíanol (2:1 ). Se añadió cianoborohidruro de sodio (10 gramo, 162 mmoles) y la reacción se agito por 18 días a temperatura ambiente La reacción de a-Cbz-lisina se monitoreo por cromaíografía de capa fina en gel de sílice empleando ácido 1-bulanol-acético-agua (4 1 1) usando ninhidpna para visualización La reacción se terminó cuando no permanecía a-Cbz- sma La solución se ajustó a pH 2 con HCl para descomponer el exceso de cianoborohidruro, neutralizar y entonces aplicar a una columna (5x50 cm) de Dowex-50 (H+) y la columna se lavó bien con agua para remover el exceso de 3-O-me-glucosa El compuesto objetivo se eluyó con hidróxido de amonio al 5% Después de la evaporación el residuo se disolvió en 50 ml de agua-metanol (2 1) y se añadió 10% de Pd/C (0 5 gramos) La mezcla entonces se sacudió bajo 1 4 kg/cm2 (20 psi) de hidrógeno por 1 hr El carbón vegetal se filtró y el filtrado se evaporó a un polvo blanco (10 7 gramos, 77% de rendimiento con base en a-Cbz-hsina) que se homogeneizó cuando se analizo por HPLC de fase inversa como el derivado de feni soíiocianaío Análisis elemeníal Calculado para C13H28N207 CH3OH 2 H20 C, 42 86, H, 9 18, N, 7 14 Enconlrado C, 42 94, H, 8 50, N, 6 95 Los compuestos relacionados con la estrucíura de 3-O-mei?l sorbiíol sina, como se analiza en algún lugar en la preseníe, pueden fabricarse, por ejemplo, por glucación de un material de inicio que contiene nitrógeno u oxígeno, que puede ser un aminoácido, poliaminoácido, pépíido o similar, con un ageníe de glucación, tal como fructosa, que puede estar químicamente modificada, si se desea, de acuerdo con procedimientos bien conocidos por aquellos expertos en la técnica EJEftflPLQ 8 Ensayo adicional para la actividad de FL3P cinasa a. Preparación de Soluciones de Almacenamiento Se preparó una solución amortiguadora de ensayo que fue 100 mM de HEPES pH 8.0, 10 mM de ATP, 2 mM de MgCI2, 5 mM de DTT, 0.5 mM de PMSF. Se preparó una solución de almacenamiento de fruclosil-espermina que fue 2 mM de fructosil-espermina HCl. Se preparó una solución de conírol de A espermina que fue 2 mM de espermina HCl. b. Síntesis de Fructosil-espermina La síntesis de fructosíl-espermina se realizó por una adaptación de un procedimiento conocido (J. Hodge and B. Fisher, 1963, Methods Carbohydr. Chem., 2:99-107). Una mezcla de espermina (500 mg), glucosa (500 mg), y solución de pirosulfito de sodio (80 mg) se preparó en una proporción molar de 8:4:1 (espermina:glucosa:pirosulfito) en 50 ml de meíanol-agua (1 :1 ) y se calentó a reflujo por 12 horas. El producto se diluyó a 200 ml con agua y se cargó sobre una columna DOW-50 (5 x 90 cm). La glucosa no reaccionada se removió por dos volúmenes de agua de columna y el producto y la espermina no reaccionados se removieron con NH4OH 0.1 M. Las fracciones pico combinadas del producto se liofilizaron y la concentración de fruclosil-epermina se determinó al medir la integral del pico de C-2 fructosil en un especíro 13C RMN cuantitativo del producto (los datos de RMN se recolecíaron con un pulso de 45°, un reíardo de relajación de 10 segundos y sin desacoplamiento de NOE). c. Ensavo de Cinasa para Determinar la Purificación Se preparó una mezcla de incubación incluyéndolo µl de la preparación de enzima, 10 µl de amortiguador de ensayo, 1.0 µCi de 33P ATP, 10 µl de solución de almacenamiento de fructosil-espermina y 70 µl de agua y se incubó a 37°C por 1 hora. Al terminar la incubación 90 µl (2 x 45 µl) de la mezcla se salpicó sobre dos discos de fosfato de celulosa de 2.5 cm de diámetro (Whatman P-81) y se dejaron secar. Los discos se lavaron extensamente con agua. Después del secado, los discos se colocaron en frascos de cintilación y se conlaron. Cada fracción de enzima se ensayó por duplicado con un control apropiado de espermina.

EJEÜPLO 1© Patología de riñen observada ®n anámaies d® prueba en un® dieta de prote?na glucada Tres ratas se mantuvieron en una dieta de proteína glucada (20% de la proteína total; 3% glucada) por 8 meses y se comparó con 9 ratas de la misma edad mantenidas en una dieía de conírol. La diefa de proteína glucada consistió de una dieta nuíricional estándar de la cual se sustíluyó 3% de una proteína glucada por proteína no glucada. La proteína glucada se hizo al mezclar conjuntamente caseína y glucosa (2:1), añadiendo agua (2X el peso del material seco), y horneando la mezcla a 60 °C por 72 horas. El control se preparó de la misma manera excepto que no se usó agua y la caseína y la glucosa no se mezclaron antes del horneado. El hallazgo principal fue un incremento sustancial en el daño de glomérulos en los animales en la dieta glucada. Las lesiones típicas observadas en esíos animales fueron esclerosis segmentaria del penacho glomerular con la adhesión a cápsula de Bowman, metaplasia tubular del epitelio parietal y fibrosis intestinal. Todos los animales en la dieta de proteína glucada, y sólo uno de los animales en la dieta de control moslraron más de 13% de glomérulos dañados. La probabilidad de que esto suceda por azar es menor que 2%. Adicionalmente a los cambios patológicos observados en los glomérulos, se observaron un número de cilindros hialinados. Más de esíos cilindros hialinados se enconíraron en animales con la dieía glucada, aunque éstos no fueron cuantificados. También se observaron niveles incrementados de NAGasa en los animales en la dieta glucada. Con base en los resultados de este experimento, parece que la dieta glucada causó que los animales de prueba desarrollaran una serie de lesiones histológicas similares a aquellas observadas en los riñones diabéticos.

EJEMPLO 12 Efectos carcinogénicos d® Ba trayectoria de fructosa fe Para investigar el potencial carcinogénico de meíaboliíos formados en la trayectoria de fructosalisina, se condujeron experimentos en una cepa de ralas con una alia susceptibilidad a carcinomas de riñon. Cuatro ratas se pusieron en una dieta de proteína glucada y tres ratas en una dieta de control. Después de tres semanas en la dieta, se sacrificaron los animales y se examinaron sus riñones. En todos los cuatro animales en la dieta, se encontraron carcinomas de riñon del tamaño mayor que 1 mm, en tanto que no se encontraron lesiones de este tamaño en los animales de conírol. La probabilidad de que esío suceda por azar es menor que 2%. Los daíos demosíraron que hay niveles elevados de 3DG, causados por la fructosalisina en exceso proveniente de la proteína glucada en la dieta, en las células tubulares de riñon (conocidas como las células de origen de la mayoría de los carcinomas de riñon), y los 3DG pueden interacluar con el ADN celular, llevando a una variedad de eventos muíagénicos y finalmente carcinogénicos. Existe la posibilidad de que esíe procedimiento sea importante en el desarrollo de cánceres humanos en el riñon y en oíros lugares.

EJEMPLO n Efectos alimenticios de dieta de proteína glucada en carcinoma d© céiuias renales en ratas susceptibles Adicionalmeníe a los experimentos descritos antes, se desarrollaron experimentos para evaluar la relación enlre una diela de proíeína glucada y carcinoma de células renales. Veintiocho ratas con una muíación que las hacía susceptibles al desarrollo de carcinoma de riñon se dividieron en dos cohortes. Un cohorte se alimentó con una diela de proteína glucada y el otro cohorte con una dieta de control. La dieta de proteína glucada consistió de una dieta nutricional estándar a la cual se añadió 3% de proleína glucada. La proteína glucada se hizo al mezclar conjuntamente caseína y glucosa (2:1), añadiendo agua (2X el peso del material seco), y horneando la mezcla a 60 °C por 72 horas. El control se preparó de la misma manera excepto que no se usó agua y la caseína y la glucosa no se mezclaron antes del horneado. Las ratas fueron colocadas en la dieta inmediatamente en seguida del destetamiento a las tres semanas de edad y se mantuvieron en las dietas ad libitum por las siguientes 16 semanas. Entonces los animales sacrificaron, se fijaron los riñones, y se prepararon las secciones con hematoxilina y eosina. Las muestras histológicas examinaron por un patólogo. Se identificaron cuaíro tipos de lesiones. Estas incluyeron: quistes; colecciones muy pequeñas de células similares a tumor, típicamente menos de 10 células; íumores pequeños, de 0.5 mm o menores; y íumores mayores que 0.5 mm. Para los cualro tipos de lesiones, se observaron más lesiones en los animales en la dieta glucada que en la dieta de control, como se muestra en el siguiente cuadro (Cuadro A).

Para resumir los resultados, el número promedio de lesiones por sección de riñon se calculó para cada dieta. Estas fueron 0.82 + 0.74 y 2.43 + 2.33 en la dieta de control y glucada respectivamente. La probabilidad de esíos sucesos por azar es de aproximadamente 2 en 100,000. Esos resultados proporcionan un fuerte soporte para la premisa de que los efectos de la trayectoria de recuperación de lisina, el descubrimiento en el cual se basa la presente invención, se extiende hasta causar mutaciones, y entonces produce también efectos carcinogénicos. Estos resultados proporcionan una base para el desarrollo de métodos terapéulicos y agentes para inhibir esta írayectoria para reducir cáncer en el riñon así como en otros órganos en donde esía írayecíoria puede íener efectos similares.

