[go: up one dir, main page]

MD3355890T2 - Inhibitori de kalikreină plasmatică umană - Google Patents

Inhibitori de kalikreină plasmatică umană Download PDF

Info

Publication number
MD3355890T2
MD3355890T2 MDE20180777T MDE20180777T MD3355890T2 MD 3355890 T2 MD3355890 T2 MD 3355890T2 MD E20180777 T MDE20180777 T MD E20180777T MD E20180777 T MDE20180777 T MD E20180777T MD 3355890 T2 MD3355890 T2 MD 3355890T2
Authority
MD
Moldova
Prior art keywords
alkyl
mmol
fluorophenyl
cyanophenyl
aryl
Prior art date
Application number
MDE20180777T
Other languages
English (en)
Inventor
Pravin L Kotian
Yarlagadda S Babu
V Satish Kumar
Weihe Zhang
Lakshminarayana Vogeti
Original Assignee
Biocryst Pharm Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Biocryst Pharm Inc filed Critical Biocryst Pharm Inc
Publication of MD3355890T2 publication Critical patent/MD3355890T2/ro

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/10—Anti-acne agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/10—Antioedematous agents; Diuretics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)

Abstract

Sunt dezvăluiţi compuşi cu formula I şi săruri acceptabile farmaceutic ale acestora. Compuşii sunt inhibitori ai kalikreinei plasmatice. De asemenea, sunt furnizate compoziţii farmaceutice care cuprind cel puţin un compus al invenţiei şi metode care implică utilizarea compuşilor şi compoziţiilor invenţiei în tratamentul şi prevenirea bolilor şi stărilor caracterizate prin activitate nedorită a kalikreinei plasmatice.

Description

BAZELE INVENŢIEI
Serin proteazele formează cel mai mare şi mai pe larg studiat grup de enzime proteolitice. Rolurile lor critice în procesele fiziologice se extind pe diverse regiuni, cum ar fi coagularea sângelui, fibrinoliza, activarea complementului, reproducerea, digestia şi eliberarea de peptide active fiziologic. Multe dintre aceste procese vitale încep cu scindarea unei legături peptidice simple sau a câtorva legături peptidice în proteina sau peptidele precursoare. Reacţiile sau cascadele proteolitice limitate secvenţial sunt implicate în coagularea sângelui, fibrinoliză şi activarea complementului. Semnalele biologice pentru a porni aceste cascade pot fi de asemenea controlate şi amplificate. Similar, proteoliza controlată poate opri sau inactiva proteinele sau peptidele prin scindări ale unei legături simple.
Kalicreinele sunt un subgrup de serin proteaze. La oameni, kalikreina plasmatică (KLKBl) nu are un omolog cunoscut, în timp ce peptidazele tisulare înrudite cu kalikreina (KLKuri) codifică o familie de cincisprezece serin proteaze strâns înrudite. Kalikreina plasmatică participă la o serie de căi legate de calea intrinsecă de coagulare, inflamaţie şi sistemul complementului. WO 2015/107724 dezvăluie derivaţi de 5-oxazolidinonă condensaţi şi săruri admisibile farmaceutic ale acestora. WO 98/06694 dezvăluie amidinofenil-pirolidine, piroline şi -izoxazolidine şi derivaţi şi săruri acceptabile farmaceutic ale acestora.
Coagularea este procesul prin care sângele formează cheaguri, de exemplu pentru a opri sângerarea. Fiziologia coagulării este relativ complexă în măsura în care include două căi iniţiale separate, care converg într-o cale finală comună care conduce la formarea cheagurilor. În calea comună finală, protrombina este transformată în trombină, care la rândul său converteşte fibrinogenul în fibrină, acesta din urmă fiind principalul bloc de construcţie al polimerilor de fibrină reticulaţi care formează un dop hemostatic. Dintre cele două căi iniţiale din amonte de calea comună finală, una este cunoscută sub numele de activare de contact sau cale intrinsecă, iar cealaltă este cunoscută sub numele de factor tisular sau cale extrinsecă.
Calea intrinsecă începe cu formarea unui complex primar pe colagen prin kininogen cu greutate moleculară mare (HMWK), prekalicreină şi FXII (Factorul XII; factor Hageman). Prekalicreina este convertită în kalicreină, iar FXII este activat pentru a deveni FXIIa. FXIIa converteşte apoi Factorul XI (FXI) în FXIa şi FXIa activează la rândul său Factorul IX (FIX), care cu co-factorul său FVIIIa formează complexul de ʺtenazăʺ, care activează Factorul X (FX) la FXa. FXa este responsabil de conversia protrombinei la trombină în calea comună finală.
Prekalicreina, precursorul inactiv al kalicreinei plasmatice, este sintetizat în ficat şi circulă în plasmă legat de HMWK sau ca zimogen liber. Prekalicreina este scindată de factorul XII activat (FXIIa) pentru a elibera kalicreina plasmatică (PK). Kalicreina plasmatică activată prezintă activitate endopeptidazică faţă de legăturile peptidice după arginină (preferată) şi lizină. PK generează apoi FXIIa suplimentar într-o buclă de feedback care la rândul său activează factorul XI (FXI) la FXIa pentru a se conecta la calea comună. Deşi activarea iniţială a căii intrinseci se realizează printr-o cantitate mică de FXIIa activând o cantitate mică de PK, activarea ulterioară a feedback-ului FXII de către PK este cea care controlează gradul de activare a căii intrinseci şi, prin urmare, coagularea din aval. Hathaway, W. E. şi colab. (1965) Blood 26:521-32.
Kalicreina plasmatică activată clivează, de asemenea, HMWK pentru a elibera peptida puternic vasodilatatoare bradikinina. De asemenea, este capabilă să scindeze o serie de proteine precursoare inactive pentru a genera produse active, cum ar fi plasmina (de la plasminogen) şi urokinaza (de la prourokinază). Plasmina, un agent de reglare al coagulării, clivează proteolitic fibrina în produse de degradare a fibrinei care inhibă formarea excesivă de fibrină.
Pacienţii care au suferit un infarct miocardic acut (MI) prezintă dovezi clinice că se află într-o stare hipercoagulabilă (care promovează cheagul). Această hipercoagulabilitate este în mod paradoxal agravată în plus la cei care primesc terapie fibrinolitică. Generarea crescută de trombină, măsurată prin nivelurile de trombină-antitrombină III (TAT), se observă la pacienţii care urmează un astfel de tratament, comparativ cu nivelurile deja ridicate observate la cei care primesc numai heparină. Hoffmeister, H. M. şi colab. (1998) Circulation 98:2527-33. Creşterea trombinei a fost propusă ca fiind rezultată din activarea mediată de plasmină a căii intrinseci prin activarea directă a FXII de către plasmină.
Nu numai că hipercoagulabilitatea indusă de fibrinoliză conduce la creşterea ratelor de reocluzie, ci este, de asemenea, probabil responsabilă, cel puţin parţial, pentru eşecul de a se atinge fibrinoliza completă a cheagului (tromb), un neajuns major al terapiei fibrinolitice (Keeley, E. C. şi colab. (2003) Lancet 361: 13-20). O altă problemă în terapia fibrinolitică este riscul crescut de hemoragie intracraniană ce o însoţeşte. Menon, V. şi colab. (2004) Chest 126:549S-575S; Fibrinolytic Therapy Trialists' Collaborative Group (1994) Lancet 343:311-22. Prin urmare, o terapie anticoagulantă adjuvantă care nu creşte riscul de sângerare, dar inhibă formarea de trombină nouă, ar fi deosebit de benefică.
Prin urmare, există nevoia de a se dezvolta inhibitori suplimentari ai PK care să poată înclina balanţa fibrinolizei/trombozei la trombul de ocluzie spre dizolvare, promovând astfel reperfuzia şi atenuând starea de hipercoagulabilitate, prevenind astfel reformarea trombului şi reocluzarea vasului.
REZUMATUL INVENŢIEI
În anumite aspecte, invenţia redă compuşi cu formula (I) şi săruri acceptabile farmaceutic ale acestora:
în care, independent pentru fiecare incidenţă:
R1 reprezintă ―OH, ―ORc, ―NH2, ―NHRc, ―NRcRd, alchil(C1-C10), aril(C6-C10), aril(C6-C10 alchil(C1-C10), heteroaril, heteroaril alchil (C1-C10), halo, halo alchil (C1-C10), cicloalchil(C3-C12), (cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10), ―C(O)Rc, ―C(O)OH, ―C(O)ORc, ―OC(O)Rc, ―C(O)NH2, ―C(O)NHRc,―C(O)NRcRd, ―NHC(O)Rc, sau ―NRcC(O)Rd; sau două incidenţe geminale ale lui R1 luate împreună cu carbonul la care sunt ataşate reprezintă -C(O)-; sau două incidenţe vicinale sau geminale ale lui R1 luate împreună formează un inel carbociclic (C3-C12) sau heterociclic condensat sau spirociclic opţional substituit;
W este ―C(O)NH― sau ―C(O)N(Rc);
R2 reprezintă aril sau heteroaril (C6-C10) opţional substituit;
V reprezintă aril sau heteroaril (C6-C10) opţional substituit;
Z este absent sau reprezintă unul sau mai mulţi substituenţi selectaţi independent din grupul care constă din halo, halo(C1-C10)alchil, ―NO2, ―CN, ―C(O)Rc, ―C(O)OH, ―C(O)ORc, ―OC(O)Rc, -C(O)NH2, ―C(O)NHRc, ―C(O)NRcRd, ―NHC(O)Rc, ―N(Rc)C(O)Rd, ―OS(O)p(Rc), ―NHS(O)p(Rc), şi ―NRcS(O)p(Rc);
X reprezintă ―C(NH2)―, ―C(NH(Rc))―, ―C(NRcRd)―, ―C(NHS(O)pRc)―, ―C(NHC(O)Rc)―, ―C(NHC(O)NH2)―, ―C(NHC(O)NHRc)―, ―C(NHC(O)NRcRd)―, ―C(OH)―, ―C(O(alchil(C1-C10)))―, ―C(N3)―, ―C(CN)―, ―C(NO2)―, ―C(S(O)nRa)―, ―C[-C(=O)Rc]―, ―C[-C(=O)NRcRd]―, ―C[-C(=O)SRc]―, ―C[-S(O)Rc]―, ―C[-S(O)2Rc]―, -C[S(O)(ORc)]―, ―C[-S(O)2(ORc)]―, ―C[-SO2NRcRd]―, ―C(halogen)―, ―C(alchil (C1-C10)), -C((cicloalchil (C3-C12))(alchil C1-C10)), ―C(alchenil (C2-C10))― ―C(alchinil (C2-C10))―, sau ―C(aril(C6-C10) alchil (C1-C10))―;
R3 reprezintă aril (C6-C10), heteroaril, cicloalchil (C3-C12), sau heterocicloalchil opţional substituit;
R3a este absent sau reprezintă unul sau mai mulţi substituenţi selectaţi independent din grupul care constă din halo, hidroxi, alchil (C1-C10), -CF3, -OCF3, alcoxi (C1-C10), aril (C6-C10), heteroaril, ariloxi (C6-C10), amino, aminoalchil (C1-C10), -C(O)NH2, ciano, -NHC(O) alchil (C1-C10), -SO2 alchil (C1-C10), -SO2NH2, cicloalchil (C3-C12), -(CH2)rORa, -NO2, - (CH2)rNRaRb, -(CH2)rC(O)Ra, -NRaC(O)Rb, -C(O)NRcRd, -NRaC(O)NRcRd, - C(=NRa)NRcRd, -NHC(=NRa)NRcRd, -NRaRb, -SO2NRcRd, -NRaSO2NRcRd, - NRaSO2 alchil (C1-C10), -NRaSO2Ra, -S(O)pRa, -(CF2)rCF3, -NHCH2Ra, -OCH2Ra, - SCH2Ra, -NH(CH2)2(CH2)rRa, -O(CH2)2(CH2)rRa, sau -S(CH2)2(CH2)rRa;
Y reprezintă o legătură; sau -Y-R4 reprezintă - alchilen (C1-C10) -R4 opţional substituit, - CH2C(O)-R4, -CH2NH-R4, -CH2N((C1-C10)alchil)-R4, -CRaRb-R4, -NH-R4, -NHCH2-R4, -NHC(O)-R4, -N((C1-C10)alchil)-R4, -N((C1-C10)alchil)CH2-R4, -N((CH2)2OH)-R4, - N((cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10))R4, -heterociclil-R4, -OR4, -OCH2-R4, -OC(O)-R4, -OC(O)NRaRb, -SCH2R4, sau -SR4;
R4 reprezintă hidrogen, hidroxi, alchil (C1-C10), cicloalchil (C3-C12), (heterocicloalchil) alchil (C1-C10), (cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10), -CH2OH, -CH(alchil (C1-C10))OH, -CH(NH2)CH(alchil (C1-C10))2, aril (C6-C10), aril (C6-C10) alchil (C1-C10), heteroaril, heteroaril alchil (C1-C10), -CH2S(alchil (C1-C10)), amino, sau ciano opţional substituit; sau - (CRaRb)r(CRaRb)p- condensat la poziţia a 4-a a inelului care poartă Z pentru a forma un inel heterociclic cu 5 la 7 membri cu substituenţi opţionali; sau,
când R3 este fenil, R4 poate reprezenta -NRa- condensat la poziţia orto la X pe acel fenil; fiecare Ra şi Rb este independent H, alchil (C1-C10), alchenil (C2-C10), alchinil (C2-C10), aril (C6-C10) alchil (C1-C10), (cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10), -C(=O)Rc, -C(=O)ORc, - C(=O)NRcRd, -C(=O)SRc, -S(O)Rc, -S(O)2Rc, -S(O)(ORc), sau ―SO2NRcRd;
Rc şi Rd reprezintă, independent pentru fiecare incidenţă, opţional substituit alchil (C1-C10), alchenil (C2-C10), alchinil (C2-C10), halo alchil (C1-C10), aril (C6-C10), aril (C6-C10) alchil (C1-C10), heteroaril, heteroaril alchil (C1-C10), cicloalchil (C3-C12), (cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10), heterocicloalchil, (heterocicloalchil) alchil (C1-C10), -C(O) alchil (C1-C10), sau -S(O)p(alchil (C1-C10)); sau Rc şi Rd pot fi luaţi împreună pentru a forma un inel heterociclic opţional substituit;
r este 0, 1, 2, sau 3;
n este un întreg de la 0 la 6; şi
p este 0, 1, sau 2;
în care în plus:
"heteroaril" înseamnă un inel aromatic monociclic, biciclic sau policiclic având în total 3-12 atomi şi cel puţin un heteroatom selectat din grupul constând din azot, oxigen şi sulf;
"heterociclic", "heterocicloalchil" şi "heterociclil" înseamnă un inel nearomatic monociclic, biciclic sau triciclic având 3-12 atomi în total şi cel puţin un heteroatom selectat din grupul constând din azot, oxigen şi sulf; şi
"opţional substituit" înseamnă nesubstituit sau substituit cu unul sau mai mulţi substituenţi fiecare selectaţi independent din grupul care constă din halogen, azidă, alchil (C1-C10), aril (C6-C10) alchil (C1-C10), alchenil (C2-C10), alchinil (C2-C10), cicloalchil (C3-C12), hidroxil, alcoxi (C1-C10), amino (de exemplu, -NH2, -NH(alchil (C1-C6)),-N(alchil (C1-C6))2), nitro, sulfhidril, imino, amido, fosfonat, fosfinat, carbonil, carboxil, silil, eter, (C1-C10)alchiltio, sulfonil, sulfonamido, cetonă, aldehidă, ester, heterociclil, aril (C6-C10), heteroaril, fluoro alchil (C1-C10), ciano, - C(O)O alchil (C1-C6), -C(O)NH2, -C(O)NH alchil (C1-C6), -C(O)N(alchil (C1-C6))2, şi haloalchil (C1-C6).
În anumite aspecte, invenţia redă o compoziţie farmaceutică, care cuprinde un compus conform invenţiei, sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia; şi un purtător acceptabil farmaceutic.
Variante ale dezvăluirii care nu fac parte din invenţie redau o metodă de tratare sau prevenire a unei boli sau stări caracterizate prin activitate nedorită a kalikreinei plasmatice. Metoda cuprinde etapa de administrare la un subiect care are nevoie de aceasta a unei cantităţi eficiente terapeutic dintr-un compus conform invenţiei, sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia, tratând sau prevenind astfel boala sau starea caracterizată prin activitate nedorită a kalikreinei plasmatice. În anumite aspecte, invenţia redă un compus conform oricăreia dintre revendicările de la 1 la 18, sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia, pentru utilizarea în tratamentul sau prevenirea unei boli sau stări caracterizate printr-o activitate nedorită a kalikreinei plasmatice, în care boala sau starea caracterizată prin activitatea nedorită a kalikreinei plasmatice este selectată din grupul constând din accident vascular cerebral, inflamaţie, leziune de reperfuzie, infarct miocardic acut, tromboză venoasă profundă, stare post tratament fibrinolitic, angină, edem, angioedem, angioedem ereditar, sepsis, artrită, hemoragie, pierderi de sânge în timpul tratamentului de bypass cardiopulmonar, boală inflamatorie intestinală, diabet zaharat, retinopatie, retinopatie diabetică, edem macular diabetic, degenerescenţă maculară diabetică, edem macular legat de vârstă, degenerescenţă maculară legată de vârstă, retinopatie proliferativă, neuropatie, hipertensiune arterială, edem cerebral, excreţie crescută de albumină, macroalbuminurie şi nefropatie.
DESCRIEREA DETALIATĂ
Au fost raportaţi inhibitori ai kalicreinei plasmatice şi aceştia sunt utili în metode şi compoziţii terapeutice adecvate pentru utilizare în eliminarea sau reducerea diferitelor forme de ischemie, incluzând, dar fără a se limita la pierderea de sânge perioperatorie, ischemie cerebrală, debutul răspunsului inflamator sistemic şi/sau leziune de reperfuzie, de exemplu, leziune de reperfuzie asociată cu ischemie cerebrală sau o ischemie cerebrală focală Pierderea de sânge perioperatorie rezultă din proceduri chirurgicale invazive care conduc la activarea prin contact a componentelor complementului şi a sistemelor de coagulare/fibrinoliză. Inhibitorii de kalicreină pot fi utilizaţi pentru a reduce sau preveni pierderea de sânge perioperatorie şi un răspuns inflamator sistemic la pacienţii supuşi unor proceduri chirurgicale invazive, în special intervenţii chirurgicale cardiotoracice. Inhibitorii de kalicreină pot fi utilizaţi şi pentru reducerea sau prevenirea ischemiei cerebrale şi a accidentului vascular cerebral şi/sau a leziunilor de reperfuzie asociate cu ischemia cerebrală. De asemenea, ei pot preveni deficitele neurologice şi cognitive asociate cu accidentul vascular cerebral, pierderea de sânge şi ischemia cerebrală, de exemplu, evenimente care nu sunt asociate cu intervenţia chirurgicală. Alte exemple de aplicaţii pentru inhibitorii de kalicreină includ chirurgia cardiacă pediatrică, transplantul pulmonar, înlocuirea totală a şoldului şi transplantul de ficat ortotopic, pentru a reduce sau preveni accidentul vascular cerebral în timpul acestor proceduri, precum şi pentru a reduce sau preveni accidentul vascular cerebral în timpul grefei de by-pass coronarian (CABG) şi oxigenarea membranelor extracorporale (ECMO).
Definiţii
Articolele "un" şi "o" sunt utilizate aici cu referire la unul sau la mai mult de unul (adică, la cel puţin unul) dintre obiectele gramaticale ale articolului. Cu titlu de exemplu, ʺun elementʺ înseamnă un element sau mai multe elemente.
Termenul "heteroatom" este recunoscut în stadiul tehnicii şi se referă la un atom al oricărui element altul decât carbon sau hidrogen. Heteroatomii ilustrativi includ bor, azot, oxigen, fosfor, sulf şi seleniu şi, alternativ, oxigen, azot sau sulf.
Termenul "alchil" aşa cum se utilizează aici este un termen din domeniu şi se referă la grupări alifatice saturate, incluzând grupări alchil cu lanţ linear, grupări alchil cu lanţ ramificat, grupări cicloalchil (aliciclice), grupări cicloalchil substituite cu alchil şi grupări alchil substituite cu cicloalchil. În anumite variante de realizare, un alchil cu lanţ liniar sau ramificat are aproximativ 30 sau mai puţini atomi de carbon în coloana sa vertebrală (de exemplu, C1-C30 pentru lanţul liniar, C3-C30 pentru lanţul ramificat), şi alternativ, aproximativ 20 sau mai puţin, sau 10 sau mai puţin. În anumite variante de realizare, termenul "alchil" se referă la o grupare alchil C1-C10 cu lanţ liniar. În anumite variante de realizare, termenul "alchil" se referă la o grupare alchil C1-C6 cu lanţ liniar. În anumite variante de realizare, termenul "alchil" se referă la o grupare alchil C3-C12 cu lanţ ramificat. În anumite variante de realizare, termenul "alchil" se referă la o grupare alchil C3-C8 cu lanţ ramificat. Exemple reprezentative de alchil includ, dar nu se limitează la, metil, etil, n-propil, izo-propil, n-butil, sec-butil, izo-butil, terţ-butil, n-pentil, izopentil, neopentil, şi n-hexil.
Termenul "cicloalchil" înseamnă inele carbociclice saturate mono- sau biciclice sau cu punte, fiecare având de la 3 la 12 atomi de carbon. Anumiţi cicloalchili au de la 5-12 atomi de carbon în structura inelului lor şi pot avea 6-10 atomi de carbon în structura inelului. De preferinţă, cicloalchilul este (C3-C7)cicloalchil, care reprezintă un inel carbociclic monociclic saturat, având de la 3 la 7 atomi de carbon. Exemple de cicloalchili monociclici includ ciclopropil, ciclobutil, ciclopentil, ciclopentenil, ciclohexil, ciclohexenil, cicloheptil, şi ciclooctil. Sistemele de inel de cicloalchil biciclic includ inele monociclice punte şi inele biciclice fuzionate. Inelele monociclice punte conţin un inel de cicloalchil monociclic unde sunt legaţi doi atomi de carbon ne-adiacenţi ai inelului monociclic printr-o punte alchilenă de între unul şi trei atomi de carbon suplimentari (adică, o grupare punte având forma -(CH2)w-, unde w este 1, 2, sau 3). Exemple reprezentative de sisteme de inel biciclic includ, dar nu se limitează la, biciclo[3,1,1]heptan, biciclo[2,2,1]heptan, biciclo[2,2,2]octan, biciclo[3,2,2]nonan, biciclo[3,3,1]nonan, şi biciclo[4,2,1]nonan. Sistemele de inel de cicloalchil biciclic fuzionat conţin un inel de cicloalchil monociclic fuzionat fie la un fenil, un cicloalchil monociclic, un cicloalchenil monociclic, un heterociclil monociclic, sau un heteroaril monociclic. Cicloalchilul biciclic punte sau fuzionat este ataşat la fracţiunea moleculară părinte prin orice atom de carbon conţinut în inelul de cicloalchil monociclic. Grupările cicloalchil sunt opţional substituite. În anumite variante de realizare, cicloalchilul biciclic condensat este un inel cicloalchil monociclic cu 5 sau 6 membri condensat fie la un inel fenil, un cicloalchil monociclic cu 5 sau 6 membri, un cicloalchenil monociclic cu 5 sau 6 membri, un heterociclil cu 5 sau 6 membri, un heterociclil monociclic cu 5 sau cu 6 membri sau un heteroaril monociclic cu 5 sau 6 membri, în care cicloalchilul biciclic condensat este opţional substituit.
Termenul "cicloalchilalchil" aşa cum se utilizează aici se referă la o grupare alchil substituită cu una sau mai multe grupări cicloalchil. Un exemplu de cicloalchilalchil este gruparea ciclohexilmetil.
Termenul "heterociclil" aşa cum se utilizează aici se referă la un radical al unui sistem ciclic nearomatic, incluzând, dar fără a se limita la, inele monociclice, biciclice şi triciclice, care pot fi complet saturate sau care pot conţine una sau mai multe unităţi de nesaturare, pentru evitarea oricărui dubiu, gradul de nesaturare nu are ca rezultat un sistem inelar aromatic şi având 3 până la 12 atomi incluzând cel puţin un heteroatom, cum ar fi azot, oxigen sau sulf. În scopuri de exemplificare, care nu ar trebui interpretate ca limitând scopul acestei invenţii, următoarele sunt exemple de inele heterociclice: aziridinil, azirinil, oxiranil, tiiranil, tiirenil, dioxiranil, diazirinil, diazepanil, 1,3-dioxanil, 1,3-dioxolanil, 1,3-ditiolanil, 1,3-ditianil, imidazolidinil, izotiazolinil, izotiazolidinil, izoxazolinil, izoxazolidinil, azetil, oxetanil, oxetil, tietanil, tietil, diazetidinil, dioxetanil, dioxetenil, ditietanil, ditietil, dioxalanil, oxazolil, tiazolil, triazinil, izotiazolil, izoxazolil, azepine, azetidinil, morfolinil, oxadiazolinil, oxadiazolidinil, oxazolinil, oxazolidinil, oxopiperidinil, oxopirolidinil, piperazinil, piperidinil, piranil, pirazolinil, pirazolidinil, pirolinil, pirolidinil, chinuclidinil, tiomorfolinil, tetrahidropiranil, tetrahidrofuranil, tetrahidrotienil, tiadiazolinil, tiadiazolidinil, tiazolinil, tiazolidinil, tiomorfolinil, 1,1-dioxidotiomorfolinil (tiomorfolin sulfonă), tiopiranil, şi tritianil. O grupare heterociclil este opţional substituită cu unul sau mai mulţi substituenţi aşa cum este descris mai jos.
Termenul "heterocicloalchilalchil" aşa cum se utilizează aici se referă la o grupare alchil substituită cu una sau mai multe grupări heterocicloalchil (adică heterociclil).
Termenul "alchenil" aşa cum se utilizează aici înseamnă un radical hidrocarbonat cu lanţ liniar sau ramificat care conţine de la 2 la 10 carboni şi care conţine cel puţin o legătură dublă carbon-carbon formată prin îndepărtarea a doi hidrogeni. Exemple reprezentative de alchenil includ, dar nu se limitează la, etenil, 2-propenil, 2-metil-2-propenil, 3-butenil, 4-pentenil, 5-hexenil, 2-heptenil, 2-metil-1-heptenil, şi 3-decenil. Legătura(ile) nesaturată(e) a ale grupării alchenil pot fi localizate oriunde în fragment şi pot avea fie configuraţia (Z) fie configuraţia (E) faţă de legătura(ile) dublă(e).
Termenul "alchinil" aşa cum se utilizează aici înseamnă un radical de hidrocarbură cu lanţ liniar sau ramificat care conţine de la 2 până la 10 atomi de carbon şi care conţine cel puţin o legătură triplă carbon-carbon. Exemple reprezentative de alchinil includ, dar nu se limitează, la acetilenil, 1-propinil, 2-propinil, 3-butinil, 2-pentinil şi 1-butinil.
Termenul "alchilen" este recunoscut în domeniu şi aşa cum se utilizează aici se referă la un diradical obţinut prin îndepărtarea a doi atomi de hidrogen ai unei grupări alchil, aşa cum este definită mai sus. Într-un mod de realizare un alchilen se referă la un alcan disubstituit, adică, un alcan substituit la două poziţii cu substituenţi cum ar fi halogen, azidă, alchil, aralchil, alchenil, alchinil, cicloalchil, hidroxil, alcoxil, amino, nitro, sulfhidril, imino, amido, fosfonate, fosfinat, carbonil, carboxil, silil, eter, alchiltio, sulfonil, sulfonamido, cetonă, aldehidă, ester, heterociclil, resturi aromatice sau heteroaromatice, fluoroalchil (cum ar fi triflurometil), ciano, sau altele asemenea. Adică, într-un mod de realizare, un "alchil substituit" este un "alchilen".
Termenul "amino" este un termen din domeniu şi aşa cum se utilizează aici se referă atât la amine nesubstituite cât şi substituite, de exemplu, un rest care poate fi reprezentat prin formulele generale:
în care Ra, Rb şi Rc reprezintă fiecare independent un hidrogen, un alchil, un alchenil, -(CH2)x-Rd, sau Ra şi Rb, luaţi împreună cu atomul de N la care sunt ataşaţi completează un heterociclu având de la 4 la 8 atomi în structura de inel; Rd reprezintă un aril, un cicloalchil, un cicloalchenil, un heterociclil sau un policiclil; şi x este zero sau un întreg din domeniul de 1 la 8. În anumite moduri de realizare, numai unul dintre Ra sau Rb poate fi un carbonil, de exemplu, Ra, Rb şi împreună cu azotul nu formează o imidă. În alte variante de realizare, Ra şi Rb (şi opţional Rc) fiecare independent reprezintă un hidrogen, un alchil, un alchenil, sau -(CH2)x-Rd. În anumite variante de realizare, termenul "amino" se referă la ―NH2.
Termenul "amido", aşa cum se utilizează aici, înseamnă -NHC(=O)-, în care gruparea amido este legată de fragmentul molecular părinte prin azot. Exemple de amido includ alchilamido cum ar fi CH3C(=O)N(H)- şi CH3CH2C(=O)N(H)-.
