MX2007014327A - Derivados de pirrolopiridina como inhibidores de cinasa de proteina. - Google Patents

Abstract

La invencion proporciona una clase novedosa de compuestos, composiciones farmaceuticas que comprenden estos compuestos, y metodos para utilizar tales compuestos con el fin de tratar o prevenir enfermedades o trastornos asociados con una actividad anormal o mal regulada de la cinasa, en particular enfermedades o trastornos que involucren una activacion anormal de las cinasas CDKs, Aurora, Jak2, Rock, CAMKII, FLT3, Tie2, TrkB, FGFR3 Y KDR.

Description

DERIVADOS DE PIRROLOPIRIDINA COMO INHIBIDORES DE CINASA DE PROTEÍNA REFERENCIA CRUZADA A SOLICITUDES RELACIONADAS Esta solicitud reclama el beneficio de prioridad a la Solicitud de Patente Provisional de EE.UU. número 60/681,853, publicada el 16 de mayo de 2005. La descripción completa de esta solicitud se incorpora en la presente como referencia en su totalidad y para todos los propósitos. Campo de la Invención La invención provee una clase novedosos a de compuestos, composiciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos y métodos para usar dichos compuestos para tratar o prevenir enfermedades o desórdenes relacionados con una actividad de cinasa anormal o desregulada, en particular enfermedades o desórdenes que involucran la activación anormal de las cinasas CDKs, Aurora, Jak2, Rock, CAMKII, FLT3, T¡e2, TrkB, FGFR3 y KDR. Antecedentes de la Invención Las proteínas cinasas representan una familia grande de proteínas, las cuales desempeñan un papel central en la regulación de una amplia variedad de procesos celulares y mantienen control sobre la función celular. Una lista parcial, no limitante, de estas cinasas incluye: tirosina cínasas tales como FLT3, Tie2, TrkB, KDR y el receptor del factor de crecimiento de fibroblastos, FGFR3; y serina/treonina cinasas tales como CDKs Aurora, Jak2, Rock y CAMKII. La actividad de cinasa aberrante se ha observado en muchos estados de enfermedades incluyendo desórdenes proliferativos benignos y malignos, así como enfermedades que resultan de la activación inapropiada de los sistemas inmune y nervioso. Los compuestos novedosos de esta invención inhiben la actividad de una o más proteínas cinasa, y por lo tanto, se espera sean útiles en el tratamiento de enfermedades asociadas con cinasa. Breve Descripción de la Invención En un aspecto, la presente invención provee compuestos seleccionados de las Fórmulas la, Ib y le: la Ib le en las que: n se selecciona de 0, 1 y 2; Ri se selecciona de halo, C?_6alquilo, C-?.6alcox¡, C-,. 6alquilo halo-sustituido y C?.6alcoxi halo-sustituido; R2 se selecciona de C6-?oaril-C0-4 alquilo y C5.10heteroaril- C0-4alquilo; en el que dicho arilo o heteroarilo de R2 se sustituye opcionalmente por 1-3 radicales independientemente seleccionados de halo, C-|.6alquilo, C-|.6alcox¡, C?.6alquilo halo-sustituido, C-i. 6alcoxi halo-sustituido, -S(O)0.2R5, -COOR5, - C(O)NR5R6 y -NR5C(O)R6; en donde R5 se selecciona de hidrógeno y C-|.6alqu¡lo; y R6 se selecciona de Cß-ioarilo y C5. ?oheteroarilo; en el que dicho arilo o heteroarilo de R6 se sustituye opcionalmente con 1 a 3 radicales independientemente seleccionados de halo, d.ßalquilo, C1. 6alcoxi, C?.6alquilo halo-sustituido y C?.6alcoxi halo-sustituido; X se selecciona de CR7 o N; en donde R7 se selecciona de hidrógeno y C-|.6alqu¡lo; y los derivados N-óxido, derivados de profármaco, derivados protegidos, isómeros individuales y mezcla de isómeros de los mismos; y las sales y solvatos farmacéuticamente aceptables (e.g. hidratos) de dichos compuestos. En un segundo aspecto, la presente invención provee una composición farmacéutica que contiene un compuesto de Fórmula I o un derivado de N-óxido, isómeros individuales y mezcla de isómeros de los mismos; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en combinación con uno o más excipientes adecuados. En un tercer aspecto, la presente invención provee un método para tratar una enfermedad en un animal cuya inhibición de actividad de cinasa, particularmente actividad CDKs, Aurora, Jak2, Rock, CAMKII, FLT3, Tie2, TrkB, FGFR3 y/o KDR, puede prevenir, inhibir o mejorar la patología y/o sintomatología de las enfermedades, cuyo método consiste en administrar al animal una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de Fórmula I o un derivado de N-óxido, isómeros individuales y mezclas de isómeros de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En un cuarto aspecto, la presente invención provee el uso de un compuesto de Fórmula I en la elaboración de un medicamento para tratar una enfermedad en un animal en el que la actividad cinasa, particularmente actividad CDKs, Aurora, Jak2, Rock, CAMKII, FLT3, Tie2, TrkB, FGFR3 y/o KDR, contribuyen a la patología y/o sintomatología de la enfermedad. En un quinto aspecto, la presente invención provee un proceso para preparar compuestos de Fórmula I y los derivados N-óxido, derivados de profármaco, derivados protegidos, isómeros individuales y mezclas de isómeros de los mismos, o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Descripción Detallada de la Invención Definiciones "Alquilo" como un grupo y un elemento estrcutural de otros grupos, por ejemplo alquilo halo-sustituido y alcoxi, y pueden ser de cadena recta o ramificada. C-?_4-alcox¡ incluye, metoxi, etoxi, y similares. Alquilo halo-sustituido incluye trifluorometilo, pentafluoroetilo, y similares. "Arilo" significa un ensamble de anillo aromático bicíclico fusionado o monocíclico que contiene de seis a diez átomos de carbono en el anillo. Por ejemplo, arilo puede ser fenilo o naftilo, preferiblemente fenilo. "Arileno" significa un radical divalente derivado de un grupo arilo. "Heteroarilo" es como se definió antes para arilo en el que uno o más de los miembros del anillo de carbono indicados pueden ser sustituidos por un heteroátomo. Por ejemplo C5_ 8heteroarilo incluye piridilo, indolilo, indazolilo, quinoxalinilo, quinolinilo, benzofuranilo, benzopiranilo, benzotiopiranilo, benzo[l,3]dioxol, imidazolilo, benzo-imidazolilo, pirimidinilo, furanilo, oxazolilo, ¡soxazolilo, triazolilo, tetrazolilo, pirazolilo, tienilo, etc. "Cicloalquilo" significa un ensamble de anillo policíclíco puenteado o bicíclico fusionado, monocíclico, saturado o parcialmente insaturado que contiene el número de átomos de anillo indicados. Por ejemplo, C3.10cicloalquilo incluye ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, etc. "Heterocicloalquilo" significa cicloalquilo, como se define en esta solicitud, con la condición de que uno o más de los carbonos del anillo se reemplacen con una porción seleccionada de -O-, -N = , -NR-, -C(O)-, -S-, -S(O) - o -S(O)2-, en donde R es hidrógeno, C-|. alqu¡lo o un grupo protector de nitrógeno. Por ejemplo, C3-8heterocicloalquilo como se usa en esta solicitud para describir compuestos de la invención incluye morfolino, pirrolidinilo, pirrolidinil-2-ona, piperacinilo, piperidinilo, piperidinilona, l,4-d¡oxa-8-aza-spiro[4.5]dec-8-ilo, etc. "Halógeno" (o halo) representa preferiblemente cloro o fluoro, pero también puede ser bromo o yodo. "Panel de Cinasa" es una lista de cinasas que comprenden Abl(humano), Abl(T3151), JAK2, JAK3, ALK, JNKIal, ALK4, KDR, Aurora-A, Lck, Blk, MAPKI, Bmx, MAPKAP- K2, BRK, MEKl, CaMKII(rat), Met, CDKI/cyclinB, p70S6K, CHK2, PAK2, CKI, PDGFRa, CK2, PDKI, c-kit, Pim-2, c-RAF, PKA(h), CSK, PKBa, cSrc, PKCa, DYRK2, Plk3, EGFR, ROCK-I, Fes, Ron, FGFR3, Ros, Flt3, SAPK2a, Fms, SGK, Fyn, SIK, GSK3ß, Syk, IGF-IR, Tie-2, IKKB, TrKB, IR, WNK3, IRAK4, ZAP-70, ITK, AMPK(rat), LIMKI, Rsk2, Axi, LKBI, SAPK2ß, BrSK2, Lyn (h), SAPK3, BTK, MAPKAP-K3, SAPK4, CaMKW, MARKI, Snk, CDK2/cyclinA, MINK, SRPKI, CDK3/cyclinE, MKK4(m), TAKI, CDK5/p25, MKK6(h), TBKI, CDK6/cyclinD3, MLCK, TrkA, CDKT/cyclinH/MATI, MRCKß, TSSKI, CHKI, MSKI, Yes, CKId, MST2, ZIPK, c-Kit (D816V), MuSK, DAPK2, NEK2, DDR2, NEK6, DMPK, PAK4, DRAKI, PAR-IBa, EphAI, PDGFRß, EphA2, Pim-1, EphA5, PKBß, EpliB2, PKCßl, EphB4, PKCd, FGFRI, PKC?, FGFR2, PKCT, FGFR4, PKD2, Fgr, PKGI ß, Fltl, PRK2, Hck, PYK2, HIPK2, Ret, IKKa, RIPK2, IRR, ROCK-I l(human), JNK2a2, Rse, JNK3, Rskl(h), PI3 Ky, PB Kd y PI3-Kß. Los compuestos de la invención se tamizan en comparación con el panel de cinasa (tipo Silvestre y/o mutación del mismo) e inhiben la actividad de al menos uno de dichos miembros del panel. "Formas mutantes de BCR-Abl" significa cambios de aminoácidos individuales o múltiples de la secuencia de tipo silvestre. Las mutaciones en BCR-ABL actúan al interrumpir los puntos de contacto críticos entre la proteína y el inhibidor (por ejemplo, Gleevec, y similares), con más frecuencia, al inducir una transición del estado inactivo al activo, i.e. a una conformación a la cual BCR-ABL y Gleevec son incapaces de unir. A partir de análisis de muestras clínicas, el repertorio de mutaciones encontrado en relación con el fenotipo resistente ha aumentado de forma lente pero inexorablemente en el transcurso del tiempo. Las mutaciones parecen agruparse en cuatro regiones principales. Un grupo de mutaciones (G250E, Q252R, Y253F/H, E255K/V) incluye aminoácidos que forman el ciclo para unión con fosfato para ATP (también conocido como ciclo-P). Un segundo grupo puede encontrarse (V289A, F311 L, T3151, F317L) en el sitio de unión Gleevec e interactúa directamente con el inhibidor a través de enlaces de hidrógeno o interacciones de Van der Waals. El tercer grupo de mutaciones (M351T, E355G) se agrupa en proximidad con el dominio catalítico. El cuarto grupo de mutaciones (H396R/P) se localiza en el ciclo de activación, cuya conformación es el cambio molecular que controla la activación /inactivación de cinasa. Las mutaciones de punto BCR-ABL relacionadas con la resistencia Gleevec detectadas en pacientes CML y ALL incluyen: M224V, L248V, G250E, G250R, Q252R, Q252H, Y253H, Y253F, E255K, E255V, D276G, T277A, V289A, F311L, T315L T315N, F317L, M343T, M315T, E355G, F359V, F359A, V379I, F382L, L387M, L387F, H396P, H396R, A397P, S417Y, E459K, y F486S (Las posiciones de aminoácidos, indicadas por el código de una sola letra, son aquéllas para la secuencia GenBank, número de adquisición AAB60394, y corresponden al tipo ABL la; Martinelli et al., Haematologica/The Hematology Journal, 2005, April; 90-4). A menos que se especifique lo contrario en la invención, Bcr-Abl se refiere a las formas de tipo silvestre y mutante de la enzima. "Tratar" y "tratamiento" se refiere a un método para aliviar o calmar una enfermedad y/o sus síntomas relacionados. Descripción de las Modalidades Preferidas La presente ¡nvención provee compuestos, composiciones y métodos para el tratamiento de enfermedades relacionadas con la cinasa, en particular enfermedades relacionadas con las cinasas CDKs, Aurora, Jak2, Rock, CAMKII, FLT3, Tie2, TrkB, FGFR3 y KDR. En una modalidad, con referencia a los compuestos de las Fórmulas la, Ib y le, n se selecciona de 0 y 1; R-i es C-?.6alcoxi; y R2 se selecciona de C6-?oaril-C0-4alquilo y C5. 10heteroaryl-C0-4alquilo; en el que dicho arilo o heteroarilo de R2 se sustituye opcionalmente por 1-3 radicales que se seleccionan independientemente de halo, C?.6alquilo, C?_6alcox¡, C-i.