EJEMPLO 14 Excreción urinaria de 3-desoxi-fructosa como indicador de progiresiómi microaibyminiaria en pacientes con diabetes tipo II Como se establece en la preseníe, los niveles de suero del intermediario del glucación, íres desoxi-glucosona (3DG) y su produelo de desloxificación reductiva, tres desoxi-fructosa (3DF), son elevados en la diabetes. La proporción entre los niveles de línea de base de estos compuestos y la progresión subsiguiente de microalbuminuria (MA) se ha examinado en un grupo de 39 individuos de un cohorte prospectivo de pacientes en el Joslin Diabetes Center con diabetes mellitus dependiente de insulina (IDDM) y microalbuminuria (con base en mediciones múltiples durante los dos años de inicio de línea de base entre 1990-1993) y no en inhibidores ACE. Los niveles de línea de base de 3DF y DG en gotas aleatorias de orina se midió por HPLC y GC-EM. Los individuos que progresaron a cualquiera de un alto nivel de MA o proteinuria en los siguientes cuatro años (n=14) tuvieron niveles de línea de base significativamente mayores de proporciones log 3DF/creatinina urinaria en comparación con no progresivos (n=15) (p=0.02). Los niveles de linea de base determinados en este estudio fueron aproximadamente 0.18 µmoles/mg de proporciones de creatinina en los no progresivos. Las proporciones de línea de base de 3DG/creatínina en orina no difirieron entre los grupos. El ajuste de la línea de base del nivel de HgA.c (la mayor fracción de hemoglobina glucosilada) no alteró susíancialmenle esíos hallazgos. Esos resullados proporcionaron evidencia adicional de la asociación eníre el 3DF urinario y la progresión de complicaciones en el riñon en la diabetes. a. Cuantificación de 3-desoxifructosa Las muestras fueron procesadas al pasar 0.3 ml de alícuota de la muestra de prueba a través de una columna de intercambio iónico que contenía 0.15 ml de resina AG 1-X8 y 0.15 ml de resina AG 50W-X8. Las columnas entonces se lavaron dos veces con 0.3 ml de agua desionizada, se aspiraron para remover el líquido libre y se filtraron a íravés de un filíro Milipore de 0.45 mm. Se analizaron inyecciones (50 µl) de las muestras traíadas usando un sislema de cromatografía Dionex DX 500. Una columna de intercambio iónico carbopac PA1 C. empleó con un eluyente que consistía de hídróxido de sodio al 16% (200 mM) y 84% de agua desionizada. El 3DF se detectó electroquímicamente usando un detector amperomélrico de pulsos. Las soluciones esfándar 3DF que generaron las concenlraciones anlicipadas 3DF ambas fueron corridas antes y después de cada muestra desconocida. b. Mediciones de creatinina en orina Las concentraciones de creatinina en orina se determinaron por el méíodo calorimétrico de punto final (equipo-A de Sigma Diagnostics) modificado para uso con un lector de placa. Las conceníraciones de crealinina se evaluaron para normalizar volúmenes de orina para medir los niveles de metaboliíos presentes en el mismo. c. Mediciones de albúmina en la orina Para evaluar los niveles de albúmina en la orina de los sujetos de prueba, se recolectaron gotas de orina y se desarrolló una inmunoefelomelría en un aparato BN 100 con el equipo de N-albúmina (Behring). Los anticuerpos antialbúmina están disponibles comercialmenle. Los niveles de albúmina en la orina pueden evaluarse por cualquier ensayo adecuado incluyendo pero no limitado a ensayos ELISA, radioinmunoensayos, Western y transferencia en mancha. Con base en los datos obtenidos en el estudio de los pacientes del Joslin Diabetes Center, parece que los niveles elevados de 3DF en orina están asociados con la progresión de microalbuminuria en diabetes. Esta observación proporciona un parámetro de diagnóstico nuevo para evaluar la probabilidad de progresión a complicaciones serias de riñon en pacientes afligidos con diabetes.

EJEMPLO 15 3-O-metil sorbitol lisina disminuye los nóveles sistémicos de 3DG en ratas normales y diabéticas.

Un cohorte de doce ratas diabéticas se dividió en dos grupos de seis. El primer grupo recibió inyecciones únicamente de salina, y el segundo grupo recibió inyecciones de 3-O-meíil sorbiíol lisina (50 mg/kg de peso corporal) en solución salina. El mismo procedimiento se condujo en un cohorte de doce raías no diabólicas. Como se resume en el Cuadro B, dentro de una semana, el tratamiento con 3-O- metil sorbitol lisina redujo significativamente los niveles de 3DG en plasma en comparación con los respectivos controles de salina en ambas ratas diabéticas y no diabéticas. 3-O-metil sorbitol lésina (3-QMel) reducen niveies de 3DG en plasma en ratas diabéticas y no diabéticas La habilidad del 3-0- meíil sorbiíol lisina para reducir los niveles sisíémicos de 3DG sugiere que las complicaciones diabéticas difereníes de nefropatía (por ejemplo retinopalía y rigidez de la aorta) íambién pueden conírolarse por terapia de inhibidor de amadorasa.

EJEMPLO 18 La localización defl 3-Q- metil sorbitollISsIna to ado OT vivo ®s ®B riñen Seis ratas fueron inyectadas intraperitonealmente con 13.5 mmoles (4.4 mg) de 3-0- metil sorbiíol lisina. Se recolectó la orina por 3 horas, después de lo cual se sacrificaron las ratas. Los tejidos a ser analizados se removieron y se fijaron por congelación en nilrógeno líquido, exíraíos de ácido perclórico de los íejidos se usaron para análisis de meíaboliíos. Los tejidos examinados se tomaron del cerebro, corazón, músculo, nervio ciático, bazo, páncreas, hígado, y riñon. También se analizó el plasma. El único exíracío de tejido que se encontró que contenía 3-0-meíil sorbilol lisina fue el del riñon. La orina fambién conlenía 3-0- melil sorbiíollisina, pero no el plasma. El porcentaje de la dosis inyecíada recuperado de la orina y el riñon varió entre 39 y 96%, como se muestra en el Cuadro C, siguiente.

EJEMPLO i; La actividad de Amadorasa/fructosa ina cnnasa cuenta para la may@r parte de la producción de 3DG La producción enzimática de 3DG se demoslró en un ensayo in vitro con diversos componentes clave (10 mM de Mg-ATP, amadorasa parcialmente purificada, 2.6 mM de FL) omitida de la reacción para evaluar su importancia en la producción de 3DG. Esíos resultados muestran que la producción de 3DG es 20 veces mayor en la presencia de extracto de riñon que contiene amadorasa en su sustrato (Cuadro D comparativo, reacciones 1 y 3). Claramente, la gran mayoría de la producción de 3DG está mediada enzimaticameníe en la presencia de amadorasa.

Producción de 3DG dependiente de amadorasa después de 24 horas EJEMPLO 10 Efectos del 3DG, e inhibición de 3DG. en el entrelazamiento El colágeno está presente a altos niveles en la piel. Para esíe propósito, se determinó qué efecto tiene el 3DG en el enírelazamienío de colágeno. El colágeno I se incubó en la presencia o ausencia de 3DG in vitro. Colágeno íipo I de piel de becerro (1.3 mg; Sigma) se incubaron en 20 mM de fosfato de Na amortiguado buffer, pH 7.25, ya sea sólo, con 5 mM de 3DG, o con 5 mM de 3DG más 10 mM de arginina, en un volumen total de 1 ml a 37°C por 24 horas y entonces se congeló y liofilizó. El residuo se disolvió en 0.5 ml de 70% ácido fórmico y se añadió bromuro de cianógeno (20:1 , p/p).

Esla solución se incubó a 30°C por 18 horas. Las muestras fueron dializadas en contra de 0.125 M Tris, pH 6.8, conteniendo 2% de SDS y 2% glicerol, en un tubo de diálisis con un corte de peso molecular de 10,000. Todas las muestras fueron ajustadas a un volumen de 1 ml. La extensión del entrelazamiento de colágeno se determinó al aplicar volúmenes iguales de muestra y analizándolas por SDS-PAGE electroforesis (16.5% de gel de Tris-tricina), como se determinó por los efectos de 3DG en la migración de colágeno. Se encontró que el tratamiento de colágeno con 3DG causó que el colágeno migrara como si tuviera un peso molecular mayor, lo que es indicativo del entrelazamiento. La imagen del gel teñido con plata en la Figura 10 de muestra que hay unas cuantas bandas moleculares altas en los grupos que contienen colágeno sólo o en colágeno más 3DG más arginina. Hay más bandas de peso molecular alio en el grupo tratado con 3DG, en la ausencia de un inhibidor de 3DG. Parece haber más proteína en la muesíra íraíada con 3DG sólo. Debido a que las tres muestras iniciaron con la misma cantidad de proíeína, sin estar unidas a ninguna teoría, puede concluirse que durante la diálisis escaparon algunos péptidos de la muestra tralada con 3DG porque se produjeron más enlrelazamientos y se retuvieron proteínas de mayor peso molecular. En otras palabras, parece haber menos proteína en el conírol y grupos de 3DG más arginina, porque los pépfidos moleculares menores se difundieron duraníe la diálisis EJEMPLO 1 Localizacién de 3DG en Ba Piel La invención como se describe la presente descripción identifica por primera vez la presencia de 3DG en la piel. Se usó un modelo de piel de ratón. Un centímetro (1 cm) cuadrado de piel se preparó y sometió a extracción con ácido perclórico. Se midió el 3DG como se describió antes. Se usaron seis ratones y la cantidad promedio de 3DG detectado en la piel fue de 1.46 +/- 0.3 µM. Este valor fue substancialmente mayor que las concentraciones de 3DG en plasma detectados en los mismos animales (0.19 +/- 0.05 µM. Estos datos, y los datos descritos en lo siguiente en el Ejemplo 20, sugieren que los altos niveles de 3DG en la piel se deben a la producción de 3DG en la piel.