Termenul "acil" este un termen din stadiul tehnicii şi, astfel cum s-a utilizat aici, se referă la orice grupare sau radical având forma RCO- unde R este orice grupare organică, de exemplu, alchil, aril, heteroaril, aralchil, şi heteroaralchil. Grupări acil reprezentative includ acetil, benzoil şi malonil.
Termenul "aminoalchil" astfel cum s-a utilizat aici se referă la o grupare alchil substituită cu una sau mai multe grupări amino. Într-o variantă de realizare, termenul "aminoalchil" se referă la o grupare aminometil.
Termenul "aminoacil" este un termen din domeniu şi aşa cum se utilizează aici se referă la o grupare acil substituită cu una sau mai multe grupări amino.
Termenul "aminotionil" aşa cum se utilizează aici se referă la un analog al unui aminoacil în care O din RC(O)- a fost înlocuit cu sulf, prin urmare este sub forma de RC(S)-. Termenul "fosforil" este un termen din domeniu şi aşa cum se utilizează aici poate fi reprezentat în general prin formula:
în care Q50 reprezintă S sau O, şi R59 reprezintă hidrogen, un alchil sau un aril inferior; de exemplu, -P(O)(OMe)- sau -P(O)(OH)2. Când este utilizată pentru a substitui, de exemplu, un alchil, gruparea fosforil a fosforilalchilului poate fi reprezentată prin formulele generale:
în care Q50 şi R59, fiecare independent, sunt definite mai sus, şi Q51 reprezintă O, S sau N; de exemplu, -O-P(O)(OH)OMe sau -NH-P(O)(OH)2. Când Q50 este S, fragmentul de fosforil este un "fosforotioat."
Termenul "aminofosforil" aşa cum se utilizează aici se referă la o grupare fosforil substituită cu cel puţin o grupare amino, aşa cum este definită aici; de exemplu, -P(O)(OH)NMe2.
Termenul "azidă" sau "azido", aşa cum se utilizează aici, înseamnă o grupare ―N3.
Termenul "carbonil" aşa cum se utilizează aici se referă la -C(=O)-.
Termenul "tiocarbonil" aşa cum se utilizează aici se referă la -C(=S)-.
Termenul "alchilfosforil" aşa cum se utilizează aici se referă la o grupare fosforil substituită cu cel puţin o grupare alchil, aşa cum este definită aici; de exemplu, -P(O)(OH)Me.
Termenul "alchiltio" aşa cum se utilizează aici se referă la alchil-S-.
Termenul "carboxi", aşa cum se utilizează aici, înseamnă o grupare -CO2H.
Termenul "aril" este un termen din domeniu şi aşa cum se utilizează aici se referă la include grupări de hidrocarbură aromatică monociclice, biciclice şi policiclice de exemplu, benzen, naftalen, antracen, şi piren. Inelul aromatic poate fi substituit la una sau mai multe poziţii ale inelului cu unul sau mai mulţi substituenţi, cum ar fi halogen, azidă, alchil, aralchil, alchenil, alchinil, cicloalchil, hidroxil, alcoxil, amino, nitro, sulfhidril, imino, amido, fosfonat, fosfinat, carbonil, carboxil, silil, eter, alchiltio, sulfonil, sulfonamido, cetonă, aldehidă, ester, heterociclil, fragmente aromatice sau heteroaromatice, fluoroalchil (cum ar fi triflurometil), ciano, sau altele asemenea. Termenul "aril" de asemenea include sisteme de inel policiclice având două sau mai multe inele ciclice în care doi sau mai mulţi atomi de carbon sunt comuni pentru două inele alăturate (inelele sunt "inele fuzionate") în care cel puţin unul dintre inele este o hidrocarbură aromatică, de exemplu, celelalte inele ciclice pot fi cicloalchili, cicloalchenili, cicloalchinili, arili, heteroarili, şi/sau heterociclili. În anumite variante de realizare, termenul "aril" se referă la o grupare fenil. În anumite variante de realizare, "aril" are de la 6 la 10 atomi de carbon. Termenul "heteroaril" este un termen din domeniu şi aşa cum se utilizează aici se referă la o grupare aromatică monociclică, biciclică, şi policiclică având 3 la 12 atomi în total incluzând unul sau mai mulţi heteroatomi cum ar fi azot, oxigen, sau sulf în structura inelului. Grupări heteroaril exemplare includ azaindolil, benzo(b)tienil, benzimidazolil, benzofuranil, benzoxazolil, benzotiazolil, benzotiadiazolil, benzotriazolil, benzoxadiazolil, furanil, imidazolil, imidazopiridinil, indolil, indolinil, indazolil, izoindolinil, izoxazolil, izotiazolil, izochinolinil, oxadiazolil, oxazolil, purinil, piranil, pirazinil, pirazolil, piridinil, pirimidinil, pirolil, pirolo[2,3-d]pirimidinil, pirazolo[3,4-d]pirimidinil, chinolinil, chinazolinil, triazolil, tiazolil, tiofenil, tetrahidroindolil, tetrazolil, tiadiazolil, tienil, tiomorfolinil, triazolil sau tropanil, şi altele asemenea. "Heteroarilul" poate fi substituit la una sau mai multe poziţii din inel cu unul sau mai mulţi substituenţi cum ar fi halogen, azidă, alchil, aralchil, alchenil, alchinil, cicloalchil, hidroxil, alcoxil, amino, nitro, sulfhidril, imino, amido, fosfonat, fosfinat, carbonil, carboxil, silil, eter, alchiltio, sulfonil, sulfonamido, cetonă, aldehidă, ester, heterociclil, fracţiuni aromatice sau heteroaromatice, fluoroalchil (cum ar fi triflurometil), ciano, sau altele asemenea. Termenul "heteroaril" include, de asemenea, sisteme inelare policiclice având două sau mai multe inele ciclice în care doi sau mai mulţi atomi de carbon sunt comuni la două inele alăturate (inelele sunt ʺinele condensateʺ) în care cel puţin unul dintre inele este o grupare aromatică având una sau mai mulţi heteroatomi în structura de inel, de exemplu, celelalte inele ciclice pot fi cicloalchili, cicloalchenili, cicloalchinili, arili, heteroarili şi/sau heterociclili. Termenul "aralchil" sau "arilalchil" este un termen din domeniu şi aşa cum se utilizează aici se referă la o grupare alchil substituită cu o grupare aril, în care fragmentul este ataşat la molecula părinte prin gruparea alchil. Termenul "heteroaralchil" sau "heteroarilalchil" este un termen din domeniu şi aşa cum se utilizează aici se referă la o grupare alchil substituită cu o grupare heteroaril, ataşată la fragmentul molecular părinte prin gruparea alchil. Termenul "alcoxi" aşa cum se utilizează aici înseamnă o grupare alchil, aşa cum este definită aici, ataşată la fragmentul molecular părinte printr-un atom de oxigen. Exemple reprezentative de alcoxi includ, dar nu se limitează la, metoxi, etoxi, propoxi, 2-propoxi, butoxi, terţ-butoxi, pentiloxi, şi hexiloxi. Termenul "alcoxicarbonil" înseamnă o grupare alcoxi, aşa cum este definită aici, ataşată la fragmentul molecular părinte printr-o grupare carbonil, reprezentată prin -C(=O)-, aşa cum este definită aici. Exemple reprezentative de alcoxicarbonil includ, dar nu se limitează la, metoxicarbonil, etoxicarbonil, şi terţ-butoxicarbonil. Termenul "alchilcarbonil", astfel cum s-a utilizat aici, înseamnă o grupare alchil, astfel cum s-a definit aici, ataşată la fracţiunea moleculară părinte printr-o grupare carbonil, astfel cum s-a definit aici. Exemple reprezentative de alchilcarbonil includ, dar nu se limitează la, acetil, 1-oxopropil, 2,2-dimetil-1-oxopropil, 1-oxobutil, şi 1-oxopentil. Termenul "arilcarbonil", astfel cum s-a utilizat aici, înseamnă o grupare aril, astfel cum s-a definit aici, ataşată la fracţiunea moleculară părinte printr-o grupare carbonil, astfel cum s-a definit aici. Exemple reprezentative de arilcarbonil includ, dar nu se limitează la, benzoil şi (2-piridinil)carbonil. Termenul "alchilcarboniloxi" şi "arilcarboniloxi", astfel cum s-a utilizat aici, înseamnă o grupare alchilcarbonil sau arilcarbonil, astfel cum s-a definit aici, ataşată la fracţiunea moleculară părinte printr-un atom de oxigen. Exemple reprezentative de alchilcarboniloxi includ, dar nu se limitează la, acetiloxi, etilcarboniloxi, şi terţ-butilcarboniloxi. Exemple reprezentative de arilcarboniloxi includ, dar nu sunt limitate la fenilcarboniloxi. Termenul "alchenoxi" sau "alchenoxil" înseamnă o grupare alchenil, astfel cum s-a definit aici, ataşată la fracţiunea moleculară părinte printr-un atom de oxigen. Exemple reprezentative de alchenoxil includ, dar nu se limitează la, 2-propen-1-oxil (adică, CH2=CH-CH2-O-) şi viniloxi (adică, CH2=CH-O-). Termenul "ariloxi" aşa cum se utilizează aici înseamnă o grupare aril, aşa cum este definită aici, ataşată la fragmentul molecular părinte printr-un atom de oxigen. Termenul "heteroariloxi" aşa cum se utilizează aici înseamnă o grupare heteroaril, aşa cum este definită aici, ataşată la fragmentul molecular părinte printr-un atom de oxigen. Termenul "carbociclil" aşa cum se utilizează aici înseamnă un radical de hidrocarbură monociclic sau multiciclic (de exemplu, biciclic, triciclic, etc.) care conţine de la 3 la 12 atomi de carbon care este complet saturat sau are una sau mai multe legături nesaturate şi pentru a evita orice dubiu, gradul de nesaturare nu are ca rezultat un sistem inelar aromatic (de exemplu, fenil). Exemple de grupări carbociclil includ 1-ciclopropil, 1-ciclobutil, 2-ciclopentil, 1-ciclopentenil, 3-ciclohexil, 1-ciclohexenil şi 2-ciclopentenilmetil. Termenul "ciano" este un termen din domeniu şi aşa cum se utilizează aici se referă la ―CN. Termenul "halo" este un termen din domeniu şi aşa cum se utilizează aici se referă la ―F, ―Cl, -Br, sau ―I. Termenul "haloalchil" aşa cum se utilizează aici se referă la o grupare alchil, aşa cum este definită aici, în care unii sau toţi hidrogenii sunt înlocuiţi cu atomi de halogen. Termenul "hidroxi" este un termen din domeniu şi aşa cum se utilizează aici se referă la ―OH. Termenul "hidroxialchil", aşa cum se utilizează aici, înseamnă cel puţin o grupare hidroxi, aşa cum este definită aici, ataşată la fragmentul molecular părinte printr-o grupare alchil, aşa cum este definită aici. Exemple reprezentative de hidroxialchil includ, dar nu se limitează la, hidroximetil, 2-hidroxietil, 3-hidroxipropil, 2,3-dihidroxipentil, şi 2-etil-4-hidroxiheptil. Termenul "silil", aşa cum se utilizează aici, include derivaţi hidrocarbil ai grupării silil (H3Si-) (adică, (hidrocarbil)3Si―), în care grupările hidrocarbil sunt grupări univalente formate prin îndepărtarea unui atom de hidrogen dintr-o hidrocarbură, de exemplu, etil, fenil. Grupările hidrocarbil pot fi combinaţii de grupări diferite care pot fi variate pentru a furniza un număr de grupări silil, cum ar fi trimetilsilil (TMS), terţ-butildifenilsilil (TBDPS), terţ-butildimetilsilil (TBS/TBDMS), triizopropilsilil (TIPS), şi [2-(trimetilsilil)etoxi]metil (SEM). Termenul "sililoxi", aşa cum se utilizează aici, înseamnă o grupare silil, aşa cum este definită aici, ataşată la molecula părinte printr-un atom de oxigen. Anumiţi compuşi conţinuţi în compoziţiile prezentei invenţii pot exista forme geometrice sau stereoizomerice particulare. În plus, compuşii conform prezentei invenţii pot fi, de asemenea, activi optic. Prezenta invenţie are în vedere toţi astfel de compuşi, inclusiv cis- şi trans-izomeri, (R)- şi (S)-enantiomeri, diastereoizomeri, (D)-izomeri, (L)-izomeri, amestecurile racemice ale acestora şi alte amestecuri ale acestora, ca fiind în scopul invenţiei. Atomi asimetrici suplimentari de carbon pot fi prezenţi într-un substituent, cum ar fi o grupare alchil. Toţi astfel de izomeri, precum şi amestecurile acestora, se intenţionează să fie incluşi în această invenţie. În cazul în care, de exemplu, un enantiomer particular al compusului conform prezentei invenţii este dorit, poate fi preparat prin sinteză asimetrică, sau prin derivare cu un auxiliar chiral, unde amestecul rezultat diastereomeric este separat şi gruparea auxiliară clivată pentru a se furniza enantiomerii puri doriţi. Alternativ, în cazul în care molecula conţine o grupare funcţională de bază, cum ar fi amino, sau o grupare funcţională acidă, cum ar fi carboxil, sărurile diastereomerice sunt formate cu un acid sau o bază optic activă adecvată, urmată de separarea diastereomerilor astfel formaţi prin cristalizare fracţionată prin sau mijloace cromatografice bine cunoscute în domeniu, şi recuperarea ulterioară a enantiomerilor puri. Se va înţelege că ʺsubstituţiaʺ sau ʺsubstituit cuʺ include condiţia implicită că o astfel de substituţie este în conformitate cu valenţa permisă a atomului substituit şi a substituentului şi că substituţia are ca rezultat un compus stabil, de exemplu, care nu suferă spontan transformări, cum ar fi prin rearanjare, fragmentare, descompunere, ciclizare, eliminare sau altă reacţie. Termenul ʺsubstituitʺ este de asemenea avut în vedere ca incluzând toţi substituenţii permisibili ai compuşilor organici. Într-un aspect larg, substituenţii permisibili includ substituenţi aciclici şi ciclici, ramificati şi neramificati, carbociclici şi heterociclici, aromatici şi nearomatici ai compuşilor organici. Substituenţii ilustrativi îi includ, de exemplu, pe cei descrişi aici mai sus. Substituenţii permisibili pot fi unul sau mai mulţi şi aceiaşi sau diferiţi pentru compuşii organici adecvaţi. În scopul acestei invenţii, heteroatomii, cum ar fi azotul, pot avea substituenţi hidrogen şi/sau orice substituenţi admisibili ai compuşilor organici descrişi aici care satisfac valenţele heteroatomilor. Această invenţie nu se intenţionează a fi limitată în niciun fel de substituenţii permisibili ai compuşilor organici. Fraza "grupare de protejare", astfel cum s-a utilizat aici, înseamnă substituenţi temporari care protejează o grupare reactivă funcţională potenţială de transformări chimice nedorite. Exemple de astfel de grupări protectoare includ esteri ai acizilor carboxilici, eteri sililici ai alcoolilor şi acetali şi cetali ai aldehidelor şi respectiv cetonelor. Domeniul chimiei grupării de protejare a fost revizuit (Greene, T.W.; Wuts, P.G.M. Grupări protective în sinteza organică, ed. a 2-a; Wiley: New York, 1991). Formele protejate ale compuşilor inventivi sunt incluse în scopul acestei invenţii. În scopul invenţiei, elementele chimice sunt identificate în conformitate cu Tabelul periodic al elementelor, versiunea CAS, Handbook of Chemistry and Physics, 67th Ed., 1986-87, coperta interioară. Alţi termeni chimici de aici sunt utilizaţi conform utilizării convenţionale în domeniu, aşa cum este exemplificat în The McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (ed. Parker, S., 1985), McGraw-Hill, San Francisco). Dacă nu se definesc altfel, toţi termenii tehnici şi ştiinţifici utilizaţi aici au aceeaşi semnificaţie pe care o înţelege în mod obişnuit o persoană cu o calificare obişnuită în domeniul la care se referă această invenţie. Termenul ʺsare acceptabilă farmaceuticʺ, aşa cum se utilizează aici, include săruri derivate din acizi anorganici sau organici incluzând, de exemplu, clorhidric, bromhidric, sulfuric, azotic, percloric, fosforic, formic, acetic, lactic, maleic, fumaric, succinic, tartric, glicolic, salicilic, citric, metansulfonic, benzensulfonic, benzoic, malonic, trifluoroacetic, tricloroacetic, naftalen-2-sulfonic, şi alţi acizi. Formele de sare acceptabile farmaceutic pot include forme în care raportul de molecule care sunt cuprinse în sare nu este 1:1. De exemplu, sarea poate cuprinde mai mult de o moleculă de acid anorganic sau organic per moleculă de bază, cum ar fi două molecule de acid clorhidric per moleculă de compus cu Formula I. Ca un alt exemplu, sarea poate cuprinde mai puţin de o moleculă de acid anorganic sau organic per moleculă de bază, cum ar fi două molecule de compus cu Formula I per moleculă de acid tartric. Termenii "purtător" şi "purtător acceptabil farmaceutic" astfel cum s-au utilizat aici, se referă la un diluant, adjuvant, excipient, sau vehicul cu care un compus este administrat sau formulat în vederea administrării. Exemple nelimitative de astfel de purtători acceptabili farmaceutic includ lichide, cum ar fi apă, soluţie salină şi uleiuri; şi solide, cum ar fi gumă de acacia, gelatină, pastă de amidon, talc, cheratină, silice coloidală, uree şi altele asemenea. In plus, se pot folosi auxiliari, stabilizatori, agenţi de îngroşare, lubrifiere, aromatizare şi coloranţi Alte exemple de purtători farmaceutici adecvaţi sunt descrise în Remington's Pharmaceutical Sciences de E.W. Martin. Termenul "a trata" astfel cum s-a utilizat aici înseamnă a preveni, a stopa sau a încetini progresia, sau a elimina o boală sau o afecţiune la un subiect. Într-o variantă de realizare "tratare" înseamnă oprirea sau încetinirea progresării sau eliminarea unei boli sau stări la un subiect. Într-o variantă de realizare, "tratare" înseamnă reducerea a cel puţin unei manifestări obiective a unei boli sau stări la un subiect. Termenul "cantitate eficientă" aşa cum se utilizează aici se referă la o cantitate care este suficientă pentru a produce un efect biologic dorit. Termenul "cantitate eficientă terapeutic" aşa cum se utilizează aici se referă la o cantitate care este suficientă pentru a produce un efect terapeutic dorit. Termenul "inhibare" aşa cum se utilizează aici înseamnă scăderea cu o cantitate sau un nivel măsurabile obiectiv. În diferite variante de realizare, "inhibarea" înseamnă o scădere cu cel puţin 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, sau 95 procente comparativ cu un martor relevant. Într-o variantă de realizare ʺinhibareʺ înseamnă scăderea cu 100 procente, adică oprire sau eliminare. Termenul "subiect", astfel cum s-a utilizat aici, se referă la un mamifer. În diferite variante de realizare, un subiect este un şoarece, şobolan, iepure, pisică, câine, porc, oaie, cal, vacă sau o primată care nu este om. Într-o variantă de realizare, un subiect este un om.
Compuşi
Prezenta invenţie redă compuşi cu Formula (I) sau săruri acceptabile farmaceutic ale acestora:
în care, independent pentru fiecare incidenţă:
R1 reprezintă ―OH, ―ORc, ―NH2, ―NHRc, ―NRcRd, alchil (C1-C10), aril (C6-C10), aril (C6-C10 alchil (C1-C10), heteroaril, heteroaril alchil (C1-C10), halo, halo alchil (C1-C10), cicloalchil (C3-C12), cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10), ―C(O)Rc, ―C(O)OH, ―C(O)ORc, -OC(O)Rc, -C(O)NH2, ―C(O)NHRc,―C(O)NRcRd, ―NHC(O)Rc, sau ―NRcC(O)Rd; sau două incidenţe geminale ale lui R1 luate împreună cu carbonul la care sunt ataşate reprezintă -C(O)-; sau două incidenţe vicinale sau geminale ale lui R1 luate împreună formează un inel carbociclic (C3-C12) sau heterociclic condensat sau spirociclic opţional substituit;
W este ―C(O)NH― sau ―C(O)N(Rc);
R2 reprezintă aril (C6-C10) sau heteroaril opţional substituit;
V reprezintă aril (C6-C10) sau heteroaril opţional substituit;
Z este absent sau reprezintă unul sau mai mulţi substituenţi selectaţi independent din grupul care constă din halo, halo(C1-C10)alchil, ―NO2, ―CN, ―C(O)Rc, ―C(O)OH, ―C(O)ORc, ―OC(O)Rc, -C(O)NH2, ―C(O)NHRc, ―C(O)NRcRd, ―NHC(O)Rc, ―N(Rc)C(O)Rd, ―OS(O)p(Rc), ―NHS(O)p(Rc), şi ―NRcS(O)p(Rc);
X reprezintă ―C(NH2)―, ―C(NH(Rc))―, ―C(NRcRd)―, ―C(NHS(O)pRc)―, ―C(NHC(O)Rc)―, ―C(NHC(O)NH2)―, ―C(NHC(O)NHRc)―, ―C(NHC(O)NRcRd)―, ―C(OH)―, ―C(O(alchil (C1-C10)))―, ―C(N3)―, ―C(CN)―, ―C(NO2)―, ―C(S(O)nRa)―, ―C[-C(=O)Rc]―, ―C[-C(=O)NRcRd]―, ―C[-C(=O)SRc]―, ―C[-S(O)Rc]―, ―C[-S(O)2Rc]―, ―C[S(O)(ORc)]―, ―C[-S(O)2(ORc)]―, ―C[-SO2NRcRd]―, ―C(halogen)―, ―C(alchil (C1-C10)), -C((cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10)), ―C(alchenil (C2-C10))―, ―C(alchinil (C2-C10))―, sau ―C(aril (C6-C10) alchil (C1-C10))―;
R3 reprezintă aril (C6-C10), heteroaril, cicloalchil (C3-C12), sau heterocicloalchil opţional substituit;
R3a este absent sau reprezintă unul sau mai mulţi substituenţi selectaţi independent din grupul care constă din halo, hidroxi, alchil (C1-C10), -CF3, -OCF3, alcoxi (C1-C10), aril (C6-C10), heteroaril, ariloxi (C6-C10), amino, amino alchil (C1-C10), -C(O)NH2, ciano, -NHC(O) (C1-C10)alchil, -SO2 alchil (C1-C10), -SO2NH2, (C3-C12)cicloalchil, -(CH2)rORa, -NO2,-(CH2)rNRaRb, -(CH2)rC(O)Ra, -NRaC(O)Rb, -C(O)NRcRd, -NRaC(O)NRcRd,-C(=NRa)NRcRd, -NHC(=NRa)NRcRd, -NRaRb, -SO2NRcRd, -NRaSO2NRcRd,-NRaSO2 alchil (C1-C10), -NRaSO2Ra, -S(O)pRa, -(CF2)rCF3, -NHCH2Ra, -OCH2Ra,-SCH2Ra, -NH(CH2)2(CH2)rRa, -O(CH2)2(CH2)rRa, sau -S(CH2)2(CH2)rRa;
Y reprezintă o legătură; sau -Y-R4 reprezintă alchilen - (C1-C10)-R4 opţional substituit,-CH2C(O)-R4, -CH2NH-R4, -CH2N((C1-C10)alchil)-R4, -CRaRb-R4, -NH-R4, -NHCH2-R4, -NHC(O)-R4, -N(alchil (C1-C10))-R4, -N(alchil (C1-C10))CH2-R4, -N((CH2)2OH)-R4,-N((cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10))R4, -heterociclil-R4, -OR4, -OCH2-R4, -OC(O)-R4, -OC(O)NRaRb, -SCH2R4, sau -SR4;
R4 reprezintă hidrogen, hidroxi, alchil (C1-C10) opţional substituit, cicloalchil (C3-C12), (heterocicloalchil) alchil (C1-C10), (cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10), -CH2OH, -CH(alchil (C1-C10))OH, -CH(NH2)CH(alchil (C1-C10))2, aril (C6-C10), aril (C6-C10) alchil (C1-C10), heteroaril, heteroaril alchil (C1-C10), -CH2S(alchil (C1-C10)), amino, sau ciano; sau-(CRaRb)r(CRaRb)p- condensat la poziţia a 4-a a inelului care poartă Z pentru a forma un inel heterociclic cu 5 la 7 membri cu substituenţi opţionali; sau, atunci când R3 este fenil, R4 poate reprezenta -NRa- condensat la poziţia orto la X pe acel fenil; fiecare Ra şi Rb este independent H, alchil (C1-C10), alchenil (C2-C10), alchinil (C2-C10), aril (C6-C10) alchil (C1-C10), (cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10), -C(=O)Rc, -C(=O)ORc,-C(=O)NRcRd, -C(=O)SRc, -S(O)Rc, -S(O)2Rc, -S(O)(ORc), sau ―SO2NRcRd;
Rc şi Rd reprezintă, independent pentru fiecare incidenţă, alchil (C1-C10) opţional substituit, alchenil (C2-C10), alchinil (C2-C10), halo alchil (C1-C10), aril (C6-C10), aril (C6-C10) alchil (C1-C10), heteroaril, heteroaril alchil (C1-C10), cicloalchil (C3-C12), (cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10), heterocicloalchil, (heterocicloalchil) alchil (C1-C10), -C(O) alchil (C1-C10), sau -S(O)p(alchil (C1-C10)); sau Rc şi Rd pot fi luaţi împreună pentru a forma un inel heterociclic opţional substituit;
r este 0, 1, 2, sau 3;
n este un întreg de la 0 la 6; şi
p este 0, 1, sau 2;
în care în plus:
"heteroaril" înseamnă un inel aromatic monociclic, biciclic, sau policiclic având 3-12 atomi în total şi cel puţin un heteroatom selectat din grupul care constă din azot, oxigen, şi sulf;
"heterociclic," "heterocicloalchil," şi "heterociclil" înseamnă un inel monociclic, biciclic, sau triciclic non-aromatic având 3-12 atomi în total şi cel puţin un heteroatom selectat din grupul care constă din azot, oxigen, şi sulf; şi
"opţional substituit" înseamnă nesubstituit sau substituit cu unul sau mai mulţi substituenţi fiecare selectaţi independent din grupul care constă din halogen, azidă, alchil (C1-C10), aril (C6-C10) alchil (C1-C10), alchenil (C2-C10), alchinil (C2-C10), cicloalchil (C3-C12), hidroxil, alcoxi (C1-C10), amino (de exemplu, -NH2, -NH(alchil (C1-C6)), -N(alchil (C1-C6))2), nitro, sulfhidril, imino, amido, fosfonat, fosfinat, carbonil, carboxil, silil, eter, (C1-C10)alchiltio, sulfonil, sulfonamido, cetonă, aldehidă, ester, heterociclil, aril (C6-C10), heteroaril, fluoro alchil (C1-C10), ciano, -C(O)O alchil (C1-C6), -C(O)NH2, -C(O)NH alchil (C1-C6), - C(O)N(alchil (C1-C6))2, şi haloalchil (C1-C6).
În anumite variante de realizare,
R1 reprezintă ―OH, ―ORc, ―NH2, ―NHRc, ―NRcRd, alchil (C1-C10), aril (C6-C10), heteroaril, halo, halo alchil (C1-C10), cicloalchil (C3-C12), ―OC(O)Rc, ―NHC(O)Rc, sau ―NRcC(O)Rd; sau două incidenţe geminale ale lui R1 luate împreună cu carbonul la care sunt ataşate reprezintă -C(O)-; sau două incidenţe vicinale sau geminale ale lui R1 luate împreună formează un inel carbociclic (C3-C12) sau heterociclic condensat sau spirociclic opţional substituit.
În anumite variante de realizare, R1 reprezintă ―OH, ―ORc, ―NH2, alchil (C1-C10), aril (C6-C10), halo, haloalchil, cicloalchil (C3-C12), sau ―OC(O)Rc.
În anumite variante de realizare, n este 1.
În anumite astfel de variante de realizare, R1 reprezintă ―OH sau ―ORc.
În anumite variante de realizare în care n este 1, R1 reprezintă ―ORc, de exemplu R1 poate reprezenta -O(alchil (C1-C6)).
În anumite variante de realizare în care n este 1, R1 reprezintă ―OC(O)Rc, de exemplu R1 poate reprezenta ―OC(O)(alchil (C1-C6)).
În anumite variante de realizare, R1 reprezintă ―NH2.
În anumite variante de realizare, R1 reprezintă alchil (C1-C6).
În anumite variante de realizare, n este 2.
În anumite astfel de variante de realizare, cele două incidenţe ale R1 sunt geminale, adică, cele două incidenţe ale R1 sunt ataşate la acelaşi atom de carbon.