ßalquilo halo-sustituido, - S(0)o.2R5, -COOR5, y -NR5C(O)R6; en donde Rs se selecciona de hidrógeno y C-?.6alqu¡lo; y Re es C?.?0arilo opcionalmente sustituido con 1 a 3 radicales que se seleccionan independientemente de C?.6alquilo halo-sustituido. En otra modalidad, R1 es metoxi; R2 se selecciona de fenilo, bencilo y piridinilo; en el que dicho fenilo, bencilo o piridinilo de R2 es opcionalmente sustituido con 1 a 2 radicales que se seleccionan independientemente de cloro, bromo, fluoro, metilo, trifluorometoxi, trifluorometilo, -COO2R5, -S(O)2R5 y -NHC(O)R6; en donde R5 se selecciona de metilo y etilo; y R6 es fenilo opcionalmente sustituido con trifluorometilo. Los compuestos preferidos de la invención se seleccionan de (3-Cloro-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina; (4-Fluoro-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il] -amina; [4-(IH-Pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-(4-trifluorometoxi-fenil)-amina; [4-(IH-Pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-(3-trifluorometil-fenil)-amina; (3,4-Dif luoro-fenil )-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirímidin-2-il]-amina; [4-(IH-Pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-(4-trifluorometil-fenil)-amina; éster etílico de ácido 4-[4-(IH-Pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-ilamino]-benzoico; (3-Metoxi-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina; (3-Fluoro-bencil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]p¡ridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina; (3,5-Dimetoxi-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina; (2- Metil-piridin-4-il)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina; (2-Cloro -piridin -4-il)- [4 -(IH-pirrolo[2,3-b]piridin -4 -il)-pirimidin-2-il]-amina; (2-Metoxi-piridin-4-il)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)- pirimidin-2-il]-amina; (4-Metansulfonil-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina; Piridin -4-il- [4-(1 H-pirrolo[2,3 -b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il] - amina; (4-Metil-pirimidin-2-il)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina; (3-Bromo-fenil)- [4-(1-metil-1 H-pirrolo [2,3 -b] pi rid i n-4-il)-pirimidin-2-il] - amina; (3-Cloro-fenil)-[4-(l-metil-IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-ll]-amina; [4-(l- eti l-l H-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-(3-trifluorometil- fenil )-amina; (3-Bromo-4-metil-fenil)-[4-(l-metil-IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-ll)-pirimidin-2-il]-amina; 2-{4-[2-(3-B romo-fe nilamino)-pirimidin-4-il]-pirrolo[2,3-b]piridin-l-il}-etanol; 2-{4-[2-(3-Trifluorometil-fenilamino)-pirimidin-4-il]-pirrolo[2,3-b]piridin-l-il}-etanol; 2-{4-[2-(3-Cloro-fenilamino)-pirimidin-4-il]-p i rro I o [2, 3-b] piri di n-l-i I }-eta nol; 2-{4-[2-(3-Bromo-4-metil-fenilamino)-pirimidin-4-il]-pirrolo[2,3-b]piridin-l-il}-etanol; {4-[l-(2-Amino-etil)-IH-pirrolo[2, 3-b] piri din -4-il]-pirimidin-2-il} -(3-bromo-fenil)-amina; {4-[1 -(2-Amino-etil)-1 H-pirrolo [2,3 b]piridin-4-il]-pirimidin-2-il}-(3-bromo-fenil)-metil-amina; {4-[l- (2-Amino-etil)-IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il]-pirimidin-2-il}-(4-t rif luoro metil -fe nil)- amina; N-{4-Metil-3-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-ilamino]-fenil}-3-trifluorometil-benzamida; [4-(IH-Pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-pirimidin-2-il]-(4- tpfluorometil-fenil)-amina; (3,5-Dimetoxi-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)- pirimidin-2-il]-amina; (3,5-Difluoro-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-pirimidin- 2-il]-amina; (3-Bromo-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-pirimidin-2-il]-amina; (3-Metoxi-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-pirimidin-2-il]-amina; (4-C lo ro-f enil )-[4-( I H-pirrol o[2, 3-b] pirid i n -3-il )-pirimidin-2-il]-amina; éster etílico de ácido 4-[4-(IH-Pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-pirimidin-2-ilamino]-benzoico; N-{4-Metil-3-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-pirimidin-2-ilamino]-fenil}-3-trifluorometil-benzamida; (3-Cloro-fenil)-[4-(4-metoxi- 1 H-pirrolo [2 , 3-b]pi rid i n-3 -il)-pirimidin-2-il]-amina; [4-(4-Metoxi-IH-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-pirimidin-2-il]-(3-trifluorometil-fenil)-amina; (3-Bromo-fenil)-[4-(4-metoxi-IH-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-pirimidin-2-il]-am¡na; N-{4-Metil-3-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-5-il)-pirimidin-2-ilamino]-fenil}-3-tr¡fluorometil-benzamida; N-Etil-4-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-ilamino]-bencensul fonamida; N-(2-Metoxi-etil)-4-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-ilamino]-bencensul fonamida; N-(3- Metoxi-propil)-4-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-ilamino]-bencensulfonamida; N-(3-Metoxi-propil)-4-[4- (IH-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-pirimidin-2-ilamino]-bencensul fonamida; (3-Bromo-fenil)-[4-(2-metil-IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina; (3-C loro-f enil )-[4-(2-meti l-l H-pirrolo[2,3--b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amína; [4-(2-Metil-IH-pi rrolo[2, 3-b] pi rid i n-4-i I )-pi rim id i n -2 - i 13-( 3-trif luorometil-fenil)- amina; N-(2-Metoxi-etil)-4-[4-(2-metil-IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-ilamino]- bencensulfonamida; N-(3-Metoxi-propil)-4-[4-(2-metil-IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)- pirimidin-2-ilamino] -bencensulfonamida; (3-Bromo-fenil)-[4-( 1H-pirazolo [3 ,4-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina; (3-C loro-f enil )-[4-(IH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il] -amina; [4-( 1 H-Pirazolo [3 ,4-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il] -(3- trifluorometil-fenil)-amina; (3-Cloro-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-5-il)-pirimidin-2-il] -amina; (3-Bromo-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-5-il)-pirimidin-2- il]-amina; y [4-( 1H-Pirrolo [2,3-b]piridin-5 -il)-pirimidin-2-il] -(3-trifluorometil- fenil)-amina. Otros compuestos preferidos de la invención se detallan en los ejemplos y Tabla 1, posteriores. Farmacología y uso Los compuestos de la invención modulan la actividad de cinasas y, como tal, son útiles en el tratamiento de enfermedades o trastornos en los cuales las cinasas contribuyen a la patología y/o sintomatología de la enfermedad. Ejemplos de cinasas que son inhibidos por los compuestos y composiciones descritos en la presente y contra los cuales son útiles los métodos descritos en la presente incluyen, pero no se limitan a, CDKs, Aurora, Jak2, Rock, CAMKII, FLT3, Tie2, TrkB, FGFR3 y KDR. La tirosina cinasa Abelson (i.e. Abl, c-Abl) está involucrada en la regulación del ciclo celular en la respuesta celular al estrés genotóxico, y en la transmisión de información acerca del entorno celular a través de la señalización por integrinas. En general, parece que la proteína Abl provee un rol complejo como un módulo celular que integra señales de varias fuentes extracelulares e intracelulares y que influencia las decisiones con respecto al ciclo celular y apoptosis. La tirosina cinasa Abelson incluye derivados de subtipos tales como la fusión quimérica (oncoproteína) BCR-Abl con actividad de tirosina cinasa desregulada o la v-Abl. BCR- Abl es crítica en la patogénesis de 95% de la leucemia mielógena crónica (CML) y 10% de leucemia linfocítica aguda. STI-571 (Gleevec) es un inhibidor de la tirosina cinasa oncogénica BCR- Abl y se usa para el tratamiento de leucemia mieloide crónica (CML). Sin embargo, algunos pacientes en la etapa de crisis de CML son resistentes a STI-571 debido a mutaciones en la BCR-bl cinasa. Se han reportado más de 22 mutaciones hasta la fecha siendo las más comunes G250E, E255V, T315I, F317L y M351T. Los compuestos de la presente invención inhiben la abl cinasa, en especial v-abl cinasa. Los compuestos de la presente invención también inhiben la BCR-Abl cinasa de tipo silvestre y las mutaciones de BCR-Abl cinasa y por lo tanto son adecuadas para el tratamiento de cáncer Bcr-abl-positivo y enfermedades tumorales, tales como leucemias (en especial leucemia mieloide crónica y leucemia linfoblástica aguda, en donde se encuentran especialmente mecanismos de acción apoptótica), y también muestran efectos en el subgrupo de células madre de leucemia, así como potenciales para la purificación de estas células in vitro después de la eliminación de dichas células (por ejemplo, retiro de médula ósea) y reimplantación de las células una vez que se han despejado de las células cancerígenas (por ejemplo, reimplantación de células de médula ósea purificada). La trayectoria de señalización Ras-Raf-MEK-ERK media la respuesta celular a las señales de crecimiento. Ras muta a una forma oncogénica en -15% del cáncer humano. La familia Raf pertenece a la serina/treonina proteína cinasa e incluye tres miembros, A-Raf, B-Raf y c-Raf (o Raf-1). El enfoque en Raf siendo un blanco del medicamento se ha centrado en la relación de Raf como un efector corriente debajo de Ras. Sin embargo, datos recientes sugieren que B- Raf puede tener un rol prominente en la formación de ciertos tumores que no requieren un alelo Ras activado (Nature 417, 949 - 954 (01 Jul 2002). En particular, se han detectados las mutaciones B-Raf en un gran porcentaje de melanomas malignos. Los tratamientos médicos que existen para el melanoma son limitados en efectividad, en especial para los melanomas de etapas avanzadas. Los compuestos de la presente invención también inhiben los procesos celulares que involucran a la b-Raf cinasa, proveyendo una nueva oportunidad terapéutica para el tratamiento de cánceres en humanos, en especial melanoma. Los compuestos de la presente invención también inhiben los procesos celulares que involucran la c-Raf cinasa. La c-Raf es activada por el oncógeno ras, que es mutado en un amplio número de cánceres en humanos. Por lo tanto, la inhibición de la actividad de cinasa de c-Raf puede proveer una manera de evitar el crecimiento tumoral mediado por ras [Campbell, S. L., Oncogene, 17, 1395 (1998)]. El PDGF (Factor de Crecimiento derivado de Plaquetas) es un factor de crecimiento que ocurre muy comúnmente, que desempeña un papel importante tanto en el crecimiento normal como en la proliferación de células patológicas, tales como las que se observan en la carcinogénesis y en enfermedades de las células del músculo liso de los vasos sanguíneos, por ejemplo en ateroesclerosis y trombosis. Los compuestos de la invención pueden inhibir la actividad del receptor PDGF (PDGFR) y son, por lo tanto, adecuados para el tratamiento de enfermedades tumorales, tales como gliomas, sarcomas, tumores de próstata, y tumores del colon, mama y ovarios. Los compuestos de la presente invención pueden usarse no solo como una sustancia inhibidora de tumores, por ejemplo en cáncer de pulmón de células pequeñas, si no también como un agente para tratar desórdenes proliferativos no malignos, tales como ateroesclerosis, trombosis, soriasis, esclerodermia y fibrosis, así como para la protección de células madre, por ejemplo para combatir el efecto hemotóxico de los agentes quimioterapéuticos, tales como 5-fluoruracilo, y en asma. Los compuestos de la invención pueden usarse especialmente para el tratamiento de enfermedades que responden a la inhibición del receptor PDGF cinasa. Los compuestos de la presente invención muestran efectos útiles en el tratamiento de desórdenes que surgen como resultado de la trasplantación, por ejemplo, trasplantación alogénica, especialmente el rechazo de tejido, tal como bronquiolitis obliterante (OB), i.e. un rechazo crónico de transplantes de pulmón alogénicos. En contraste con los pacientes sin OB, aquéllos con OB con frecuencia muestran una concentración de PDGF elevada en fluidos de irrigación de bronquioalveolar. Los compuestos de la presente invención también son efectivos en enfermedades asociadas con la migración y proliferación de células del músculo liso vascular (en donde PDGF y PDGF-R con frecuencia también desempeñan un papel), tal como restenosis y aterosclerosis. Estos efectos y las consecuencias de los mimos para la proliferación o migración de las células del músculo liso vascular in vitro e in vivo pueden demostrarse por la administración de los compuestos de la presente invención, y también mediante la investigación de su efecto en el engrosamiento de la íntima vascular tras la lesión mecánica in vivo. La familia trk de receptores de neurotrofinas (trkA, trkB, trkC) promueve la supervivencia, crecimiento y diferenciación de los tejidos neuronales y no neuronales. La proteína TrkB se expresa en células tipo neuroendocrino en el intestino delgado y colon, en las células alfa del páncreas, en los monocitos y macrófagos de los nodulos linfáticos y del bazo, y en las capas granulares de la epidermis (Shibayama and Koizumi, 1996). La expresión de la proteína TrkB se ha asociado con un avance desfavorable de tumores Wilms y de neuroblastomas. TkrB es, además, expresado en las células de próstata cancerosas pero no en células normales. La trayectoria de señalización corriente abajo de los receptores trk involucra la cascada de la activación MAPK a través de She, Ras activado, genes ERK-I y ERK-2, y la trayectoria de transducción PLC-gammal (Sugimoto et al., 2001). La cinasa, c-Src transmite señales oncogénicas de muchos receptores. Por ejemplo, la sobre expresión de EGFR de HER2/neu en tumores conduce a la activación constitutiva de c-src, que es característica de la célula maligna pero ausente de la célula normal. Por otro lado, los ratones deficientes en la expresión de c-src presentan un fenotipo osteopetrótico, indicando una participación clave de c-src en función osteoclástica y un posible involucramiento en los trastornos relacionados. La familia Tec cinasa, Bmx, una cinasa de proteína tirosina no de receptor, controla la proliferación de las células de cáncer mamarias epiteliales.