EJEMPLO 20 Localización de Amadorasa mARN en Da Aunque se encontraron altos niveles de 3DG en la piel (ver Ejemplo previo), no se conocía si el 3DG se formaba localmente y si la piel tenía la habilidad de producir 3DG enzimáticamente. La presencia de Amadorasa mARN se analizó y se utilizó como una medida de la habilidad de la piel para producir la 3DG preseníe en la piel (ver ejemplo previo).

Poli A + ARN mensajero aislado de riñon y piel humanos se adquirió de Straíagene. El mARN se usó en los procedimienlos RT-PCR. Usando la secuencia publicada para amadorasa (Delpierre eí al., 2000, Diabetes 49:10:1627-1634; Szwergold et al., 2001 , Diabetes 50:2139-2147), un cebador inverso en la dirección 3' del extremo terminal del gen (bp 930-912) se sometió a RT para crear un modelo de cADN para PCR. Este mismo cebador se usó junto con un cebador seiguiente de la mitad del gen de amadorasa gene (bp 412-431) para amplificar el gen de Amadorasa del modelo de cADN. El producto del PCR debería ser un fragmento de 519 bp. Muestras de piel y riñon humanos se sometieron a RT-PCR y se analizaron por electroforesis en gel agarosa, así como los controles que no contenían modelos de cADN. Este resultado demuestra que la piel de hecho expresa Amadorasa mARN. La expresión subsiguiente de la proteína puede contar para la producción de 3DG en la piel. Como se esperaba, se observó un producto de 519 bp (ver Figura 11 ). El fragmento 519 bp no solamente se encontró en el riñon (línea 1 ), también se encontró en la piel (línea 3). El fragmento de 519 bp no se detectó en los grupos que no recibieron el modelo cADN (líneas 2 y 4).

EJEMPLO 21 Efectos de ta FructosaBisina en células de Como se describió antes, una dieta alta en proíeínas glucadas, por ejemplo, fructosalisina, tiene un efecto profundo en el meíabolismo in vivo. Por lo íanlo, los efectos de fructosalisina se probaron direcíameníe en las células de riñon in vitro. Los resulíados demueslran que la fruclosalisina adminisírada a las células de riñon in vitro causó un incremento en los niveles de colágeno del tipo IV en las células. La producción del colágeno tipo IV se midió en células mesangiales de ratón. Los controles (crecidos con 10% de glucosa) produjeron 300 ng de colágeno del tipo IV por 10,000 células, mientras que las células tratadas con fructosalisina (5 o 10 mM de fructosalisina con 10 mM de glucosa) produjeron 560 y 1100 ng/10,000 células.

EJEMPLO 22 Inhibición de 30G ai inhibir Amadorasa mARN y proteina La síntesis de 3DG puede inhibirse al inhibir los componentes de la trayectoria enzimática que lleva a su síniesis. Esto puede realizarse en diversas maneras. Por ejemplo, la enzima que lleva la síntesis de 3DG, denominada amadorasa en la presente (una fructosamina-3-cinasa) puede inhibirse al actuar usando un compuesto como se describe antes, pero también puede inhibirse al bloquear la síntesis de su mensaje o proteína o al bloquear la misma proteína, diferente de con un compuesto, como se describió antes. La síntesis y función de amadorasa mARN y proteína pueden inhibirse usando compuestos o moléculas tales como inhibidores de transcripción o transducción, anticuerpos, mensajeros antisentido u oligónucleótidos, o inhibidores competitivos.

Secuencias de ácidos nucleicos y proteínas Lo siguiente representa la secuencia de 988 bp de ADN derivadas de m ARN para amadorasa (fructosamina-3-cinasa), No. de acceso NM_022158 (SEQ ID NO:1) (ver Figura 8): 1 cgtcaagctt ggcacgaggc catggagcag ctgctgcgcg ccgagctgcg caccgcgacc 61 clgcgggcct tcggcggccc cggcgccggc tgcatcagcg agggccgagc ctacgacacg 121 gacgcaggcc cagtgtícgt caaagtcaac cgcaggacgc aggcccggca gatgtíígag 181 ggggaggígg ccagccígga ggccctccgg agcacgggcc tgglgcgggl gccgaggccc 241 aígaagglca tcgacctgcc gggaggtggg gccgcctííg ígatggagca tíígaagaíg 301 aagagcííga gcaglcaagc aícaaaactt ggagagcaga íggcagaííí gcaícíttac 361 aaccagaagc tcagggagaa gttgaaggag gaggagaaca cagtgggccg aagaggígag 421 ggtgcígagc cícaglalgt ggacaagílc ggclíccaca cggtgacgtg cígcggcttc 481 atcccgcagg tgaaígagtg gcaggaígac íggccgaccl ttítcgcccg gcaccggclc 541 caggcgcagc íggacclcat ígagaaggac íatgcígacc gagaggcacg agaactctgg 601 tcccggctac aggtgaagat cccggatctg tttígtggcc lagagaílgt ccccgcgttg 661 ctccacgggg atclclggtc gggaaacgtg gclgaggacg acgíggggcc caííaíttac 721 gacccggcíí ccíícíaígg ccaííccgag ítígaactgg caatcgcctí gaígtííggg 781 gggíícccca gaíccttcít caccgcclac caccggaaga tccccaaggc íccgggcttc 841 gaccagcggc tgctgcícía ccagcígfíí aacíacctga accactggaa ccactlcggg 901 cgggagtaca ggagccctíc cíígggcacc algcgaaggc ígclcaagla gcggccccíg 961 cccfcccííc cccígtcccc gíccccgl La siguiente representa la secuencia de residuos de 309 aminoácidos de amadorasa humana (fruclosamina-3- cinasa), No. de acceso NP_071441 (SEQ ID NO:2) (ver Figura 9): 1 meqllraelr taílrafggp gagcisegra ydídagpvfv kvnrrtqarq mfegevasle 61 alrstglvrv prpmkvidlp gggaafvmeh Ikmkslssqa sklgeqmadl hlynqklrek 121 Ikeeenívgr rgegaepqyv dkfgfhlvíc cgfipqvnew qddwplffar hrlqaqldli 181 ekdyadrear elwsrlqvki pdlfcgleiv pallhgdlws gnvaeddvgp iiydpasfyg 241 hsefelaial mfggfprsff íayhrkipka pgfdqrllly qlfnylnhwn hfgreyrsps 301 Igtmrrllk Las secuencias identificadas antes fueron enviadas por Delpierre el al. (2000, Diabeíes 49:16227-1634). Los datos de secuencias de Szwergold et al. (2001 , Diabetes 50:2139-2147) están en acuerdo excelente con aquellas de Delpierre et al. Por ejemplo, la secuencia de proteína deducida por Szwergold eí al. (2001 , Diabetes 50:2139-2147) es idéntica con la secuencia de fructosamina-3-cinasa humana clonada de Delpierre et al. (2000, Diabetes 49:16227-1634) en 307 de 309 residuos de aminoácidos. Entonces, la confianza en las secuencias publicadas de cualquier grupo no debe ser un problema, no obstante, para asegurar que no surja ningún problema cuando se usa una secuencia de esta proteína, sólo se usarán aquellas porciones de la secuencia que no son diferentes entre las dos secuencias publicadas.

EJEMPLO 23 Presencia de Azúcares AB<Fa°Dicarbonilo @n Sudor Como se describe en la presente, los azúcares alfa-dicarbonilo están presentes en la piel, pero no se había determinado su presencia en el sudor. Una de las funciones de la piel es actuar como un órgano excretor, por lo tanto, se determinó si los azúcares alfa-dicarbonilo son excretados en sudor. Se analizaron muestras de sudor humano para la presencia de 3DG, como se describió antes. Las muestras de cuatro sujetos fueron obtenidas y se determinó el 3DG estaba presente en niveles de 0.189, 2.8, 0.312, and 0.11 µM, respectivamente. Por lo tanto, los resultados demostraron la presencia de 3DG en sudor.

EJEMPLO 24 Efectos de DYH 12 (3-0- etiB sorbitoBlisina]) en Ba Elasticidad d® Ba Piel La administración de DYN 12, un inhibidor de amadorasa de molécula pequeña, redujo los niveles de 3DG en el plasma de animales diabéticos y no diabólicos (Kappler el al., 2002, Diabetes Technol. Ther., Winíer 3:4:606-609). Los experimentos se desarrollaron para determinar los efectos de DYN 12 en la pérdida de la elasticidad de la piel asociada con diabetes. Para este propósito, dos grupos de ratas diabéticas STZ y los grupos de ratas normales se sometieron a tratamiento con DYN 12 o salina. Un grupo de ratas diabéticas STZ (n=9) recibió diariamente inyecciones cutáneas de DYN 12 a 50 mg/kg por ocho semanas, así como un grupo de ralas normales (n=6). Un grupo de control de ratas diabéticas (n=10) y un grupo de ratas normales (n=6) recibieron salina en lugar de DYN 12. Una rata se retiró del grupo diabético de DYN 12 después de 2 semanas porque sus lecturas de glucosa en sangre fueron inconsistentes (muy bajas) con otras ratas diabéticas. Un procedimiento no invasivo con base en CyberDERM, Inc. tecnología que uíiliza a un dispositivo de medición de elasticidad de la piel se usó para probar los efectos de DYN 12 en el tratamienío de la elasíicidad de la piel. El procedimienío proporciona medición no invasiva de la elasticidad de la piel con base en la cantidad de jalón a vacio requerido para desplazar la piel. Una sonda de copa de succión se adhiere a 1 a de piel rasurada para formar un sello hermético. Entonces, se aplica vacío al área de la piel deníro de la copa de succión hasía que la piel se desplaza pasando un sensor localizado al interior de la sonda. De conformidad, mientras más presión se requiere para desplazar la piel, menos elástica es la piel.