În anumite astfel de variante de realizare, o incidenţă a lui R1 reprezintă ―OH sau ―ORc; şi cealaltă incidenţa a lui R1 reprezintă aril (C6-C10) sau heteroaril. Alternativ, în alte anumite astfel de variante de realizare, o incidenţă a lui R1 reprezintă ―OH sau ―ORc; şi cealaltă incidenţă a lui R1 reprezintă halo alchil (C1-C10). Încă într-o altă variantă de realizare, ambele dintre cele două incidenţe geminale ale lui R1 sunt halo. În anumite variante de realizare, cele două incidenţe geminale ale lui R1 luate împreună cu carbonul la care sunt ataşate reprezintă -C(O)-. În anumite variante de realizare în care n este 2, cele două incidenţe ale R1 sunt vicinale, adică, cele două incidenţe ale R1 sunt ataşate la doi atomi de carbon adiacenţi. În anumite astfel de variante de realizare, cele două incidenţe vicinale ale lui R1 luate împreună formează un inel carbociclic condensat opţional substituit. În anumite variante de realizare, n este 0. W este ―C(O)NH― sau ―C(O)N(Rc)―. R2 reprezintă aril (C6-C10) sau heteroaril opţional substituit. În anumite variante de realizare, R2 reprezintă aril (C6-C10) sau heteroaril, substituit cu unul sau mai mulţi substituenţi selectaţi din grupul care constă din ―OH, halo, ―NH2, -NH(alchil (C1-C6)), -N(alchil (C1-C6))2, -CN, -NO2, alchil (C1-C6), haloalchil (C1-C6), alcoxi (C1-C6), - C(O)OH, -C(O)O alchil (C1-C6), -C(O)NH2, -C(O)NH alchil (C1-C6), şi -C(O)N(alchil (C1-C6))2. În anumite variante de realizare în care W este ―C(O)NH― sau ―C(O)N(Rc)―, R2 reprezintă (halo)aril sau (halo)heteroaril. În variante ale dezvăluirii, W este ―C(O)―. În variante ale dezvăluirii, R2 reprezintă aralchil sau heteroaralchil opţional substituit. În anumite variante de realizare, V reprezintă aril (C6-C10) opţional substituit. În anumite variante de realizare, Z reprezintă unul sau mai mulţi substituenţi selectaţi independent din grupul care constă din halo, halo alchil (C1-C10), ―NO2, şi ―CN. În anumite variante de realizare, Z reprezintă un exemplu de halo. \tabÎn anumite variante de realizare, Z reprezintă un exemplu de fluoro. În anumite variante de realizare, Z este absent. În anumite variante de realizare, X
reprezintă ―C(NH2)―, ―C(NH(Rc))―, ―C(NRcRd)―,―C(NHS(O)pRc)―, ―C(NHC(O)Rc)―, ―C(NHC(O)NH2)―, ―C(NHC(O)NHRc)―, sau ―C(NHC(O)NRcRd)―.
În anumite variante de realizare, X
reprezintă ―C(NH2)―, ―C(NH(Rc))―, ―C(NRcRd)―,―C(NHS(O)pRc)―, ―C(NHC(O)Rc)―, sau ―C(NHC(O)NHRc)―.
În anumite variante de realizare, X reprezintă ―C(NH2)―.
În anumite variante de realizare, X reprezintă ―C(NH(Rc))―.
În anumite astfel de variante de realizare, X reprezintă ―C(NH(cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10))―. Ca alternativă la astfel de variante de realizare, X reprezintă ―C(NH alchil (C1-C6))―.
În anumite variante de realizare, X reprezintă ―C(NHS(O)pRc)―.
În anumite astfel de variante de realizare, X reprezintă ―C(NHS(O)p alchil (C1-C6))―, în care p este 1 sau 2.
În anumite variante de realizare, X reprezintă ―C(NHC(O)NHRc)―.
În anumite astfel de variante de realizare, X reprezintă opţional substituit ―C(NHC(O)NH(aril (C6-C10)))― sau C(NHC(O)NH(heteroaril))―.
În anumite variante de realizare, X reprezintă ―C(NHC(O)Rc)―.
În anumite astfel de variante de realizare, X reprezintă ―C(NHC(O)(alchil (C1-C6)))―.
În anumite variante de realizare, R3 reprezintă aril (C6-C10) sau heteroaril opţional substituit.
În anumite variante de realizare, R3 reprezintă heteroaril opţional substituit.
În anumite astfel de variante de realizare, R3 reprezintă piridil.
În anumite variante de realizare, R3 reprezintă aril (C6-C10) opţional substituit.
În anumite astfel de variante de realizare, R3 reprezintă fenil, opţional substituit cu unul sau mai mulţi substituenţi selectaţi din grupul care constă din ―CN, halo, -NO2, alchil (C1-C6), şi haloalchil (C1-C6).
În anumite variante de realizare, R3a este absent sau reprezintă halo, alchil, -CF3, -OCF3, aril (C6-C10), heteroaril, -C(O)NH2, ciano, -NHC(O) alchil (C1-C10), -SO2 alchil (C1-C10), -SO2NH2, -NO2, -NRaC(O)Rb, ―C(O)NRcRd, -NRaC(O)NRcRd, -C(=NRa)NRcRd, -NHC(=NRa)NRcRd, - SO2NRcRd, -NRaSO2NRcRd, -NRaSO2 alchil (C1-C10), -NRaSO2Ra, -S(O)pRa, sau -(CF2)rCF3.
În anumite variante de realizare, Y reprezintă o legătură.
În anumite variante de realizare, R4 reprezintă H.
În anumite variante de realizare, R4 reprezintă (cicloalchil (C3-C12)) alchil C1-C10). De exemplu, R4 poate reprezenta (ciclopropil) alchil (C1-C6).
În anumite variante de realizare, compusul conform invenţiei este selectat din următorul tabel de compuşi sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia:
Compoziţii farmaceutice
Invenţia furnizează compoziţii farmaceutice, fiecare cuprinzând unul sau mai mulţi compuşi ai invenţiei şi un purtător acceptabil farmaceutic. În anumite variante de realizare, compoziţia farmaceutică cuprinde un compus conform invenţiei şi un purtător acceptabil farmaceutic. În anumite variante de realizare, compoziţia farmaceutică cuprinde o multitudine de compuşi conform invenţiei şi un purtător acceptabil farmaceutic.
În anumite variante de realizare, compoziţia farmaceutică este formulată pentru administrare parenterală.
În anumite variante de realizare, compoziţia farmaceutică este formulată pentru administrare orală.
În anumite variante de realizare, o compoziţie farmaceutică conform invenţiei cuprinde în plus, cel puţin un agent activ farmaceutic, altul decât un compus conform invenţiei. Respectivul cel puţin un agent activ farmaceutic suplimentar poate fi un agent util în tratamentul unei boli sau stări caracterizate printr-o activitate nedorită a kalikreinei plasmatice. De exemplu, respectivul cel puţin un agent activ farmaceutic suplimentar poate fi un agent de anticoagulare, un agent antiplachetar sau un agent trombolitic.
Agenţii anticoagulanţi previn coagularea componentelor sanguine şi astfel previn formarea cheagurilor, de exemplu în fibrilaţia atrială. Anticoagulantele includ, dar nu se limitează la, heparină, warfarină, cumadină, dicumarol, fenprocumon, acenocumarol, biscumacetat de etil, hirudină, bivalarutină, inhibitori direcţi de trombină şi derivaţi de indandionă.
Agenţii antiplachetari inhibă agregarea trombocitelor şi sunt adesea utilizaţi pentru a preveni accidentul vascular cerebral tromboembolic la pacienţii care au prezentat o trecere atac ischemic, accident vascular cerebral sau fibrilaţie atrială. Agenţii antiplachetari includ, dar nu sunt limitaţi la, aspirină, derivaţi de tienopiridină cum ar fi ticlopodina şi clopidogrelul, dipiridamol şi sulfinpirazonă, precum şi mimetice de RGD.
Agenţii trombolitici lizează cheaguri care provoacă fenomene tromboembolice cum ar fi accident vascular cerebral, infarct miocardic şi tromboembolism pulmonar. Agenţii trombolitici includ, dar nu sunt limitaţi la, plasminogen, a2-antiplasmină, streptokinază, antistreplază, TNK, activator tisular de plasminogen (tPA) şi urokinază. Activatorul de plasminogen tisular include tPA nativ şi tPA recombinant, precum şi forme modificate de tPA care păstrează activităţile enzimatice sau fibrinolitice ale tPA nativ.
Compoziţiile farmaceutice conform invenţiei pot fi preparate prin combinarea unuia sau mai multor compuşi conform invenţiei cu un purtător acceptabil farmaceutic şi, opţional, unul sau mai mulţi agenţi activi farmaceutic suplimentari.
Metode de utilizare
Prezenta invenţie redă compuşi care inhibă formarea trombinei pe calea intrinsecă şi astfel reduc riscul formării de noi trombi patogeni (ocluzia sau reocluzia vaselor) şi, de asemenea, îmbunătăţesc reperfuzia indusă de fibrinolitic atunci când sunt administraţi ca terapie adjuvantă cu un regim fibrinolitic. Bolile şi stările care pot fi tratate folosind compuşii conform prezentei invenţii includ, dar nu se limitează la, accident vascular cerebral, inflamaţie, leziune de reperfuzie, infarct miocardic acut, tromboză venoasă profundă, stare post tratament fibrinolitic, angină, edem, angioedem, angioedem ereditar, sepsis, artrită, hemoragie, pierderi de sânge în timpul bypass-ului cardiopulmonar, boală inflamatorie intestinală, diabet zaharat, retinopatie, retinopatie diabetică, edem macular diabetic, degenerescenţă maculară diabetică, edem macular legat de vârstă, degenerescenţă maculară legată de vârstă, retinopatie proliferativă, neuropatie, hipertensiune arterială, edem cerebral, excreţie crescută de albumină, macroalbuminurie şi nefropatie.
De exemplu, la pacienţii cu stări de angioedem, inhibitorul polipeptidic mic PK DX-88 (ecalantida) ameliorează edemul la pacienţii cu angioedem ereditar (HAE). Williams, A. şi colab. (2003) Transfus. Apher. Sci. 29:255-8; Schneider, L. şi colab. (2007) J Allergi Clin Immunol. 120:416-22; şi Levi, J. H. şi colab. (2006) Expert Opin. Invest. Drugs 15:1077-90. De asemenea, un antagonist al receptorului bradikinină B2, Icatibant, este eficient la tratarea HAE. Bork, K. şi colab. (2007) J. Allergy Clin. Immunol. 119:1497-1503. Deoarece kalikreina plasmatică generează bradikinină, inhibarea kalikreinei plasmatice este de aşteptat să inhibe producţia de bradikinină. De exemplu, în coagularea rezultată de la tratamentul fibrinolitic (de exemplu, tratamentul cu activator tisular de plasminogen sau streptokinază), niveluri mai ridicate de kalikreină plasmatică sunt găsite la pacienţii supuşi fibrinolizei. Hoffmeister, H. M. şi colab. (1998) J. Cardiovasc. Pharmacol. 31:764-72. Activarea mediată de plasmă a căii intrinseci s-a dovedit a avea loc în plasmă şi sânge şi a fost atenuată semnificativ în plasma de la indivizii cu deficienţă de oricare dintre componentele căii intrinseci. Ewald, G. A. şi colab. (1995) Circulation 91:28-36. Indivizii care au avut un IM acut s-au dovedit a avea niveluri crescute de kalicreină activată plasmatică şi trombină. Hoffmeister, H. M., şi colab. (1998) Circulation 98:2527-33. DX-88 a redus edemul cerebral, volumul infarctului şi deficitele neurologice într-un model de accident vascular cerebral ischemic la animal. Storini, C. şi colab. (2006) J. Pharm. Exp. Ter. 318:849-854. Inhibitorul C1 a redus dimensiunea infarctului la un model de ocluzie a arterei cerebrale medii (MCAO) la şoarece.De Simoni, M. G. şi colab. (2004) Am. J. Pathol. 164:1857-1863; şi Akita, N. şi colab. (2003) Neurosurgery 52:395-400). S-a constatat că antagoniştii receptorilor B2 reduc volumul infarctului, umflarea creierului şi acumularea de neutrofile şi au fost neuroprotectori într-un model de animal MCAO. Zausinger, S. şi colab. (2003) Acta Neurochir. Suppl. 86:205-7; Lumenta, D. B. şi colab. (2006) Brain Res. 1069:227-34; Ding-Zhou, L. şi colab. (2003) Br. J Pharmacol. 139:1539-47. În ceea ce priveşte pierderea de sânge în timpul bypass-ului cardiopulmonar (CPB), s-a constatat că sistemul kalicrein-kinină (adică, contact) este activat în timpul CABG. Wachtfogel, Y. T. (1989) Blood 73:468. Activarea sistemului de contact în timpul CPB are ca rezultat o creştere de până la 20 ori a bradikininei plasmatice.Cugno, M. şi colab. (2006) Chest 120:1776-82; şi Campbell, D. J. şi colab. (2001) Am. J. Physiol. Reg. Integr. Comp. Physiol. 281:1059-70. S-a dovedit, de asemenea că inhibitorii de kalikreină plasmatică P8720 şi PKSI-527, reduc umflarea articulaţiilor la modelele de artrită la şobolani. De La Cadena, R. A. şi colab. (1995) FASEB J. 9:446-52; Fujimori, Y. (1993) Agents Action 39:42-8. De asemenea, s-a constatat că inflamaţia la modelele de artrită la animale a fost însoţită de activarea sistemului de contact. Blais, C. Jr. şi colab. (1997) Arthritis Rheum. 40:1327-33. În plus, s-a descoperit că inhibitorul de kalikreină plasmatică P8720 reduce inflamaţia într-un model acut şi cronic al bolii inflamatorii intestinale (IBD) la şobolan. Stadnicki, A. şi colab. (1998) FASEB J. 12:325-33; Stadnicki, A. şi colab. (1996) Dig. Dis. Sci. 41:912-20; şi De La Cadena, R. A. şi colab. (1995) FASEB J. 9:446-52. Sistemul de contact este activat în timpul inflamaţiei intestinale acute şi cronice.Sartor, R. B. şi colab. (1996) Gastroenterology 110:1467-81. S-a constatat că un antagonist al receptorului de B2, un anticorp împotriva kininogenului cu greutate moleculară mare, sau reducerea nivelurilor de kininogen a redus patologia clinică la modelele animale de IBD. Ibid.; Arai, I. şi colab. (1999) Dig. Dis. Sci. 44:845-51; şi Keith, J. C. şi colab. (2005) Arthritis Res. Therapy 7:R769-76. S-a constatat că H-D-Pro-Phe-Arg-clorometilcetona (CMK), un inhibitor al PK şi FXII şi un inhibitor fiziologic (inhibitor C1), reduce permeabilitatea vasculară în mai multe organe şi reduce leziunile la lipopolizaharide (LPS) sau sepsisul indus de bacterii la animale. Liu, D. şi colab. (2005) Blood 105:2350-5; Persson, K. şi colab. (2000) J. Exp. Med. 192:1415-24. Îmbunătăţirea clinică a fost observată la pacienţii cu sepsis trataţi cu inhibitor de C1. Zeerleder, S. şi colab. (2003) Clin. Diagnost. Lab. Immunol. 10:529-35; Caliezi, C. şi colab. (2002) Crit. Care Med. 30:1722-8; şi Marx, G. şi colab. (1999) Intensive Care Med. 25:1017-20. Se constată în cazurile de septicemie letale există un grad mai ridicat de activare a contactului. Martinez-Brotons, F. şi colab. (1987) Thromb. Haemost. 58:709-713; şi Kalter, E. S. şi colab. (1985) J. Infect. Dis. 151:1019-27. S-a constatat de asemenea că nivelurile prePK sunt mai ridicate la diabetici, în special cu retinopatie proliferativă şi se corelează cu nivelurile de fructozamină. Gao, B.-B., şi colab. (2007) Nature Med. 13:181-8; şi Kedzierska, K. şi colab. (2005) Archives Med. Res. 36:539-43. S-a constatat de asemenea că PrePK este cel mai ridicat la cei cu neuropatie senzorimotorie. Christie, M. şi colab. (1984) Thromb. Haemostas. (Stuttgart) 52:221-3. Nivelurile PrePK sunt crescute la diabetici şi sunt asociate cu creşterea tensiunii arteriale. Nivelurile PrePK se corelează independent cu viteza de excreţie a albuminei şi sunt crescute la diabetici cu macroalbuminurie, sugerând că prePK poate fi un marker pentru nefropatia progresivă.Jaffa, A. A. şi colab. (2003) Diabetes 52:1215-21. S-a constatat că antagoniştii receptorilor de B1 scad scurgerile de plasmă la şobolani trataţi cu streptozotocină. Lawson, S. R. şi colab. (2005) Eur. J. Pharmacol. 514:69-78. Antagoniştii receptorilor de B1 pot preveni, de asemenea, ca şoarecii trataţi cu streptozotocină să dezvolte hiperglicemie şi disfuncţie renală. Zuccollo, A. şi colab. (1996) Can. J. Physiol. Pharmacol. 74:586-9. În anumite aspecte, invenţia redă un compus conform invenţiei, sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia, pentru utilizarea ca medicament. Variante ale dezvăluirii care nu fac parte din invenţie redau metode de tratare sau prevenire a unei boli sau afecţiuni caracterizate prin activitate nedorită a kalikreinei plasmatice. Metoda include etapa de administrare la un subiect care are nevoie de aceasta a unei cantităţi eficiente terapeutic dintr-un compus conform invenţiei sau dintr-o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia, tratând sau prevenind astfel boala sau starea caracterizată printr-o activitate nedorită a kalikreinei plasmatice. Prin reducerea activităţii kalikreinei plasmatice la subiect, se tratează boala sau starea caracterizată printr-o activitate nedorită a kalikreinei plasmatice. Alternativ, în anumite aspecte, invenţia redă un compus conform invenţiei, sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia, pentru tratamentul unei boli sau stări caracterizate prin activitate nedorită a kalikreinei plasmatice. Alternativ, în anumite aspecte, invenţia se referă la utilizarea unui compus conform invenţiei, sau a unei sări acceptabile farmaceutic a acestuia, pentru fabricarea unui medicament pentru utilizarea în tratamentul unei boli sau stări caracterizate printr-o activitate nedorită a kalikreinei plasmatice. Aşa cum se utilizează aici, o "boală sau stare caracterizată printr-o activitate nedorită a kalikreinei plasmatice" se referă la orice boală sau stare în care este de dorit să se reducă activitatea kalikreinei plasmatice. De exemplu, poate fi de dorit să se reducă activitatea kalikreinei plasmatice în stabilirea unei stări de hipercoagulare. Ca un alt exemplu, poate fi de dorit să se reducă activitatea kalikreinei plasmatice în stabilirea ischemiei tisulare care este asociată cu prezenţa sau formarea de tromb. În anumite variante de realizare, boala sau starea caracterizată printr-o activitate nedorită a kalikreinei plasmatice este selectată din grupul care constă din accident vascular cerebral, inflamaţie, leziune de reperfuzie, infarct miocardic acut, tromboză venoasă profundă, stare post-tratament fibrinolitic, angină, edem, angioedem, angioedem ereditar, sepsis, artrită, hemoragie, pierdere de sânge în timpul bypass-ului cardiopulmonar, boală inflamatorie intestinală, diabet zaharat, retinopatie, retinopatie diabetică, edem macular diabetic, degenerescenţă maculară diabetică, edem macular legat de vârstă, degenerescenţă maculară legată de vârstă, retinopatie proliferativă, hipertensiune arterială, neuropatie, edem cerebral, excreţie crescută de albumină, macroalbuminurie şi nefropatie. În anumite variante de realizare, boala sau starea caracterizată printr-o activitate nedorită a kalikreinei plasmatice este angioedemul. În anumite variante de realizare, boala sau starea caracterizată printr-o activitate nedorită a kalikreinei plasmatice este angioedem ereditar (HAE). În anumite variante de realizare, boala sau starea caracterizată printr-o activitate nedorită a kalikreinei plasmatice este accidentul vascular cerebral. În anumite variante de realizare, boala sau starea caracterizată printr-o activitate nedorită a kalikreinei plasmatice este leziunea de reperfuzie. În anumite variante de realizare, boala sau starea caracterizată printr-o activitate nedorită a kalikreinei plasmatice este infarctul miocardic acut. În anumite variante de realizare, boala sau starea caracterizată printr-o activitate nedorită a kalikreinei plasmatice este hemoragia. În anumite variante de realizare, boala sau starea caracterizată printr-o activitate nedorită a kalikreinei plasmatice este pierderea de sânge în timpul bypass-ului cardiopulmonar. În anumite variante de realizare, boala sau starea caracterizată printr-o activitate nedorită a kalikreinei plasmatice este selectată din grupul care constă din retinopatie, retinopatie diabetică, edema macular diabetic, degenerescenţă maculară diabetică, edema macular legat de vârstă, degenerescenţă maculară legată de vârstă, şi retinopatie proliferativă.
Formulări, căi de administrare şi dozare
Compuşii invenţiei pot fi formulaţi ca compoziţii farmaceutice şi administraţi la o gazdă mamifer, cum ar fi un pacient uman, într-o varietate de forme adaptate căii de administrare alese, de exemplu, orale sau parenterale, pe cale intravenoasă, intraperitoneală, intramusculară, topică sau subcutanată. Căile suplimentare de administrare sunt de asemenea avute în vedere de invenţie.
Astfel, compuşii prezenţi pot fi administraţi sistemic, de exemplu, oral, în combinaţie cu un vehicul acceptabil farmaceutic, cum ar fi un diluant inert sau un purtător comestibil asimilabil. Aceştia pot fi înglobaţi în capsule de gelatină tare sau moale, pot fi comprimaţi în tablete sau pot fi încorporaţi direct cu alimentele din dieta pacientului. Pentru administrare terapeutică orală, compusul activ poate fi combinat cu unul sau mai mulţi excipienţi şi utilizat sub formă de tablete ingerabile, tablete bucale, troşeuri, capsule, elixiruri, suspensii, siropuri, napolitane şi altele asemenea. Astfel de compoziţii şi preparate ar trebui să conţină cel puţin 0,1% compus activ. Procentajul compoziţiilor şi a preparatelor poate fi, desigur, variat şi poate fi în mod convenabil cuprins între aproximativ 2% şi aproximativ 60% din greutatea unei forme de dozare unitare date. Cantitatea de compus activ din astfel de compoziţii utile terapeutic este astfel încât se va obţine un nivel de dozare eficient.
Tabletele, troşeurile, pilulele, capsulele şi altele asemenea pot conţine de asemenea următorii diluanţi şi purtători: agenţi de legare, cum ar fi gumă de tragacant, acacia, amidon de porumb sau gelatină; excipienţi cum ar fi fosfat dicalcic; un agent de dezintegrare, cum ar fi amidon de porumb, amidon de cartof, acid alginic şi altele asemenea; a lubrifiant, cum ar fi stearat de magneziu; şi se poate adăuga un agent de îndulcire, cum ar fi sucroză, fructoză, lactoză sau aspartam sau un agent de aromatizare, cum ar fi mentă, ulei de wintergreen sau aromă de cireşe. Când forma de dozare unitară este o capsulă, aceasta poate conţine, în plus faţă de materialele de tipul de mai sus, un purtător lichid, cum ar fi un ulei vegetal sau un polietilenglicol. Diverse alte materiale pot fi prezente ca acoperiri sau pentru a modifica în alt mod forma fizică a formei de dozare unitare solide. De exemplu, tabletele, pilulele sau capsulele pot fi acoperite cu gelatină, ceară, şelac sau zahăr şi altele asemenea. Un sirop sau elixir poate conţine compusul activ, zaharoză sau fructoză ca agent de îndulcire, metil şi propilparabeni drept conservanţi, un colorant şi un agent de aromatizare, cum ar fi aroma de cireşe sau portocale. Desigur, orice material utilizat la prepararea oricărei forme de dozare unitară trebuie să fie acceptabil farmaceutic şi substanţial netoxic în cantităţile utilizate. În plus, compusul activ poate fi încorporat în preparate şi dispozitive cu eliberare susţinută.
Compusul activ poate fi de asemenea administrat intravenos sau intraperitoneal prin infuzie sau injecţie. Soluţiile de compus activ sau sărurile acestuia pot fi preparate în apă sau în soluţie apoasă acceptabilă fiziologic, amestecate opţional cu un agent tensioactiv netoxic. Dispersiile pot fi, de asemenea, preparate în glicerol, polietilenglicoli lichizi, triacetină şi amestecuri ale acestora şi în uleiuri. În condiţii obişnuite de depozitare şi utilizare, aceste preparate conţin un conservant pentru prevenirea creşterii microorganismelor.
Formele de dozare farmaceutice adecvate pentru injectare sau infuzie pot include soluţii sau dispersii apoase sterile, sau pulberi sterile, cuprinzând ingredientul activ, adaptate pentru preparare extemporană a soluţiilor sau dispersiilor sterile injectabile sau infuzabile, opţional încapsulate în lipozomi. În toate cazurile, forma de dozare finală trebuie să fie sterilă, fluidă şi stabilă în condiţiile de fabricare şi depozitare. Purtătorul sau vehiculul lichid poate fi un solvent sau mediu de dispersie lichid care cuprinde, de exemplu, apă, etanol, un poliol (de exemplu, glicerol, propilenglicol, polietilenglicoli lichizi şi altele asemenea), uleiuri vegetale, esteri de gliceril netoxici şi amestecuri adecvate ale acestora. Fluiditatea adecvată poate fi menţinută, de exemplu, prin formarea lipozomilor, prin menţinerea dimensiunii necesare a particulelor în cazul dispersiilor sau prin utilizarea agenţilor tensioactivi. Prevenirea acţiunii microorganismelor poate fi realizată de diferiţi agenţi antibacterieni şi antifungici, de exemplu, parabeni, clorobutanol, fenol, acid sorbic, timerosal şi altele asemenea. În multe cazuri, va fi de preferat să se includă agenţi izotonici, de exemplu, zaharuri, tampoane sau clorură de sodiu. Absorbţia prelungită a compoziţiilor injectabile poate fi realizată prin utilizarea în compoziţii a agenţilor care întârzie absorbţia, de exemplu, monostearat de aluminiu şi gelatină.
Soluţiile injectabile sterile sunt preparate încorporându-se compusul activ în cantitatea necesară în solventul adecvat cu diferite ingrediente dintre cele enumerate mai sus, după caz, urmată de sterilizarea prin filtrare. În cazul pulberilor sterile pentru prepararea soluţiilor injectabile sterile, metodele de preparare pot include uscarea în vid şi tehnicile de liofilizare, care produc o pulbere a ingredientului activ plus orice ingredient suplimentar dorit prezent în soluţiile filtrate steril anterior.
În cazul administrării topice, compuşii prezenţi pot fi aplicaţi în formă pură, adică, atunci când sunt lichizi. Totuşi, în general, va fi de dorit să se administreze pe piele sub formă de compoziţii sau formulări, în combinaţie cu un purtător acceptabil dermatologic, care poate fi un solid sau un lichid.
Purtători solizi utili includ solide fin separate, cum ar fi talc, argilă, celuloză microcristalină, silice, alumină şi altele asemenea. Purtătorii lichizi utili includ apă, alcooli sau glicoli sau amestecuri apă-alcool/glicol, în care prezenţii compuşi pot fi dizolvaţi sau dispersaţi la niveluri eficiente, opţional cu ajutorul unor agenţi tensioactivi netoxici. Adjuvanţi precum parfumuri şi agenţi antimicrobieni suplimentari pot fi adăugaţi pentru a optimiza proprietăţile pentru o utilizare dată. Compoziţiile lichide rezultate pot fi aplicate din tampoane absorbante, utilizate pentru a impregna bandaje şi alte pansamente sau pulverizate pe zona afectată folosind pulverizatoare de tip pompă sau aerosoli.
Agenţi de îngroşare, cum ar fi polimerii sintetici, acizii graşi, sărurile şi esterii acizilor graşi, alcoolii graşi, celulozele modificate sau materialele minerale modificate pot fi, de asemenea, utilizaţi cu purtători lichizi pentru a forma paste, geluri, unguente, săpunuri şi altele asemănătoare, pentru aplicarea directă pe pielea utilizatorului.
Exemple de compoziţii dermatologice utile care pot fi folosite pentru a elibera pe piele compuşii conform invenţiei sunt cunoscute în domeniu; de exemplu, vezi Jacquet şi colab. (Brev. U.S. nr. 4,608,392), Geria (Brev. U.S. nr. 4,992,478), Smith şi colab. (Brev. U.S. nr. 4,559,157), şi Wortzman (Brev. U.S. nr. 4,820,508).
Dozele utile ale compuşilor conform invenţiei pot fi determinate, cel puţin iniţial, prin compararea activităţii acestora in vitro şi a activităţii in vivo în modele pe animale. Metodele pentru extrapolarea dozelor eficiente la şoareci şi alte animale la oameni sunt cunoscute în domeniu; de exemplu, vezi Brev. U.S. nr. 4,938,949.
Cantitatea de compus, sau o sare activă a acestuia, necesară pentru utilizarea în tratament va varia nu numai în funcţie de compusul sau de sarea selectată, ci şi de calea de administrare, natura stării care este tratată şi vârsta şi starea pacientului şi va fi în cele din urmă la discreţia medicului curant sau a clinicianului.