El receptor 3 del factor de crecimiento de fibroblastos mostró que ejercía un efecto regulatorio negativo en el crecimiento de huesos y una inhibición de proliferación de condrocitos. La displasia tanatofórica es causada por diferentes mutaciones en el receptor 3 del factor de crecimiento de fibroblastos, y una mutación, TDII FGFR3, tiene una actividad de cinasa tirosina constitutiva que activa el factor de trascripción Statl, lo que conduce a la expresión de un inhibidor de ciclo celular, arresto de crecimiento y desarrollo anormal de huesos (Su et al., Nature, 1997, 386, 288-292). FGFR3 también se expresa con frecuencia en cánceres de tipo mieloma múltiple. Los inhibidores de la actividad FGFR3 son útiles en el tratamiento de enfermedades autoinmunes o inflamatorias mediadas por células T que incluyen pero no se limitan a artritis reumatoide (RA), artritis colágeno II, esclerosis múltiple (MS), lupus eritematoso sistémico (SLE), soriasis, diabetes juvenil, síndrome de Sjogren, enfermedad de la tiroides, sarcoidosis, uveítis autoinmune, enfermedad inflamatoria intestinal (colitis ulcerativa y Crohn), enfermedad celíaca y miastenia gravis. La actividad de suero y cinasa regulada por glucocorticoides (SGK), se correlaciona con actividades de canales de iones perturbadas, en particular, los canales de sodio y/o potasio y los compuestos de la invención pueden ser útiles para tratar la hipertensión. Lin et al (1997) J. Clin. Invest. 100, 8: 2072-2078 y P. Lin (1998) PNAS 95, 8829-8834, han mostrado inhibición del crecimiento tumoral y la vascularización y también una reducción en la metástasis pulmonar durante infecciones adenovirales o durante infecciones del dominio extracelular de Tie-2 (Tek) en tumores de pecho y modelos de xenoinjerto de melanoma. Los inhibidores Tie2 pueden usarse en situaciones en las que la neovascularización se lleva a cabo de manera inadecuada (i.e. en retinopatía diabética, inflamación crónica, soriasis, sarcoma de Kaposi, neovascularización crónica debido a la degeneración macular, artritis reumatoide, hemangioma infantil y cánceres). Lck desempeña un papel en la señalización de células T. Los ratones que carecen del gen Lck tienen una pobre capacidad de desarrollar timocitos. La función de Lck como un activador positivo de señalización de células T sugiere que los inhibidores Lck pueden ser útiles para tratar enfermedades autoinmunes tales como artritis reumatoide. Se ha implicado que JNKs, junto con otros MAPKs, tiene un papel en mediar la respuesta celular al cáncer, agregación de plaquetas inducidas por trombina, desórdenes de inmunodeficiencia, enfermedades autoinmunes, muerte celular, alergias, osteoporosis y enfermedades del corazón. Los objetivos terapéuticos relacionados con la activación de la trayectoria JNK incluyen leucemia mielógena crónica (CML), artritis reumatoide, asma, osteoartritis, isquemia, cáncer y enfermedades neurodegenerativas. Como resultado de la importancia de la activación JNK asociada con la enfermedad del hígado o episodios de isquemia hepática, los compuestos de la invención también pueden ser útiles para tratar varios desórdenes hepáticos. Un rol del JNK en enfermedades cardiovasculares tale como infarto al miocardio o deficiencia cardiaca congestiva también se han reportado al demostrarse que JNK media las respuestas hipertróficas a diversas formas de estrés cardiaco. Se ha demostrado que la cascada de JNK también desempeña un papel importante en la activación de células T, incluyendo la activación del promotor IL-2. Por lo tanto, los inhibidores de JNK pueden tener un valor terapéutico en alterar las respuestas inmunes patológicas. También se ha establecido un rol de la activación JNK en varios cánceres, sugiriendo el uso potencial de inhibidores JNK en cáncer. Por ejemplo, JNK constitutivamente activado se asocial con tumorigenesis mediada por HTLV-I [Oncogene 13:135-42 (1996)]. JNK puede desempeñar un papel en el sarcoma de Kaposi (KS). Otros efectos proliferativos de otras citocinas implicadas en la proliferación de KS, tales comos el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), IL-6 y TNFa, también pueden mediarse por JNK. Además, la regulación del gen c-jun en células transformadas p210 BCR-ABL corresponde con la actividad de JNK, sugiriendo un papel para los inhibidores de JNK en el tratamiento de leucemia mielógena crónica (CML) [Blood 92:2450-60 (1998)]. Se cree que ciertas condiciones proliferativas anormales están relacionadas con la expresión raf, y por lo tanto, se cree que responden a la inhibición de expresión raf. Los niveles anormalmente altos de expresión de la proteína raf también están implicados en la transformación y proliferación de células anormales. También se cree que estas condiciones proliferativas anormales responden a la inhibición de la expresión raf. Por ejemplo, se piensa que la expresión de la proteína c-raf desempeña un papel en la proliferación celular anormal debido a que se ha reportado que 60% de todas las líneas de células de carcinoma pulmonar expresan niveles normalmente altos de c-raf mARN y proteína. Otros ejemplos de condiciones proliferativas anormales son los trastornos hiper-proliferativos tales como cánceres, tumores, hiperplasia, fibrosis pulmonar, angiogénesis, soriasis, ateroesclerosis y proliferación de células del músculo liso en los vasos sanguíneos, tales como estenosis o restenosis tras angioplastia. También se ha implicado la trayectoria de señalización celular de la que raf es parte en desórdenes inflamatorios caracterizados por la proliferación de células T (activación y crecimiento de células T), tales como rechazo a injerto de tejido, choque de endotoxina y nefritis glomerular, por ejemplo. Las cinasas de proteína activadas por estrés (SAPKs) son una familia de proteína cinasas que representan el penúltimo paso en las trayectorias de transducción de señal que dan como resultado en la activación del factor de trascripción c-jun y la expresión de genes regulada por c-jun. En particular, c-jun está involucrado en la trascripción de genes que codifican proteínas involucradas en la reparación de ADN que es dañado debido a los insultos genotóxicos. Por lo tanto, los agentes que inhiben la actividad SAPK en una célula previenen la reparación de AND y sensibilizan la célula a agentes que induce daño ADN o inhiben la síntesis de ADN e inducen apoptosis de una célula o que inhiben la proliferación de células. Las proteínas cinasas activadas por mitógenos (MAPKs) son miembros de trayectorias de transducción de señal conservadas que activan los factores de trascripción, factores de traducción y otras moléculas objetivo como respuesta a una variedad de señales extracelulares. Los MAPKs son activados por fosforilación a un motivo de fosforilación dual que tienen la secuencia Thr-X-Tyr por cinasas de proteína cínasa activada por mitógeno (MKKs). En eucariontes más elevados, el rol físico de la señalización MAPK ha sido correlacionado con eventos celulares tales como proliferación, oncogénesis, desarrollo y diferenciación. Asimismo, la capacidad de regular la transducción de señales a través de estas trayectorias (particularmente mediante MKK4 y MKK6) podría conducir al desarrollo de tratamientos y terapias preventivas para enfermedades humanas asociadas con señalización MAPK, tal como enfermedades inflamatorias, enfermedades autoinmunes y cáncer. La familia de cinasas de proteína S6 ribosomal humana consiste de al menos 8 miembros (RSKI, RSK2, RSK3, RSK4, MSKI, MSK2, p70S6K y p70S6 Kb). Las cinasas de la proteína ribosomal S6 desempeñan funciones pelotrópicas importantes, entre ellas es un rol clave en la regulación de la traducción mARN durante la biosíntesis de proteína (Eur. J. Biochem 2000 Noviembre; 267(21): 6321-30, Exp Cell Res. Nov. 25, 1999; 253 (l):100-9, Mol Cell Endocrinol. May 25, 1999; 151 (l-2):65-77). La fosforilación de la proteína ribosomal S6 por 70S6 también se ha implicado en la regulación de la movilidad de células (Immunol. Cell Biol. 2000 August;78(4):447-51 ) y el crecimiento celular (Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol., 2000;65: 101-27), y por lo tanto, puede ser importante en la metástasis tumoral, la respuesta inmune y la reparación de tejido así como otras condiciones de las enfermedades. Las SAPK (también denominadas "cinasas jun N-terminal" o " JNK's") son una familia de cinasas proteína que representa el paso penúltimo en las trayectorias de transducción de señal que dan como resultado la activación del factor de trascripción c-jun y la expresión de genes regulados por c-jun. En particular, c-jun está involucrado en la trascripción de genes que codifican para proteínas involucradas en la reparación de ADN que está dañado debido a los insultos genotóxicos. Los agentes que inhiben la actividad SAPK en una célula previenen la reparación de ADN y sensibilizan la célula a las modalidades terapéuticas del cáncer que actúan al inducir daño a ADN. BTK desempeña un papel en el enfermedad autoinmune y/o inflamatoria tal como lupus eritematoso sistémico (SLE), artritis reumatoide, vasculitides múltiple, púrpura trombocitopénico idiopático (ITP), miastenia gravis, y asma. Debido a que el rol de BTK en la activación de células B, los inhibidores de BTK también son útiles como inhibidores de actividad patogénica mediada por células B, tal como producción autoanticuerpo, y son útiles para el tratamiento de linfoma de células B y leucemia. CHK2 es un miembro de la familia de cinasa de punto de revisión de cinasas de proteína serina/treonina y se involucra en un mecanismo usado para vigilancia del daño de ADN, tal como el daño causado por los mutágenos ambientales y las especies de oxígeno reactivas endógenas. Como resultado, está implicado como un supresor de tumores y blanco para la terapia de cáncer. CSK influencia el potencial metastásico de las células cancerosas, particularmente el cáncer de colon. Fes es una cinasa de proteína tirosina no de receptor que se ha implicado en una variedad de trayectorias de transducción de señal de citosina, así como la diferenciación de células mieloides. Fes también es un componente clave de la maquinaria de diferenciación de granulocitos. La actividad de cinasa tirosina de receptor Flt3 está implicada en leucemias y síndrome mielodisplásico. En alrededor de 25% de AML las células de leucemia expresan una forma constitutivamente activa de tirosina cinasa auto-fosforilada (p) FLT3 sobre la superficie de la célula. La actividad de p-FLT3 confiere crecimiento y ventaja de supervivencia en las células leucémicas. Los pacientes con leucemia aguda, cuyas células de leucemia expresan actividad P-FLT3 cinasa, tiene un resultado clínico general pobre. La inhibición de actividad cinasa p-FLT3 induce la apoptosis (muerte celular programada) de las células leucémicas. Los inhibidores de IKKa y IKKß (1 & 2) son terapéuticos para enfermedades que incluyen artritis reumatoide, rechazo de trasplante, enfermedad inflamatoria intestinal, osteoartritis, asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, aterosclerosis, soriasis, esclerosis múltiple, embolia, lupus eritematoso sistémico, enfermedad de Alzheimer, isquemia cerebral, lesión traumática cerebral, enfermedad de Parkinson, esclerosis lateral amiotrófica, hemorragia subaracnoide u otras enfermedades o trastornos relacionados con la producción excesiva de mediadores inflamatorios en el cerebro y sistema nervioso central).