Los datos demuestran que después de ocho semanas de íraíamienío la elasíicidad de la piel en raías diabéticas traladas con DYN 12 fue mayor que la elasticidad de la piel en los animales diabéticos que fueron tratados con salina. Como se observa en la Figura 12, la cantidad de la presión requerida para desplazar la piel de ratas diabéticas traladas con salina (7.2 +/- 3.0 kPA) fue aproximadamente 2 a 2.25 veces mayor que la presión requerida para desplazar la piel de animales diabéticos traíados con DYN 12 (3.2 +/- 1.2 kPA). También, el valor de elasticidad observado en las ratas diabéticas tratadas con DYN 12 no fue estadísticamente diferente del valor encontrado en ratas no diabéticas tratadas con salina (p=0.39) (Cuadro E). Entonces, el resultado del tratamiento de animales diabéticos con DYN 12, un inhibidor indirecto de 3DG, fue una piel con mayor elasticidad que la piel en animales diabéticos que solameníe recibieron salina.

CUADRO E Análisis Estadístico y Comparación de Grypos Los datos anteriores demuestran que la adminisíración de DYN 12 a ralas diabéticas evitó la pérdida de la elasticidad de la piel (por ejemplo, esclerosis y estrechamiento de la membrana basal de la piel) que se observa típicamente en ratas diabéticas no íraíadas, lo que evidencia que el exceso de 3DG encontrado en diabéticos es la causa de la pérdida de la elasticidad. Los dalos descritos en la presente indican además que la reducción de los niveles de 3DG también pueden servir para mantener la elasticidad de la piel en individuos normales. Las mediciones elasticidad de la piel íambién fueron tomadas en los sujetos se prueba como se describió antes, pero sin sedar a los animales de prueba antes de la medición. La Figura 13 ilustra las mediciones elasticidad de la piel tomadas en la pierna posterior de los sujetos de prueba mientras que los sujetos estaban despiertos y estaban restringidos por un lécnico. En eslos experimentos, los animales pelearon fuertemente a la restricción y los resultados son diferentes. Los animales diabéticos sin tratamiento del fármaco mostraron menos habilidad para "separarse" de la copa de succión y por lo tanto mostraron menos "resistencia al jalado". Por otro lado, tanto los animales diabéticos que recibieron fármaco y los animales normales tuvieron una gran capacidad para separarse de la copa de succión, y ambos grupos de animales mostraron rigidez y mayor tensión muscular. Esto indica que la inhibición de la enzima, y más probablemente, la inactivación de 3DG, resulta en la escasez del deterioro de microcirculación y neuro deterioro que tipifica la condición diabética.

Nivel de 3DG en escBeroderma de piel Se ha determinado, de acuerdo con los métodos descritos previamente en algún lugar en la presente, que la piel normal tuvo las siguientes concentraciones de 3DG (dato de numerosos sujetos): 0.9 µM, OJ µM, y 0.6 µM. numerosas muestras de la piel de numerosos pacieníes con escleroderma fueron ensayados de manera similar y tuvieron los siguientes niveles de 3DG: 15 µM, 130 µM , y 3.5 µM. de conformidad, estos datos se moslraron que el nivel de 3DG en la piel de pacientes con escleroderma es significativamente más elevado en comparación con el nivel de 3DG de la piel de humanos normales.

EJEMPLO 28 Formulación de un sistema de suministro de crema de fliposoroa 23.9 gramos de Concentrado de BioCreme de BioChemica International Inc. se mezclaron con 2.9 gramos de mantequilla de cacao, 1.4 gramos de mantequilla de karité, 2.2 gramos de aceite de aloe, 1.1 gramos de vitamina E, 3.7 gramos de glicerol, 51 gramos de agua, 1.1 gramos de dimeticona y 10.8 gramos de Naíipide II que contenía 1 gramo de arginina-HCI y 1 gramo de meglumina-HCI.

EJE PLO 27 Se condujo un esíudio a ciegas con 9 adultos voluntarios que tenían 2- 10% de su área de superficie corporal afectada con psoriasis. Entre 2 y 4 siíios afecíados con psoriasis por cada voluntario se seleccionaron para el tralamienío; sólo un tipo de crema se usó en cada voluntario. Los voluntarios se dividieron en 3 grupos de 3 voluntarios cada uno, y los sitios afectados en los voluntarios en cada grupo se trataron con aplicaciones dos veces diariamente de una de las siguientes cremas: una crema de base que contenía ácido salicílico (1.9 %) ("Crema SA"); 2) una crema de base que contenía ácido salicílico (1.9 %) y meglumina (5.5%) y arginina (3.8%) ("Crema SAMA"); o 3) una crema de base que contenía meglumina (5.5%) y argínina (3.8%) ("Crema MA"). Un clasificador experto se uso para examinar las áreas de la piel. Las evaluaciones se realizaron al inicio del estudio después de 3 semanas con respecto a: A. Eritema (0= no rojo, 1 = rojo leve, 2= coloración roja, 3= coloración roja muy brillante, 4= coloración rojo profundo); B. Sequedad (0= sin sequedad/escamas, 1 = escamas finas cubriendo parcialmente las lesiones, 2= escamas finas a gruesas cubriendo la mayor parte o toda la lesión, 3= predominio de escamas gruesas, no persistentes cubriendo la mayor parte o toda la lesión, 4= escamas gruesas, espesas, persistentes sobre la mayor parte de las lesiones, superficie rugosa); C. Induración (0= sin evidencia de elevación de placa, 1 = elevación de placa ligera pero definida, 2= elevación de placa moderada con bordes rugosos o inclinados, 3= elevación de placa marcada lípicamente con bordes duros o agudos, 4= elevación muy marcada de placa típicamente con bordes muy agudos); D. Prurito (0= sin comezón, 1 = comezón ligeramente molesta, 2= comezón molesta, pero sin pérdida de sueño, 3= comezón constante que causa una molestia intensa y pérdida de sueño). Los valores medios para la puntuación del clasificador experto en la semana 0 (inicio del estudio) y después de 3 semanas se muestra en el Cuadro F. Una prueba t estadística se uso para determinar la significancia de cualquier diferencia entre las medias. Los valores en negritas indican p<0.05. Los voluntarios tralados con la Crema SA exhibieron una mejora esladística con respeclo al eritema, pero no mejora estadística con respecto a sequedad, induración, o prurito. Los voluntarios tratados con la Crema SAMA exhibieron un beneficio estadístico para eritema, induración y prurito, y alcanzaron una significancia para sequedad. Los voluntarios tratados con la Crema MA exhibieron un beneficio estadístico para sequedad, induración, y prurito, y exhibieron una mejora no estadística de eritema. La Crema MA exige beneficios claros sobre la Crema SA con respecto a sequedad, induración y prurito. La Crema SAMA proporcionó beneficios claros sobre la Crema SA con respecto a sequedad, induración y prurito.

CUADRO F Resultados del estudio de Psoriasis sobre un periodo d® tiempo de 3 semanas EJEMPLO 28 Identificación y coantificación de fructosalisina-3- fosfato páncreas de rata Una rata macho Sprague-Dawley de 250 g se sacrificó con una sobredosis de pentobarbital y se removió el páncreas y se congeló rápidamente en nitrógeno líquido. El páncreas se pulverizó en nitrógeno líquido con 5 µmoles de ácido fenilfosfónico (un estándar interno para cuantificación) y seis volúmenes de ácido perclórico al 5% que contenía 10 mmoles/l de ácido trans-l ^-diaminocicIohexano-N^.N'.N'-tetraacético. El lodo resultante se centrifugó a 8,000g a 4o C por 10 min. El sobrenadante se neutralizó con KOH y se centrifugó de nuevo para remover el precipilado de percloraío de potasio. El sobrenadante se liofilizó a un polvo y se reconsíiluyó en 1-ml de D 0 a pH 7.5 por medición de RMN. El especlro de 31P-RMN se obíuvo en una sonda de 10-mm a 161.98 MHz en un espectrómetro Bruker AM 400 usando pulsos de 60° y una repetición de segundo tiempo de 1.5. El espectro se adquirió en bloques de 20,000 exploraciones y se referenció como glicerofosfocolina ajustado a 0.49 ppm. La cuantificación de la resonancia de FL3P se determinó por integración del área de pico, ajustando el área del ácido fenilfosfónico igual a 5 umoles. El FL3P resuena a 6.23 ppm y se identificó por siembra con maíerial autentico así como por reducción con borohidruro de sodio a sorbitollisina 3-fosfalo (5.95 ppm) y maniíollisina 3-fosfato (5.85 ppm). La concentración de FL3P en el páncreas fue 28 µM.

Las cremas íerapéulicas esíablecidas en los Ejemplos Experimeníales 29-36 contienen 3-5.5% de meglumina y 3-4% de arginina como los ingredienles acíivos.

EJEMPLO 2S loriases Cinco adultos con psoriasis aplicaron una crema de base que contenía meglumina y arginina y experimentaron una inflamación y sequedad disminuida.

EJEMPLO 30 Eczema Una niña de siete años de edad usó una crema de base que contenía meglumina y arginina y experimentó una inflamación, comezón y sequedad disminuida.

EJEMPLO 31 Dos adultos femeninos con artritis usaron la aplicación diaria de una crema de base que contenía meglumina y arginina y experimentaron alivio del dolor, hinchazón y suavidad de articulaciones.

EJEMPLO 32 Dolor de cabeza de seno Un adulto masculino y femenino con dolores de cabeza centrados alrededor de las áreas facial y froníal se aplicará una crema de base que contenía meglumina y arginina a las áreas afectadas. Ambos experimentaron el alivio del dolor aproximadamente 30 minutos después de la aplicación.