În general, totuşi, o doză adecvată va fi cuprinsă în intervalul de la aproximativ 0,5 la aproximativ 100 mg/kg greutate corporală a beneficiarului pe zi, de exemplu, de la aproximativ 3 la aproximativ 90 mg/kg de greutate corporală pe zi, de la aproximativ 6 la aproximativ 75 mg per kilogram de greutate corporală pe zi, de la aproximativ 10 la aproximativ 60 mg/kg de greutate corporală pe zi, sau de la aproximativ 15 la aproximativ 50 mg/kg de greutate corporală pe zi.
Compuşii conform invenţiei pot fi formulaţi convenabil sub formă de dozare unitară; de exemplu, conţinând 5 la 1000 mg, 10 la 750 mg, sau 50 la 500 mg de ingredient activ per formă de dozare unitară. Într-o variantă de realizare, invenţia redă o compoziţie care cuprinde un compus conform invenţiei formulat într-o astfel de formă de dozare unitară. Doza dorită poate fi prezentată în mod convenabil într-o singură doză sau sub formă de doze divizate pentru a fi administrate la intervale adecvate, de exemplu, ca două, trei, patru sau mai multe sub-doze pe zi. Sub-doza în sine poate fi divizată în continuare, de exemplu, într-un număr de administrări discrete separate libere.
Compuşii conform invenţiei pot fi de asemenea administraţi în combinaţie cu alţi agenţi terapeutici, de exemplu, alţi agenţi care sunt utili pentru tratarea sau prevenirea ischemiei, pierderii de sânge sau leziunii de reperfuzie.
Alte sisteme de livrare pot include sisteme de livrare cu eliberare în timp, eliberare întârziată sau cu eliberare susţinută, cum sunt binecunoscute în domeniu. Astfel de sisteme pot evita administrările repetate ale compusului activ, crescând confortul subiectului şi medicului. Multe tipuri de sisteme de livrare de eliberare sunt disponibile şi cunoscute celor cu o calificare obişnuită în domeniu. Utilizarea unui implant cu eliberare susţinută pe termen lung poate fi de dorit. Eliberarea pe termen lung, aşa cum se utilizează aici, înseamnă că sistemul de livrare sau este implant construit şi aranjat pentru a elibera niveluri terapeutice ale ingredientului activ timp de cel puţin 30 de zile şi, de preferinţă, 60 de zile.
În anumite variante de realizare, un compus conform invenţiei este formulat pentru administrare intraoculară, de exemplu injectare directă sau inserare în sau în asociere cu un dispozitiv medical intraocular.
Compuşii conform invenţiei pot fi formulaţi pentru depunerea într-un dispozitiv medical, care poate include oricare dintr-o varietate de grefe convenţionale, stenturi, inclusiv grefe de stent, catetere, baloane, coşuri sau alt dispozitiv care poate fi dislocat sau implantat permanent într-un lumen al corpului. Ca exemplu particular, ar fi de dorit să existe dispozitive şi metode care să poată furniza compuşii conform invenţiei în regiunea unui corp care a fost tratat prin tehnică intervenţională.
Într-o variantă de realizare exemplară, un compus conform invenţiei poate fi depus într-un dispozitiv medical, cum ar fi un stent, şi livrat la locul de tratament pentru tratamentul unei porţiuni a corpului.
Stenturile au fost utilizate ca vehicule de livrare pentru agenţi terapeutici (adică medicamente). Stenturile intravasculare sunt în general implantate permanent în vasele coronare sau periferice. Modelele de stent le includ pe cele din Brev. U.S. nr. 4,733,655 (Palmaz), Brev. U.S. nr. 4,800,882 (Gianturco), sau Brev. U.S. nr. 4,886,062 (Wiktor). Astfel de modele includ atât stenturi metalice şi polimerice, precum şi stenturi auto-expandabile şi expandabile cu balon. Stenturile pot fi, de asemenea, utilizate pentru a elibera un medicament la locul de contact cu sistemul vascular, aşa cum este dezvăluit în Brev. U.S. nr. 5,102,417 (Palmaz), Brev. U.S. nr. 5,419,760 (Narcizo, Jr.), Brev. U.S. nr. 5,429,634 (Narcizo, Jr.), şi în Cererile internaţionale de brevet nr. WO 91/12779 (Medtronic, Inc.) şi WO 90/13332 (Cedars-Sanai Medical Center), de exemplu.
Termenul "depus" înseamnă că, compusul este sub formă de acoperire, adsorbit, plasat sau încorporat în alt mod în dispozitiv prin metode cunoscute în domeniu. De exemplu, compusul poate fi încorporat şi eliberat din interior (ʺtip matriceʺ) sau înconjurat de şi eliberat prin materiale polimerice (ʺtip rezervorʺ) care acoperă sau întind dispozitivul medical.
În ultimul exemplu, compusul poate fi prins în materialele polimerice sau cuplat la materialele polimerice folosind una sau mai multe tehnici de generare a unor astfel de materiale cunoscute în domeniu. În alte formulări, compusul poate fi legat de suprafaţa dispozitivului medical fără a fi nevoie de o acoperire, de exemplu prin intermediul unor legături detaşabile, şi se eliberează în timp sau poate fi îndepărtat prin procese mecanice sau chimice active. În alte formulări, compusul poate fi într-o formă imobilizată permanent care prezintă compusul la locul de implantare.
În anumite variante de realizare, compusul poate fi încorporat cu compoziţii polimerice pe durata formării învelişurilor biocompatibile pentru dispozitivele medicale, cum ar fi stenturi. Acoperirile produse din aceste componente sunt tipic omogene şi sunt utile pentru acoperirea unui număr de dispozitive proiectate pentru implantare.
Polimerul poate fi un polimer biostabil sau bioabsorbabil în funcţie de rata de eliberare dorită sau de gradul dorit de stabilitate a polimerului, însă frecvent un polimer bioabsorbabil este preferat pentru această variantă de realizare deoarece, spre deosebire de un polimer biostabil, nu va fi prezent mult timp după implantare pentru a provoca vreun răspuns local advers, cronic. Polimerii bioabsorbabili care ar putea fi utilizaţi includ, dar nu sunt limitaţi la, poli(acid L-lactic), policaprolactonă, poliglicolidă (PGA), poli(lactidă-co-glicolidă) (PLLA/PGA), poli(hidroxibutirat), poli(hidroxibutirat-co-valerat), polidioxanonă, poliortoester, polianhidridă, poli(acid glicolic), poli(acid D-lactic), poli(acid L-lactic), poli(acid D, L-lactic), poli(D, L-lactidă) (PLA), poli (L-lactidă) (PLLA), poli(acid glicolic-co-trimetilen-carbonat) (PGA/PTMC), oxid de polietilenă (PEO), polidioxanonă (PDS), polifosfoester, polifosfoester uretan, poli(aminoacizi), cianoacrilatţi, poli(carbonat de trimetilenă), poli(iminocarbonat), copoli(eter-esteri) (de exemplu, PEO/PLA), oxalaţi de polialchilen, polifosfazene şi biomolecule cum ar fi fibrină, fibrinogen, celuloză, amidon, colagen şi acid hialuronic, poliepsilon caprolactonă, acid polihidroxi butiric, poliortoesteri, poliacetali, polidihidropirani, policianoacrilaţi, copolimeri bloc de hidrogeluri reticulaţi sau amfipatici, şi alţi polimeri bioabsorbabili adecvaţi cunoscuţi în domaniu. De asemenea, ar putea fi utilizaţi polimeri biostabili cu un răspuns cronic al ţesuturilor relativ scăzut, cum ar fi poliuretani, siliconi, şi poliesteri, şi alţi polimeri ar putea fi, de asemenea, utilizaţi dacă pot fi dizolvaţi şi întăriţi sau polimerizaţi pe dispozitivul medical, cum ar fi poliolefine, copolimeri de poliizobutilenă şi etilen-alfaolefină; polimeri şi copolimeri acrilici, polimeri şi copolimeri de halogenură de vinil, cum ar fi clorură de polivinil; polivinilpirolidonă; eteri de polivinil, cum ar fi eter polivinil metilic; halogenuri de poliviniliden, cum ar fi fluorură de poliviniliden şi clorură de poliviniliden; poliacrilonitril, polivinil cetone; aromatice polivinilice, cum ar fi polistiren, esteri polivinilici, cum ar fi acetat de polivinil; copolimeri ai monomerilor vinilici cu fiecare dintre ceilalţi şi olefine, cum ar fi copolimeri de metacrilat de etilen-metil, copolimeri de acrilonitril-stirene, răşini ABS, şi copolimeri de acetat de etilen-vinil; copolimer de piran; polihidroxi-propil-metacrilamidă-fenol; polihidroxietil-aspartamidă-fenol; polietilenoxide-polilisină substituită cu resturi de palmitoil; poliamide, cum ar fi Nailon 66 şi policaprolactamă; răşini alchidice, policarbonaţi; polioximetilene; poliimide; polieteri; răşini epoxidice, poliuretani; raion; raion-triacetat; celuloză, acetat de celuloză, butirat de celuloză; acetat butirat de celuloză; celofan; nitrat de celuloză; propionat de celuloză; eteri de celuloză; şi carboximetil celuloză.
Polimerii şi matricele polimerice semipermeabile pot fi formate ca articole modelate, cum ar fi valve, stenturi, tuburi, proteze şi altele asemenea.
În anumite variante de realizare ale invenţiei, compusul conform invenţiei este cuplat la un polimer sau o matrice polimerică semipermeabilă care este formată ca un stent sau un dispozitiv de grefă stent.
Tipic, polimeri sunt aplicaţi pe suprafaţa unui dispozitiv implantabil prin depunere ca acoperire prin rotaţie, imersare sau pulverizare. Metode suplimentare cunoscute în domeniu pot fi de asemenea utilizate în acest scop. Metodele de pulverizare includ metode tradiţionale precum şi tehnici de microdepozitare cu un tip de jet de cerneală al dispensorului. Suplimentar, un polimer poate fi depozitat pe un dispozitiv implantabil utilizând foto-modelare pentru a plasa polimerul numai pe porţiunile specifice ale dispozitivului. Această acoperire a dispozitivului asigură un strat uniform în jurul dispozitivului, care permite o difuzie îmbunătăţită a diferiţilor analiţi prin acoperirea dispozitivului.
În anumite variante de realizare a invenţiei, compusul este formulat pentru eliberare de la acoperirea polimerică în mediul în care dispozitivul medical este plasat. Preferabil, compusul este eliberat într-o manieră controlată în decursul unui interval de timp extins (de exemplu, luni) utilizând cel puţin una dintre câteva tehnici binecunoscute care implică purtători sau straturi polimerice pentru a controla eluţia. Unele dintre aceste tehnici sunt descrise în Cererea de brevet U.S. 2004/0243225A1, a cărei întreagă dezvăluire este încorporată aici în întregime.
Mai mult, aşa cum este descris, de exemplu, în Brev. U.S. nr. 6,770,729, care este încorporat aici în întregime, reactivii şi condiţiile de reacţie ale compoziţiilor polimerice pot fi manipulate astfel încât eliberarea compusului din acoperirea polimerică să poată fi controlată. De exemplu, coeficientul de difuzie a uneia sau mai multor acoperiri polimerice poate fi modulat pentru a controla eliberarea compusului din acoperirea polimerului. Într-o variaţie pe această temă, coeficientul de difuzie al unuia sau mai multor învelişuri polimerice poate fi controlat pentru a modula capacitatea unui analit care este prezent în mediul în care dispozitivul medical este plasat (de exemplu, un analit care facilitează ruperea sau hidroliza unei porţiuni a polimerului) pentru a accesa una sau mai multe componente din compoziţia polimerică (şi de exemplu, să moduleze astfel eliberarea compusului din învelişul polimeric). Încă o altă variantă de realizare a invenţiei include un dispozitiv având o multitudine de învelişuri polimerice, având fiecare o multitudine de coeficienţi de difuzie. În astfel de variante de realizare ale invenţiei, eliberarea compusului din acoperirea polimerică poate fi modulată de multitudinea de acoperiri polimerice.
În încă o altă variantă de realizare a invenţiei, eliberarea compusului din învelişul polimeric este controlată prin modularea uneia sau mai multor proprietăţi ale compoziţiei polimerice, cum ar fi prezenţa unuia sau mai multor compuşi endogeni sau exogeni, sau alternativ, pH-ul compoziţiei polimerice. De exemplu, anumite compoziţii polimerice pot fi concepute pentru a elibera un compus ca răspuns la o scădere a pH-ului compoziţiei polimerice.
Kituri
Invenţia redă, de asemenea, un kit, care cuprinde un compus conform invenţiei sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia:, cel puţin un alt agent terapeutic, material de ambalare şi instrucţiuni pentru administrarea compusului conform invenţiei sau a sării acceptabile farmaceutic a acestuia şi a altui agent sau altor agenţi terapeutici pentru un mamifer pentru a trata sau a preveni ischemia, pierderea de sânge sau leziunea de reperfuzie la un mamifer. Într-o variantă de realizare, mamiferul este un om.
EXEMPLE
Prezenta invenţie este ilustrată în continuare prin următoarele exemple, care în niciun fel nu trebuie interpretate ca limitând domeniul de aplicare al invenţiei revendicate.
Prepararea (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(((ciclopropilmetil)amino)(fenil)metil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (1p)
Etapa-1: Prepararea N-(5-bromo-2-fluorofenil)-1,1,1-trimetil-N-(trimetilsilil)silanaminei (1b)
La o soluţie agitată de 5-bromo-2-fluoroanilină (1a) (225 g, 1184 mmoli) în trietilamină (3301 mL, 20 eq) s-a adăugat trifluorometansulfonat de trimetilsilil (481 mL, 2664 mmoli) la temperatura camerei[Notă: în timpul adiţiei s-a generat căldură însă, nu a fost necesar să se răcească balonul]. Amestecul s-a încălzit la reflux timp de 16 h şi s-a răcit la temperatura camerei. Cele două straturi s-au separat. [Notă: încercaţi să nu expuneţi soluţia la aer sau umiditate în timpul separării]. Soluţia întunecată de la fund a fost aruncată şi stratul superior a fost concentrat în vid pentru a se îndepărta excesul de trietilamină. Reziduul uleios s-a transferat într-un balon de 1000 mL şi s-a distilat sub vid înaintat. Compusul începe să se distileze la 100 °C la 0,5 mm/Hg. Prima fracţie (aproximativ 15 mL) s-a înlăturat a doua fracţie s-a colectat constant la 100 °C, 0,5 mm/Hg, pentru a furniza N-(5-bromo-2-fluorofenil)-1,1,1-trimetil-N-(trimetilsilil)silanamina (1b) (364 g, 1089 mmoli, randament 92 %). Aceasta a fost totdeauna proaspăt preparată pentru următoarea etapă; 1H RMN (300 MHz, Cloroform-d) δ 7,17 ― 7,11 (m, 1H), 7,09 (dd, J = 7,5, 2,5 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 0,08 (d, J = 0,6 Hz, 18H).
Etapa-2: Prepararea bromurii de (3-(bis(trimetilsilil)amino)-4-fluorofenil)magneziu (1c)
La strunjituri de magneziu (33,1 g, 1361 mmoli) în tetrahidrofuran (15 mL) s-a adăugat iod (1,381 g, 5,44 mmoli) urmat de N-(5-bromo-2-fluorofenil)-1,1,1-trimetil-N-(trimetilsilil)silanamină (1b) (4g) pentru a activa reacţia pentru aproximativ 5 minute (Culoarea iodului s-a decolorat). În acest moment restul soluţiei de N-(5-bromo-2-fluorofenil)-1,1,1-trimetil-N-(trimetilsilil)silanamină (1b) (364 g, 1089 mmoli) în tetrahidrofuran (1000 mL) s-a adăugat lent în decursul unei perioade de 3 h (temperatura de reacţie a fost în jur de 60 °C în timpul adiţiei. Soluţia gri închis rezultată s-a agitat peste noapte pentru a furniza bromură de (3-(bis(trimetilsilil)amino)-4-fluorofenil)magneziu (1c) (397 g, 1107 mmoli, 102 % randament, soluţie aproximativ 1 M) care s-a utilizat proaspătă în etapa următoare.
Etapa-3: Prepararea (R)-(-)-N-benziliden-2-metilpropan-2-sulfinamidei (1d)
La o soluţie agitată de benzaldehidă (259 mL, 2541 mmoli) în tetrahidrofuran (2500 mL) s-a adăugat (R)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (280 g, 2310 mmoli), tetraizopropoxititan (1382 mL, 4620 mmoli) şi s-a agitat la temperatura camerei timp de 36 h. Amestecul de reacţie s-a diluat cu 1 L de saramură cu agitare energică, urmată de acetat de etil (6 L) şi s-a agitat timp de 4 h. Amestecul de reacţie s-a filtrat s-a spălat cu acetat de etil (6 × 2 L). Straturile organice s-au combinat s-au spălat cu o soluţie de metabisulfit de sodiu (329 mL, 1733 mmoli), apă (462 mL) s-au uscat pe MgSO4, s-au filtrat, s-au evaporat la sec. Reziduul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 1,5 kg, eluând cu 20% acetat de etil în hexan) pentru a furniza (R)-(-)-N-benziliden-2-metilpropan-2-sulfinamida (1d) (472,51 g, 2257 mmoli, 98 % randament) ca un ulei galben pal; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,57 (s, 1H), 8,03 ― 7,89 (m, 2H), 7,70 ― 7,48 (m, 3H), 1,19 (s, 9H); MS (ES+) 232,18 (M+Na); Rotaţie optică: [α]D = (-) 112,11 [4,155, CHCl3].
Etapa-4: Prepararea (R)-N-((R)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (1e) şi (R)-N-((S)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (1f)
Şarja-1 La o soluţie de (R)-(-)-N-benziliden-2-metilpropan-2-sulfinamidă (1d) (475 g, 2269 mmoli) în toluen (4L) răcită la -11 °C s-a adăugat în picături reactiv Grignard proaspăt preparat bromură de (3-(bis(trimetilsilil)amino)-4-fluorofenil)magneziu (1c) (4,75 L, 3563 mmoli) pe o perioadă de 70 minute, menţinând temperatura internă între (-11,1 până la -10 °C). Amestecul de reacţie s-a agitat la aceeaşi temperatură până la terminare (verificare prin TLC în ceea ce priveşte terminarea reacţiei). Reacţia s-a stins la -10 °C cu în KHSO4. Reacţia s-a încălzit la temperatura camerei pentru o perioadă de 30 min şi stratul organic s-a separat. Stratul apos s-a extras cu acetat de etil (2 × 2 L). Straturile organice s-au combinat s-au spălat cu apă (2 × 2 L), saramură (3,5 L), s-a uscat s-a filtrat şi s-a concentrat în vid pentru a se obţine un ulei brut care conţine un amestec de diastereoizomeri de (R)-N-((R)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (1e) şi (R)-N-((S)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (1f) [(de = 72/28) 727 g, 2269 mmoli]. La produsul brut într-un balon de 22 L s-a adăugat IPA (2000 mL) şi s-a încălzit la reflux cu agitare (30 min pentru solubilizarea completă). Amestecul de reacţie s-a răcit la 27 °C pe o perioadă de 5 h cu agitare blândă. Solidul obţinut s-a colectat prin filtrare s-a spălat cu IPA (5 × 100 mL), s-a uscat în aer timp de 24 h pentru a furniza (R)-N-((R)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (1e) (351 g, 48,3 % randament, de = 94,63%.) ca un solid cristalin alb.
Şarja-2 Procedura de mai sus s-a repetat utilizând (R)-(-)-N-benziliden-2-metilpropan-2-sulfinamidă (1d) (0,500 kg, 2,389 mol) pentru a furniza (R)-N-((R)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (1e) (329 g, 43 % randament, de = 93,58%.) ca un solid cristalin alb.
Şarja-3 Procedura de mai sus s-a repetat utilizând (R)-(-)-N-benziliden-2-metilpropan-2-sulfinamidă (1d) (409 g, 1953 mmoli) pentru a furniza (R)-N-((R)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (1e) (264 g, 42 % randament, de = 94,33%.) ca un solid cristalin alb.
A doua cristalizare: Cele trei şarje de mai sus s-au combinat într-un balon evaporator rotativ de 22 L cu gură mare prevăzut cu un agitator mecanic, care conţine un amestec de diastereoizomeri de (1e) şi (1f) (şarja-1, 351 g, 48,3 % randament, de = 94,63%), (şarja-2, 329 g, 43 % randament, de = 93,58%) şi (şarja-3, 264 g, 42 % randament, de = 94,33%) s-a adăugat IPA (4000 mL) şi s-a încălzit cu agitare la reflux (50 min pentru solubilizarea completă). Amestecul de reacţie s-a răcit peste noapte la temperatura camerei cu agitare blândă (13 °C). Solidul a cristalizat după aproximativ 1 h de răcire şi agitarea s-a continuat peste noapte. Solidul obţinut s-a colectat prin filtrare s-a spălat cu IPA (1 × 100 mL şi 2 × 200 mL), s-a uscat în vid ridicat timp de 24 h pentru a furniza (R)-N-((R)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (1e) (872 g, 92 % randament, de = 99,2852%.) ca un solid cristalin alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,40 - 7,26 (m, 4H), 7,25 - 7,15 (m, 1H), 6,90 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,75 (dd, J = 8,9, 2,2 Hz, 1H), 6,57 (ddd, J = 8,4, 4,4, 2,2 Hz, 1H), 5,77 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 5,33 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 5,11 (s, 2H), 1,13 (s, 9H); 19F RMN (282 MHz, DMSO) δ -137,36; 13C RMN (75 MHz, DMSO) δ 151,32, 148,19, 143,13, 139,74, 139,70, 128,22, 127,63, 126,93, 115,04, 114,98, 114,91, 114,82, 114,60, 114,35, 61,88, 55,42, 22,77; Rotaţie optică: [α]D = (-) 70,70 (MeOH, 1,065); Analiză calculată pentru C17H21FN2OS: C, 63,72; H, 6,61; N, 8,74; Găsit: C, 63,74; H, 6,74; N, 8,74.
Date pentru (R)-N-((S)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (If); 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,41 ― 7,36 (m, 2H), 7,36 ― 7,27 (m, 2H), 7,26 ― 7,18 (m, 1H), 6,89 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,71 (dd, J = 8,9, 2,2 Hz, 1H), 6,51 (ddd, J = 8,4, 4,5, 2,2 Hz, 1H), 5,82 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 5,32 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 5,09 (s, 2H, 1H D2O schimbabil), 1,14 (s, 9H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,32; MS (ES+) 321,3 (M+1), 343,3 (M+Na), 663,5 (2M+Na); MS (ES-) 319,3 (M-1). Rotaţie optică: [α]D = (-) 73,21 (MeOH, 2,505).
Etapa-5: Prepararea (+)-5-(amino(fenil)metil)-2-fluoroanilinei (1g)
La o suspensie de (R)-N-((R)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (1e) (99,13 g, 309 mmoli) agitată mecanic, în MTBE (600 mL) s-a adăugat HCl 4M (dioxan) (162 mL, 650 mmoli) şi s-a agitat la temperatura camerei timp de 11 h. Solidul începe să se formeze de îndată ce este începută adăugarea de HCl. Analiza TLC arată material de pornire nereacţionat, s-a adăugat HCl 4M (dioxan) suplimentar (162 mL, 650 mmoli) şi s-a agitat la temperatura camerei timp de 16 ore h. Excesul de metanol s-a evaporat, amestecul s-a alcalinizat cu NaOH 3N (455 mL) şi compusul s-a extras cu acetat de etil (2 x 750 mL). Straturile organice combinate s-au uscat pe MgSO4 anhidru, s-au filtrat, s-au evaporat la sec. Solidul s-a triturat cu hexani, s-a agitat timp de 1 h şi solidul obţinut s-a colectat prin filtrare pentru a se obţine (+)-5-(amino(fenil)metil)-2-fluoroanilina (1g) (38,0 g, 57 % randament) ca un solid galben pal; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,39 - 7,33 (m, 2H), 7,27 (ddd, J = 7,6, 6,6, 1,2 Hz, 2H), 7,21 - 7,13 (m, 1H), 6,86 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,77 (dd, J = 9,0, 2,2 Hz, 1H), 6,54 (ddd, J = 8,3, 4,4, 2,2 Hz, 1H), 5,03 (s, 2H, D2O schimbabil), 4,96 (s, 1H), 2,71 (s, 2H, D2O schimbabil); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -138,12; MS (ES+) 217,2 (M+1); 215,1 (M-1); Rotaţie optică: [α]D = (+) 1,47 (0,545, MeOH).
Etapa-6: Prepararea (-)-N-(ciclopropilmetil)-5-((ciclopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilinei (1h) şi (-)-5-((ciclopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilinei (1i)
La o soluţie agitată de (+)-5-(amino(fenil)metil)-2-fluoroanilină (1g) (5,312 g, 24,56 mmoli) în MeOH (80 mL) s-a adăugat ciclopropanecarboxaldehidă (1,944 mL, 25,8 mmoli) la 0 °C pentru o perioadă de 10 min şi s-a agitat timp de 30 min. La aceasta s-a adăugat borohidrură de sodiu (1,859 g, 49,1 mmoli) în multiple porţii şi s-a agitat timp de 1 h la 0 °C. Solventul în exces s-a evaporat şi reziduul s-a tratat cu apă (100 mL), şi s-a extras cu acetat de etil (2 × 100 mL). Straturile organice s-au combinat s-au uscat pe MgSO4 anhidru s-au filtrat şi s-au evaporat la sec. Reziduul s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 80 g, eluând cu 0-100% acetat de etil în hexani) pentru a furniza
1. (-)-N-(ciclopropilmetil)-5-((ciclopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilina (1h) (0,663 g, 8% randament) ca un ulei galben; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,44 - 7,35 (m, 2H), 7,30 - 7,21 (m, 2H), 7,19 - 7,08 (m, 1H), 6,96 - 6,75 (m, 2H), 6,55 (ddd, J = 8,3, 4,6, 2,0 Hz, 1H), 5,26 (td, J = 6,0, 2,3 Hz, 1H, D2O schimbabil), 4,71 (s, 1H), 2,93 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 2,27 (d, J = 7,1 Hz, 3H, 1H, D2O schimbabil), 1,09 - 0,84 (m, 2H), 0,39 (m, 4H), 0,25 - 0,15 (m, 2H), 0,09 - - 0,02 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,56; MS (ES+) 325,4 (M+1); Rotaţie optică: [α]D = (-) 6,67 [0,27, metanol]
2. (-)-5-((ciclopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilina (1i) (4,84 g, 73 % randament) ca un ulei galben ; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,42 - 7,34 (m, 2H), 7,32 - 7,23 (m, 2H), 7,22 - 7,11 (m, 1H), 6,92 - 6,78 (m, 2H), 6,55 (ddd, J = 8,3, 4,5, 2,2 Hz, 1H), 5,04 (s, 2H, D2O schimbabil), 4,67 (s, 1H), 2,25 (td, J = 9,6, 5,3 Hz, 3H; 1H D2O schimbabil), 1,04 - 0,80 (m, 1H), 0,50 - 0,28 (m, 2H), 0,11 - 0,02 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,92; MS (ES-) 269,3 (M-1); Rotaţie optică: [α]D = (-) 12,24 [1,275, CHCl3]; Puritate chirală verificată prin efectuarea de HPLC chirală utilizând o coloană AD-H chirală, 1 mL/min, Solvent: 95% Hexan, 5% izopropanol, UV = 260 nM, 25 °C (>99,99 ee).
Etapa-7: Prepararea 5-(amino(fenil)metil)-2-fluoroanilinei (1k)
Compusul (R)-N-((3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (1j) s-a obţinut din lichidul mumă de la cristalizarea amestecului de diastereoizomeri ai (R)-N-((R)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (1e) şi (R)-N-((S)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (1f). Compusul 1k s-a preparat din (R)-N-((3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (1j) (27,8 g, 87 mmoli) utilizând procedura raportată în etapa 5 din Schema 1 pentru a furniza 5-(amino(fenil)metil)-2-fluoroanilină (1k) (14 g, 75%) ca un solid maroniu deschis; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,40 ― 7,32 (m, 2H), 7,27 (ddd, J= 7,6, 6,7, 1,2 Hz, 2H), 7,21 ― 7,11 (m, 1H), 6,86 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,78 (dd, J = 9,0, 2,2 Hz, 1H), 6,54 (ddd, J = 8,3, 4,5, 2,2 Hz, 1H), 5,00 (s, 2H), 4,93 (s, 1H), 2,13 (s, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO) δ -138,30; MS (ES) 215,1 (M-1).
Etapa-8: Prepararea N-(ciclopropilmetil)-5-((ciclopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilinei (11) şi 5-((ciclopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilinei (1m).
Compuşii 1l şi 1m s-au preparat din 5-(amino(fenil)metil)-2-fluoroanilină (1k) (1,081 g, 5,00 mmoli) conform procedurii raportate în etapa 6 din Schema 1 pentru a furniza
1. N-(ciclopropilmetil)-5-((ciclopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilina (1l) (0,194 g, 0,598 mmoli, randament 11,96 %) ca un ulei incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,44 ― 7,35 (m, 2H), 7,30 ― 7,21 (m, 2H), 7,19 ― 7,11 (m, 1H), 6,94 ― 6,79 (m, 2H), 6,56 (ddd, J = 8,2, 4,6, 2,1 Hz, 1H), 5,29 (td, J = 5,9, 2,3 Hz, 1H), 4,72 (s, 1H), 2,94 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 2,38 ― 2,20 (m, 3H), 1,10 ― 0,97 (m, 1H), 0,91 (m, 1H), 0,40 (m, 4H), 0,21 (m, 2H), 0,03 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO) δ - 137,78; MS (ES+) 325,3 (M+1); (ES-) 323,2 (M-1).