El Met se asocia con la mayoría de los tipos de cánceres humanos principales y su expresión se correlaciona con frecuencia con prognosis pobre y metástasis. Los inhibidores de Met son terapéuticos para enfermedades que incluyen cánceres tales como cáncer de pulmón, NSCLC (cáncer pulmonar de células no pequeñas), cáncer en los huesos, cáncer pancreático, cáncer en la piel, cáncer de la cabeza y cuello, melanoma cutáneo o intraocular, cáncer uterino, cáncer rectal, cáncer de la región anal, cáncer de estómago, cáncer de colon, cáncer de mama, tumores ginecológicos (e. g., sarcomas uterinos, carcinoma de las trompas de Falopio, carcinoma del endometrio, carcinoma del cérvix, carcinoma de la vagina o carcinoma de la vulva), Enfermedad de Hodgkin, cáncer del esófago, cáncer del intestino delgado, cáncer del sistema endocrino (e. g., cáncer de la tiroides, paratiroides o glándulas adrenales), sarcomas de los tejidos suaves, cáncer de uretra, cáncer del pene, cáncer prostático, leucemia crónica o aguda, tumores sólidos en la niñez, linfomas linfocíticos, cáncer de la vesícula, cáncer del riñon o uretra (e. g., carcinoma de células renales, carcinoma de la pelvis renal), malignidad pediátrica, neoplasmas del sistema nervioso central (e. g., linfoma CNS primario, tumores en el eje espinal, glioma del tronco cerebral o adenomas pituitarios), cánceres de la sangre tales como leucemia mieloide aguda, leucemia mieloide crónica, etc., enfermedad cutánea neoplásica del esófago de Barrett (síndrome pre-maligno), soriasis, micosis fungoides e hipertrofia prostática benigna, enfermedades relacionadas con la diabetes tales como retinopatía diabética, isquemia retinal y neovascularización retinal, cirrosis hepática, enfermedad cardiovascular tal como aterosclerosis, enfermedad inmunológica como enfermedad autoinmune y enfermedad renal. Preferiblemente, la enfermedad es cáncer tal como leucemia mieloide aguda y cáncer colorrectal. La cinasa relacionada con Nima 2 (Nek2) es una proteína cinasa regulada por ciclo celular con una actividad máxima al inicio de la mitosis que se enfoca en el centrosoma. Estudios funcionales han implicado a la Nek2 en la regulación de separación de centrosoma y formación fusiforme. La proteína Nek2 se eleva de 2 a 5 veces en líneas celulares derivadas de una escala de tumores humanos incluyendo aquéllos de cerviz, ovarios, próstata y particularmente mama. Las enfermedades o condiciones mediadas por 70S6K incluyen, pero no se limitan a desórdenes proliferativos, tales como cáncer y esclerosis tuberosa. Existe evidencia creciente de que la terapia de inhibición de cinasa trabaja de forma consistente y confiable contra los cánceres en los que el blanco del medicamento de cinasa está constitutivamente activado por mutaciones de genes. Existen múltiples reportes de mutaciones encontradas en cinasas que resultan de un proceso de selección tumoral natural. Una lista no limitativa de ejemplos de esto incluye: mutante b- raf V599E en más de 60% de los casos de melanoma; mutantes FU3-ITD en 30% de casos de AML; mutaciones c-kit en pacientes con GIST; PDGFRa en GIST y HES; PDGFRß en CMML; mutantes Pi3K en cánceres de colon y gástrico y glioblastomas; y mutantes EGFR en 10% de cánceres de pulmón (que responde a Iressa®) y en glioblastomas. De acuerdo con lo anterior, la presente invención también provee un método para prevenir o tratar cualquiera de las enfermedades o trastornos descritos con anterioridad en un sujeto que necesite dicho tratamiento, cuyo método consiste en administrar a dicho sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva (véase, "Administración y Composiciones Farmacéuticas", más adelante) de un compuesto de Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Para cualquiera de los usos anteriores, la dosis requerida variará dependiendo del modo de administración, ka condición particular a ser tratada y el efecto deseado Administración v Composiciones farmacéuticas En general, los compuestos de la invención se administrarán en cantidades terapéuticamente efectivas a través de cualquiera de los modos normales y aceptables conocidos en la técnica, ya sea solos o en combinación con uno o más agentes terapéuticos. Una cantidad terapéuticamente efectiva puede variar ampliamente dependiendo de la severidad de la enfermedad, la edad y salud relativa del sujeto, la potencia del compuesto usado y otros factores. En general, se indica que resultados satisfactorios se obtienen sistemáticamente en dosis diarias de alrededor de 0.03 a 2.5mg/kg por peso corporal. Una dosis diaria indicada en el mamífero más grande, e.g. humanos, está en la escala de alrededor de 0.5mg a aproximadamente lOOmg, convenientemente administrada, e.g. en dosis divididas hasta cuatro veces al día o en forma retardada. Las formas de dosis unitarias adecuadas para administración oral comprenden de alrededor de 1 a 50mg del ingrediente activo. Los compuestos de la invención pueden administrarse como composiciones farmacéuticas por cualquier ruta convencional, en particular enteralmente, e.g., oralmente, e.g., en la forma de tabletas o cápsulas, o parenteralmente, e.g., en la forma de soluciones inyectables o suspensiones, tópicamente, e.g., en la forma de lociones, geles, pomadas o cremas, o en una forma nasal o de supositorio. Las composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto de la presente invención en la forma libre o en una forma de sal farmacéuticamente aceptable en relación con al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable o diluyente pueden elaborarse de manera convencional mediante métodos de mezclado, granulado o recubrimiento. Por ejemplo, las composiciones orales pueden ser tabletas o cápsulas de gelatina que comprenden el ingrediente activo junto con a) diluyentes, e.g., lactosa, dextrosa, sucrosa, manitol, sorbitol, celulosa y/o glicina; b) lubricarse, e.g., sílice, talco, ácido esteárico, su sal de magnesio o calcio y/o polietilenglicol; para tabletas también c) aglutinantes, e.g., silicato de aluminio magnesio, pasta de almidón, gelatina, tragacanto, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio y/o polivinilpirrolidona; si se desea d) desintegrantes, e.g., almidones, agar, ácido algínico o su sal de sodio, o mezclas efervescentes; y/o e) absorbentes, colorantes, saborizantes y edulcorantes. Las composiciones inyectables pueden ser soluciones o suspensiones isotónicas acuosas y los supositorios pueden prepararse de emulsiones grasas o suspensiones. Las composiciones pueden ser esterilizadas y/o contener adyuvantes, tales como agentes de conservación, estabilización, humectación o emulsifícación, promotores de solución, sales para regular la presión osmótica y/o reguladores. Además, también pueden contener otras sustancias terapéuticamente valiosas. Las formulaciones adecuadas para las aplicaciones transdérmicas incluyen una cantidad efectiva de un compuesto de la presente invención con un vehículo. Un vehículo puede incluir solventes farmacológicamente aceptables absorbibles para ayudar a pasar a través de la piel del receptor. Por ejemplo, los dispositivos transdérmicos están en la forma de una banda que contiene un miembro de respaldo, un depósito que contiene el compuesto opcionalmente con vehículos, de forma opcional una barrera que controla la velocidad para suministrar el compuesto a la piel del receptor a una velocidad controlada y predeterminada durante un periodo de tiempo prolongado, y medios para asegurar el dispositivo a la piel. También pueden usarse las formulaciones transdérmicas de matriz. Las formulaciones adecuadas para aplicación tópica, e.g., en la piel y ojos, son preferiblemente soluciones acuosas, pomadas, cremas o geles bien conocidos en la técnica. Éstos pueden contener solubilizantes, estabilizadores, agentes que incrementan la tonicidad, reguladores y conservadores. Los compuestos de la invención pueden administrarse en cantidades terapéuticamente efectivas en combinación con uno o más agentes terapéuticos (combinaciones farmacéuticas). Por ejemplo, los efectos sinergísticos pueden ocurrir con otras sustancias inmunomoduladoras o antiinflamatorias, por ejemplo cuando se usan en combinación con ciclosporina, rapamicina, o ascomicina, o análogos inmunosupresores de los mismos, por ejemplo ciclosporina A (CsA), ciclosporina G, FK-506, rapamicina, o compuestos comparables, corticosteroides, ciclofosfamida, azatioprina, metotrexato, brequinar, leflunomida, mizoribina, ácido micofenólico, mofetil micofenolato, 15-desoxispergualin, anticuerpos inmunosupresores, especialmente anticuerpos monoclonales para receptores de leucocitos, por ejemplo MHC, CD2, CD3, CD4, CD7, CD25, CD28, B7, CD45, CD58 o sus ligandos, u otros compuestos inmunomoduladores, tales como CTLA41g. Cuando los compuestos de la invención se administran en conjunto con otras terapias, las dosis de compuestos coadministrados por supuesto variarán dependiendo del tipo de co-fármaco empleado, el medicamento específico empleado, la condición tratada y así sucesivamente. La invención también provee combinaciones farmacéuticas, e.g. un equipo, que contiene a) un primer agente que es un compuesto de la invención como se describe en la presente, en la forma libre o en una forma de sal farmacéuticamente aceptable, y b) al menos un co-agente. El equipo puede contener instrucciones para su administración. Los términos "co-administración" o "administración combinada" o similar como se usan en la presente pretender comprender la administración de los agentes terapéuticos seleccionados a un solo paciente, e intentan incluir regímenes de tratamiento en los que los agentes no necesariamente se administran por la misma ruta de administración o al mismo tiempo. El término "combinación farmacéutica" como se usa en la presente significa un producto que da como resultado de la mezcla o combinación de más de un ingrediente activo incluye combinaciones tanto fijas como no fijas de los ingredientes activos. El término "combinación fija" significa que los ingredientes activos, e.g. un compuesto de Fórmula I y un coagente, ambos se administran a un paciente simultáneamente en la forma de una sola entidad o dosis. El término "combinación no fija" significa que los ingredientes activos, e.g. un compuesto de Fórmula I y un co-agente, ambos son administrados a un paciente como entidades separadas ya sea simultáneamente, de forma concurrente o secuencialmente sin límites de tiempo no específicos, en donde dicha administración provee niveles terapéuticamente efectivos de los 2 compuestos en el cuerpo del paciente. Esto último también aplica a la terapia de cóctel, e.g. la administración de 3 o más ingredientes activos. Procesos para elaborar los compuestos de la ¡nvención La presente invención también incluye procesos para la preparación de compuestos de la invención. En las reacciones descritas, puede ser necesario proteger grupos funcionales reactivos, por ejemplo grupos hidroxi, amino, imino, tio o carboxi, cuando son los deseados en el producto final, para evitar su participación no deseada en las reacciones. Los grupos protectores convencionales pueden usarse de conformidad con prácticas estándares, por ejemplo, véase T.W. Greene y P. G. M. Wuts en "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley and Sons, 1991. Los compuestos de Fórmula I pueden prepararse al proceder como en el siguiente Esquema de Reacción I: Esquema de Reacción I en el que n, Ri y R2 son como se definieron en la Breve Descripción de la invención. Un compuesto de Fórmula la puede sintetizarse al hacer reaccionar un compuesto de fórmula 2 con un compuesto de formula 3 en presencia de un solvente adecuado (por ejemplo, sec-butanol, y similares). La reacción procede en una escala de temperatura de alrededor de 20°C a aproximadamente 80°C y puede tomar hasta 24 horas para completar. Los compuestos de Fórmula I pueden prepararse al proceder como en el siguiente Esquema de Reacción II: Esquema de Reacción II en el que n, R-i y R2 son como se definieron en la Breve Descripción de la Invención. Un compuesto de Fórmula Ib puede sintetizarse al hacer reaccionar un compuesto de fórmula 5 con un compuesto de fórmula 6 en presencia de un solvente adecuado (por ejemplo, sec-butanol, y similares) y un catalizador adecuado (por ejemplo, ácido p-toluensulfónico monohidratado, y similares). La reacción avanza en una escala de temperatura de alrededor de 60°C a aproximadamente 130°C y puede tomar hasta 24 horas para completarse. De forma alternativa, los compuestos de Fórmula Ib pueden sintetizarse al hacer reaccionar un compuesto de fórmula 5 con un compuesto de fórmula 6 en presencia de un solvente adecuado (por ejemplo, dioxano, y similares) y un catalizador adecuado (por ejemplo, acetato de paladio, y similares) y un ligando adecuado (por ejemplo, XantPhos, y similares). La reacción avanza en una escala de temperatura de alrededor de 60°C a aproximadamente 130°C y puede tomar hasta 24 horas para completarse. Los compuestos de fórmula I pueden prepararse si se llevan a cabo como en el siguiente Esquema de Reacción lll: Esquema de Reacción II en el que n, R-i y R2 son como se definieron en la Breve Descripción de la Invención. Un compuesto de Fórmula I puede sintetizarse al hacer reaccionar un compuesto de fórmula 4 con un compuesto de fórmula 3 en presencia de un solvente adecuado (por ejemplo, sec-butanol, y similares). La reacción avanza en una escala de temperatura de alrededor de 20°C a aproximadamente 80°C y puede tomar hasta 24 horas para completarse. Ejemplos detallados de la síntesis de un compuesto de Fórmula I pueden encontrarse más adelante.