EJEMPLO 33 Una mujer adulta con acné facial se aplicó una crema de base que contenía meglumina y arginina a las áreas de piel afectadas y experimentó una disminución en el número/severidad de las lesiones, y una suavidad y lisura de la piel incremenladas.

EJEMPLO 34 Brritación por rastriBBo Dos hombres adultos con irritación por rastrillo facial se aplicaron una crema de base que contenía meglumina y arginina inmediaíameníe después del afeitado y experimentaron una disminución en la coloración roja de la piel.

EJEMPLO 35 Un adulto femenino con erupción en la piel debida a policilemia usó una crema de base suplemenlada con meglumina y arginina y experimento una inflamación y comezón disminuida.

EJEMPLO 36 Prueba de Brritacién de Ba Piel con LauróB Sulfato de Sodio Un esfudio clínico se desarrolló para deíerminar la efecíividad de una crema de base y una crema de base que contenía meglumina y arginina para reducir la coloración roja de la piel (inflamación) y reparar el daño a la piel usando una prueba de curación de herida (mejora de la irritación) con lauril sulfato de sodio (SLS). El protocolo incluyó autoevaluación es de los participaníes del esíudio, evaluaciones de clasificadores expertos y mediciones instruménteles de pérdida de agua por evaporación y enrojecimiento. Este fue un estudio simple a ciegas, controlado, aleatorizado. Los antebrazos volares de un grupo de doce mujeres voluníarias eníre 18-55 años de edad se expusieron a una solución irrilaníe (0.3 ml de solución de lauril sulfato de sodio al 0.5%) en seis sitios (tres siíios en cada brazo) por 18-24 horas. Los cuatro sitios que fueron los más irritados se seleccionaron para traíamiento adicional con un aplicación dos veces por día de cualquiera de una base de crema (Producto A) o una crema que contenía 3% de meglumina y 3% de arginina (Producío B) por 7 días. Los dos sitios remanentes no fueron tratados. A los 1 , 2, 3, 4, 7 y 8 días después de la aplicación de SLS, las áreas de la piel fueron evaluadas usando un Cromámetro Minolía (para medir la intensidad del color), un experto clasificador (usando una escala de 8 puntos), y un sistema DermaLab Modular con Sonda TEWL (para medir la pérdida de agua). En el oclavo día de tratamiento, los participantes llenaron un cuestionario de autoevaluación. Las respuestas se establecen en el Cuadro G.

Resultados de pruebas de crema de piel EJEMPLO 37 Prueba de Curación de Heridas Una prueba con voluntarios humanos comparó las propiedades de curación de heridas de una preparación tópica como se describe como se describe en cualquier lugar de la presente ("Crema B") a una crema de base que carecía de meglumina-HCL y arginina ("Crema A"). Seis sitios en los antebrazos volares (3 en cada brazo) de 15 voluníarios femeninos se expusieron en el Dia 0 a una solución irritante (0.5% de lauril sulfato de sodio, SLS) bajo oclusión por 18-24 hr. En el Dia 1 , los cuaíro siíios del brazo con el mayor grado de similitud de daño de 12 de los voluntarios que experimeníaron un efeclo de ¡rrilación significativa del SLS se seleccionaron para la fase de tratamiento del estudio. Se removieron los parches y los panelistas entonces tuvieron la aplicación de la crema de prueba en los cuatro sitios seleccionados dos veces por día por 7 días. Los otros siíios del antebrazo no se trataron de manera que podían usarse como controles. El grado de irritación y velocidades de curación se basaron en observaciones clínicas de un clasificador experto para eritema (usando una escala de 10 puntos), mediciones insírumentales usando un Cromámetro Minolta (para medir enrojecimiento) y un medidor DermaLab (para medir Pérdida de Agua Evaporativa Transdérmica (TEWL)) en el día 0 (antes de la exposición a SLS), y en los días 1 , 2, 3, 4, 7, y 8. Las Figuras 16 y 17 mueslran los valores promedio para las evaluaciones de eritema (enrojecimiento), y la Figura 18 muestra los valores promedio para la pérfida de agua evaporativa total (TEWL) en los días 1 , 2, 3, 4, 7 y 8 después del tratamiento de SLS. Estos resultados del estudio demostraron que la Crema B mejoró la reparación del daño a la piel por el detergente. Aunque no hubo diferencias de corte claras en las etapas tempranas del estudio, a partir del Día 3 en adelante hubo diferencias significativas enfre la Crema A y la Crema B. La Crema B fue más efecíiva en reducir eritema especialmente con respecto a evaluaciones visuales hechas por el Clasificador Experto (Figura 16). También se determinó que la Crema B mejoró la restauración de la barrera del estrato córneo que se había interrumpido por la exposición a SLS más que la Crema A (Figura 18).

EJEMPLO 30 Incremento En Los Niveles de Bsoprostano En Ratas En Una Poeta Los niveles elevelados de 3DG resullaníes de una dieta glucada llevó a un incremento de dos veces en el ésíeres oxidativo medido por los niveles urinarios de isoporstano. Los isoprosíanos son moléculas similares a la proslaglandina que se producen por peroxidación mediada por radicales libres de lipoproíeínas. Los isoprostanos urinarios se usan como una medición no invasiva de esteres oxidativo in vivo. Diez ratas fueron alimentadas con una dieta que contenía 3% de proteína glucada por 18 semanas. Un cohorte de conírol de 10 raías se colocó con comida de conírol por el mismo periodo de tiempo. Se usó una ELISA comparativa (Oxford Biochemicals) para medir los niveles de isoprostano urinarios de cada rata. Los niveles urinarios de 3DG se determinaron como se describió en el Ejemplo 5. Todos los valores se normalizaron a los niveles de creatinina en la orina para conírolar el volumen de orina. Como se muesíra en el Cuadro H, los niveles de isoprostano de ratas en dieta glucada por 18 semanas (niveles de 3DG incremeníados) fueron dos veces el nivel de aquel para raías con comida normal. La significancia estadística fue significancia de 0.005.

NiveBes de 3DG e isoprostano en orina de ratas en una dieta de control EJEMPLO 3S Localización In unofluorescente de 3DG-BmidazoBona @n Piel Dnfflamads La erupción polimórfica de embarazo es una condición de la piel caracterizada por inflamación, comezón y enrojecimiento que ocurre predominantemente en el área abdominal de algunas mujeres en el íercer írimeslre del embarazo. Se obíuvieron biopsias de piel del área inflamada de un individuo con erupción polimórfica de embarazo y en un individuo con piel normal. Secciones delgadas se incrusíaron y prepararon para inmunofluorescencia como sigue. Las secciones se desparafinizaron con dos íraíamieníos de xileno por 10 minuíos cada una, y dos tratamientos con etanol por 10 minutos cada una. Las secciones se bloquearon con suero de cabra al 5% diluido en PBS por 15 minutos y se lavaron una vez con PBS. Anticuerpo monoclonal de ratón a 3DG-imidazolona (distribuido por Cosmo Bio para TransGenic Inc.) se diluyó 1 :10 en PBS y se aplicó a las secciones por 40 minutos a lemperaíura ambiente en una cámara humidificada. Las secciones se lavaron con PBS tres veces por 2 minutos cada una. El anticuerpo cabra-anli-raíón Cy-2- conjugado (Jackson Immunologicals) se diluyó 1 :50 en PBS y se aplicó a las secciones por 40 minulos en una cámara humidificada a lemperaíura ambiente. Las secciones fueron lavadas con PBS tres veces por 2 minutos cada uno. Las secciones se montaron en portaobjetos con Medio VectraShield Mounting (Vectra Laboratories) y se observaron con un microscopio floreciente Nikon E600. La misma muesíra de sección de piel de la erupción polimórfica de embarazo se íiñó con hematoxilina y eosina como sigue. La sección se tiñó con hematoxilina por 5 minutos, se lavó con agua por 3 minutos, se trató por 30 segundos con alcohol ácido al 1 % (495 ml de 70% de etanol, 5 ml de HCl 10M), se lavó con agua por 3 minutos, se trató con amortiguador de Scoíí 30 (2 g de NaHC03, 20g de MgS04.7H20 se llevó a 1 litro con H20) por 30 segundos, se lavó con agua corriente por 3 minutos, se aprobó con eosina por 1 minulo, 95% de etanol por 1 minuto dos veces, y finalmente con 100% de etanol por 1 minuto. Las secciones se aplicaron a portaobjetos con una gota de Cryoseal 60 (Richard-Alien Scientific), una cubierta deslizante colocará sobre ellos, y se observó con un microscopio de campo brillante.

Las Figuras 19A-19C mueslran los patrones inmunofluorescentes de piel normal (Figura 19A) y piel de 1 a inflamada que un individuo con erupción polimórfica de embarazo (Figura 19B). La Figura 19C muesíra el teñido de hemaíoxilina y eosina de la sección de piel mosírada en la Figura 19B. Palrones similares de 3DG-imidazolona se obíuvieron con secciones de piel de áreas inflamadas de piel de un individuo con escleroderma y un individuo con lupus eritomatoso. Estos resultados indican que las condiciones en las cuales hay un nivel elevado de 3DG pueden tratarse usando uno o más compuestos que inhiben directamente 3DG. Esto es, un compuesto que puede reducir la concentración de 3DG en un sitio, romper o eliminar 3DG, o efectivamente inhibir la función o actividad de 3DG puede servir para íratar una enfermedad o trasíorno mediado por una concenlración elevada de 3DG. Los compuesíos y métodos para dicho tratamiento se describen a detalle en otras partes aquí. Las descripciones de cada y todas las patentes, soliciíudes de patente, y publicaciones citadas en la presente se incorporan en la presente para referenci en su totalidad. Mientras que la intención se ha descrito con referencia a modalidades específicas, será aparente que otras modalidades y variaciones de esta invención pueden diseñarse por otros expertos en la íécnica sin separarse del verdadero espíriíu y alcance de la invención. Las reivindicaciones anexas se proyeclan para considerar incluir íodas dichas modalidades y variaciones equivalentes.