2. 5-((ciclopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilina (1m) (0,795 g, 2,94 mmoli, randament 58,8 %) ca un ulei incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,40 ― 7,33 (m, 2H), 7,27 (tt, J = 6,6, 0,9 Hz, 2H), 7,20 ― 7,12 (m, 1H), 6,90 ― 6,78 (m, 2H), 6,54 (ddd, J = 8,3, 4,5, 2,1 Hz, 1H), 5,04 (s, 2H), 4,67 (s, 1H), 2,34 ― 2,22 (m, 3H), 0,91 (m, 1H), 0,44 ― 0,30 (m, 2H), 0,09 ― 0,00 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO) δ - 137,95; MS (ES+) 271,2 (M+1).
Etapa-9: Prepararea acidului (2R,4R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (1o)
La o soluţie agitată de Cis-hidroxi-D-prolină (1 g, 7,63 mmoli) în bicarbonat de sodiu apos (61,0 mL, 30,5 mmoli, 0,5 molar) s-a adăugat izocianat de 4-clorofenil (In) (1,952 mL, 15,25 mmoli) şi s-a încălzit la 80 °C timp de 5 h. Reacţia s-a răcit la temperatura camerei şi solidul obţinut s-a filtrat. Filtratul apos s-a spălat cu acetat de etil, pH-ul s-a ajustat la 1 utilizând soluţie conc. de HCl şi s-a extras cu acetat de etil (3 × 150 mL). Straturile organice extrase în final s-au combinat s-au spălat cu saramură, s-au uscat şi s-au concentrat în vid pentru a se obţine acid (2R,4R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (10) (1,92 g, 6,74 mmoli, randament 88 %) ca un solid incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,33 (s, 1H), 8,41 (s, 1H), 7,61 - 7,48 (m, 2H), 7,32 - 7,22 (m, 2H), 5,16 (bs, 1H), 4,32 (m, 2H), 3,65 (dd, J = 10,2, 5,7 Hz, 1H), 3,31 (m, 1H), 2,32 (m, 1H), 1,90 (m, 1H); MS (ES+) 285,2 (M+1), 307,2 (M+Na), (ES-) 283,2 (M-1); Rotaţie optică: [α]D = (+) 48,89 [0,27, MeOH].
Etapa-10: Prepararea (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(((ciclopropilmetil)amino)(fenil)metil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (1p)
La un amestec de acid (2R,4R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (1o) (0,2 g, 0,703 mmoli), 5-((ciclopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilină (1m) (0,19 g, 0,703 mmoli) în tetrahidrofuran (5 mL) s-a adăugat 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (EEDQ, 0,174 g, 0,703 mmoli) şi s-a agitat peste noapte la temperatura camerei. Amestecul de reacţie brut s-a concentrat în vid şi reziduul s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 24 g, eluând cu 0-100% CMA 80 în cloroform) pentru a se obţine (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((ciclopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (1p) (65 mg, 0,121 mmoli, randament 17,23 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,65 - 9,53 (m, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,05 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,57 - 7,52 (m, 2H), 7,41 - 7,35 (m, 2H), 7,27 (dt, J = 7,6, 3,2 Hz, 4H), 7,20 - 7,12 (m, 3H), 5,29 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 4,81 (s, 1H), 4,51 (dd, J = 9,0, 4,6 Hz, 1H), 4,34 (q, J = 4,8 Hz, 1H), 3,69 (dd, J = 10,2, 5,6 Hz, 1H), 3,48 (dd, J = 10,0, 3,9 Hz, 1H), 2,38 (ddd, J = 18,8, 9,2, 4,7 Hz, 2H), 2,27 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 1,96 - 1,85 (m, 1H), 0,98 - 0,85 (m, 1H), 0,36 (dt, J = 8,4, 2,8 Hz, 2H), 0,05 (dd, J = 5,6, 4,0 Hz, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,72 (d, J = 2,9 Hz); MS (ES-) 535,4, 536,3, 537,4 (M, M-1, M-2); puritate HPLC 93,5%.
Prepararea (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (2a)
La o soluţie de acid (2R,4R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (1o) (0,2 g, 0,703 mmoli), 2-fluoroanilină (0,078 g, 0,703 mmoli) în tetrahidrofuran (5 mL) s-a adăugat 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (0,174 g, 0,703 mmoli) şi s-a agitat peste noapte la temperatura camerei. Amestecul de reacţie s-a concentrat în vid şi reziduul obţinut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 24 g, eluând cu acetat de etil în hexani 0 la 100%) pentru a se obţine (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (2a) (140 mg, 0,371 mmoli, randament 52,7 %) ca un solid incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,11 (s, 1H), 8,94 (s, 1H), 8,42 (m, 1H), 8,00 (m, 2H), 7,78 - 7,65 (m, 3H), 7,59 (m, 2H), 5,76 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 5,10 - 4,92 (m, 1H), 4,81 (m, 1H), 4,20 - 4,08 (m, 1H), 3,98 (m, 1H), 2,92 - 2,77 (m, 1H), 2,47 - 2,24 (m, 1H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,05; MS (ES+) 400,3 (M+Na), 777,4 (2M+Na), (ES-) 376,3 (M-1); puritate prin HPLC 99,51%.
Prepararea (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((+)-(ciclopropilmetilamino)(fenil) metil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (3a)
La un amestec de acid (2R,4R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (1o) (0,205 g, 0,721 mmoli), (-)-5-((ciclopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluoroanilină (1i) (0,195 g, 0,721 mmoli) în tetrahidrofuran (5 mL) s-a adăugat 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (0,178 g, 0,721 mmoli) şi s-a agitat peste noapte la temperatura camerei. Amestecul de reacţie brut s-a concentrat în vid şi reziduul obţinut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 24 g, eluând cu CMA 80 în cloroform furnizat de la 0 la 100%) pentru a se obţine (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((+)-(ciclopropilmetilamino)(fenil)metil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (3a) (25 mg, 0,047 mmoli, randament 6,45 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,14 - 7,98 (m, 1H), 7,59 - 7,51 (m, 2H), 7,38 (m, 2H), 7,32 - 7,23 (m, 4H), 7,21 - 7,09 (m, 3H), 5,30 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,51 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,34 (q, J = 4,8 Hz, 1H), 3,69 (dd, J = 10,0, 5,2 Hz, 1H), 3,48 (dd, J = 10,0, 4,1 Hz, 1H), 2,39 (m, 2H), 2,27 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 1,90 (m, 1H), 0,90 (m, 1H), 0,43 - 0,30 (m, 2H), 0,06 - 0,02 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,88 ; Spec masă (ES+) 537,4, 539,5 (M,M+2), (ES-) 537,3, 535,4 (M, M-2); puritate HPLC 96,99%; Rotaţie optică: [α]D = (+) 132 [0,2, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (4g)
Etapa: 1 Prepararea 3-(3-ciclopropilacriloil)benzonitrilului (4b)
La o soluţie agitată de 3-acetilbenzonitril (4a) (50 g, 344 mmoli) în metanol (800 mL) la 0 °C s-a adăugat ciclopropanecarboxaldehidă (41 mL, 549 mmoli) urmată de hidroxid de potasiu (1M soluţie apoasă, 67 mL, 67 mmoli). Amestecul de reacţie a fost lăsat să atingă temperatura camerei şi s-a agitat timp de 14h. Reacţia s-a acidulat cu HCl la pH-6 (75 mL, 1 N) şi s-a concentrat în vid menţinând temperatura băii sub 35 °C. Reziduul s-a diluat cu acetat de etil (1200 mL) şi s-a spălat cu apă (800 mL). Stratul apos s-a extras cu acetat de etil (800 mL) şi straturile organice s-au combinat s-au spălat cu saramură, s-au uscat, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid pentru a se obţine 3-(3-ciclopropilacriloil)benzonitril (4b) (72,42 gm) brut ca un lichid incolor, care s-a utilizat ca atare în următoarea etapă; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,19 (dp, J= 7,8, 1,6 Hz, 1H), 8,11 (dddt, J = 6,3, 3,7, 2,6, 1,4 Hz, 1H), 7,80 ― 7,65 (m, 2H), 7,32 (dd, J = 15,1, 7,6 Hz, 1H), 6,60 (ddd, J = 15,0, 11,3, 10,4 Hz, 1H), 1,91 ― 1,74 (m, 1H), 1,04 (m, 2H), 0,85 ― 0,75 (m, 2H).
Etapa 2: Prepararea 3-(3-ciclopropilpropanoil)benzonitrilului (4c)
La o soluţie agitată de 3-(3-ciclopropilacriloil)benzonitril (4b) (65,7 g, 333 mmoli) în benzen (750 mL) s-a adăugat hidrură de tri-n-butilstaniu (185 mL, 666 mmoli) şi s-a încălzit la reflux timp de 14 h. Amestecul de reacţie s-a răcit la temperatura camerei şi s-a concentrat în vid. Reziduul s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel eluând cu acetat de etil în hexani 0 la 100%) pentru a se obţine 3-(3-ciclopropilpropanoil)benzonitrilul (4c) (23,3, 116,9 mmoli, randament 34%) ca un ulei incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,41 (td, J = 1,8, 0,6 Hz, 1H), 8,24 (ddd, J = 7,9, 1,8, 1,2 Hz, 1H), 8,09 (dt, J = 7,7, 1,4 Hz, 1H), 7,73 (td, J = 7,8, 0,6 Hz, 1H), 3,15 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,52 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 0,81 ― 0,64 (m, 1H), 0,46 ― 0,26 (m, 2H), 0,13 ― 0,00 (m, 2H); MS (ES-) 198,2 (M-1).
Etapa-3: Prepararea (-)-N-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (4d)
Compusul (4d) s-a preparat din 3-(3-ciclopropilpropanoil)benzonitril (4c) (22,8 g, 114 mmoli) şi (R)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (13,95 g, 114 mmoli), utilizând procedura aşa cum este raportată în etapa 3 din Schema 1 pentru a se obţine (-)-N-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4d) (21,8 g, 72,1 mmoli, randament 63 %) ca un sirop galben deschis; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,29 (s, 1H), 8,21 ― 8,12 (m, 1H), 8,01 (d, J= 7,7 Hz, 1H), 7,70 (t, J= 7,9 Hz, 1H), 3,54 ― 3,13(m, 2H), 1,44 (q, J= 7,5 Hz, 2H), 1,23 (s, 9H), 0,82 ― 0,65 (m, 1H), 0,44 ― 0,29 (m, 2H), 0,11 ― 0,00 (m, 2H); MS (ES+) 303,3 (M+1); (ES-) 301,3 (M-1);; Rotaţie optică: [α]D (-) 66,92 (0,26, MeOH).
Etapa-4: Prepararea (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (4e)
La o soluţie agitată de (-)-N-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (4d) (17,72 g, 58,6 mmoli) în toluen (350 mL) la -20 °C s-a adăugat în picături o soluţie proaspăt preparată de bromură de (3-(bis(trimetilsilil)amino)-4-fluorofenil)magneziu (1c) (160 mL, 120 mmoli, 0,75N) pe o perioadă de 30 min. Amestecul de reacţie s-a agitat la -20 °C timp de 1 h şi s-a stins cu KHSO4 apos 1N (275 mL). Amestecul de reacţie s-a agitat timp de 1 h la temperatura camerei, s-a diluat cu apă (100 mL) s-a alcalinizat cu NaOH 2 N la pH 8 şi s-a extras cu acetat de etil (600 mL, 300 mL). Straturile organice s-au combinat s-au spălat cu apă (2 × 300 mL), saramură (300 mL), s-au uscat şi s-au concentrat în vid la sec. Reziduul brut s-a triturat cu acetat de etil şi solidul obţinut s-a colectat prin filtrare pentru a se obţine la uscarea sub vid (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4e) (10,4 g, randament 42,91%) ca un solid alb. Filtratul s-a concentrat în vid şi s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu acetat de etil în hexani 0 la 50%) la (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4e) (4,11 g, randament 16,95 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,78 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 7,70 (dt, J = 7,5, 1,4 Hz, 1H), 7,62 (dt, J = 8,1, 1,5 Hz, 1H), 7,50 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,90 (dd, J = 11,3, 8,5 Hz, 1H), 6,72 (dd, J = 8,7, 2,4 Hz, 1H), 6,47 (ddd, J = 8,5, 4,3, 2,4 Hz, 1H), 5,27 (s, 1H), 5,10 (s, 2H), 2,66-2,40 (m, 2H), 1,20-1,03 (m, 1H), 1,12 (s, 9H), 1,01-0,81 (m, 1H), 0,72-0,57 (m, 1H), 0,36 (m, 2H), 0,03-0,15 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,34; MS (ES+): 436,4 (M+Na); IR (KBr) 2235cm-1; Rotaţie optică: [α]D (-) 107,95 (0,78, MeOH); Analiză calculată pentru C23H28FN3OS: C, 66,80; H, 6,82; N, 10,16; Găsit: C, 67,06; H, 6,82; N, 10,28.
Etapa-5: Prepararea (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (4f).
La un amestec de acid (2R,4R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (1o) (0,2 g, 0,703 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (4e) (0,291 g, 0,703 mmoli) în tetrahidrofuran (5 mL) s-a adăugat 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (0,174 g, 0,703 mmoli) şi s-a încălzit la reflux timp de 16 h. Amestecul de reacţie s-a concentrat în vid şi reziduul obţinut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 24 g, eluând cu CMA 80 în cloroform furnizat de la 0 la 100%) pentru a se obţine (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (4f) (175 mg, 0,257 mmoli, randament 36,6 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,66 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,07 (m, 1H), 7,79 (m, 1H), 7,71 (m, 1H), 7,61 - 7,47 (m, 4H), 7,31 - 7,24 (m, 2H), 7,19 (m, 1H), 7,08 (m, 1H), 5,50 (s, 1H), 5,33 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 4,51 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,34 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 3,68 (dd, J = 10,0, 5,2 Hz, 1H), 3,49 (dd, J = 10,0, 3,9 Hz, 1H), 2,78 - 2,53 (m, 2H), 2,38 (s, 1H), 1,90 (m, 1H), 1,13 (s, 10H), 0,90 (m, 1H), 0,63 (m, 1H), 0,34 (m, 2H), -0,03 - -0,19 (m, 2H); 9F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ - 128,58 ; MS (ES+) 680,5 (M+1), 702,5, 704,5 (M+Cl), (ES-) 714,4, 716,5 (M+Cl); IR (KBr) 2231 cm-1; Rotaţie optică: [α]D = (-) 19,4 [0,175, MeOH].
Etapa 6: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (4g)
La o soluţie agitată de (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidă (4f) (160 mg, 0,235 mmoli) în Etanol (10 mL) s-a adăugat HCl conc. (0,098 mL, 1,176 mmoli) şi s-a încălzit la reflux timp de 1 h. Reacţia s-a concentrat în vid şi reziduul obţinut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 12 g, eluând cu 0-100% CMA 80 în cloroform) pentru a se obţine (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (4g) (42 mg, 0,073 mmoli, randament 31,0 %) ca un solid incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,08 - 7,99 (m, 1H), 7,86 (m, 1H), 7,63 (m, 2H), 7,59 - 7,51 (m, 2H), 7,46 (m, 1H), 7,32 - 7,23 (m, 2H), 7,12 (m, 2H), 5,30 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,50 (dd, J = 9,1, 4,7 Hz, 1H), 4,34 (q, J = 4,8 Hz, 1H), 3,68 (dd, J = 10,1, 5,3 Hz, 1H), 3,48 (dd, J = 10,1, 4,0 Hz, 1H), 2,46 - 2,28 (m, 3H), 2,27 - 2,16 (m, 2H), 1,90 (m, 1H), 1,02 (m, 2H), 0,70 - 0,56 (m, 1H), 0,34 (m, 2H), -0,08 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,29; MS (ES-) 575,3 (M-1); puritate prin HPLC 94,3%; Analiză calculată pentru C31H31ClFN5O3,0,5H20: C, 63,64; H, 5,51; N, 11,97; Găsit: C, 63,68; H, 5,75; N, 11,77; Rotaţie optică: [α]D = (+) 93,53 [0,34, MeOH].
Prepararea (2S,4R)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (5e)
Etapa-1: Prepararea 1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilatului de (2S,4R)-benzil (5b)
Diizopropiletilamină (1,918 mL, 10,98 mmoli) s-a picurat la o suspensie de 4-hidroxipirolidin-2-carboxilate 4-metilbenzensulfonat de(2S,4R)-benzil (5a) (4,32 g, 10,98 mmoli) în diclorometan anhidru (100 mL) s-a agitat la temperatura camerei timp de 10 min urmată de adiţia de 1-cloro-4-izocianatobenzen (1n) (1,686 g, 10,98 mmoli). Amestecul de reacţie s-a agitat la temperatura camerei timp de 2 h şi s-a turnat în apă (50 mL). Solidul separat s-a colectat prin filtrare pentru a furniza 1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilat de (2S,4R)-benzil (5b) ca un solid alb. Filtratul s-a extras cu diclorometan (3 × 50 mL), straturile organice s-au combinat, s-au spălat cu saramură (50 mL), s-au uscat pe sulfat de magneziu anhidru, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid. Reziduul s-a combinat cu filtratul solid pentru a se obţine 1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilatul de(2S,4R)-benzil (5b) (4,7 g, 12,54 mmoli) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,54 (s, 1H), 7,61 - 7,45 (m, 2H), 7,37 - 7,31 (m, 5H), 7,31 - 7,25 (m, 2H), 5,21 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 5,19 - 5,06 (m, 2H), 4,47 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 4,37 (m, 1H), 3,63 (dd, J = 10,5, 4,6 Hz, 1H), 3,49 - 3,39 (m, 1H), 2,15 (m, 1H), 1,94 (m, 1H); MS (ES+) 375,4 (M+1), 397,4 (M+Na), 749,6 (2M+1), 771,6 (2M+Na), (ES-) 373,3 (M-1), 419,3 (M+Cl); Rotaţie optică: [α]D = (-) 70,08 [0,625, MeOH].
Etapa-2: Prepararea acidului (4R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (5c)
La o soluţie agitată de 1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilat de (2S,4R)-benzil (5b) (3 g, 8,00 mmoli) în metanol (30 mL) s-a adăugat la temperatura camerei hidroxid de sodiu (1,601 g, 40,0 mmoli) şi s-a agitat timp de 2 h. Reacţia s-a concentrat în vid pentru a se îndepărta metanolul. Reziduul s-a dizolvat în apă (10 mL) şi s-a spălat cu acetat de etil (2 × 20 mL). Stratul apos s-a acidulat cu HCl conc la pH 2, s-a extras cu acetat de etil (3 × 75 mL). Straturile organice s-au combinat s-au spălat cu apă (2 × 50 mL), saramură (50 mL), s-au uscat, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid pentru a se obţine acid (4R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (5c) (1 g, 3,51 mmoli, randament 43,9 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,21 (s, 1H), 8,45 (2s, 1H), 7,61 - 7,42 (m, 2H), 7,37 - 7,21 (m, 2H), 5,17 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 4,32 (m, 2H), 3,63 (m, 1H), 3,34 - 3,21 (m, 1H), 2,31 (m, 1H), 2,22 - 2,00 (m, 1H); MS (ES+) 285,2 (M+1), 307,1 (M+Na), (ES-) 283,1 (M-1).
Etapa-3: Prepararea (2S,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (5d) şi (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (4f).
Reacţia acidului (4R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (5c) (550 mg, 1,932 mmoli) cu (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (4e) (799 mg, 1,932 mmoli) în tetrahidrofuran (5 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (478 mg, 1,932 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 5 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 24 g, eluând cu CMA 80 în cloroform furnizat de la 0 la 100%)
1. (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidă (4f) (267 mg, 0,393 mmoli, randament 20,32 %) ca un solid alb, urmată de.
2. (2S,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidă (5d) (203 mg, 0,298 mmoli, 15,45 % randament) ca un solid portocaliu deschis; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,84 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 7,94 (d, J= 7,4 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,70 (dt, J = 7,3, 1,5 Hz, 1H), 7,52 (m, 4H), 7,31 ― 7,23 (m, 2H), 7,19 (m, 1H), 7,09 (m, 1H), 5,49 (s, 1H), 5,18 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 4,66 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 4,39 (s, 1H), 3,67 (m, 1H), 3,47 ― 3,37 (m, 1H), 2,68 ― 2,54 (m, 2H), 2,17 ― 2,05 (m, 1H), 2,06 ― 1,87 (m, 1H), 1,11 (s, 10H), 0,89 (m, 1H), 0,72 ― 0,49 (m, 1H), 0,33 (m, 2H), -0,02 ― -0,20 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,00; MS (ES-) 678,4, 679,5 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (-) 190 [0,08, MeOH].
Etapa-4: Prepararea (2S,4R)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (5e)
Reacţia (2S,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (5d) (183 mg, 0,269 mmoli) în etanol (5 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,224 mL, 2,69 mmoli) aşa cum este raportat în Schema 4 etapa 6 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu 0 la 30% CMA 80 în cloroform) (2S,4R)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (5e) (100 mg, 0,174 mmoli, randament 64,5 %) ca un solid incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,77 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 7,94 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,86 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,66 - 7,58 (m, 2H), 7,57 - 7,51 (m, 2H), 7,45 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,31 - 7,24 (m, 2H), 7,15 - 7,08 (m, 2H), 5,17 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 4,65 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 4,40 (s, 1H), 3,67 (dd, J = 10,3, 4,6 Hz, 1H), 3,43 (m, 1H), 2,30 (m, 2H), 2,25 - 2,07 (m, 3H), 2,03 - 1,89 (m, 1H), 1,09 - 0,93 (m, 2H), 0,62 (m, 1H), 0,38 - 0,28 (m, 2H), - 0,04 - -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,76; MS (ES+) 598,4, 600,4 (M+Na); HPLC: 5,12 min. (93,86%); Rotaţie optică [α]D = (-) 96,05 [0,86, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-N1-metilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (6c) şi (2S,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-N1-metilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (6d)
Etapa-1: Prepararea 1-((4-clorofenil)(metil)carbamoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilatului de (4R)-metil (6a)
La o soluţie agitată de acid (2R,4R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (1o) (0,837 g, 2,94 mmoli) în N,N-Dimetilformamidă (20 mL) la 0 °C s-a adăugat hidrură de sodiu (60% dispersie în ulei mineral, 0,941 g, 23,52 mmoli) şi s-a agitat la 0 °C timp de 1 h. La amestecul de reacţie s-a adăugat la 0 °C iodură de metil (1,471 mL, 23,52 mmoli) şi s-a agitat timp de 2 h. Reacţia s-a stins prin adăugarea de KHSO4 1 N apos (15 mL), apă (100 mL) şi s-a extras cu acetat de etil (3 × 100 mL). Straturile organice s-au combinat s-au spălat cu apă (2 × 50 mL), saramură (50mL), s-au uscat, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid. Reziduul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană [silicagel 40 g, eluând cu (9:1) acetat de etil şi metanol în hexani 0 la 40%] pentru a se obţine (4R)-(1-((4-clorofenil)(metil)carbamoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilat de metil (6a) (250 mg, 0,765 mmoli, randament 26,0 %) s-a utilizat în următoarea reacţie; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,49 - 7,40 (m, 2H), 7,37 - 7,30 (m, 2H), 4,54 - 4,30 (m, 1H), 3,90 - 3,74 (m, 1H), 3,67 (d, J = 4,7 Hz, 3H), 3,29 - 3,18 (m, 1H), 3,11 (2s, 3H), 3,06 (2s, 3H), 2,70 - 2,21 (m, 2H), 1,80 - 1,60 (m, 1H); MS (ES+) 349,3 (M+1).
Etapa-2: Prepararea acidului ((4R)-1-((4-clorofenil)(metil)carbamoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (6b)
La o soluţie agitată de 1-((4-clorofenil)(metil)carbamoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilat de (4R)-metil (6a) (250 mg, 0,765 mmoli) în metanol (10 mL) s-a adăugat la temperatura camerei hidroxid de sodiu (0,765 mL, 3,06 mmoli, 4 N apos), s-a agitat la temperatura camerei peste noapte şi s-a concentrat în vid pentru a se îndepărta metanolul. Reziduul s-a dizolvat în apă (30 mL), s-a acidulat cu KHSO4 1N şi s-a extras cu acetat de etil (3 × 50 mL). Straturile organice s-au combinat s-au spălat cu apă (20 mL), saramură (20 mL), s-au uscat, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid pentru a se obţine acidul ((4R)-1-((4-clorofenil)(metil)carbamoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (6b) (230 mg, 0,735 mmoli, randament 96 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,64 (s, 1H), 7,47 - 7,31 (m, 4H), 4,40 - 4,24 (m, 1H), 3,90 - 3,73 (m, 1H), 3,33 - 3,16 (m, 1H), 3,11 (2s, 3H), 3,08 (2s, 3H), 2,50 - 2,19 (m, 2H), 1,80 - 1,57 (m, 1H); MS (ES+) 313,3, (ES-) 311,2 (M-1).
Etapa-3: Prepararea (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-N1-metilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (6c) şi (2S,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-N1-metilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (6d)
La un amestec de acid ((4R)-1-((4-clorofenil)(metil)carbamoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (6b) (230 mg, 0,735 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (4e) (304 mg, 0,735 mmoli) în tetrahidrofuran (5 mL) s-a adăugat 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (EEDQ, 182 mg, 0,735 mmoli) şi s-a încălzit la reflux timp de 16 h. Amestecul de reacţie s-a concentrat în vid şi reziduul obţinut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 40 g, eluând cu CMA 80 în cloroform, 0 la 100%) pentru a se obţine:
1. (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-N1-metilpirolidin-1,2-dicarboxamida (6c) (279 mg, 0,394 mmoli, randament 53,6 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,89 (s, 1H), 8,02 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,80 (d, J= 1,8 Hz, 1H), 7,73 (dt, J= 7,4, 1,3 Hz, 1H), 7,66 - 7,58 (m, 1H), 7,54 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,40 (s, 4H), 7,21 (dd, J = 10,5, 8,8 Hz, 1H), 7,17 - 7,05 (m, 1H), 5,55 (s, 1H), 4,75 - 4,56 (m, 1H), 3,80 (s, 1H), 3,16 (s, 3H), 3,09 (s, 3H), 3,03 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 2,78 - 2,67 (m, 2H), 2,66 - 2,54 (m, 1H), 2,47 - 2,23 (m, 1H), 1,82 - 1,61 (m, 1H), 1,15 (d, J = 1,4 Hz, 9H), 1,14 - 1,00 (m, 1H), 1,04 - 0,76 (m, 1H), 0,66 (m, 1H), 0,36 (m, 2H), 0,08 - -0,11 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,84; MS (ES+) 708,6 (M+1), 730,6, 732,6 (M+Cl), (ES-) 706,6, 708,6 (M-1).
2. (2S,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-N1-metilpirolidin-1,2-dicarboxamida (6d) (200 mg, 0,282 mmoli, randament 38,4 %) ca un solid alb: 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,73 (s, 1H), 7,95 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,81 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,72 (dt, J = 7,4, 1,3 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,40 (s, 4H), 7,22 (dd, J = 10,4, 8,7 Hz, 1H), 7,14 (m, 1H), 5,56 (s, 1H), 4,58 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 3,94 - 3,79 (m, 1H), 3,29 (m, 1H), 3,10 (s, 3H), 3,08 (s, 3H), 2,73 (m, 2H), 2,57 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 1,74 - 1,50 (m, 1H), 1,28 - 1,16 (m, 1H), 1,15 (2s, 9H), 0,99 - 0,78 (m, 1H), 0,66 (m, 1H), 0,37 (m, 2H), 0,10 - -0,11 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,21; MS (ES+) 708,6 (M+1), 730,6, 732,6 (M+Cl), (ES-) 706,6, 708,6 (M-1).
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-metoxi-N1-metilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (6e)
Reacţia (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-N1-metilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (6c) (170 mg, 0,240 mmoli) în etanol (5 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,200 mL, 2,400 mmoli) aşa cum este raportat în Schema 4 etapa 6 pentru prepararea compusului 4g a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu 0 la 30% CMA 80 în cloroform) (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-metoxi-N1-metilpirolidin-1,2-dicarboxamida (6e) (115 mg, 0,190 mmoli, randament 79 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,65 (s, 1H), 7,94 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,89 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,66 (ddt, J = 10,3, 7,7, 1,4 Hz, 2H), 7,49 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,46 ― 7,34 (m, 4H), 7,19 ― 7,12 (m, 2H), 4,56 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 3,93 ― 3,77 (m, 1H), 3,10 (s, 3H), 3,08 (s, 3H), 2,61 ― 2,39 (m, 2H), 2,36 (s, 2H), 2,31 ― 2,14 (m, 2H), 1,72 ― 1,52 (m, 1H), 1,13 ― 0,97 (m, 2H), 0,77 ― 0,57 (m, 1H), 0,42 ― 0,27 (m, 2H), 3,42 ― 3,19 (m, 1H), -0,00 ― -0,07 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,01; MS (ES+) 626,4, 628,4 (M+Na); puritate prin HPLC 99,04%; Rotaţie optică [α]D = (-) 142,49 [1,005, MeOH].