Procesos adicionales para elaborar los compuestos de la invención Un compuesto de la invención puede prepararse como un sal de adición acida farmacéuticamente aceptable al hacer reaccionar la forma de base libre del compuesto con un ácido inorgánico u orgánico farmacéuticamente aceptable. De forma alternativa, una sal de adición base farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la invención puede prepararse al hacer reaccionar la forma de ácido libre del compuesto con una base inorgánica u orgánica farmacéuticamente aceptable. De forma alternativa, las formas de sales de los compuestos de la invención pueden prepararse usando sales de los materiales de partida o intermediarios. Las formas de ácido libre o base libre de los compuestos de la ¡nvención pueden prepararse de la forma de sal de adición base correspondiente o la sal de adición acida, respectivamente. Por ejemplo un compuesto de la invención en una forma de sal de adición acida puede convertirse a la base libre correspondiente al tratar con una base adecuada (e.g., solución de hidróxido de amonio, hidróxido de sodio, y similares). Un compuesto de la invención en una forma de sal de adición base puede convertirse en el ácido libre correspondiente al tratar con un ácido adecuado (e.g., ácido clorhídrico, etc.). Los compuestos de la invención en forma no oxidada pueden prepararse de N- óxidos de los compuestos de la invención al tratar con un agente reductor (e.g., azufre, dióxido de azufre, trifenil fosfina, borohidruro de litio, borohidruro de sodio, tricloruro de fósforo, tribromuro, o similares) en un solvente orgánico inerte adecuado (e.g. acetonitrilo, etanol, dioxano acuoso, o similares) de 0 a 80°C. Los derivados de profármacos de los compuestos de la invención pueden prepares mediante métodos conocidos por los expertos en la técnica (e.g., para más detalles véase Saulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985). Por ejemplo, los profármacos adecuados pueden prepararse al hacer reaccionar un compuesto no derivado de la invención con un agente carbanilante adecuado (e.g., 1,1-aciloxialquilocarbanoclorhidrato, carbonato de para-nitrofenilo, o similares). Los derivados protegidos de los compuestos de la invención pueden hacerse a través de métodos conocidos por los expertos en la técnica. Una descripción detallada de las técnicas que aplican para la creación de grupos protectores y su eliminación pueden encontrarse en T. W. Greene, "Protecting Groups in Organic Chemistry", 3rd edición, John Wiley and Sons, Inc., 1999. Los compuestos de la presente invención pueden prepararse convenientemente, o formarse durante el proceso de la invención, como solvatos (e.g., hidratos). Los hidratos de los compuestos de la presente invención pueden prepararse convenientemente por recristalización de una mezcla de solvente acuosa / orgánica, usando solventes orgánicos tales como dioxina, tetrahidrofurano o metanol. Los compuestos de la invención pueden preparase como sus estereoisómeros individuales al hacer reaccionar una mezcla racémica del compuesto con un agente de resolución óptimamente activo para formar un par de compuestos diaestereoisoméricos, separando los diastereómeros y recuperando los enantiómeros ópticamente puros. Al mismo tiempo que la resolución de enantiómeros puede llevarse a cabo usando derivados diastereoméricos covalentes de los compuestos de la invención, se prefieren los complejos disociables (e.g., sales diastereoméricas cristalinas). Los diastereómeros tienen distintas propiedades físicas (e.g., puntos de fusión, puntos de ebullición, solubilidades, reactividad, etc.) y pueden separarse fácilmente al tomar ventaja de sus disimilaridades. Los diastereómeros pueden separase por cromatografía, o preferiblemente, por técnicas de separación/resolución con base en las diferencias de solubilidad. Después se recupera el enantiómero ópticamente puro, junto con el agente de resolución, mediante cualquier medio práctico que resulte en racemización. Una descripción más detallada de las técnicas aplicables a la resolución de estereoisómeros de los compuestos de su mezcla racémica pueden encontrarse en Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, "Enantiomers, Racemates and Resolutions", John Wiley and Sons, Inc., 1981. En resumen, los compuestos de Fórmula I pueden elaborarse mediante un proceso, que involucra: (a) los esquemas de reacción I, II o lll; y (b) opcionalmente convertir un compuesto de la invención en una sal farmacéuticamente aceptable; (c) opcionalmente convertir una forma de sal de un compuesto de la invención a una forma no de sal; (d) opcionalmente convertir una forma no oxidada de un compuesto de la invención en un N-óxido farmacéuticamente aceptable; (e) opcionalmente convertir una forma de N-óxido de un compuesto de la invención en su forma no oxidada; (f) opcionalmente resolver un isómero individual de un compuesto de la invención de las mezclas de isómeros; (g) opcionalmente convertir un compuesto no derivado de la invención en un derivado de pro-fármaco farmacéuticamente aceptable; y h) opcionalmente convertir un derivado de profármaco de un compuesto de la invención a su forma no derivada. Siempre que la producción de los materiales de partida no se describan de forma particular, los compuestos son conocidos o pueden prepararse análogamente a los métodos conocidos en la técnica o como se describe en los Ejemplos de la presente de aquí en adelante. Un experto en la técnica apreciará que las transformaciones anteriores sólo son representativas de los métodos para la preparación de los compuestos de la presente invención, y que otros métodos bien conocidos pueden usarse de forma similar. Ejemplos La presente invención se ejemplifica adicionalmente, pero no se limita, por los siguientes ejemplos que ilustran la preparación de los compuestos de Fórmula I de acuerdo con la invención. Eiemplo 1 4-r2-(fenilamino sustituido)-pirimidin-4-ip-IH-pirrolor2.3-b1- piridina Preparación de IH-Pirrolo[2,3-b]piridin-7-óxido 2 o A una solución de 7-azaindol (10g, 84.6 mmol) en acetato de etilo (80 ml) se le agrega mCPBA (18.96 g, 103.21 mmol) a 0°C por 30 minutos. La mezcla de reacción se lleva a temperatura ambiente y se agita por 3 horas. Después se enfría a 0°C y se agita por 1 hora. El residuo se filtra, se lava con acetato de etilo y se seca para dar N-óxido como una sal de mCPBA. Una suspensión de la sal anterior en agua (80 ml) se enfría a 15°C y K2CO3 al 30% se agrega para aumentar el pH a 10. Después de agitar por 1 hora a temperatura ambiente la mezcla de reacción se enfría 0°C y se mantiene agitando por 1 hora. El residuo se filtra y se lava con H2O fría (10 ml). Después se seca para dar 7g de N-óxído. Preparación de 4-Bromo-IH-pirrolo[2,3-b]piridina (3) Una suspensión de IH-pirrolo[2,3-b]piridin-7-óxido (6 g, 44.8 mmol) y bromuro de amonio-tetrametilo (5.17, 34 mmol) en DMF (60 ml) se enfría a 0°C. Después de agitar por 15 minutos, se agrega anhídrido metansulfónico (7.8 g, 44.8 mmol) a la misma temperatura. La suspensión se lleva a temperatura ambiente y se agita por 4 horas. La mezcla de reacción se vierte en agua (100 ml) y la solución se neutraliza con NaOH al 50%. La solución se enfría a entre 0 y 10°C. El sólido resultante se filtra y se seca para dar 4-bromo-7-azaindol. 1H RMN 600 MHz (DMSO-d6) d 10.81 (brs, IH), 8.36 (d, J = 3.2 Hz, IH), 7.63 (d, J= 3.2 Hz, IH), 7.52 (d, J= 4.1 Hz, IH), 6.79 (d, J= 3.6 Hz, IH); MS m/z 198.1 (M + 1). Preparación de 4-Acet¡l-IH-pirrolo[2,3-b]piridina (5) 4-Bromo-7-azaindol (1 g, 5 mmol) se disuelve en THF (15 ml) y se enfría a -78°C. n-BuLi (5.25 ml, 2 M solución, 2.1eq.) se agregó lentamente a la misma temperatura durante 10 minutos. Después de agitar por 45 minutos, se agregó lentamente N-metoxi-N-metil-acetamida (1.1 ml, 10.5 mmol) a la misma temperatura. La mezcla de reacción se llevó a temperatura ambiente y se agitó durante 3 horas. Después se extinguió al agregar NH4CI (2 ml) saturado a -78°C. La mezcla de reacción se trabajó con acetato de etilo y la capa orgánica se lavó con salmuera y se secó sobre NaSO . La evaporación del solvente bajo vacío dio como resultado el compuesto crudo que se purificó por cromatografía de columna de gel de sílice usando hexano/acetato de etilo como un eluyente. 1H RMN 600 MHz (DMSOd6) d 11.02 (brs, IH), 8.41 (d5 J = 3.2 Hz, IH)5 7.53 (d, J = 3.2 Hz, IH), 7.54 (d, J = 4.4 Hz, IH), 6.09 (d, J = 3.5 Hz, IH), 2.47 (s, 3H); MS m/z 161.1 (M + 1).