Claims (1)

1. IOVEDAD DE LA INVENCIÓN 1.- El uso de una composición que comprende un inhibidor de una írayecíoria enzimáíica que produce un azúcar alfa-dicarbonilo en el mamífero para la fabricación de un medicamenío úíil para el Iralamiento de una condición inflamatoria en un mamífero, en donde el medicamento reduce o elimina el azúcar alfa-dicarbonilo en un sitio en el mamífero, dicho sitio estando afecíado por la condición inflamatoria, con lo cual se traía la condición inflamatoria. 2 - El uso de una composición que comprende un inhibidor de una trayecíoria enzimáíica que produce un azúcar alfa-dicarbonilo en el mamífero en la fabricación de un medicamento útil para el íratamiento de dolor en un mamífero, en donde el medicamento reduce o elimina el azúcar alfa-dicarbonilo en un sitio en el mamífero, dicho siíio esíando afecíado por el dolor, con lo cual se írala el dolor. 3.- El uso de una composición que comprende un inhibidor de una írayectoria enzimáíica que produce un azúcar alfa-dicarbonilo en el mamífero, en la fabricación de un medicamenío úíil para el tratamiento de comezón en un mamífero, en donde el medicamento recue o elimina el azúcar alfa-dicarbonilo en un sitio en el mamífero, dicho sitio estando afectado por la comezón, con lo cual se trata la comezón. 4.- El uso como se reclama en la reivindicación 1 , en donde la composición comprende un inhibidor de una írayecloria de Amadorasa. 5.- El uso como se reclama en la reivindicación 4, en donde la composición comprende un inhibidor de frucíosamina cinasa. 6.- El uso como se reclama en la reivindicación 1 , en donde el medicamento es útl para la reducción o eliminación de 3DG en el sitio en el mamífero afectado por la condición inflamatoria. 7.- El uso como se reclama en la reivindicación 1 , en donde el mamífero es un humano. 8.- El uso como se reclama en la reivindicación 1 , en donde la condición inflamatoria es escleroderma. 9.- El uso como se reclama en la reivindicación 1 , en donde la condición inflamatoria es eczema. 10.- El uso como se reclama en la reivindicación 1 , en donde el medicamento se adapta para ser administrable a un mamífero por una ruta tópica, oral, recial, vaginal, intramuscular, subcutánea, transdérmica o intravenosa, o a través del consumo de un producto nutricéutico por el mamífero. 11.- El uso como se reclama en la reivindicación 1 , en donde la condición inflamatoria se selecciona del grupo que consiste de condiciones alérgicas, enfermedad de Alzheimer, anemia, agiogénesis, estenosis de válvula aórtica, ateroesclerosis, trombosis, artritis reumaíoide, osíeoartritis, goía, artritis gotosa, pseudogota aguda, artritis golosa aguda, inflamación asociada con cáncer, falla cardiaca congestiva, cistitis, fibromalgia, fibrosis, glomerulonefritis, inflamación asociada con enfermedad gastrointestinal, enfermedades inflamatorias de intestino, falla de riñon, glomérulonefritis, infarto al miocardio, enfermedades oculares, pancreatitis, psoriasis, lesiones o daños por reperfusión, trastornos respiratorios, reestenosis, choque séptico, choque endotóxico, urosepsis, trasíorno cerebrovascular, complicaciones quirúrgicas, lupus eriíematoso sistémico, erupción polimórfica del embarazo, arteriopatia asociada con transplantes, reacción injerto coníra hospedero, rechazo de aloinjerto, rechazo de transplante crónico, vasculilis, y específicos relacionados con la condición, en donde puede surgir y como la composición pudiera ser administrable. 12.- El uso como se reclama en la reivindicación 2, en donde el dolor se selecciona del grupo que consiste de arácnoidiíis, artriíis, osleoartritis, artriíis reumaíoide, espondilolisis anquilosante, goía, íendoniíis, ciáíica bursiíis, espondilolistesis, radiculopatía, dolor por quemadura, dolor por cáncer, dolores de cabeza, migrañas, cefalea en racimos, dolores de cabeza por tensión, neuralgia Irigeminal, dolor miofacial, dolor neuropático, dolor asociado con neuropatía diabética, sindrome de distrofia simpática de reflejo, dolor de extremidad fantasma, dolor post amputación, íendoniíis, íenosinovitis, neuralgia postherpética, dolor asociado con Herpes zoster, síndrome de dolor central, dolor asociado con trauma, vasculitis, dolor asociado con infecciones, tumores de piel, quistes, dolor asociado con tumores asociados con neurofibromastosis, dolor asociado con distensiones, moretones, dislocaciones, fracíuras, y dolor debido a la exposición a producios químicos 13.- El uso como se reclama en la reivindicación 3, en donde la comezón es el resulíado de una condición seleccionada del grupo que consisle de comezón cutánea, comezón neuropática, comezón neurogénica, comezón del lipo mixto, y comezón psicogénica. 14.- El uso como se reclama en la reivindicación 11 , en donde el cáncer se selecciona del grupo que consiste de NSCLC, cáncer ovárico, cáncer pancreático, carcinoma de mama, carcinoma de colon, carcinoma de recto, carcinoma de pulmón, carcinoma orofaríngeo, carcinoma hipofaríngeo, carcinoma esofágico, carcinoma de estómago, carcinoma de páncreas, carcinoma de hígado, carcinoma de vesícula biliar, carcinoma del ducto biliar, carcinoma del intestino delgado, carcinoma del tracto urinario, carcinoma de riñon, carcinoma de vejiga, carcinoma de urotelio, carcinoma del tracto genital femenino, carcinoma de cérvix, carcinoma de útero, carcinoma de ovarios, coriocarcínoma, enfermedad trofoblástica de gestación, carcinoma del tracto genital masculino, carcinoma de próstata, carcinoma de vesículas seminales, carcinoma de testículos, tumores de células germinales, carcinoma de glándulas endocrinas, carcinoma tiroideo, carcinoma adrenal, carcinoma de glándula pituitaria, carcinoma de piel, hemangiomas, melanomas, sarcomas, sarcoma de huesos y tejido suave, sarcoma de Kaposi, tumores de cerebro, tumores de los nervios, tumores de los ojos, tumores de las meninges, astrocitomas, gliomas, glioblastomas, retinoblastomas, neuromas, neuroblasíomas, Schwannomas, meningiomas, lumores sólidos que surgen de malignidades hematopoiéticas, y tumores sólidos que surgen de linfomas. 15.- El uso como se reclama en la reivindicación 14, en donde los tumores sólidos que surgen de malignidades hematopoiélicas se seleccionan del grupo que consiste de leucemias, cloromas, plasmacitomas y las placas y tumores de micosis fúngicas y linfoma/leucemia de células T cutáneas. 16.- El uso como se reclama en la reivindicación 11 , en donde la enfermedad gastrointestinal se selecciona del grupo que consiste de úlceras añosas, faringitis, esofagitis, úlcera péptica, gingivitis, periodoníííis, mucositis oral, mucositis gastrointestinal, mucositis nasal, y proctitis. 17.- El uso como se reclama en la reivindicación 11 , en donde la enfermedad inflamatoria de intesíino se selecciona el grupo que consiste de enfermedad de Chron, coliíis ulcerativa, colitis indeterminada, enterocolitis necrotízaníe, y coliíis infecciosa. 18.- El uso como se reclama en la reivindicación 11 , en donde la enfermedad ocular se selecciona del grupo que consisíe de conjuntivitis, retinitis, y uveítis. 19 - El uso como se reclama en la reivindicación 11 , en donde el trastorno respiratorio se selecciona del grupo que consisle de asma, lesión de pulmón dependiente de fagocito mononuclear, fibrosis pulmonar idiopática, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, síndrome de distrés respiratorio adulto, síndrome de pecho agudo en enfermedad de células drepanocitosas, fibrosis cística. 20.- El uso como se reclama en la reivindicación 1 , en donde dicha composición comprende además un fármaco anti inflamatorio no esferoideo (NSAID). 21.- El uso como se reclama en la reivindicación 20, en donde dicho fármaco aníi inflamaíorio no esíeroideo (NSAID) se selecciona del grupo que consisíe de ibuprofen (ácido 2-(isobuíilfenil)-propiónico); melolrexalo (ácido N-[4-(2,4 diamino 6-pteridinil-melil]meíilamino]benzoil)-L-glutámico); aspirina (ácido acetilsalicílico); ácido salicílico; difenhidramina (clorhidrato de 2-(difenilmetoxi)-NN-dimetiletilamina); naproxen (ácido 2-naflalenacéíico, 6-metoxi-9-metil-, sal de sodio, (-)); fenilbutazona (4-butil-1 ,2-difenil-3,5-pirazolidindiona); ácido sulindac-(2)-5-fuoro-2-metil-1-[[p- (meíilsulfinil)fen¡l]melilen-]-1 H-indeno-3-acélico; ácido diflunisal (2',4',-difluoro-4-hídroxi-3-bifenilcarboxílico; piroxicam (4-hidrox¡-2-metil-N-2-pírid¡n¡l-2H-1 ,2-benzotiazina-2-carboxamida 1 ,1-dióxide, un oxicam; indometacin (ácido 1-(4-clorobenzoil)-5-meíoxi-2-melil-H-indol-3-acélico); meclofenamaío sódico (sal de sodio del ácido N-(2,6-dicloro-m-lolil) aníranílico, monohidralo); celoprofen (ácido 2-(3-benzoilfeníl)-propiónico; tolmetin sódico (1-metil-5-(4-metilbenzoil- 1 H-pirrolo-2-acetato sódico dihidrato); diclofenac sódico (sal monosódica del ácido 2-[(2,6-diclorofenil)amino]bencenoático); sulfato de hidroxicloroquina (2-{[4-[(7-cloro-4-quinolil) amino]pentil]etilamino}etanol sulfato (1 :1); penicillamina (3-mercapto-D-valina); flurbiprofen (ácido [1 ,1-bifenil]-4-acético, 2-fluoro- alfametil-, (+-.)); celodolac (ácido 1-8-dietil-13,4,9, tetra hidropirano-[3-4-13]indolo-1 -acético; ácido mefenámico (ácido N-(2,3-xilil)antranílico; y clorhidrato de difenhidramina (clorhidrato de 2-dífenil meloxi-N, N-di-metiletamina). 