Prepararea (2S,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-metoxi-N1-metilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (6f).
Reacţia (2S,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-N1-metilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (6d) (238 mg, 0,336 mmoli) în etanol (5 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,280 mL, 3,36 mmoli) aşa cum este raportat în Schema 4 etapa 6 pentru prepararea compusului 4g a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu 0 la 30% CMA 80 în cloroform) (2S,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-metoxi-N1-metilpirolidin-1,2-dicarboxamida (6f) (106 mg, 0,175 mmoli, 52,2 % randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,81 (s, 1H), 7,98 - 7,91 (m, 1H), 7,89 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,70 - 7,62 (m, 2H), 7,48 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 1,5 Hz, 4H), 7,18 - 7,10 (m, 2H), 4,63 (dd, J = 10,3, 7,0 Hz, 1H), 3,80 (t, J = 3,5 Hz, 1H), 3,15 (s, 3H), 3,09 (s, 3H), 3,02 (m, 1H), 2,73 (m, 1H), 2,35 (s, 3H), 2,24 (m, 2H), 1,70 (m, 1H), 1,05 (m, 2H), 0,66 (m, 1H), 0,36 (m, 2H), -0,03 (s, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,42 ; MS (ES+) 626,4, 627,5 (M+Na), (ES-) 602,5, 603,3 (M-1); puritate prin HPLC 91,30%; Rotaţie optică [α]D = (+) 189,77 [0,86, MeOH.
Prepararea (R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (7c)
Etapa-1: Prepararea acidului (R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)pirolidin-2-carboxilic (7a)
Reacţia D-Prolinei (1,0 g, 8,69 mmoli) în bicarbonat de sodiu apos (69,5 mL, 34,7 mmoli, 0,5 M) cu 4-izocianat de clorofenil (In) (2,223 mL, 17,37 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 9 din Schema 1 a dat acidul (R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)pirolidin-2-carboxilic (7a) (1,6 g, 5,95 mmoli, randament 68,6 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,45 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,66 - 7,41 (m, 2H), 7,41 - 7,09 (m, 2H), 4,44 - 4,16 (m, 1H), 3,67 - 3,38 (m, 2H), 2,28 - 2,05 (m, 1H), 1,92 (m, 3H); MS (ES+) 269,1 (M+1), 291,2, 293,2 (M+Na), (ES-) 267,2, 269,1 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 59,33 [0,3, MeOH].
Etapa-2: Prepararea (R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (7b)
Reacţia acidului (R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)pirolidin-2-carboxilic (7a) (0,5 g, 1,861 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (4e) (0,770 g, 1,861 mmoli) în tetrahidrofuran (25 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (0,460 g, 1,861 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 100%) (R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (7b) (1,08 g, 1,626 mmoli, randament 87 %) ca un solid incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,84 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 7,92 (d, J= 7,3 Hz, 1H), 7,78 (d, J= 1,8 Hz, 1H), 7,71 (dt, J = 7,3, 1,4 Hz, 1H), 7,65 ― 7,44 (m, 4H), 7,32 ― 7,24 (m, 2H), 7,19 (dd, J = 10,4, 8,7 Hz, 1H), 7,16 ― 7,03 (m, 1H), 5,53 (s, 1H), 4,68 ― 4,45 (m, 1H), 3,71 ― 3,55 (m, 2H), 3,56 ― 3,42 (m, 1H), 2,77 ― 2,55 (m, 1H), 2,22 ― 2,04 (m, 1H), 1,95 (m, 4H), 1,12 (s, 9H), 1,00 ― 0,75 (m, 1H), 0,74 ― 0,50 (m, 1H), 0,41 ― 0,26 (m, 2H), 0,10 ― -0,25 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,07; MS (ES+) 686,5, 688,5 (M+Na); Rotaţie optică [α]D = (+) 142,65 [0,415, MeOH].
Etapa 3: (R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (7c)
Reacţia (R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (7b) (0,9 g, 1,355 mmoli) în etanol (20 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (1,129 mL, 13,55 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 30%) (R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (7c) (200 mg, 0,357 mmoli, 26,4 % randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,76 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 7,94 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,86 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 7,63 (ddt, J = 7,8, 6,1, 1,3 Hz, 2H), 7,59 ― 7,51 (m, 2H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,33 ― 7,23 (m, 2H), 7,19 ― 7,05 (m, 2H), 4,64 ― 4,52 (m, 1H), 3,61 (m, 1H), 3,49 (m, 1H), 2,31 (m, 2H), 2,22 (m, 2H), 2,14 (m, 1H), 1,96 (m, 3H), 1,04 (m, 2H), 0,63 (m, 1 H), 0,33 (m, 2H), - 0,07 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,97; MS (ES+) 582,4 (M+Na), (ES-) 558,5 (M-1), 594,3, 596,3 (M+Cl); IR(KBr) 3385, 2229, 1657, 1527, 1494, 1406 cm-1; Rotaţie optică [α]D = (+) 23,57 [0,28, MeOH].
Prepararea (S)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (8c)
Etapa-1: Prepararea acidului (S)-1-(4-clorofenilcarbamoil)pirolidin-2-carboxilic (8a)
Reacţia L-Prolinei (1,0 g, 8,69 mmoli) în bicarbonat de sodiu apos (69,5 mL, 34,7 mmoli, 0,5 M) cu 4-izocianat de clorofenil (In) (2,223 mL, 17,37 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 9 din Schema 1 a dat acidul (S)-1-(4-clorofenilcarbamoil)pirolidin-2-carboxilic (8a) (1,643 g, 6,11 mmoli, randament 70,4 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,45 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,60 ― 7,45 (m, 2H), 7,34 ― 7,20 (m, 2H), 4,39 ― 4,19 (m, 1H), 3,63 ― 3,39 (m, 1H), 2,17 (m, 1H), 2,02 ― 1,80 (m, 4H); MS (ES+) 269,3 (M+1), 291,3, 293,3 (M+Na); (ES-) 267,2 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (-) 51,85 [0,27, MeOH].
Etapa-2: Prepararea (S)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (8b)
Reacţia acidului (S)-1-(4-clorofenilcarbamoil)pirolidin-2-carboxilic (8a) (0,5 g, 1,861 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (4e) (0,770 g, 1,861 mmoli) în tetrahidrofuran (25 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (0,46 g, 1,861 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 100%) (S)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (8b) (1,002 g, 1,509 mmoli, randament 81 %) ca un solid incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,83 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 8,02 - 7,91 (m, 1H), 7,78 (d, J= 1,8 Hz, 1H), 7,71 (dt, J = 7,3, 1,5 Hz, 1H), 7,61 - 7,45 (m, 4H), 7,32 - 7,25 (m, 2H), 7,20 (dd, J = 10,4, 8,7 Hz, 1H), 7,15 - 7,04 (m, 1H), 5,51 (s, 1H), 4,72 - 4,49 (m, 1H), 3,62 (m, 1H), 3,58 - 3,42 (m, 1H), 2,62 (m, 1H), 2,14 (m, 1H), 2,06 - 1,85 (m, 4H), 1,12 (s, 10H), 0,97 - 0,78 (m, 1H), 0,70 - 0,54 (m, 1H), 0,45 - 0,26 (m, 2H), 0,02 - -0,17 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ - 127,28; MS (ES+) 686,5, 688,5 (M+Na); Rotaţie optică [α]D = (-) 208,15 [0,27, MeOH].
Etapa 3: (S)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (8c)
Reacţia (S)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (8b) (0,9 g, 1,355 mmoli) în etanol (20 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (1,129 mL, 13,55 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 30%) (S)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (8c) (300 mg, 0,536 mmoli, 39,5 % randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,76 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 7,96 (d, J= 7,3 Hz, 1H), 7,86 (t, J= 1,7 Hz, 1H), 7,63 (ddt, J= 7,8, 4,7, 1,3 Hz, 2H), 7,59 ― 7,51 (m, 2H), 7,46 (t, J= 7,8 Hz, 1H), 7,31 ― 7,24 (m, 2H), 7,12 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 4,66 ― 4,45 (m, 1H), 3,69 ― 3,54 (m, 1H), 3,56 ― 3,42 (m, 1H), 2,37 ― 2,28 (m, 2H), 2,27 ― 2,06 (m, 2H), 2,04 ― 1,86 (m, 4H), 1,11 ― 0,89 (m, 2H), 0,73 ― 0,54 (m, 1H), 0,40 ― 0,25 (m, 2H), -0,02 ― -0,15 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,04; MS (ES+) 582,4; 584,5 (M+Na), (ES-) 558,4 (M-1); IR (KBr) 3386, 2229, 1655, 1594, 1526, 1494, 1405cm-1; Rotaţie optică [α]D = (-)102,42[1,035, MeOH]; Analiză calculată pentru C31H31ClFN5O2; C, 66,48; H, 5,58; N, 12,50; Găsit: C, 66,23; H, 5,71; N, 12,24.
Prepararea (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (9c)
Etapa-1: Prepararea acidului (2R,4S)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4 hidroxipirolidin-2-carboxilic (9a)
Reacţia acidului (2S,4S)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (trans-D-4-hidroxiprolină, 1,0 g, 7,63 mmoli) în bicarbonat de sodiu apos (61,0 mL, 30,5 mmoli, 0,5 M) cu 4-izocianat de clorofenil (In) (1,952 mL, 15,25 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 9 din Schema 1 a dat acidul (2R,4S)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4 hidroxipirolidin-2-carboxilic (9a) (1,643 g, 5,77 mmoli, randament 76 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,43 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 7,57 - 7,48 (m, 2H), 7,31 - 7,22 (m, 2H), 5,16 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 4,34 (m, 2H), 3,60 (dd, J = 10,4, 4,6 Hz, 1H), 3,45 - 3,35 (m, 1H), 2,12 (m, 1H), 1,92 (m, 1H); MS (ES+) 285,3 (M+1), 307,2, 309,3 (M+Na), (ES-) 283,2, 285,3 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+)54,375 [0,32, MeOH].
Etapa-2: Prepararea (2R,4S)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (9b)
Reacţia acidului (2R,4S)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4 hidroxipirolidin-2-carboxilic (9a) (0,7 g, 2,459 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (4e) (1,017 g, 2,459 mmoli) în tetrahidrofuran (25 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (0,608 g, 2,459 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 100%) (2R,4S)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (9b) (1,37 g, 2,014 mmoli, 82 % randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,86 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 7,91 (dd, J = 7,5, 2,4 Hz, 1H), 7,78 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,71 (dt, J = 7,4, 1,4 Hz, 1H), 7,63 - 7,45 (m, 4H), 7,31 - 7,23 (m, 2H), 7,19 (dd, J = 10,3, 8,7 Hz, 1H), 7,14 - 7,03 (m, 1H), 5,53 (s, 1H), 5,19 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 4,66 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 4,39 (m, 1H), 3,67 (dd, J = 10,4, 4,6 Hz, 1H), 3,44 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,80 - 2,53 (m, 1H), 2,10 (m, 1H), 2,04 - 1,84 (m, 1H), 1,12 (s, 10H), 1,05 (s, 1H), 0,90 (s, 1H), 0,63 (s, 1H), 0,39 - 0,27 (m, 2H), -0,03 - -0,16 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO- d6) δ -126,81; MS (ES+) 702,5, 704,5 (M+Na); Rotaţie optică [a]D = (+) 20,71 [0,28, MeOH].
Etapa 3: (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (9c)
Reacţia (2R,4S)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidă (9b) (0,725 g, 1,066 mmoli) în etanol (20 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,888 mL, 10,66 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 30%) (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (9c) (210 mg, 0,365 mmoli, 34,2 % randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,77 (s, 1H), 8,46 (s, 1H), 7,92 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,86 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,63 (m, 2H), 7,59 - 7,50 (m, 2H), 7,45 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,32 - 7,22 (m, 2H), 7,18 - 7,08 (m, 2H), 5,17 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 4,64 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 4,39 (m, 1H), 3,67 (dd, J = 10,3, 4,6 Hz, 1H), 3,47 - 3,36 (m, 2H), 2,31 (m, 2H), 2,21 (m, 2H), 2,11 (m, 1H), 1,11 - 0,91 (m, 2H), 0,62 (m, 1H), 0,41 - 0,22 (m, 2H), -0,08 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,52; MS (ES+) 598,4, 600,4 (M+Na), (ES-) 610,4, 612,4 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 132,69 [0,82, MeOH].
Prepararea (2S,4S)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (10c)
Etapa-1: Prepararea acidului (2S,4S)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (10a)
Reacţia acidului (2S,4S)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (cis-L-4-hidroxiprolină, 1,0 g, 7,63 mmoli) în bicarbonat de sodiu apos (61,0 mL, 30,5 mmoli, 0,5 M) cu 4-izocianat de clorofenil (1n) (1,952 mL, 15,25 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 9 din Schema 1 a dat acidul (2S,4S)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (10a) (1,643 g, 5,77 mmoli, randament 76 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,33 (s, 1H), 8,41 (s, 1H), 7,64 ― 7,43 (m, 2H), 7,37 ― 7,14 (m, 2H), 5,09 (s, 1H), 4,51 ― 4,16 (m, 2H), 3,65 (dd, J = 10,3, 5,6 Hz, 1H), 3,32 (m, 1H), 2,32 (m, 1H), 1,97 ― 1,78 (m, 1H); MS (ES+) 307,2, 309,2 (M+Na), (ES-) 283,2, 285,2 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (-) 37,74 [0,265, MeOH].
Etapa-2: Prepararea (2S,4S)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1 -((R)-1,1 -dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (10b)
Reacţia acidului (2S,4S)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (10a) (0,7 g, 2,459 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (4e) (1,017 g, 2,459 mmoli) în tetrahidrofuran (25 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (0,608 g, 2,459 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 100%) (2S,4S)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (10b) (0,961 g, 1,413 mmoli, 57,5 % randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,66 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,06 (dd, J = 7,6, 2,4 Hz, 1H), 7,79 (m, 1H), 7,71 (m, 1H), 7,62 ― 7,45 (m, 4H), 7,34 ― 7,24 (m, 2H), 7,20 (dd, J = 10,5, 8,7 Hz, 1H), 7,14 ― 7,03 (m, 1H), 5,49 (s, 1H), 5,32 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 4,51 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,39 ― 4,25 (m, 1H), 3,68 (dd, J = 10,1, 5,2 Hz, 1H), 3,49 (dd, J = 9,9, 3,9 Hz, 1H), 2,75 ― 2,51 (m, 2H), 2,49 ― 2,20 (m, 1H), 1,97 ― 1,81 (m, 1H), 1,13 (s, 9H), 1,07 (m, 1H), 0,90 (m, 1H), 0,64 (m, 1H), 0,40 ― 0,26 (m, 2H), -0,06 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,68; MS (ES+) 702,5, 704,5 (M+Na), (ES-) 678,6, 680,5 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (-) 153,33 [0,27, MeOH].
Etapa 3: Prepararea (2S,4S)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (10c)
Reacţia (2S,4S)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (10b) (0,5 g, 0,735 mmoli) în etanol (20 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,613 mL, 7,35 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 30%) (2S,4S)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (10c) (50 mg, 0,087 mmoli, randament 11,81 %) ca un solid incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,62 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,05 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,86 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,63 (m, 2H), 7,59 - 7,50 (m, 2H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,34 - 7,24 (m, 2H), 7,19 - 7,04 (m, 2H), 5,30 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 4,51 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,34 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 3,69 (dd, J = 10,1, 5,3 Hz, 1H), 3,54 - 3,43 (m, 1H), 2,40 - 2,08 (m, 5H), 1,90 (m, 1H), 1,02 (m, 2H), 0,63 (m, 1H), 0,34 (m, 2H), -0,07 (s, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,13; MS (ES+) 598,4, 600,4 (M+Na); Rotaţie optică [α]D = (-) 51,85 [0,7, MeOH]; Analiză calculată pentru C31H31ClFN5O3•0,75H2O: C, 63,15; H, 5,56; N, 11,88; Găsit: C, 63,02; H, 5,89; N, 10,83.
Prepararea (2S,4S)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (11e)
Etapa-1: Prepararea clorhidratului acidului (2S,4S)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (11b)
La o soluţie agitată de acid (2S,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (11a) (Preparat conform procedurii raportate în Benzimidazole-proline derivatives as orexin receptor antagonists and their preparation; de Boss, Christoph şi colab; Din cererea internaţională PCT, 2013182972, 12 Dec 2013; 0,25 g, 1,019 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) s-a adăugat HCl 6N apos (0,680 mL, 4,08 mmoli) şi s-a agitat peste noapte la temperatura camerei. Reacţia s-a concentrat şi s-a uscat în vid pentru a se obţine clorhidrat al acidului (2S,4S)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (11b) (0,185 g, 1,019 mmoli, randament 100 %) ca un solid alb care s-a utilizat ca atare în următoarea etapă; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6/D2O) δ 4,42 (t, J = 6,7 Hz, 1H), 4,06 (m, 1H), 3,38 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 3,25 - 3,18 (m, 1H), 3,16 (s, 3H), 2,30 (dd, J = 7,3, 3,2 Hz, 2H).
Etapa-2: Prepararea acidului (2S,4S)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (11c)
Reacţia clorhidratului acidului (2S,4S)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (11b) (182 mg, 1,0 mmoli) în bicarbonat de sodiu apos (10 mL, 20 mmoli, 0,5 M) cu 4-izocianat de clorofenil (1n) (10,256 mL, 2,0 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 9 din Schema 1 a dat acidul (2S,4S)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (11c) (133 mg, 0,445 mmoli, 44,5 % randament) MS (ES+) 321,3, 323,3 (M+Na), (ES-) 297,3, 299,3 (M-1).
Etapa-3: Prepararea (2S,4S)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (11d)
Reacţia acidului (2S,4S)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (11c) (120 mg, 0,402 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (4e) (166 mg, 0,402 mmoli) în tetrahidrofuran (20 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (99 mg, 0,402 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 100%) (2S,4S)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (11d) (156 mg, 0,225 mmoli, randament 55,9 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,51 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,92 (d, J= 7,3 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,71 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 7,64 ― 7,46 (m, 4H), 7,35 ― 7,25 (m, 2H), 7,24 ― 7,14 (m, 1H), 7,10 (s, 1H), 5,48 (s, 1H), 4,54 (dd, J = 9,2, 3,9 Hz, 1H), 4,07 (m, 1H), 3,72 (dd, J = 10,6, 5,0 Hz, 1H), 3,61 (dd, J= 10,0, 2,4 Hz, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,69 ― 2,51 (m, 2H), 2,43 ― 2,24 (m, 1H), 2,23 ― 2,06 (m, 1H), 1,12 (s, 10H), 0,99 ― 0,79 (m, 1H), 0,63 (s, 1H), 0,42 ― 0,27 (m, 2H), 0,06 ― -0,16 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,19; MS (ES+) 716,6, 718,5 (M+Na).
Etapa 4: Prepararea (2S,4S)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (11e)
Reacţia (2S,4S)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (11d) (0,143 g, 0,206 mmoli) în etanol (20 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,172 mL, 2,060 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 30%) (2S,4S)-N2-(5-((-)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (11e) (80 mg, 0,136 mmoli, 65,8 % randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,45 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,90 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,86 (m, 1H), 7,63 (m, 2H), 7,58 - 7,52 (m, 2H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,32 - 7,25 (m, 2H), 7,14 (s, 1H), 7,11 (s, 1H), 4,53 (dd, J = 9,1, 3,9 Hz, 1H), 4,07 (m, 1H), 3,73 (dd, J = 10,6, 5,1 Hz, 1H), 3,61 (dd, J = 10,4, 3,3 Hz, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,47 - 1,98 (m, 6H), 1,11 - 0,92 (m, 2H), 0,63 (m, 1H), 0,33 (m, 2H), -0,07 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,86; MS (ES+) 612,4, 614,4 (M+Na); IR (KBr) 2229 cm-1; Rotaţie optică [α]D = (-)56,57 [0,495, MeOH]
Prepararea 2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)pirolidin-1-carboxilatului de (R)-benzil (12b)
Etapa-1: Prepararea acidului (R)-1-(benziloxicarbonil)pirolidin-2-carboxilic (12a)
La o soluţie agitată de D-Prolină (1,2 g, 10,42 mmoli) în soluţie apoasă de NaOH 2N (20,85 mL, 41,7 mmoli) s-a adăugat la 0 °C cloroformiat de benzil (1,488 mL, 10,42 mmoli) şi s-a lăsat să se încălzească peste noapte la temperatura camerei. Reacţia s-a spălat cu MTBE (2 × 25 mL), s-a acidulat cu HCl conc. şi s-a extras cu acetat de etil (2 × 200 mL). Straturile de acetat de etil s-au combinat s-au spălat cu apă (50 mL), saramură (25 mL) s-au uscat şi s-au concentrat în vid pentru a se obţine acidul (R)-1-(benziloxicarbonil)pirolidin-2-carboxilic (12a) (2,41 g, 9,67 mmoli, randament 93 %) care s-a utilizat ca atare în următoarea etapă; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,66 (s, 1H), 7,42 - 7,25 (m, 5H), 5,14 - 4,97 (m, 2H), 4,20 (ddd, J = 22,7, 8,8, 3,5 Hz, 1H), 3,50 - 3,25 (m, 2H), 2,32 - 2,08 (m, 1H), 1,97 - 1,75 (m, 3H); MS (ES+) 250,2 (M+1), 272,2 (M+Na), (ES-) 248,2 (M-1), 284,2 (M+Cl), 497,4 (2M-1).
Etapa-2: Prepararea 2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)pirolidin-1-carboxilatului de (R)-benzil (12b)
Reacţia acidului (R)-1-(benziloxicarbonil)pirolidin-2-carboxilic (12a) (1 g, 4,01 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (4e) (1,659 g, 4,01 mmoli) în tetrahidrofuran (50 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (0,992 g, 4,01 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 100%) 2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)pirolidin-1-carboxilat de (R)-benzil (12b) (2,4 g, 3,72 mmoli, 93 % randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,86 (d, J= 11,1 Hz, 1H), 7,92 (t, J= 9,0 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,65 ― 7,56 (m, 1H), 7,51 (m, 1H), 7,37 (m, 2H), 7,29 ― 7,06 (m, 5H), 5,52 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 5,14 ― 4,93 (m, 2H), 4,62 ―4,38 (m, 1H), 3,58 ― 3,33 (m, 2H), 2,72 ― 2,57 (m, 1H), 2,33 ― 2,08 (m, 1H), 1,97 ― 1,73 (m, 4H), 1,12 (2s, 9H patru rotameri), 1,11 ― 1,00 (m, 1H), 0,86 (m, 1H), 0,62 (m, 1H), 0,34 (m, 2H), 0,01 ― -0,18 (m, 2H); F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,74; MS (ES+) 645,6 (M+1), 667,6 (M+Na), (ES-) 643,6 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (-) 21,18 [0,255, MeOH].
Prepararea (R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (13e)
Etapa 1: Prepararea 5-cloropiridin-2-ilcarbamatului de fenil (13b)
Într-o baie de gheaţă-apă s-a răcit o soluţie de 2-amino-5-cloropiridină (13a) (5 g, 38,9 mmoli) în diclorometan (100 mL) s-a adăugat piridină (4,72 mL, 58,3 mmoli) şi cloroformiat de fenil (4,88 mL, 38,9 mmoli). Amestecul rezultat s-a agitat în baia de gheaţă-apă timp de 2 h, s-a diluat cu apă (100 mL) şi diclorometan (50 mL). Solidul obţinut s-a colectat prin filtrare s-a uscat la 50°C sub vid pentru a da 5-cloropiridin-2-il carbamat de fenil (13b) (9,519 g, 38,3 mmoli, randament 98 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,97 (s, 1H), 8,38 (dd, J = 2,6, 0,8 Hz, 1H), 7,93 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,84 (dd, J = 8,9, 0,8 Hz, 1H), 7,51 - 7,37 (m, 2H), 7,36 - 7,17 (m, 3H).
Etapa 2: Prepararea (R)-N-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-2-carboxamidei (13c)
La o suspensie de paladiu pe cărbune 10% (0,165 g, 0,155 mmoli) în etanol (75 mL) s-a adăugat o soluţie de 2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)pirolidin-1-carboxilat de (R)-benzil (12b) (1 g, 1,551 mmoli) în etanol şi s-a hidrogenat într-un aparat parr cu scuturare la 50 psi timp de 5 h. Reacţia s-a filtrat printr-un mic dop de celite şi s-a concentrat pentru a da (R)-N-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-2-carboxamida (13c) (815 mg, 1,596 mmoli, randament 103 %) care s-a utilizat în etapa următoare fără altă purificare; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,13 (s, 1H), 8,29 (dd, J = 7,6, 2,4 Hz, 1H), 7,79 (t, J = 1,8 Hz, 1H), 7,72 (dt, J = 7,4, 1,4 Hz, 1H), 7,60 (dt, J = 8,3, 1,5 Hz, 1H), 7,51 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,22 (m, 1H), 7,06 (m, 1H), 5,46 (s, 1H), 3,74 (dd, J = 9,1, 5,2 Hz, 1H), 3,43 (m, 2H), 2,87 (m, 2H), 2,71 ― 2,53 (m, 2H), 2,05 (m, 1H), 1,79 (dq, J = 12,4, 6,5 Hz, 1H), 1,72 ― 1,56 (m, 2H), 1,14 (s, 9H), 0,99 ― 0,82 (m, 1H), 0,74 ― 0,54 (m, 1H), 0,35 (m, 2H), 0,04 ― -0,15 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -131,82 ; MS (ES+) 511,4 (M+1), 533,5 (M+Na), (ES-) 509,4 (M-1).
Etapa 3: Prepararea (R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (13d)
La o soluţie de (R)-N-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-2-carboxamidă (13c) (0,763 g, 1,494 mmoli) în tetrahidrofuran (50 mL) s-a adăugat 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (0,446 g, 1,793 mmoli) şi N-etil-N-izopropilpropan-2-amină (1,041 mL, 5,98 mmoli). Amestecul de reacţie s-a încălzit la reflux timp de 16 h. Reacţia s-a răcit la temperatura camerei, s-a diluat cu acetat de etil (100 mL), s-a spălat cu apă (2 × 50 mL), saramură (50 mL), s-a uscat şi s-a concentrat în vid. Reziduul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă pentru a se obţine (R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (13d) (773 mg, 1,162 mmoli, randament 78 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,82 (s, 1H), 9,07 (s, 1H), 8,28 (dd, J = 2,7, 0,8 Hz, 1H), 7,96 ― 7,86 (m, 2H), 7,83 ― 7,76 (m, 2H), 7,71 (dt, J= 7,4, 1,5 Hz, 1H), 7,58 (d, J= 8,0 Hz, 1H), 7,50 (m, 1H), 7,27 ― 7,05 (m, 2H), 5,52 (s, 1H), 4,62 (d, J= 7,7 Hz, 1H), 3,78 ― 3,62 (m, 1H), 3,62 ― 3,46 (m, 1H), 2,73 ― 2,40 (m, 2H), 2,26 ― 2,10 (m, 1H), 1,93 (m, 3H), 1,12 (s, 10H), 0,85 (m, 1H), 0,72 ― 0,54 (m, 1H), 0,33 (m, 2H), 0,00 ― -0,16 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,74.