Preparación de Enaminona (7) Una mezcla de 4-Acetil-7-azaindol (1g, 6.2 mmol) y reactivo Bredereck (2.56 ml, 12.4 mmol) se irradia por microondas a 110°C por 1 hora. El reactivo de exceso se retira al vacío para dar enaminona que se usa para el siguiente paso sin purificación adicional. Preparación de 4-[2-(fenilamino sustituido)-pirimidin-4-il]-IH-pirrolo[2,3-b]-piridina (9) Una mezcla de enaminona (35 mg, 0.16 mmol), nitrato de 3-bromofenilguanidina (48.57 mg, 0.178 mmol), LiOH (11.5 mg, 48 mmol) en sec-butanol (1 ml) se calentó a 130°C por 24 horas. El solvente se retiró por vacío y el sóludo crudo resultante se purificó al someterse a LC-MS de fase inversa para dar el compuesto del título. 1H RMN 600 MHz (DMSO-d6) d 11.92 (brs, IH), 9.83 (s, IH), 8.65 (d, J = 4.8 Hz, IH), 8.38 (d, J = 4.8 Hz, IH), 8.12 (t, J = 2 Hz, IH)5 7.77 (m, IH), 7.69 (m, IH), 7.65 (d, J =4.8 Hz, IH), 7.59 (t, J = 2 Hz, IH), 7.50 (d, J = 5.2 Hz, IH), 7.33 (t, J = 8.4 Hz, IH), 7.06-7.07 (m, IH); MS m/z 366.2 (M + 1). Eiemplo 2a v 2b Piridin-2-il- í4-( 1 H-pirrolor2 .3 -blpiridin-4-i l)-p¡rim idin-2- ill-amina ( 2a) v (3-Bromo-4-metil-fenil)-r4-(1H-pirrolor2.3-b1piridin -4-iD- pirimidin-2-ill-amina (2b) N N N Oró 15 H Preparación de 4-{2-Cloro-pirimidin-4-il]-IH-pirrolo[2,3-b]piridina (11) A una solución de 4-Bromo-7-azaindol (500mg, 2.5 mmol) THF se agrega n-BuLi (2.6 ml, 2 M solución en hexanos, 2.1 eq.) a -78°C. La mezcla de reacción se mantiene agitando a la misma temperatura por 45 minutos. 2-Cloropirimidina (314.9 mg, 2.75 mmol) en THF se agrega mediante goteo a -78°C. Después de agitar por otras 2 horas, 1ml de agua se agrega y se continúa agitando por otros 20 minutos. DDQ (618.7mg, 2.75 mmol) en THF se agrega después a la misma temperatura y la mezcla de reacción se ajusta a 0°C y se agita por 1 hora. Se extingue con 1 N NaOH y se trabaja con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con solución de NaHCO3 saturada, salmuera y agua. El solvente orgánico combinado se secó (MgSO ) y se evaporó para dar el compuesto de azaindol sustituido con 4-pirimidina cruda. El compuesto se purificó por cromatografía de columna de gel de sílice usando hexano/acetato de etilo como eluyente. 1H RMN 600 MHz (DMSO-d6) d 12.05 (brs, IH), 8.91 (d, J = 5.2 Hz, IH), 8.41 (d, J = 4.8 Hz, IH), 8.25 (d, J = 5.2 Hz, IH), 7.76 (d, J = 5.2 Hz, IH), 7.72 (brs, IH), 7.09 (brs, IH); MS m/z 231.0 (M + 1). Preparación de (3-Bromo-4-metil-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3 b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina (13) Un matraz de Smith (2-5 n¡L) se carga con 11 (26.5 mg, 0.115 mmol), 3-bromo-4- metilanilina (42.54 mg, 0.23 mmol) y ácido p-toluensulfónico monohidratado (4.4mg, 0.023 mmol), sec-BuOH (0.5 mL). Después de purgar con argón, el matraz se sella y se irradia a 100°C por 1.5 horas en un Sintetizador Smith. La solución resultante se somete a purificación por LCMS de fase inversa para dar el compuesto del título. MS m/z 380.04 (M + 1). Preparación de Piridin-2-il-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]- amina (15) A una solución de 4-[2-Cloro-pirimidin-4-il]-IH-pirrolo[2,3-b]piridina (26.5 mg, 0.12 mmol) en dioxano (1 mL) se agregó Pd(OAc)2 (2.6 mg, 0.0115 mM), XantPhose (9.98 mg, 0.017 mmol), CsCO3 (112.40 mg, 0.345 mmol) y 2-aminopiridina (16.17 mg, 0.172 mmol). El matraz se purgó con argón, se niveló y se sometió a radiación por microondas por 10 minutos a 150°C. Después se filtró y se evaporó al vacío. El compuesto deseado se separó por LC-MS de fase inversa para dar el compuesto del título. 1H RMN 600 MHz (DMSO-d6) d 11.97 (bra, IH), 11.55 (bra, IH), 8.79 (d, J = 4.8 Hz, IH), 8.37-8.35 (m, 2H), 8.12 (d, J = 4.8 Hz, IH), 7.84-7.83 (m, 2H), 7.70 (d, J = 4.8 Hz, IH), 7.65 (d, J = 4.8 Hz, IH), 7.25-7.20 (m, 2H); (M + 1); MS m/z 289.10 (M + 1). Eiemplo 3 ( 3-C loro-f enil )-r4-(1H-pi rrolof2.3-bl pirid i n-3-¡ I )pi rim idi n-2-¡ llamina 4-Metoxi-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina (16) 4-Metoxi-IH-pirrolo[2,3-b]piridina se sintetizó de 7-azaindol usando el procedimiento reportado. [Cottan, H. B.; Girfis, N. S.; Robins, R. K. Journal of Heterocyclic Chemistry (1989), 26(2), 317-25]. 3-Acetil-IH-pirrolo[2,3-b]piridina (17) 7-Azaindol (1 g, 8.4 mmol) se disolvió en diclorometano y la solución se agregó en una suspensión de AICI3 (5.6g, 42 mmol) en diclorometano a temperatura ambiente. Después de agitar por 1 hora, se agregó cloruro de acetilo (1.8 ml, 25.2 mmol) lentamente a la misma temperatura y se mantuvo agitando por 2 horas. Después de concluir (CLAR analítico), la mezcla de reacción se enfrió a 0°C y se agregó 3 ml de metanol cuidadosamente para extinguir la reacción. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se lavó con hexanos. El residuo se neutralizó después con solución de NaOH al 30% y se extrajo con diclorometano. El material filtrado se lavó (salmuera), se secó (MgSO ) y se evaporó para dar el producto crudo. El producto puro se obtuvo por recristalización con hexanos/dicloro metano. Preparación de Enaminona (19) Una mezcla de 3-Acetil-7-azaindol (Ig, 6.2 mmol) y reactivo de Bredereck (2.5 equiv) se irradió por microondas a 110°C por 1 hora. El reactivo en exceso se retiró al vacío para dar enaminona que se usa sin purificación adicional.