22 - El uso como se reclama en la reivindicación 5, en donde el inhibidor de la fructosamina cinasa es un agente que inhibe la transcripción de un gen que codifica la fructosamina cinasa o transducción de un mARN que codifica la fructosamina cinasa. 23.- El uso como se reclama en la reivindicación 1 , en donde el compuesto es meglumina o sales de ésta. 24 - El uso como se reclama en la reivindicación 23, en donde la composición comprende además arginina. 25 - El uso como se reclama en la reivindicación 24 en donde el resultado proporcionado por el medicamento es mayor que el resultado aditivo de un traíamiento que usa meglumina sola y un tratamiento que usa arginina sola. 26 - El uso como se reclama en la reivindicación 1 , en donde el compueslo se selecciona del grupo que consisle de galactitol lisina, 3-desoxi sorbitol lisina, 3-desoxi-3-fluoro-xilitol lisina, 3-desoxi-3-ciano sorbitol lisina, 3-O-metil sorbitollisina, sorbitol lisina, mannitol lisina, sorbitol y xilitol. 27.- El uso como se reclama en la reivindicación 1 , en donde la composición comprende un compuesto que contiene cobre. 28.- El uso como se reclama en la reivindicación 27, en donde el compuesto que coníiene cobre se selecciona del grupo que consiste de un conjugado de cobre-ácido salicílico, un conjugado de cobre-péptido, un conjugado de cobre-aminoácido, y una sal de cobre. 29.- El uso como se reclama en la reivindicación 28, en donde el compueslo que conliene cobre se selecciona del grupo que consiste de un conjugado de cobre-lisina, y un conjugado de cobre-arginina. 30.- El uso como se reclama en la reivindicación 1 , en donde la composición comprende además un inhibidor de la función del azúcar alfa-dicarbonilo. 31.- El uso como se reclama en la reivindicación 30, en donde el azúcar alfa-dicarbonilo es 3DG. 32.- El uso como se reclama en la reivindicación 31 , en donde el inhibidor quela 3DG. 33.- El uso como se reclama en la reivindicación 31 , en donde el inhibidor destoxifica 3DG. 34.- El uso como se reclama en la reivindicación 30, en donde el inhibidor es un compuesto similar a N-metil-glucamina. 35.- El uso como se reclama en la reivindicación 34, en donde el inhibidor comprende meglumina o sales de ésta. 36.- El uso como se reclama en la reivindicación 35, en donde el inhibidor comprende además arginina. 37.- El uso como se reclama en la reivindicación 30, en donde el inhibidor de la función de azúcar alfa-dicarbonilo inhibe el entrelazamiento de proteínas. 38.- El uso como se reclama en la reivindicación 30, en donde el inhibidor de la función de azúcar alfa-dicarbonilo inhibe la formación de especies con oxígeno reactivo. 39.- El uso como se reclama en la reivindicación 30, en donde el inhibidor de la función de azúcar alfa-dicarbonilo inhibe apoptosis. 40.- El uso como se reclama en la reivindicación 30, en donde el inhibidor de la función de azúcar alfa-dicarbonilo inhibe mutagenicidad. 41.- El uso como se reclama en la reivindicación 30, en donde el inhibidor de la función de azúcar alfa-dicarbonilo inhibe la formación de proteínas modificadas de producto final de glucación avanzada. 42.- El uso como se reclama en la reivindicación 30, en donde el inhibidor es arginina o un derivado o modificación del mismo. 43.- El uso de una composición que comprende un inhibidor de un azúcar alfa-dicarbonilo en el mamífero en la fabricación de un medicamento útil para el tratamiento de una condición inflamatoria en un mamífero, en donde el medicamento reduce, elimina o inhibe la función del azúcar alfa-dicarbonilo en un sitio en el mamífero, dicho sitio estando afectado por la condición inflamatoria, con lo cual se trata la condición inflamatoria. 44.- El uso como se reclama en la reivindicación 43, en donde el medicamento es útil para la reducción, eliminación o inhibición de la función de 3DG en el sitio en el mamífero afeclado por la condición inflamatoria. 45.- El uso de una composición que comprende un inhibidor de un azúcar alfa-dicarbonilo en el mamífero en la fabricación de un medicamento útil para el tratamienío de dolor en un mamífero, en donde el medicamenlo reduce, elimina o inhibe la función del azúcar alfa-dicarbonilo en un siíio en el mamífero, dicho sitio estando afecíado por el dolor, con lo cual se íraía el dolor. 46.- El uso como se reclama en la reivindicación 45, en donde el medicamento es útil para la reducción, eliminación o inhibición de la función de 3DG en el sitio en el mamífero afectado por el dolor. 47.- El uso de una composición que comprende un inhibidor de un azúcar alfa-dicarbonilo en el mamífero en la fabricación de un medicamenío útil para el íralamiento de comezón en un mamífero, en donde el medicamento reduce, elimina o inhibe la función del azúcar alfa-dicarbonílo en un sitio en el mamífero, dicho siíio eslando afecíado por la comezón, con lo cual se írata la comezón. 48.- El uso como se reclama en la reivindicación 47, en donde el medicamento es útil para la reducción, eliminación o inhibición de la función de 3DG en el sitio en el mamífero afeclado por la comezón. 49.- El uso como se reclama en la reivindicación 43, en donde dicho mamífero es un humano. 50.- El uso como se reclama en la reivindicación 2, en donde la composición comprende un inhibidor de una trayectoria de Amadorasa. 51.- El uso como se reclama en la reivindicación 50, en donde la composición comprende un inhibidor de fructosamina cinasa. 52.- El uso como se reclama en la reivindicación 2, en donde el medicamento es úíil para la reducción o eliminación de 3DG en el sitio en el mamífero afeclado por el dolor. 53.- El uso como se reclama en la reivindicación 2, en donde el mamífero es un humano. 54.- El uso como se reclama en la reivindicación 2, en donde el dolor se debe a artritis. 55.- El uso como se reclama en la reivindicación 2, en donde el dolor se puede a cáncer. 56.- El uso como se reclama en la reivindicación 2, en donde el medicamenlo es adaptado para ser administrable a un mamífero por una ruta tópica, oral, recial, vaginal, intramuscular, subcutánea, transdérmica o intravenosa, o a través del consumo de un producto nutricéutico por el mamífero. 57.- El uso como se reclama en la reivindicación 2, en donde dicha composición comprende además un fármaco anti inflamatorio no esteroideo (NSAID). 58.- El uso como se reclama en la reivindicación 57, en donde dicho fármaco anti inflamatorio no esteroideo (NSAID) se selecciona del grupo que consiste de ibuprofen (ácido 2-(isobutilfenil)-propiónico); metotrexato (ácido N-[4-(2,4 diamino 6-pteridinil-metil]metilamino]benzoil)-L-glutámico); aspirina (ácido acetilsalicílico); ácido salicílico; difenhidramina (clorhidrato de 2-(difenilmetoxi)-NN-dimetiletilamina); naproxen (ácido 2-naftalenacélico, 6-meloxi-9-metil-, sal de sodio, (-)); fenilbutazona (4-butil-1 ,2-difenil-3,5-pirazolidindiona); ácido sulindac-(2)-5-fuoro-2-metil-1-[[p- (metilsulfinil)fenil]metilen-]-1 H-indeno-3-acético; ácido diflunisal (2',4',-difluoro-4-hidroxi-3-bifenilcarboxílico; piroxicam (4-hidroxi-2-metil-N-2-piridinil-2H-1 ,2-benzotiazina-2-carboxamida 1 ,1-dióxide, un oxicam; indometacin (ácido 1-(4-clorobenzoil)-5-meíoxi-2-metil-H-indol-3-acético); meclofenamaío sódico (sal de sodio del ácido N-(2,6-dicloro-m-tolil) antranílico, monohidrato); cetoprofen (ácido 2-(3-benzoilfenil)-propiónico; tolmetin sódico (1-melil-5-(4-metilbenzoil-1 H-pirrolo-2-acetato sódico dihidrato); diclofenac sódico (sal monosódica del ácido 2-[(2,6-diclorofenil)amino]bencenoático); sulfato de hidro?icloroquina (2-{[4-[(7-cloro-4-quinolil) amino]peníil]eíilamino}eíanol sulfato (1 :1); penicillamina (3-mercapío-D-valina); flurbiprofen (ácido [1 ,1-bifenil]-4-acético, 2-fluoro-alfamelil-, (+-.)); celodolac (ácido 1 -8-dietil-13,4,9, tetra hidropirano-[3-4-13]indolo-1 -acético; ácido mefenámico (ácido N-(2,3-xilil)aníranílico; y clorhidrato de difenhidramina (clorhidrato de 2-difenil meíoxi-N, N-di-metilelamina). 59.- El uso como se reclama en la reivindicación 51 , en donde el inhibidor de la fructosamina cinasa es un agente que inhibe la transcripción de un gen que codifica la fructosamina cinasa o transducción de un mARN que codifica la fructosamina cinasa. 60.- El uso como se reclama en la reivindicación 2, en donde el compueslos meglumina o sales de ésía. 61.- El uso como se reclama en la reivindicación 60, en donde en la composición comprende además arginina. 62.