Etapa-4: Prepararea (R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (13e)
Reacţia (R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (13d)
(554 mg, 0,833 mmoli) în etanol (100 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,694 mL, 8,33 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu un amestec 9:1 de acetat de etil şi metanol în hexani 0 la 60%) (R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)pirolidin-1,2-dicarboxamida (13e) (219 mg, 0,390 mmoli, 46,9 % randament) ca un solid incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,76 (s, 1H), 9,05 (s, 1H), 8,28 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,96 ― 7,88 (m, 2H), 7,86 (m, 1H), 7,79 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,63 (ddt, J = 7,6, 5,9, 1,3 Hz, 2H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 4,61 (d, J= 7,7 Hz, 1H), 3,66 (m, 1H), 3,56 (m, 1H), 3,33 ― 3,27 (m, 1H), 2,40 ― 2,06 (m, 4H), 1,94 (m, 3H), 1,13 ― 0,85 (m, 2H), 0,62 (m, 1H), 0,41 ― 0,26 (m, 2H), -0,03 ― -0,17 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,82 ; MS(ES+) 561,4, 562,4 (M+1), 583,4, 585,5 (M+Na); IR (KBr) 2229 cm-1; Rotaţie optică [α]D = (+) 160,49 [0,82, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-(1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (14h)
Etapa 1: Prepararea acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (14b)
La o soluţie de acid (2R,4R)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (14a) (10 g, 76 mmoli) în THF:H2O (125 mL, 2:1) s-a adăugat hidroxid de sodiu apos 2,5 M (42,1 mL, 105 mmoli) urmat de o soluţie de dicarbonat de di-terţ-butil (22,80 g, 104 mmoli) în THF: H2O (125 mL, 2:1) şi s-a agitat la temperatura camerei timp de 32 h. Amestecul s-a concentrat în vid pentru a se îndepărta THF-ul şi s-a adăugat stratul apos acidulat cu soluţie apoasă 10% de hidrogen sulfat de potasiu (150 mL). Amestecul rezultat s-a extras cu acetat de etil, s-a spălat cu apă, saramură, s-a uscat, s-a filtrat, şi s-a evaporat la sec. Semisolidul rezultat s-a cristalizat din acetat de etil cald pentru a se obţine acid (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (14b) (13,58 g, 58,7 mmoli, randament 77 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,41 (s, 1H, D2O schimbabil), 4,95 (s, 1H, D2O schimbabil), 4,20 (q, J = 5,1 Hz, 1H), 4,14 ― 4,02 (m, 1H), 3,48 (dt, J = 10,8, 5,4 Hz, 1H), 3,09 (ddd, J = 10,6, 6,2, 4,2 Hz, 1H), 2,41 ― 2,20 (m, 1H), 1,81 (dt, J = 12,8, 5,0 Hz, 1H), 1,37 (d, J = 15,9 Hz, 9H); 1H RMN (300 MHz, MeOH-d4) δ 4,34 (ddd, J = 5,8, 4,0, 1,5 Hz, 1H), 4,30 ― 4,22 (m, 1H), 3,61 (dd, J = 11,1, 5,6 Hz, 1H), 3,38 ― 3,33 (m, 1H), 2,54 ― 2,32 (m, 1H), 2,15 ― 1,97 (m, 1H), 1,45 (d, J = 12,0 Hz, 9H); MS (ES+) 254,3 (M+Na); MS (ES-) 230,2 (M-1), 461,5 (2M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 52,96 [1,065, MeOH].
Etapa 2: Prepararea 2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (14c)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (14b) (0,752 g, 3,25 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (4e) (1,345 g, 3,25 mmoli) în tetrahidrofuran (50 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (0,804 g, 3,25 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 100%) 2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido) propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-1-carboxilat de (2R,4R)-terţ-butil (14c) (0,84 g, 1,340 mmoli, 41,2 % randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,79 (s, 1H), 7,78 (d, J= 1,9 Hz, 1H), 7,75 ― 7,67 (m, 1H), 7,62 (m, 1H), 7,51 (m, 1H), 7,20 (m, 1H), 6,90 (m, 1H), 6,72 (m, 1H), 6,48 (m, 1H), 5,28 (s, 1H), 5,11 (s, 1H), 4,38 ― 4,14 (m, 1H), 3,47 (m, 1H), 3,31 ― 3,19 (m, 1H), 2,76 ― 2,23 (m, 3H), 1,99 (m, 1H), 1,12 (s, 18H), 1,00 ― 0,79 (m, 2H), 0,76 ― 0,56 (m, 1H), 0,35 (m, 2H), -0,00 ― -0,16 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,33; MS (ES+) 649,5 (M+Na), (ES-) 625,5 (M-1).
Etapa 3: Prepararea 4-acetoxi-2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)pirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (14d)
La o soluţie de 2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-1-carboxilat de (2R,4R)-terţ-butil (14c) (0,8 g, 1,276 mmoli) în diclorometan (30 mL) s-a adăugat DIPEA (0,669 mL, 3,83 mmoli), anhidridă acetică (0,145 mL, 1,532 mmoli), DMAP (7,80 mg, 0,064 mmoli) şi s-a agitat peste noapte la temperatura camerei. Reacţia s-a diluat cu diclorometan (100 mL), s-a spălat cu apă (2 × 25 mL), saramură (25 mL), s-a uscat şi s-a concentrat. Reziduul brut obţinut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 12 g, eluând cu acetat de etil în hexani 0 la 50%) pentru a se obţine 4-acetoxi-2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)pirolidin-1-carboxilat de (2R,4R)-terţ-butil (14d) (324 mg, 0,484 mmoli, 38,0 % randament) ca un semi solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,63 (s, 1H), 7,78 (m, 1H), 7,76 - 7,55 (m, 3H), 7,51 (m, 1H), 7,21 (m, 2H), 5,49 (s, 1H), 5,09 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 4,42 (2 seturi de dd, J = 32,7, 7,2 Hz, 1H patru rotameri), 3,76 - 3,59 (m, 1H), 3,49 - 3,35 (m, 1H), 2,75 - 2,38 (m, 2H), 2,09 - 1,95 (m, 1H), 1,87 (2S, 3H patru rotameri), 1,36 (2s, 9H patru rotameri), 1,12 (s, 10H), 1,08 - 1,00 (m, 1H), 1,00 - 0,80 (m, 1H), 0,72 - 0,51 (m, 1H), 0,44 - 0,24 (m, 2H), - 0,06 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO- d6) δ -125,32; MS (ES+) 691,6 (M+Na), (ES-) 667,6 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (-) 48,0 [0,125, MeOH].
Etapa-4: Prepararea acetatului de (3R,5R)-5-(5-(1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenilcarbamoil)pirolidin-3-il (14e) şi (2R,4R)-N-(5-(1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidei (14f)
Reacţia 4-acetoxi-2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)pirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (14d) (0,32 g, 0,478 mmoli) în etanol (10 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,399 mL, 4,78 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 12 g, eluând cu CMA-80 în cloroform 0 la 60%) a dat
1. acetat de (3R,5R)-5-(5-(1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenilcarbamoil)pirolidin-3-il (14e) (90 mg, 0,194 mmoli, randament 40,5 %); 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,04 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 8,24 - 8,11 (m, 1H), 7,84 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 7,64 (tt, J = 7,6, 1,3 Hz, 2H), 7,47 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,27 - 7,06 (m, 2H), 5,07 (m, 1H), 3,81 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 3,46 (m, 1H), 3,18 (m, 1H), 2,91 (m, 1H), 2,26 (m, 5H), 2,06 (m, 1H), 1,75 (s, 3H), 1,03 (m, 2H), 0,64 (m, 1H), 0,42 - 0,28 (m, 2H), -0,07 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -132,66. MS(ES+) 465,4 (M+1), 487,4 (M+Na), (ES-) 463,4 (M-1), 499,5 (M+Cl).
2. (2R,4R)-N-(5-(1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidă (14f) (100 mg, 0,237 mmoli, randament 49,5 %); 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,19 (s, 1H), 8,42 - 8,22 (m, 1H), 7,86 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,74 - 7,59 (m, 2H), 7,47 (m, 1H), 7,25 - 6,94 (m, 2H), 4,67 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 4,16 (m, 1H), 3,84 - 3,60 (m, 1H), 3,00 (m, 1H), 2,72 (dd, J = 10,6, 3,0 Hz, 1H), 2,43 - 2,03 (m, 6H), 1,83 (dt, J = 13,0, 3,9 Hz, 1H), 1,14 - 0,88 (m, 2H), 0,76 - 0,51 (m, 1H), 0,46 - 0,25 (m, 2H), -0,03 - -0,10 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ - 133,44; MS (ES+) 423,4 (M+1), 445,4 (M+Na), (ES-) 457,4 (M+Cl).
Etapa 5: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-(1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (14h)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-(1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidei (14f) (92 mg, 0,218 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (54,1 mg, 0,218 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 3 din Schema 13 după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 12 g, eluând cu 0-100% CMA-80 în cloroform) a dat (2R,4R)-N2-(5-(1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (14h) (34 mg, 0,059 mmoli, randament 27,1 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,67 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,31 - 8,26 (m, 1H), 8,01 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,94 - 7,83 (m, 2H), 7,79 (dd, J = 9,0, 2,7 Hz, 1H), 7,63 (m, 2H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,13 (dd, J = 7,4, 2,0 Hz, 2H), 5,31 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 4,54 (m, 1H), 4,31 (q, J = 4,9 Hz, 1H), 3,73 (m, 1H), 3,51 (dd, J = 10,5, 4,2 Hz, 1H), 2,47 - 2,28 (m, 3H), 2,28 - 2,10 (m, 2H), 1,89 (m, 1H), 1,01 (m, 2H), 0,63 (m, 1H), 0,34 (m, 2H), -0,03 - -0,17 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO- d6) δ -128,70; MS (ES+) 577,5, 579,5 (M+1); IR (KBr) 2229 cm-1.
Prepararea acetatului de (3R,5R)-5-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenilcarbamoil)-1-(5-cloropiridin-2-ilcarbamoil)pirolidin-3-il (14g)
Reacţia acetatului de (3R,5R)-5-(5-(1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenilcarbamoil)pirolidin-3-il (14e) (81 mg, 0,174 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (43,4 mg, 0,174 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 3 din Schema 13 după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 12 g, eluând cu 0-100% CMA-80 în cloroform) a dat acetat de (3R,5R)-5-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenilcarbamoil)-1-(5-cloropiridin-2-ilcarbamoil)pirolidin-3-il (14g) (24 mg, 0,039 mmoli, randament 22,23 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,64 (s, 1H), 9,18 (s, 1H), 8,30 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,91 (dd, J = 9,0, 0,8 Hz, 1H), 7,86 - 7,79 (m, 2H), 7,75 (dd, J = 7,6, 2,2 Hz, 1H), 7,63 (m, 2H), 7,46 (m, 1H), 7,23 - 7,10 (m, 2H), 5,19 (q, J = 4,6, 3,7 Hz, 1H), 4,72 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 3,88 (dd, J = 11,7, 5,2 Hz, 1H), 3,75 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 2,48 - 2,40 (m, 1H), 2,32 (m, 2H), 2,22 (m, 3H), 1,87 (s, 3H), 1,12 - 0,91 (m, 2H), 0,72 - 0,50 (m, 1H), 0,42 - 0,28 (m, 2H), - 0,03 - -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,76 ; MS (ES-) 617,4 (M-1), 653,3, 655,3 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 109,1 [0,165, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-cianofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (15f)
Etapa 1: Prepararea acidului (2R,4R)-1-(benziloxicarbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (15b)
La o suspensie de hidrură de sodiu (60% dispersie în ulei, 2,262 g, 56,5 mmoli) în tetrahidrofuran (30 mL) la -10°C s-a adăugat o soluţie of acid (2R,4R)-1-(benziloxicarbonil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (15a) (2,5 g, 9,42 mmoli) în THF (60 mL). Reacţia s-a agitat timp de 30 min, urmată de adiţia de sulfat de dimetil (0,901 mL, 9,42 mmoli) şi s-a agitat la temperatura camerei timp de 16 h. Amestecul de reacţie s-a stins cu clorură de amoniu apoasă saturată şi s-a concentrat în vid pentru a se îndepărta THF-ul. Amestecul de reacţie s-a alcalinizat, s-a spălat cu eter, s-a acidulat şi s-a extras cu acetat de etil (2 x 100 mL). Stratul combinat de acetat de etil s-a spălat cu apă (50 mL), saramură (50 mL), s-a uscat, s-a filtrat şi s-a evaporat în vid pentru a se obţine acid (2R,4R)-1-(benziloxicarbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (15b) (2,138 g, 7,66 mmoli, randament 81 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,56 (s, 1H), 7,55 - 7,12 (m, 5H), 5,23 - 4,88 (m, 2H), 4,29 (ddd, J = 21,9, 9,4, 3,0 Hz, 1H), 3,95 (qt, J = 5,3, 2,7 Hz, 1H), 3,61 (ddd, J = 15,6, 11,5, 5,4 Hz, 1H), 3,31 (m, 1H), 3,17 (2s, 3H, patru rotameri), 2,42 - 2,24 (m, 1H), 2,17 - 2,01 (m, 1H); MS (ES-) 278,2 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 33,81 [0,775, MeOH].
Etapa 2: Prepararea 2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-benzil (15c)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(benziloxicarbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (15b) (1,52 g, 5,44 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (4e) (2,251 g, 5,44 mmoli) în tetrahidrofuran (75 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (1,346 g, 5,44 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 100%) 2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilat de (2R,4R)-benzil (15c) (3,15 g, 4,67 mmoli, randament 86 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,54 (2s, 1H, patru rotameri), 7,86 (m, 1H), 7,79 (m, 1H), 7,71 (m, 1H), 7,65 7,56 (m, 1H), 7,52 (m, 1H), 7,38 (m, 2H), 7,19 (m, 5H), 5,50 (2s, 1H, patru rotameri), 5,18 ― 4,93 (m, 2H), 4,54 ― 4,33 (m, 1H), 4,05 ― 3,93 (m, 2H), 3,75 ― 3,59 (m, 1H), 3,49 ― 3,39 (m, 1H), 3,19 (2s, 3H, patru rotameri), 2,51 (m, 2H), 2,12 ― 2,00 (m, 1H), 1,17 ― 1,01 (m, 10H), 0,98 ― 0,81 (m, 1H), 0,71 ― 0,55 (m, 1H), 0,42 ― 0,25 (m, 2H), 0,01 ― -0,13 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,94, -127,36; MS (ES+) 675,5 (M+1), 697,5, 698,5 (M+Na), (ES-) 673,5 (M-1), 709,4, 710,4 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 58,2 [0,165, MeOH].
Etapa 3: Prepararea (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (15d)
Debenzilarea prin hidrogenare a 2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-benzil (15c) (3,05 g, 4,52 mmoli) în etanol (100 mL), utilizând paladiu pe cărbune 10% (0,265 g, 0,249 mmoli) drept catalizator conform procedurii raportate în etapa 2 din Schema 13 a dat (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamida (15d) (2,4 g, 4,44 mmoli, randament 98 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,09 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 8,29 (dd, J = 7,7, 2,4 Hz, 1H), 7,80 (t, J= 1,8 Hz, 1H), 7,71 (dt, J = 7,4, 1,3 Hz, 1H), 7,62 (dt, J = 8,3, 1,5 Hz, 1H), 7,51 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,21 (dd, J = 10,8, 8,7 Hz, 1H), 7,10 ― 7,01 (m, 1H), 5,47 (s, 1H), 3,95 ― 3,81 (m, 1H), 3,74 (dd, J= 8,1, 5,1 Hz, 1H), 3,11 (s, 3H), 3,08 ― 2,97 (m, 1H), 2,89 (dd, J = 11,1, 2,4 Hz, 1H), 2,75 ― 2,56 (m, 2H), 2,13 ― 2,01 (m, 2H), 1,14 (s, 10H), 1,12 ― 1,04 (m, 1H), 0,96 ― 0,80 (m, 1H), 0,72 ― 0,53 (m, 1H), 0,43 ― 0,27 (m, 2H), 0,00 ― -0,15 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -132,45; MS (ES+) 541,5 (M+1), (ES-) 575,4 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 67,1 [0,155, MeOH].
Etapa-4: Prepararea (2R,4R)-N1-(4-cianofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (15e)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (15d) (0,5 g, 0,925 mmoli) în tetrahidrofuran (20 mL), 4-izocianatobenzonitril (0,267 g, 1,849 mmoli) utilizând DIPEA (0,646 mL, 3,70 mmoli) ca bază prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 9 din Schema 1 a dat (2R,4R)-N1-(4-cianofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (15e) (514 mg, 0,751 mmoli, 81 % randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,51 (d, J= 1,3 Hz, 1H), 8,85 (s, 1H), 7,90 ― 7,84 (m, 1H), 7,78 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 7,77 ― 7,66 (m, 5H), 7,62 ― 7,57 (m, 1H), 7,50 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,19 (dd, J = 10,3, 8,7 Hz, 1H), 7,14 ― 7,06 (m, 1H), 5,50 (s, 1H), 4,57 (dd, J= 9,1, 4,1 Hz, 1H), 4,11 ― 4,06 (m, 1H), 3,76 (dd, J= 10,6, 5,2 Hz, 1H), 3,65 (dd, J = 10,2, 2,9 Hz, 2H), 3,23 (s, 3H), 2,76 ― 2,53 (m, 1H), 2,48 ― 2,31 (m, 1H), 2,18 ― 2,05 (m, 1H), 1,13 (s, 9H), 1,11 ― 1,01 (m, 1H), 0,98 ― 0,80 (m, 1H), 0,72 ― 0,55 (m, 1H), 0,41 ― 0,26 (m, 2H), -0,02 ― -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,51; MS: (ES+) 685,5 (M+1), 707,5, 709,7 (M+Na), (ES-) 719,5, 721,1 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 4,21 [0,19, MeOH].
Etapa 5: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-cianofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (15f)
Reacţia (2R,4R)-N1-(4-cianofenil)-N2-(5-((R)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (15e) (445 mg, 0,650 mmoli) în etanol (20 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,542 mL, 6,50 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 12 g, eluând cu CMA-80 în cloroform 0 la 60%) a dat (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-cianofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (15f) (300 mg, 0,517 mmoli, randament 80 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,46 (s, 1H), 8,83 (s, 1H), 7,89 ― 7,81 (m, 2H), 7,78 ― 7,60 (m, 6H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,18 ― 7,07 (m, 2H), 4,56 (dd, J = 9,1, 4,1 Hz, 1H), 4,17 ― 3,98 (m, 1H), 3,77 (dd, J = 10,5, 5,2 Hz, 1H), 3,63 (dd, J= 10,4, 3,4 Hz, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,41 ― 2,14 (m, 5H), 2,14 ― 2,00 (m, 1H), 1,09 ― 0,92 (m, 2H), 0,76 ― 0,49 (m, 1H), 0,41 ― 0,27 (m, 2H), -0,04 ― - 0,19 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,39; MS (ES+) 603,5, 604,5 (M+Na), (ES-) 615,6, 617,4 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 108,68 [0,265, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-N1-(4-metoxifenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (16b)
Etapa 1: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-N1-(4-metoxifenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (16a)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (15d) (0,5 g, 0,925 mmoli) în tetrahidrofuran (20 mL), fenil 1-izocianato-4-metoxibenzenului (0,240 mL, 1,849 mmoli), DIPEA (0,646 mL, 3,70 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 9 din Schema 1 a dat (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-N1-(4-metoxifenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (16a) (552 mg, 0,800 mmoli, randament 87 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,50 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,00 (dd, J = 7,7, 2,4 Hz, 1H), 7,79 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,71 (m, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,50 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,43 ― 7,34 (m, 2H), 7,19 (m, 1H), 6,87 ― 6,79 (m, 2H), 5,50 (s, 1H), 4,52 (dd, J = 9,2, 3,7 Hz, 1H), 4,07 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,65 (m, 2H), 3,22 (s, 3H), 2,75 ― 2,48 (m, 2H), 2,32 (m, 1H), 2,23 ― 2,11 (m, 1H), 1,13 (s, 10H), 1,00 ― 0,79 (m, 1H), 0,43 ― 0,25 (m, 2H), 0,63 (m, 1H), 0,43-0,25 (m, 2H), -0,01 ― -0,15 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,51; MS (ES+) 690,5 (M+1), 712,5, 713,5 (M+Na), (ES-) 724,4, 726,6 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 17,78 [0,36, MeOH].
Etapa 2: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-N1-(4-metoxifenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (16b)
Reacţia (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-N1-(4-metoxifenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (16a) (485 mg, 0,703 mmoli) în etanol (20 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,586 mL, 7,03 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu CMA-80 în cloroform 0 la 100%) a dat (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-N1-(4-metoxifenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (16b) (19 mg, 0,032 mmoli, randament 4,61 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,44 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,97 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,86 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,71 ― 7,57 (m, 2H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,41 ― 7,32 (m, 2H), 7,13 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 6,88 ― 6,75 (m, 2H), 4,51 (dd, J = 9,3, 3,7 Hz, 1H), 4,11 ― 3,99 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,67 (m, 1H), 3,64 ― 3,56 (m, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,38 ― 2,11 (m, 6H), 1,11 ― 0,94 (m, 2H), 0,73 ― 0,55 (m, 1H), 0,40 ― 0,24 (m, 2H), -0,01 ― -0,21 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,61; MS (ES+) 586,5 (M+1), 608,5, 610,6 (M+Na), (ES-) 620,5, 622,5 (M+Cl); IR (KBr) 2228 cm-1; Analiză calculată pentru C33H36FN5O4,0,5H2O; C, 66,65; H, 6,27; N, 11,78; Găsit; C, 66,83; H, 6,19; N, 11,71; Rotaţie optică [α]D = (+) 95,48 [0,155, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-N1-(4-clorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (17b)
Etapa 1: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-N1-(4-clorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (17a)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (15d) (0,5 g, 0,925 mmoli) în tetrahidrofuran (20 mL), 4-izocianatului de clorofenil (1n) (0,237 mL, 1,849 mmoli), DIPEA (0,646 mL, 3,70 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 9 din Schema 1 a dat (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-N1-(4-clorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (17a) (555 mg, 0,799 mmoli, randament 86 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,52 ― 9,44 (m, 1H), 8,53 (s, 1H), 7,96 ― 7,88 (m, 1H), 7,79 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,71 (dt, J = 7,5, 1,3 Hz, 1H), 7,63 ― 7,46 (m, 4H), 7,33 ― 7,25 (m, 2H), 7,19 (dd, J = 10,4, 8,8 Hz, 1H), 7,11 (m, 1H), 5,50 (s, 1H), 4,54 (m, 1H), 4,10 ― 4,05 (m, 1H), 3,72 (m, 1H), 3,68 ― 3,57 (m, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,63 (m, 2H), 2,42 ― 2,26 (m, 1H), 2,12 (m, 1H), 1,13 (s, 9H), 1,12 ― 1,01 (m, 1H), 0,98 ― 0,76 (m, 1H), 0,72 ― 0,56 (m, 1H), 0,43 ― 0,22 (m, 2H), -0,02 ― -0,16 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO- d6) δ -128,06; MS: (ES+) 694,5 (M+H), 716,5, 718,5 (M+Na), (ES-) 728,5, 730,4 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 17,31 [0,335, MeOH].
Etapa 2: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-N1-(4-clorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (17b)
Reacţia (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (17a) (478 mg, 0,689 mmoli) în etanol (20 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,574 mL, 6,89 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu CMA-80 în cloroform 0 la 100%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (17b) (52 mg, 8,3%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,67 (s, 1H), 9,21 (s, 3H), 8,56 (s, 1H), 7,89 (m, 2H), 7,84 (m, 1H), 7,70 ― 7,58 (m, 2H), 7,58 ― 7,52 (m, 2H), 7,36 (m, 1H), 7,32 ― 7,26 (m, 2H), 7,09 (m, 1H), 4,56 (dd, J = 9,2, 4,0 Hz, 1H), 4,13 ― 4,04 (m, 1H), 3,74 (dd, J = 10,5, 5,2 Hz, 1H), 3,62 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,60 ― 2,53 (m, 1H), 2,47 ― 2,32 (m, 1H), 2,08 (m, 1H), 1,15 ― 0,99 (m, 2H), 0,78 ― 0,57 (m, 1H), 0,45 ― 0,17 (m, 2H), 0,17 ― -0,10 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -125,67; MS (ES+) 612,5, 614,4 (M+Na), (ES-) 624,4, (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 71,88 [0,32, MeOH]; Analiză calculată pentru: C32H33ClFN5O3.HCl,2H2O; C, 58,01; H, 5,78; N, 10,57; Găsit: C, 58,21; H, 5,41; N, 10,24; IR (KBr) 2233 cm-1.
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (18b)
Etapa 1: Prepararea ((2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (18a)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (15d) (0,475 g, 0,879 mmoli) în tetrahidrofuran (20 mL), 5-cloropiridin-2-ilcarbamatului de fenil (13b) (0,437 g, 1,757 mmoli), DIPEA (0,614 mL, 3,51 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat ((2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (18a) (484 mg, 0,696 mmoli, randament 79 %) ca o pulbere albă; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,49 (s, 1H), 9,17 (s, 1H), 8,30 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,93 ― 7,86 (m, 2H), 7,84 ― 7,77 (m, 2H), 7,71 (dt, J = 7,5, 1,3 Hz, 1H), 7,59 (dt, J = 8,2, 1,6 Hz, 1H), 7,50 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,19 (dd, J = 10,4, 8,7 Hz, 1H), 7,14 ― 7,06 (m, 1H), 5,50 (s, 1H), 4,59 (dd, J = 9,1, 3,9 Hz, 1H), 4,04 (m, 1H), 3,81 ― 3,63 (m, 2H), 3,21 (s, 3H), 2,75 ― 2,52 (m, 2H), 2,48 ― 2,29 (m, 1H), 2,11 (m, 1H), 1,13 (s, 10H), 0,97 ― 0,80 (m, 1H), 0,72 ― 0,49 (m, 1H), 0,40 ― 0,27 (m, 2H), -0,01 ― - 0,15 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,91; MS (ES+) 695,5 (M+1), 717,5, 719,5 (M+Na), (ES-) 729,5, 731,5 (M+Cl); IR (KBr) 2230 cm-1; Rotaţie optică [α]D = (-) 19,10 [0,335, MeOH]; CHN calculat pentru: C35H40ClFN6O4S. 0,5H2O; C, 59,69; H, 5,87; N, 11,93; Găsit: C, 59,74; H, 5,75; N, 11,79.
Etapa 2: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (18b)
Reacţia ((2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (18a) (406 mg, 0,584 mmoli) în etanol (20 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,487 mL, 5,84 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu CMA-80 în cloroform 0 la 100%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (18b) (60 mg, 10%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,45 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,30 (dd, J = 2,6, 0,8 Hz, 1H), 7,93 ― 7,84 (m, 3H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,7 Hz, 1H), 7,63 (ddt, J = 7,5, 5,7, 1,3 Hz, 2H), 7,46 (t, J= 7,8 Hz, 1H), 7,15 (d, J= 1,3 Hz, 1H), 7,13 (d, J= 2,9 Hz, 1H), 4,57 (dd, J = 9,2, 3,9 Hz, 1H), 4,10 ― 3,97 (m, 1H), 3,82 ― 3,62 (m, 2H), 3,21 (s, 3H), 2,41 ― 2,18 (m, 5H), 2,17 ― 2,00 (m, 1H), 1,08 ― 0,94 (m, 2H), 0,72 ― 0,53 (m, 1H), 0,42 ― 0,25 (m, 2H), -0,03 ― -0,16 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,61; MS (ES+) 591,5, 593,4 (M+1), (ES-) 625,3, 627,6 (M+Cl); Analiză calculată pentru: C31H32ClFN6O3,0,25H2O: C, 62,52; H, 5,50; N, 14,11; Găsit: C, 62,53; H, 5,52; N, 13,89; Rotaţie optică [α]D = (+) 95,38 [0,26, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-4-amino-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (19c)
Etapa 1: Prepararea (2R,4R)-4-azido-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (19a)
La o soluţie de (2R,4S)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidă (9b) (0,502 g, 0,738 mmoli) şi trifenilfosfină (0,581 g, 2,214 mmoli) în tetrahidrofuran (15 mL) la 0 °C s-a adăugat un amestec de fosforazidat de difenil (0,477 mL, 2,214 mmoli) şi azodicarboxilat de diizopropil (0,430 mL, 2,214 mmoli) în tetrahidrofuran (5 mL) pe o perioadă de 30 min. Reacţia s-a lăsat la temperatura camerei s-a agitat timp de 24 h, s-a diluat cu acetat de etil (150 mL), s-a spălat cu apă (2 x 25 mL), saramură (25 mL), s-a uscat, s-a filtrat şi s-a concentrat în vid. Reziduul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 40 g eluând cu (9:1) acetat de etil şi metanol în hexani 0 la 100%) pentru a se obţine (2R,4R)-4-azido-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (19a) (88 mg, 0,125 mmoli, 16,91 % randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,97 (s, 1H), 8,78 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,99 (m, 1H), 7,91 (m, 1H), 7,76 (m, 4H), 7,51 (m, 2H), 7,39 (m, 1H), 7,38 ― 726 (m, 1H), 5,71 (s, 1H), 4,79 (m, 2H), 4,35 ― 4,15 (m, 1H), 4,03 (m, 1H), 3,76 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 2,37 ― 2,23 (m, 1H), 1,40 ― 1,35 (m, 1H), 1,33 (s, 11H), 1,23 ― 1,01 (m, 1H), 0,84 (m, 1H), 0,62 ― 0,46 (m, 2H), 0,21 ― 0,06 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,67.
Etapa 2: Prepararea (2R,4R)-4-amino-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (19c)
Hidrogenarea (2R,4R)-4-azido-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (19a) (0,08 g, 0,113 mmoli) în etanol (10 mL), utilizând paladiu pe cărbune 10% (0,012 g, 0,011 mmoli) drept catalizator timp de şase ore conform procedurii raportate în etapa 2 din Schema 13 a dat (2R,4R)-4-amino-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (19c) (60 mg, 0,088 mmoli, randament 78 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,46 (s, 1H), 8,11 (d, J= 7,3 Hz, 1H), 7,79 (m, 1H), 7,70 (m, 1H), 7,63 ― 7,46 (m, 4H), 7,26 (m, 2H), 7,23 ― 7,13 (m, 1H), 7,05 (m, 1H), 5,48 (s, 1H), 4,44 (dd, J= 9,1, 5,1 Hz, 1H), 3,74 ― 3,40 (m, 3H), 2,76 ― 2,21 (m, 4H), 1,78 (m, 1H), 1,13 (s, 10H), 1,02 ― 0,74 (m, 1H), 0,74 ― 0,51 (m, 1H), 0,34 (m, 2H), -0,06 (m, 2H); MS (ES+) 679,6 (M+1); 702,5 (M+Na).