Preparación de (3-Clorofenil)- [4-( 1 H-pirrolo[2,3-b]piridin 3-il)-pirimidin-2-il]-amina (21) Una mezcla de enaminona (35 mg, 0.16 mmol), nitrato de 3-clorofenilguanidina (41.29 mg, 0.178 equiv), LiOH (11.5 mg, 48 mmol) en sec-butanol (1 ml) se calentó a 13O°C por 24 horas. El solvente se retiró y el residuo se lavó con H2O y hexano para dar el compuesto deseado. El compuesto se purificó al someterse a LC-MS de fase inverse para dar el compuesto del título. 1H RMN 600 MHz (DMSO-d6) d 12.41 (s, IH), 9.71 (s, IH), 8.90 (d, J = 7.6 Hz, IH), 8.53 (d, J = 2.8, IH), 8.38 (d, J = 5.6 Hz, IH)5 8.33 (dd, J = 4.4, 1.6 Hz, IH), 7.85-7.83 (m, 2H), 7.39 (d, J = 2.4 Hz, 2H), 7.38 (s, IH), 7.24 (dd, J = 7.6, 4.4 Hz, IH); MS m/z 322.14 (M + 1). Al repetir los procedimientos descritos en los ejemplos anteriores, usando los materiales de partida adecuados, se obtienen los siguientes compuestos de Fórmula I identificados en la Tabla 1.

Tabla 1 Número de Estructura Datos físicos compuesto 1 HRMN 400 MHz (DMSO- d6) y/o MS (m/z) Ensayos Los compuestos de la invención se prueban para medir su capacidad para inhibir cinasas CDKs, Aurora, Jak2, Rock, CAMKII, FLT3, Tie2, TrkB, FGFR3 y KDR. FGFR3 ÍEnsavo enzimáticoi El ensayo de actividad cinasa con FGFR3 purificada (Upstate) se llevó a cabo en un volumen final de 10 µL conteniendo 0.25 µg/mL de enzima en regulador de cinasa (30 mM Tris-HCl pH7.5, 15 mM MgCI2, 4.5 niM MnCI2, 15 µM Na3VO4 y 50 µg/mL BSA), y substratos (5 µg/mL biotin-poli-EY(Glu, Tlr) (CIS-US, Inc.) y 3µM ATP). Se realizan dos soluciones: la primera solución de 5 µl que contiene la enzima FGFR3 en regulador de cinasa se suministró primero en ProxiPlate® formato 384 (Perkin-Elmer) seguido de la adición de 50 nL de compuestos disueltos en DMSO, luego 5 µl de la segunda solución que contiene el sustrato (poli- EY) y ATP en regulador de cinasa se agregó a cada cavidad. Las reacciones se incubaron a temperatura ambiente por una hora, se detuvo al agregar 10 µL de mezcla de detección HTRF, la cual contiene 30 mM de Tris-HCl pH7.5, 0.5 M KF, 50 mM ETDA, 0.2 mg/mL BSA, 15 µg/mL estreptavidina-XL665 (CIS-US, Inc.) y de anticuerpo anti-fosfotirosina conjugado criptado (CIS-US, Inc.). Después de una hora de incubación a temperatura ambiente para permitir la interacción con estretavidina-biotina, las señales fluorescentes resueltas en el tiempo se leen en Analyst GT (Molecular Devices Corp.). Los valores de IC50 se calculan por análisis de regresión lineal de la inhibición de porcentaje de cada compuesto a 12 concentraciones (1:3 dilución de 50 µM a 0.28 nM). En este ensayo, los compuestos de la ¡nvención tienen un IC50 en la escala de 10 nM a 2 µM.

FGFR3 (Ensavo celular) Los compuestos de la invención se prueban para su capacidad de inhibir la proliferación de células Ba/F3-TEL-FGFR3 transformadas, que depende de la actividad de cinasa celular FGFR3. Ba/F3-TEL-FGFR3 se cultivan hasta 800,000 célulasl/mL en suspensión, con RPMI 1640 complementado con suero de bovino fetal al 10% como el medio de cultvo. Las células se suministran en placas de 384 cavidades a 5000 célula/cavidad en 50 µL de medio de cultivo. Los compuestos de la invención se disuelven y diluyen en dimetilsufóxido (DMSO). Se hacen diluciones seriales de doce puntos 1:3 en DMSO para crear gradiente de concentraciones en la escala típica de 10 mM a 0.05 µM. Las células se agregan con 50 nL de compuestos diluidos y se incuban por 48 horas en incubador de cultivo celular. AlamarBIue® (TREK Diagnostic Systems), que se puede usar para monitorear el entorno de reducción creado por las células proliferantes, se agregan a las células a concentración final de 10%. Después de cyatro horas adicionales de incubación en un incubador de cultivo de células a 37 °C, las señales fluorescentes del AlamarBIue® reducido (Excitación a 530 nm, Emisión a 580 nm) se cuantifican en Analyst GT (Molecular Devices Corp.). Los valores de IC50 se calculan por análisis de regresión lineal de la inhibición de porcentaje de cada compuesto a 12 concentraciones.

FLT3 (Ensavo celular) Los efectos de los compuestos de la invención sobre la actividad celular de FLT3 se llevan a cabo usando métodos idénticos como se describe arriba para la actividad celular FGFR3, excepto porque se usa Ba/F3-FLT3-ITD en vez de Ba/F3-TEL-FGFR3. Upstate KinaseProfiler™ - ensavo cegado de filtro radio-enzimático Los compuestos de la invención se miden por su capacidad de inhibir a los miembros individuales del panel de cinasa. Los compuestos se prueban por duplicado a una concentración final de 10 µM siguiendo su protocolo genérico. Observe que la composición de regulador de cinasa y los sustratos varían de las diferentes cinasas incluidas en en el panel de "Upstate KinaseProfiler™". El regulador de cinasa (2.5µL, 10x - que contiene MnCI2 cuando se requiere), cinasa activa (0.001-0.01 unidades; 2.5µL), péptido específico o Poli(Glu4-Tir) (5-500µM o .01 mg/ml) en regulador de cinasa y regulador de cinasa (50µM; 5µL) se mezclan en un eppendorf sobre hielo. Se agrega una mezcla de Mg/ATP (10 µL; 67.5 (o 33.75) mM MgCI2, 450 (o 225) µM ATP y se agrega 1 µCi/µl [y-32P]-ATP (3000Ci/mmol)) y la reacción se incuba en alrededor de 30°C por alrededor de 10 minutos. La mezcla de reacción se mancha (20µL) en un 2cm x 2cm P81 (fosfocelulosas, para sustrato de péptido positivamente cargados o papel cuadriculado Whatman No. 1 (para sustrato de péptido poli (Glu4-Tir)). Los cuadros de la prueba se lavan 4 veces, por 5 minutos cada uno, con ácido fosfórico al 0.75% y se lava una vez con acetona por 5 minutos. Los cuadros de prueba se transfieren a un matraz de escintilación, se agregan 5 ml de cóctel de escintilación y la incorporación 32P (cpm) al substrato de péptido se cuantifica con un contador de escintilación de Beckman. El porcentaje de inhibición se calcula para cada reacción. Los compuestos de la Fórmula I, en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, exhibe propiedades farmacológicas valiosas, por ejemplo, como se indica por las pruebas in Vitro descritas en esta solicitud. Por ejemplo, los compuestos de Fórmula I preferiblemente muestran un IC50 en la escala de 1 x 10 "10 a 1 x 10 "5 M, preferiblemente de menos de 50OnM, 40OnM, 30OnM y 200nM por al menos una de las cinasas listadas en el panel de cinasa. Los compuestos de Fórmula I, a una concentración de 10 µM, preferiblemente muestran un porcentaje de inhibición de más de 50%, preferiblemente más de alrededor de 70%, contra cinasas CDKs, Aurora, Jak2, Rock, CAMKII, FLT3, Tie2, TrkB, FGFR3 y/o KDR.