- El uso como se reclama en la reivindicación 61 , en donde el resultado proporcionado por el medicamento es mayor que el resulíado del tipo de un tralamienío usando meglumina sola y un tratamiento usando arginina sola. 63.- El uso como se reclama en la reivindicación 2, en donde el compuesto se selecciona del grupo que consiste de galactitol lisina, 3-desoxi sorbitol lisina, 3-desoxi-3-fluoro-xilitol lisina, 3-desoxi-3-ciano sorbitol lisina, 3-O-metil sorbitollisina, sorbitol lisina, mannitol lisina, sorbitol y xilitol. 64.- El uso como se reclama en la reivindicación 2, en donde la composición comprende un compuesto que contiene cobre. 65.- El uso como se reclama en la reivindicación 64, en donde el compuesto que contiene cobre se selecciona del grupo que consiste de un conjugado de cobre-ácido salicílico, un conjugado de cobre-péptido, un conjugado de cobre-aminoácido, y una sal de cobre. 66.- El uso como se reclama en la reivindicación 65, en donde el compuesío que contiene cobre se selecciona del grupo que consiste de un conjugado de cobre-lisina, y un conjugado de cobre-arginina. 67.- El uso como se reclama en la reivindicación 2, en donde la composición comprende además un inhibidor de la función del azúcar alfa-dicarbonilo. 68.- El uso como se reclama en la reivindicación 67, en donde el azúcar alfa-dicarbonilo es 3DG. 69.- El uso como se reclama en la reivindicación 68, en donde el inhibidor quela 3DG. 70.- El uso como se reclama en la reivindicación 68, en donde el inhibidor destoxifica 3DG. 71.- El uso como se reclama en la reivindicación 67, en donde el inhibidor es un compuesto similar a N-metil-glucamina. 72 - El uso como se reclama en la reivindicación 71 , en donde el inhibidor comprende meglumina, o sales de ésta. 73.- El uso como se reclama en la reivindicación 72, en donde el inhibidor comprende además arginina. 74.- El uso como se reclama en la reivindicación 67, en donde el inhibidor de la función de azúcar alfa-dicarbonilo inhibe el entrelazamiento de proteínas. 75.- El uso como se reclama en la reivindicación 67, en donde el inhibidor de la función de azúcar alfa-dicarbonilo inhibe la formación de especies con oxígeno reaclivo. 76.- El uso como se reclama en la reivindicación 67, en donde el inhibidor de la función de azúcar alfa-dicarbonilo inhibe apopíosis. 77.- El uso como se reclama en la reivindicación 67, en donde el inhibidor de la función de azúcar alfa-dicarbonilo inhibe mulagenicidad. 78.- El uso como se reclama en la reivindicación 67, en donde el inhibidor de la función de azúcar alfa-dicarbonilo inhibe la formación de proteínas modificadas de producto final de glucación avanzada. 79.- El uso como se reclama en la reivindicación 67, en donde el inhibidor es arginina o un derivado o modificación del mismo. 80.- El uso como se reclama en la reivindicación 3, en donde la composición comprende un inhibidor de una trayectoria de Amadorasa. 81.- El uso como se reclama en la reivindicación 80, en donde la composición comprende un inhibidor de fructosamina cinasa. 82.- El uso como se reclama en la reivindicación 3, en donde el medicamento es útil para la reducción o eliminación de 3DG en el sitio en el mamífero afectado por la comezón. 83.- El uso como se reclama en la reivindicación 3, en donde el mamífero es un humano. 84.- El uso como se reclama en la reivindicación 3, en donde la comezón es comezón cutánea. 85.- El uso como se reclama en la reivindicación 3, en donde la comezón es comezón del tipo mixto. 86.- El uso como se reclama en la reivindicación 3, en donde el medicamento es adaplado para ser adminislrable a un mamífero por una ruta tópica, oral, rectal, vaginal, intramuscular, subcutánea, transdérmica o intravenosa, o a través del consumo de un producto nutricéutico por el mamífero. 87.- El uso como se reclama en la reivindicación 3, en donde dicha composición comprende además un fármaco anli inflamatorio no esíeroideo (NSAID). 88.- El uso como se reclama en la reivindicación 87, en donde dicho fármaco aníi inflamatorio no esteroideo (NSAID) se selecciona del grupo que consiste de ibuprofen (ácido 2-(isobutilfenil)-propiónico); melolrexaío (ácido N-[4-(2,4 diamino 6-pteridinil-metil]meíilamino]benzoil)-L-glutámico); aspirina (ácido acetilsalicilico); ácido salicílico; difenhidramina (clorhidrato de 2-(difenilmetoxi)-NN-dimetiletilamina); naproxen (ácido 2-naflalenacético, 6-melo?i-9-melil-, sal de sodio, (-)); fenilbuíazona (4-bulil-1 ,2-difenil-3,5-pirazolidindiona); ácido sulindac-(2)-5-fuoro-2-melil-1-[[p- (met¡lsulfinil)fenil]metilen-]-1 H-indeno-3-acéíico; ácido diflunisal (2',4',-difluoro-4-hidroxi-3-bifenilcarboxílico; piroxicam (4-hidroxi-2-metil-N-2-piridinil-2H-1 ,2-benzoíiazina-2-carboxamida 1 , 1-dióxide, un oxicam; indomeíacin (ácido 1-(4-clorobenzoil)-5-meíoxi-2-metil-H-indol-3-acético); meclofenamalo sódico (sal de sodio del ácido N-(2,6-dicloro-m-lolil) anlranílico, monohidraío); celoprofen (ácido 2-(3-benzoilfeníl)-propiónico; tolmetin sódico (1-metil-5-(4-metilbenzoil-1 H-pirrolo-2-acetato sódico dihidrato); diclofenac sódico (sal monosódica del ácido 2-[(2,6-diclorofenil)amino]bencenoático); sulfaío de hidroxicloroquina (2-{[4-[(7-cloro-4-quinolil) amino]pentil]eíilamino}eíanol sulfato (1 :1); penícillamina (3-mercapto-D-valina); flurbiprofen (ácido [1 ,1-bifenil]-4-acético, 2-fluoro- alfamelil-, (+-.)); cetodolac (ácido 1-8-dietil-13,4,9, tetra hidropirano-[3-4-13]indolo-1 -acético; ácido mefenámico (ácido N-(2,3-xilil)antranílico; y clorhidraío de difenhidramina (clorhidraío de 2-difenil metoxi-N, N-di-metilelamina). 89.- El uso como se reclama en la reivindicación 81 , en donde el inhibidor de la frucíosamina cinasa es un ageníe que inhibe la Iranscripción de un gen que codifica la frucíosamina cinasa o íransducción de un mARN que codifica la fructosamina cinasa. 90.- El uso como se reclama en la reivindicación 3, en donde el compuestos meglumina o sales de ésta. 91.- El uso como se reclama en la reivindicación 90, en donde en la composición comprende además arginina. 92.- El uso como se reclama en la reivindicación 91 , en donde el resultado proporcionado por el medicamento es mayor que el resulíado del lipo de un Iratamiento usando meglumina sola y un tratamiento usando arginina sola. 93.- El uso como se reclama en la reivindicación 3, en donde el compuesto se selecciona del grupo que consiste de galactitol lisina, 3-desoxi sorbiíol lisina, 3-desoxi-3-fluoro-xiliíol lisina, 3-desoxi-3-ciano sorbitol lisina, 3-O-melil sorbitollisina, sorbiíol lisina, mannitol lisina, sorbitol y xilitol. 94.- El uso como se reclama en la reivindicación 3, en donde la composición comprende un compuesto que contiene cobre. 95.- El uso como se reclama en la reivindicación 94, en donde el compuesto que contiene cobre se selecciona del grupo que consisle de un conjugado de cobre-ácido salicílico, un conjugado de cobre-péplido, un conjugado de cobre-aminoácido, y una sal de cobre. 96.- El uso como se reclama en la reivindicación 95, en donde el compuesto que contiene cobre se selecciona del grupo que consiste de un conjugado de cobre-lisina, y un conjugado de cobre-arginina. 97.- El uso como se reclama en la reivindicación 3, en donde la composición comprende además un inhibidor de la función del azúcar alfa-dicarbonilo. 98.- El uso como se reclama en la reivindicación 97, en donde el azúcar alfa-dicarbonilo es 3DG. 99.- El uso como se reclama en la reivindicación 98, en donde el inhibidor quela 3DG. 100.- El uso como se reclama en la reivindicación 98, en donde el inhibidor destoxifica 3DG. 101.- El uso como se reclama en la reivindicación 97, en donde el inhibidor es un compuesto similar a N-metil-glucamina. 102.- El uso como se reclama en la reivindicación 101 , en donde el inhibidor comprende meglumina o sales de ésta. 103.- El uso como se reclama en la reivindicación 102, en donde el inhibidor comprende además arginina. 104.- El uso como se reclama en la reivindicación 97, en donde el inhibidor de la función de azúcar alfa-dicarbonilo inhibe el entrelazamiento de proteínas. 105 - El uso como se reclama en la reivindicación 97, en donde el inhibidor de la función de azúcar alfa-dicarbonilo inhibe la formación de especies con oxígeno reactivo. 106.- El uso como se reclama en la reivindicación 97, en donde el inhibidor de la función de azúcar alfa-dicarbonilo inhibe apoptosis. 107.- El uso como se reclama en la reivindicación 97, en donde el inhibidor de la función de azúcar alfa-dicarbonilo inhibe mutagenicidad. 108.- El uso como se reclama en la reivindicación 97, en donde el inhibidor de la función de azúcar alfa-dicarbonilo inhibe la formación de proteínas modificadas de producto final de glucación avanzada. 109.- El uso como se reclama en la reivindicación 97, en donde el inhibidor es arginina o un derivado o modificación del mismo.