Se entiende que los ejemplos y modalidades descritas en la presenten son solamente para propósitos ilustrativos y que varias modificaciones o cambios se sugerirán a los expertos en la técnica y se pretende se incluyan dentro del espíritu y alcance de esta solicitud y alcance de las reivindicaciones adjuntas. Todas las publicaciones, patentes y solicitudes de patentes citadas en la presente se incorporan aquí para referencia para todos los propósitos.

Claims (8)

1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto que se selecciona de las Fórmulas la, Ib y le: la Ib le en las que: n se selecciona de 0, 1 y 2; R-i se selecciona de halo, d-ßalquilo, C-i-ßalcoxi, C-i. 6alquilo halo-sustituido y C-|.6alcox¡ halo-sustituido; R2 se selecciona de C6-?oaril-C0- alquilo y C5.?oheteroaril- C0-4alquilo; en el que dicho arilo o heteroarilo de R2 se sustituye opcionalmente por 1-3 radicales independientemente seleccionados de halo, C?.6alquilo, C-|.6alcoxi, C?.6alquilo halo-sustituido, C-i. 6alcoxi halo-sustituido, -S(O)0-2R5, -COOR5, -C(O)NR5R6 y -NR5C(O)R6; en donde R5 se selecciona de hidrógeno y C?.6alquilo; y R6 se selecciona de C6-?oarilo y C5. loheteroarilo; en el que dicho arilo o heteroarilo de R6 se sustituye opcionalmente con 1 a 3 radicales independientemente seleccionados de halo, C-i.ßalquilo, C-,. 6alcoxi, C-?.6alqu¡lo halo-sustituido y C-?.6alcox¡ halo-sustituido; X se selecciona de CR7 o N; en donde R7 se selecciona de hidrógeno y C?.6alquilo; y las sales, hidratos, solvatos e isómeros de los mismos.
2. 2. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 en el que: n se selecciona de 0 y 1; R-i es C-?.6alcox¡; R2 se selecciona de C6-?oaril-Co-4alquilo y C5.?0heteroarilo-C0- alquilo; en donde dicho arilo o heteroarilo de R2 es opcionalmente sustituido por 1-3 radicales que se seleccionan independientemente de halo, C?.6alquilo, C-i-ßalcoxi, C-|.6alquilo halo-sustituido, -S(O)0-2R5, -COOR5, y -NR5C(O)R6; en el que R5 se selecciona de hidrógeno y C?.6alquilo; y R6 es C6-?oarilo opcionalmente sustituido con 1 a 3 radicales que se seleccionan independientemente de C-?.6alqu¡lo halo-sustituido.
3. 3. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2 en el que: R-i es metoxi; R2 se selecciona de fenilo, bencilo y piridinilo; en donde dicho fenilo, bencilo o piridinilo de R2 es opcionalmente sustituido con 1 a 2 radicales que se seleccionan independientemente de cloro, bromo, fluoro, metilo, trifluorometoxi, trifluorometil, -COO2R5, -S(O)2R5 y -NHC(O)R6; en el que R5 se selecciona de metilo y etilo; y R6 es fenilo opcionalmente sustituido con trifluorometilo.
4. 4. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 que se selecciona de (3-Cloro-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina; (4-Fluoro-f enil)- [4-(l H-pir rolo [2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina; [4-(IH-Pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-(4-trifluorometoxi-fenil)-amina; [4-(IH-Pir rolo[2, 3-b] piridin -4-il)- pi rim idi n-2-il]-(3-trif luorometil-f enil )-amina; (3,4-Dif luoro-fenil )-[4-(IH-pirrolo[2, 3-b] pi ridi n-4-i I )-pirimidin-2-il]-amina; [4-(IH-Pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-(4-trifluorometil-fenil)-amina; éster etílico de ácido 4-[4-(IH-P¡rrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-ilamino]-benzoico; (3-M etoxi-fen i I )-[4-(IH-pirrolo[2, 3-b] pirid i n-4-il)-pi rim idi n-2-i IJ-amina; (3-Fluoro-bencil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina; (3,5-Dimetoxi-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina; (2-Metil-piridin-4-il)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimid¡n-2-il]-amina; (2-Cloro-piridin-4-il)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina; (2- Metoxi-piridin-4-il)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)- pirimidin-2-il]-amina; (4-Metansulfonil-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina; Piridin-4-il-[4-(1H-pirrolo[2,3 -b] pirid i n-4-il)-pirimidin-2-il] - amina; (4-Metil-pirimidin-2-il)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]- amina; (3-Bromo-fenil)-[4-(1-metil-1 H-pirrolo [2,3 -b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il] - amina; (3-Cloro-fenil)-[4-(l-metil-IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-ll]-amina; [4-(l-Metil-IH-?irrolo[2,3-b]p¡ridin-4-il)-p¡rimidin-2-il]-(3-trifluorometil- fenil)-am¡na; (3-Bromo-4-metil-fenil)-[4-(l-metil-IH-pirrolo[2, 3-b] piridin -4 -ll)-pirimidin-2-il]-amina; 2 -{4 -[2- (3-Bromo-fenilamino)-pirimidin-4-il]-pirrolo[2,3-b]piridin-l-il}-etanol; 2-{4-[2-(3-Trifluorometil-fenilamino)-pirimidin-4-il]-pirrolo[2,3-b]piridin-l-il}-etanol; 2-{4-[2-(3-Cloro-fenilamino)-pirimidin-4-il]-pirrolo[2,3-b]piridin-l-il}-etanol; 2-{4-[2-(3-Bromo-4-metil-fenilamino)-pirimidin-4-il]-pirrolo[2,3-b]piridin-l-il}-etanol; {4-[l-(2-Amino-etil)-IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il]-pirimidin-2-il} -(3-bromo-fenil)-amina; {4-[1 -(2-Am¡no-etil)-1 H-pirrolo [2,3 -b]piridin-4-¡l]-pirimidin-2-¡l}-(3-bromo-fenil)-metil-amina; {4-[l-(2-Amino-etil)-IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il]-pirimidin-2-il}-(4-trifluorometil-fenil)-amina; N-{4-Metil-3-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-ilamino]-fenil}-3-trifluorometil-benzamida; [4-(IH-Pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-pirimidin-2-il]-(4-trifluorometil-fenil)-amina; (3,5-Dimetoxi-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)- pirimidin-2-ilJ-amina; (3,5-Difluoro-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]p¡ridin-3-il)-pirimidin- 2-il]-amina; (3-Bromo-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-pirimidin-2-il]-amina; (3-Metoxi-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-pirimidin-2-il]-amina; (4-Cloro-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2, 3-b] pi ridi n-3-il)-pirimidin-2-il]-amina; éster etílico de ácido 4-[4-(IH-Pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-pirimidin-2-ilamino]-benzoico; N-{4-Metil-3-[4-(IH-p¡rrolo[2,3-b]piridin-3-il)-pirimidin-2-ilamino]-fenil}-3-trifluorometil-benzamida; (3-Cloro-fenil)-[4-(4-metoxi- 1 H-pirrolo [2,3-b]piridin-3 -il)-pirimidin-2-il]-amina; [4-(4-Metoxi-IH-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-pirim¡din-2-il]-(3-tri fluoro metil-fenil)-amina; (3-Bromo-fenil)-[4-(4-metoxi-IH-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)- pirimidin-2-il]-amina; N-{4-Metil-3-[4-(IH-pirrolo[2, 3-b] pi ridi n-5-il)-pirimidin-2-ilamino]-fenil}-3-trifluorometil-benzamida; N-Etil-4-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-ilamino]-bencensul fonamida; N-(2-Metoxi-etil)-4-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimid i n-2-ilamino]-bencensul fonamida; N-(3- Metoxi-propil)-4-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-ilamino]-bencensulfonamida; N-(3-Metoxi-propil)-4-[4- (IH-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-pirimidin-2-ilamino]-bencensul fonamida; (3-Bromo-fenil)-[4-(2-metil-IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina; (3-Cloro-f enil )-[4-(2-meti l-l H-pirrolo[2,3--b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina; [4-(2-Metil-IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il3-(3-trifluorometil-fenil)-amina; N-(2-Metoxi-etil)-4-[4-(2-metil-IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-ilamino]- bencensulfonamida; N-(3-Metoxi-propil)-4-[4-(2-metil-IH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)- pirimidin-2-ilamino] -bencensulfonamida; (3-Bromo-fenil)-[4-( 1H-pirazolo [3 ,4-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il]-amina; (3-Cloro-fenil)-[4-(IH-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il] -amina; [4-( 1 H-Pirazolo [3 ,4-b]piridin-4-il)-pirimidin-2-il] -(3- trifluorometil-fenil)-amina; (3-Cloro-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-5-il)-pirimidin-2-il] -amina; (3-Bromo-fenil)-[4-(IH-pirrolo[2,3-b]piridin-5-il)-pirimidin-2- il]-amina; y [4-( 1H-Pirrolo [2,3-b] pi rid i n-5 -il)-pirimidin-2-il] -(3-trifluorometil- fenil)-amina.
5. 5. Una composición farmacéutica que contiene una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 en combinación con un excipiente farmacéuticamente aceptable.
6. 6. Un método para tratar una enfermedad en un animal cuya inhibición de actividad de cinasa, puede prevenir, inhibir o mejorar la patología y/o sintomatología de la enfermedad, cuyo método consiste en administrar al animal una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1.
7. 7. El método de conformidad con la reivindicación 6 en el que la cinasa se selecciona de CDKs, Aurora, Jak2, Rock, CAMKII, FLT3, Tie2, TrkB, FGFR3 y KDR.
8. 8. El uso de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 en la elaboración de un medicamento para tratar una enfermedad en un animal en el que la actividad cinasa, particularmente actividad CDKs, Aurora, Jak2, Rock, CAMKII, FLT3, Tie2, TrkB, FGFR3 y/o KDR, contribuyen a la patología y/o sintomatología de la enfermedad.