Etapa-3: Prepararea (2R,4R)-4-amino-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (19c)
Reacţia (2R,4R)-4-amino-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (19c) (0,052 g, 0,077 mmoli) în etanol (5 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,064 mL, 0,766 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu CMA-80 în cloroform 0 la 100%) (2R,4R)-4-amino-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (19c) (12 mg, 0,021 mmoli, randament 27,3 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,45 (s, 1H), 8,15 ― 7,99 (m, 1H), 7,86 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 7,67 ― 7,60 (m, 2H), 7,57 ― 7,42 (m, 3H), 7,32 ― 7,23 (m, 2H), 7,15 ― 7,06 (m, 2H), 4,43 (dd, J= 9,0, 5,3 Hz, 1H), 3,64 (dd, J= 9,6, 5,6 Hz, 1H), 3,58 ― 3,47 (m, 1H), 2,41 ― 2,27 (m, 4H), 2,25 ― 2,18 (m, 2H), 1,84 ― 1,63 (m, 1H), 1,12 ― 0,93 (m, 2H), 0,72 ― 0,55 (m, 1H), 0,34 (m, 2H), -0,01 ― -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,51; MS (ES-) 573,5, 575,4 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 85,0 [0,08, MeOH].
Prepararea (R)-N2-(5-(1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-oxopirolidin-1,2-dicarboxamidei (20b)
Etapa1: Prepararea (R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-oxopirolidin-1,2-dicarboxamidei (20a)
La o soluţie de (2R,4S)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidă (9b) (50 mg, 0,074 mmoli) în diclorometan (10 mL) s-a adăugat, la temperatura camerei, bicarbonat de sodiu (24,70 mg, 0,294 mmoli), Periodinan Dess-Martin (100 mg, 0,235 mmoli) şi s-a agitat timp de 30 min. Reacţia s-a diluat cu diclorometan (50 mL), s-a spălat cu apă (2 x 25 mL), saramură (25 mL), s-a uscat, s-a filtrat şi s-a concentrat în vid la sec. Reziduul brut obţinut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 4 g eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 100%) pentru a se obţine (R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(1-(3 -cianofenil)-3 -ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-oxopirolidin-1,2-dicarboxamida (20a) (40 mg, 0,059 mmoli, randament 80 %) ca un solid aproape incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,09 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,08 - 7,98 (m, 1H), 7,94 (m, 1H), 7,85 - 7,66 (m, 2H), 7,61 - 7,45 (m, 3H), 7,31 (m, 2H), 7,26 - 7,16 (m, 1H), 7,13 (m, 1H), 5,51 (s, 1H), 5,10 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 4,27 - 4,10 (m, 1H), 3,98 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 3,40 (m, 2H), 2,63 - 2,38 (m, 2H), 1,11 (s, 10H), 0,98 - 0,79 (m, 1H), 0,72 - 0,51 (m, 1H), 0,40 - 0,25 (m, 2H), -0,00 - - 0,21 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,75; MS (ES+) 700,4 (M+23), (ES-) 676,4 (M-1); 712,4, 714,4 (M+Cl).
Etapa 2: Prepararea (R)-N2-(5-(1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-oxopirolidin-1,2-dicarboxamidei (20b)
Reacţia (R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-oxopirolidin-1,2-dicarboxamidei (20a) (35 mg, 0,052 mmoli) în etanol (5 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,043 mL, 0,516 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu CMA-80 în cloroform 0 la 100%) (R)-N2-(5-(1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-oxopirolidin-1,2-dicarboxamida (20b) (20 mg, 0,035 mmoli, randament 67,5 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,03 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,04 ― 7,96 (m, 1H), 7,86 (t, J = 1,8 Hz, 1H), 7,63 (ddt, J= 7,6, 5,9, 1,4 Hz, 2H), 7,59 ― 7,51 (m, 2H), 7,45 (t, J= 7,8 Hz, 1H), 7,34 ― 7,27 (m, 2H), 7,18 ― 7,08 (m, 2H), 5,10 (dd, J= 10,0, 2,2 Hz, 1H), 4,19 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 3,98 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 3,11 (m, 1H), 2,61 ― 2,51 (m, 1H), 2,36 ― 2,27 (m, 2H), 2,27 ― 2,15 (m, 2H), 1,09 ― 0,90 (m, 2H), 0,70 ― 0,51 (m, 1H), 0,37 ― 0,27 (m, 2H), - 0,00 ― -0,13 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,99; MS (ES+) 596,5 (M+Na), (ES-) 610,4 (M+Cl).
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (21d)
Etapa 1: Prepararea 2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-benzil (21a)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(benziloxicarbonil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (15a) (1,5 g, 5,65 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (4e) (2,339 g, 5,65 mmoli) în tetrahidrofuran (50 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (1,398 g, 5,65 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 100%) 2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-1-carboxilat de (2R,4R)-benzil (21a) (2,396 g, 3,63 mmoli, 64,1 % randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,79 (2s, 1H, rotameri), 8,04 (d, J= 7,3 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,71 (d, J= 7,4 Hz, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,51 (m, 1H), 7,37 (m, 2H), 7,26 ― 7,04 (m, 5H), 5,50 (d, J= 17,5 Hz, 1H), 5,29 (s, 1H), 5,14 ― 4,89 (m, 2H), 4,53 ― 4,34 (m, 1H), 4,27 (s, 1H), 3,71 ― 3,47 (m, 2H), 3,47 ― 3,24 (m, 1H), 2,77 ― 2,26 (m, 2H), 1,88 (m, 1H), 1,16 ― 1,01 (m, 10H, rotameri), 0,98 ― 0,77 (m, 1H), 0,73 ― 0,53 (m, 1H), 0,41 ― 0,26 (m, 2H), -0,02 ― -0,16 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,76, -127,94; MS (ES+) 683,6 (M+Na), (ES-) 695,6 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 75,0 [0,16, MeOH].
Etapa 2: Prepararea (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidei (21b)
Debenzilarea prin hidrogenare a 2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-benzil (21a) (2,35 g, 3,56 mmoli) în etanol (100 mL), utilizând paladiu pe cărbune 10% (0,378 g, 0,356 mmoli) drept catalizator conform procedurii raportate în etapa 2 din Schema 13 a dat (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido) propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxamida (21b) (1,61 g, 3,06 mmoli, randament 86 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,24 (s, 1H), 8,36 (dd, J = 7,8, 2,4 Hz, 1H), 7,79 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,72 (m, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,51 (m, 1H), 7,21 (dd, J= 10,8, 8,7 Hz, 1H), 7,09 ― 6,99 (m, 1H), 5,46 (s, 1H), 4,70 (d, J= 3,3 Hz, 1H), 4,22 ― 4,10 (m, 1H), 3,84 ― 3,64 (m, 1H), 3,00 (m, 1H), 2,79 ― 2,68 (m, 2H), 2,68 ― 2,52 (m, 2H), 2,21 ― 2,07 (m, 1H), 1,84 (m, 1H), 1,14 (s, 10H), 1,01 ― 0,76 (m, 1H), 0,75 ― 0,54 (m, 1H), 0,44 ― 0,25 (m, 2H), -0,02 ― -0,23 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -132,73; MS (ES+) 527,5 (M+1), 549,5(M+Na), (ES-) 525,5 (M-1), 561,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 0,44 [0,15, MeOH].
Etapa 3: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (21c)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidei (21b) (160 mg, 0,304 mmoli) şi izocianatului de fenil (0,040 mL, 0,365 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 9 din Schema 1 a dat (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamida (21c) (176 mg, 0,273 mmoli, randament 90 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,67 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 8,14 ― 8,02 (m, 1H), 7,79 (t, J= 1,7 Hz, 1H), 7,70 (dt, J = 7,4, 1,3 Hz, 1H), 7,59 (dt, J = 8,1, 1,6 Hz, 1H), 7,55 ― 7,44 (m, 3H), 7,29 ― 7,10 (m, 3H), 7,12 ― 7,02 (m, 1H), 6,94 (tt, J = 7,3, 1,2 Hz, 1H), 5,50 (s, 1H), 5,34 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 4,51 (dd, J = 9,1, 4,5 Hz, 1H), 4,42 ― 4,27 (m, 1H), 3,67 (dd, J = 10,1, 5,1 Hz, 1H), 3,52 (m, 1H), 2,74 ― 2,52 (m, 2H), 2,44 ― 2,29 (m, 1H), 1,93 (dd, J = 11,0, 6,5 Hz, 1H), 1,13 (s, 10H), 1,00 ― 0,79 (m, 1H), 0,71 ― 0,55 (m, 1H), 0,42 ― 0,26 (m, 2H), 0,02 ― -0,15 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,67; MS: (ES+) 646,5 (M+1), 668,5 (M+Na), (ES-) 644,5 (M-1), 680,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 37,42 [0,155, MeOH].
Etapa-4: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (21d)
Reacţia (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (21c) (160 mg, 0,248 mmoli) în etanol (10 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,206 mL, 2,478 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamida (21d) (50 mg, 0,092 mmoli, randament 37,3 %) ca un solid incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,07 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,86 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,68 ― 7,58 (m, 2H), 7,55 ― 7,39 (m, 3H), 7,29 ― 7,17 (m, 1H), 7,12 (d, J = 9,5 Hz, 2H), 6,99 ― 6,85 (m, 1H), 5,30 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 4,50 (dd, J = 9,1, 4,5 Hz, 1H), 4,34 (s, 1H), 3,68 (dd, J = 10,1, 5,1 Hz, 1H), 3,50 (m, 1H), 2,38 ― 2,19 (m, 6H), 1,98 ― 1,84 (m, 1H), 1,10 ― 0,94 (m, 2H), 0,70 ― 0,55 (m, 1H), 0,39 ― 0,28 (m, 2H), -0,02 ― -0,12 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,38; MS (ES+) 564,4 (M+Na); Analiză calculată pentru C31H32FN5O3,0,25H2O: C, 67,62; H, 6,04;N, 12,72; Găsit: C, 67,72; H, 6,10;N, 12,60; Rotaţie optică [α]D = (+) 90,3 [0,32, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-p-tolilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (22b)
Etapa 1: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-p-tolilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (22a)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidei (21b) (160 mg, 0,304 mmoli) şi izocianatului de p-tolil (0,046 mL, 0,365 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 9 din Schema 1 a dat (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-p-tolilpirolidin-1,2-dicarboxamida (22a) (154 mg, 0,233 mmoli, randament 77 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,65 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,10 (dd, J= 7,7, 2,4 Hz, 1H), 7,79 (t, J= 1,7 Hz, 1H), 7,70 (dt, J= 7,4, 1,4 Hz, 1H), 7,59 (dt, J = 8,1, 1,6 Hz, 1H), 7,55 ― 7,45 (m, 1H), 7,42 ― 7,31 (m, 2H), 7,19 (dd, J = 10,6, 8,7 Hz, 1H), 7,10 ― 6,98 (m, 3H), 5,51 (s, 1H), 5,32 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 4,50 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 4,41 ― 4,27 (m, 1H), 3,63 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 3,55 ― 3,46 (m, 1H), 2,64 (m, 1H), 2,61 ― 2,51 (m, 1H), 2,42 ― 2,28 (m, 1H), 2,22 (m, 3H), 1,92 (m, 1H), 1,14 (d, 9H, rotameri), 1,12 ― 1,00 (m, 1H), 0,98 ― 0,81 (m, 1H), 0,72 ― 0,55 (m, 1H), 0,44 ― 0,29 (m, 2H), -0,01 ― -0,13 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ - 128,93; MS: (ES+) 682,5 (M+Na), (ES-) 658,6 (M-1), 694,6 (M+Cl); Rotaţie optică [a]D = (-)14,66 [0,15, MeOH].
Etapa 2: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-p-tolilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (22b)
Reacţia (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-p-tolilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (22a) (140 mg, 0,212 mmoli) în etanol (10 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,177 mL, 2,122 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-p-tolilpirolidin-1,2-dicarboxamida (22b) (39 mg, 0,070 mmoli, randament 33,1 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,60 (s, 1H), 8,27 (s, 1H), 8,07 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 7,87 (t, J= 1,7 Hz, 1H), 7,73 ― 7,57 (m, 2H), 7,46 (t, J= 7,8 Hz, 1H), 7,40 ― 7,34 (m, 2H), 7,15 ― 7,09 (m, 2H), 7,03 (d, J= 8,3 Hz, 2H), 5,29 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 4,49 (dd, J= 9,1, 4,5 Hz, 1H), 4,33 (m, 1H), 3,66 (dd, J= 10,1, 5,1 Hz, 1H), 3,48 (dd, J = 10,0, 3,9 Hz, 1H), 2,44 ― 2,27 (m, 3H), 2,22 (m, 5H), 1,98 ― 1,84 (m, 1H), 1,10 ― 0,93 (m, 2H), 0,72 ― 0,54 (m, 1H), 0,40 ― 0,26 (m, 2H), -0,06 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,66; MS (ES+) 578,5 (M+Na), (ES-) 554,6 (M-1), 590,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 92,5 [0,24, MeOH]; Analiză calculată pentru C32H34FN5O3,0,25H2O: C, 68,61; H, 6,21; N, 12,50; Găsit, 68,68; H, 6,26; N, 12,30; Rotaţie optică [α]D = (+) 90,0 [0,32, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-bromofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (23b)
Etapa 1: Prepararea (2R,4R)-N1-(4-bromofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (23a)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidei (21b) (160 mg, 0,304 mmoli) şi izocianatului de 4-bromofenil (72,2 mg, 0,365 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 9 din Schema 1 a dat (2R,4R)-N1-(4-bromofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (23a) (192 mg, 0,265 mmoli randament, 87 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,66 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,06 (dd, J= 7,4, 2,3 Hz, 1H), 7,79 (t, J= 1,6 Hz, 1H), 7,71 (dt, J = 7,5, 1,3 Hz, 1H), 7,59 (dt, J = 8,2, 1,6 Hz, 1H), 7,54 ― 7,46 (m, 3H), 7,45 ― 7,37 (m, 2H), 7,23 ― 7,14 (m, 1H), 7,11 ― 7,03 (m, 1H), 5,50 (s, 1H), 5,33 (d, J= 4,4 Hz, 1H), 4,51 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,41 ― 4,27 (m, 1H), 3,68 (dd, J = 10,1, 5,2 Hz, 1H), 3,49 (dd, J= 9,9, 3,8 Hz, 1H), 2,77 ― 2,60 (m, 1H), 2,64 ― 2,51 (m, 1H), 2,47 ― 2,24 (m, 1H), 1,97 ― 1,78 (m, 1H), 1,13 (s, 10H), 0,98 ― 0,77 (m, 1H), 0,63 (m, 1H), 0,41 ― 0,22 (m, 2H), - 0,02 ― -0,17 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,38; MS: (ES+) 746,5, 748,5 (M+Na), (ES-) 722,5 (M-1), 758,5, 760,4 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 12,9 [0,155, MeOH].
Etapa 2: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-bromofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (23b)
Reacţia (2R,4R)-N1-(4-bromofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (23a) (180 mg, 0,248 mmoli) în etanol (10 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,207 mL, 2,484 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-bromofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (23b) (41 mg, 0,066 mmoli, randament 26,6 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,04 (d, J= 7,6 Hz, 1H), 7,86 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,67 ― 7,59 (m, 2H), 7,53 ― 7,45 (m, 3H), 7,44 ― 7,37 (m, 2H), 7,12 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 5,30 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 4,50 (dd, J = 9,1, 4,8 Hz, 1H), 4,41 ― 4,28 (m, 1H), 3,68 (dd, J= 10,2, 5,4 Hz, 1H), 3,47 (dd, J = 9,8, 4,0 Hz, 1H), 2,40 ― 2,14 (m, 5H), 2,01 ― 1,79 (m, 1H), 1,13 ― 0,88 (m, 2H), 0,63 (m, 1H), 0,42 ― 0,27 (m, 2H), -0,02 ― -0,12 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,26 ; MS (ES+) 642,4, 644,5 (M+Na); IR (KBr) 2229 cm-1; Rotaţie optică [a]D = (+) 101,54 [0,325, MeOH]; Analiză calculată pentru C31H31BrFN5O3,0,5H2O: C, 59,15; H, 5,12; N, 11,12; Găsit: C, 59,11; H, 5,18; N, 10,95.
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (24b)
Etapa 1: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (24a)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidei (21b) (160 mg, 0,304 mmoli) şi izocianatului de 4-fluorofenil (0,041 mL, 0,365 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 9 din Schema 1 a dat (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (24a) (138 mg, 0,208 mmoli, randament 68,4 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,64 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 8,43 (s, 1H), 8,08 (dd, J = 7,6, 2,5 Hz, 1H), 7,91 ― 7,75 (m, 1H), 7,71 (dt, J = 7,4, 1,4 Hz, 1H), 7,59 (dt, J = 8,2, 1,6 Hz, 1H), 7,50 (m, 3H), 7,12 ― 7,01 (m, 3H), 5,50 (m, 1H), 5,32 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 4,50 (dd, J = 9,1, 4,5 Hz, 1H), 4,41 ― 4,28 (m, 1H), 3,66 (dd, J = 10,0, 5,1 Hz, 1H), 3,49 (dd, J = 10,2, 3,8 Hz, 1H), 2,74 ― 2,51 (m, 2H), 2,49 ― 2,23 (m, 2H), 1,98 ― 1,81 (m, 1H), 1,13 (d, J = 2,2 Hz, 10H), 0,98 ― 0,76 (m, 1H), 0,70 ― 0,52 (m, 1H), 0,38 ― 0,27 (m, 2H), 0,01 ― -0,16 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -121,20, -128,61; MS: (ES+) 664,5 (M+1), 686,5 (M+Na), (ES-) 662,5 (M-1), 698,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 10,52 [0,095, MeOH].
Etapa 2: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (24b)
Reacţia (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (24a) (125 mg, 0,188 mmoli) în etanol (10 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,157 mL, 1,883 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (24b) (35 mg, 0,063 mmoli, 33,2 % randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,60 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,06 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,86 (t, J= 1,8 Hz, 1H), 7,63 (m, 2H), 7,55 ― 7,41 (m, 3H), 7,18 ― 706 (m, 2H), 7,05 (d, J= 7,0 Hz, 1H), 5,30 (d, J= 4,7 Hz, 1H), 4,49 (dd, J= 9,1, 4,6 Hz, 1H), 4,43 ― 4,22 (m, 1H), 3,67 (dd, J = 10,1, 5,3 Hz, 1H), 3,58 ― 3,31 (m, 1H), 2,37 ― 2,17 (m, 6H), 1,98 ― 1,77 (m, 1H), 1,11 ― 0,94 (m, 2H), 0,71 ― 0,54 (m, 1H), 0,40 ― 0,26 (m, 2H), -0,03 ― -0,12 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -121,39, -129,49; MS (ES+) 582,5 (M+Na); Rotaţie optică [a]D = (+) 85,93 [0,27, MeOH]
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(4-nitrofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (25b)
Etapa 1: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(4-nitrofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (25a)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidei (21b) (280 mg, 0,532 mmoli) şi izocianatului de 4-nitrofenil (105 mg, 0,638 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 9 din Schema 1 a dat (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(4-nitrofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (25a) (353 mg, 0,511 mmoli, randament 96 %) ca un solid galben deschis; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,72 (s, 1H), 9,07 (s, 1H), 8,19 ― 8,10 (m, 2H), 8,02 (d, J= 7,1 Hz, 1H), 7,85 ― 7,75 (m, 3H), 7,70 (m, 1H), 7,62 ― 7,55 (m, 1H), 7,50 (t, J= 7,8 Hz, 1H), 7,19 (dd, J= 10,5, 8,7 Hz, 1H), 7,15 ― 7,02 (m, 1H), 5,51 (s, 1H), 5,35 (s, 1H), 4,56 (dd, J= 8,8, 5,1 Hz, 1H), 4,36(m, 1H), 3,75 (dd, J = 10,1, 5,4 Hz, 1H), 3,52 (dd, J = 9,9, 4,2 Hz, 1H), 3,48 ― 3,38 (m, 1H), 2,75 ― 2,51 (m, 1H), 2,48 ― 2,30 (m, 1H), 1,89 (m, 1H), 1,13 (s, 9H), 1,11 ― 1,01 (m, 1H), 0,90(m, 1H), 0,61 (m, 1H), 0,38 ― 0,30 (m, 2H), -0,00 ― -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,81; MS (ES+) 713,5 (M+Na), (ES-) 689,5 (M-1), 725,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 18,66 [0,15, MeOH].
Etapa 2: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(4-nitrofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (25b)
Reacţia (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(4-nitrofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (25a) (100 mg, 0,145 mmoli) în etanol (10 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,121 mL, 1,448 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(4-nitrofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (25b) (61 mg, 0,104 mmoli, randament 71,8 %) ca un solid galben deschis; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,66 (s, 1H), 9,05 (d, J= 2,7 Hz, 1H), 8,15 (ddt, J= 9,3, 4,3, 2,1 Hz, 2H), 7,99 (d, J= 7,3 Hz, 1H), 7,89 ― 7,75 (m, 3H), 7,69 ― 7,56 (m, 2H), 7,47 (ddd, J= 8,0, 3,9, 2,3 Hz, 1H), 7,18 ― 7,07 (m, 2H), 5,32 (td, J = 4,9, 4,2, 2,2 Hz, 1H), 4,63 ― 4,45 (m, 1H), 4,41 ― 4,25 (m, 1H), 3,85 ― 3,65 (m, 1H), 3,58 ― 3,43 (m, 1H), 2,49 ― 2,37 (m, 1H), 2,36 ― 2,26 (m, 1H), 2,29 ― 2,13 (m, 3H), 1,89 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 1,12 ― 0,92 (m, 2H), 0,71 ― 0,53 (m, 1H), 0,40 ― 0,26 (m, 2H), -0,02 ― -0,15 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,42; MS (ES+) 609,5 (M+Na), (ES-) 585,5 (M-1), 621,4 (M+Cl); Rotaţie optică [a]D = (+) 124,90 [0,27, MeOH]; Analiză calculată pentru C31H31FN6O5,0,5H2O: C, 62,51; H, 5,42; N, 14,11; Găsit: C, 62,58; H, 5,43; N, 13,89.
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(naftalen-1-il)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (26b)
Etapa 1: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(naftalen-1-il)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (26a)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidei (21b) 160 mg, 0,304 mmoli şi 1-izocianatonaftalenei (61,7 mg, 0,365 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 9 din Schema 1 a dat (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(naftalen-1-il)pirolidin-1,2-dicarboxamida (26a) (196 mg, 0,282 mmoli, randament 93 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,69 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,17 (dd, J = 7,7, 2,4 Hz, 1H), 8,04 ― 7,95 (m, 1H), 7,91 (dd, J= 8,2, 1,4 Hz, 1H), 7,79 (t, J= 1,7 Hz, 1H), 7,77 ― 7,67 (m, 2H), 7,58 (m, 1H), 7,54 ― 7,39 (m, 5H), 7,21 (dd, J= 10,6, 8,7 Hz, 1H), 7,07 (m, 1H), 5,47 (s, 1H), 5,38 (s, 1H), 4,56 (dd, J = 9,3, 3,9 Hz, 1H), 4,42 (s, 1H), 3,80 (dd, J = 10,3, 4,9 Hz, 1H), 3,64 (dd, J = 10,0, 3,1 Hz, 1H), 2,75 ― 2,51 (m, 2H), 2,42 (m, 1H), 2,09 ― 2,00 (m, 1H), 1,12 (s, 10H), 0,99 ― 0,79 (m, 1H), 0,70 ― 0,54 (m, 1H), 0,41 ― 0,26 (m, 2H), -0,02 ― -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,33; MS (ES+) 718,5 (M+Na), (ES-) 694,6 (M-1), 730,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 61,3 [0,075, MeOH].
Etapa 2: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(naftalen-1-il)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (26b)
Reacţia (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(naftalen-1-il)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (26a) (160 mg, 0,230 mmoli) în etanol (10 mL) utilizând soluţie conc. de HCl 0,192 mL, 2,299 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(naftalen-1-il)pirolidin-1,2-dicarboxamida (26b) (30 mg, 0,051 mmoli, randament 22,05 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,63 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,13 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 8,00 (d, J= 8,2 Hz, 1H), 7,91 (d, J= 8,1 Hz, 1H), 7,87 (t, J= 1,7 Hz, 1H), 7,77 ― 7,69 (m, 1H), 7,66 ― 7,62 (m, 1H), 7,51 ― 7,40 (m, 5H), 7,20 ― 7,07 (m, 2H), 5,34 (s, 1H), 4,55 (dd, J= 9,3, 4,0 Hz, 1H), 4,46 ― 4,28 (m, 1H), 3,81 (dd, J= 10,3, 5,0 Hz, 1H), 3,68 ― 3,55 (m, 1H), 2,48 ― 2,35 (m, 2H), 2,30 (s, 2H), 2,22 (t, J= 8,1 Hz, 2H), 2,08 ― 1,96 (m, 1H), 1,12 ― 0,94 (m, 2H), 0,71 ― 0,55 (m, 1H), 0,39 ― 0,28 (m, 2H), -0,03 ― -0,15 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,99; MS (ES+) 614,5 (M+Na), (ES-) 590,6 (M-1), 626,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 81,2 [ 0,165, MeOH]; Analiză calculată pentru: C35H34FN5O3,0,5H2O: C, 69,98; H, 5,87; N, 11,66; Găsit: C, 70,25; H, 5,99; N, 11,44.
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(4-(trifluorometil)fenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (27b)
Etapa 1: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(4-(trifluorometil)fenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (27a)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidei (21b) (160 mg, 0,304 mmoli) şi 1-izocianato-4-(trifluorometil)benzenului (0,043 mL, 0,304 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 9 din Schema 1 a dat (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletil sulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(4-(trifluorometil)fenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (27a) (161 mg, 0,226 mmoli, randament 74,2 %) ca un solid incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,69 (s, 1H), 8,76 (s, 1H), 8,04 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,89 - 7,62 (m, 4H), 7,60 (m, 2H), 7,50 (m, 1H), 7,25 - 7,11 (m, 1H), 7,04 (m, 1H), 5,50 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 5,35 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 4,54 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,41 - 4,28 (m, 2H), 3,72 (m, 1H), 3,52 (m, 1H), 2,75 - 2,54 (m, 1H), 2,48 - 2,24 (m, 1H), 1,99 - 1,80 (m, 1H), 1,13 (m, 10H), 1,11 - 1,00 (m, 1H), 0,97 - 0,76 (m, 1H), 0,71 - 0,56 (m, 1H), 0,42 - 0,26 (m, 2H), 0,00 - -0,18 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -59,80, - 128,17; MS (ES+) 736,5 (M+Na), (ES-) 712,6 (M-1), 748,5 (M+Cl); Rotaţie optică [a]D = (+) 14,19 [0,155, MeOH].
Etapa 2: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(4-(trifluorometil)fenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (27b)
Reacţia (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(4-(trifluorometil)fenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (27a) (150 mg, 0,210 mmoli) în etanol (10 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,175 mL, 2,101 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(4-(trifluorometil)fenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (27b) (50 mg, 0,082 mmoli, randament 39,0 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,63 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,02 (d, J= 7,6 Hz, 1H), 7,86 (t, J= 1,8 Hz, 1H), 7,74 (d, J= 8,5 Hz, 2H), 7,61 (m, 4H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 5,31 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 4,53 (dd, J = 9,0, 4,9 Hz, 1H), 4,42 ― 4,27 (m, 1H), 3,72 (dd, J = 10,1, 5,3 Hz, 1H), 3,57 ― 3,45 (m, 1H), 2,42 ― 2,15 (m, 5H), 1,97 ― 1,77 (m, 1H), 1,09 ― 0,92 (m, 2H), 0,70 ― 0,55 (m, 1H), 0,41 ― 0,24 (m, 2H), -0,02 ― -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -59,77, -128,84; MS(ES+) 632,5 (M+Na), (ES-) 608,4 (M-1), 644,5 (M+Cl); Rotaţie optică [a]D = (+) 94,00 [0,3, MeOH]; Analiză calculată pentru C32H31F4N5O3,0,5H2O: C, 62,13; H, 5,21; N, 11,32; Găsit: C, 62,54; H, 5,34; N, 11,15.
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-aminofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (28b)
Etapa 1: Prepararea (2R,4R)-N1-(4-aminofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (28a)
Reducerea nitro la amină prin hidrogenarea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-N1-(4-nitrofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (25a) (200 mg, 0,290 mmoli) în etanol (20 mL), utilizând paladiu pe cărbune 10% (30,8 mg, 0,029 mmoli) drept catalizator, conform procedurii raportate în etapa 2 din Schema 13 a dat (2R,4R)-N1-(4-aminofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (28a) (160 mg, 0,242 mmoli, randament 84 %) ca un solid galben deschis; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,62 (s, 1H), 8,32 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 8,15 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,79 (t, J = 1,9 Hz, 1H), 7,70 (dd, J = 7,2, 1,5 Hz, 1H), 7,63 ― 7,55 (m, 1H), 7,50 (td, J = 7,8, 2,3 Hz, 1H), 7,19 (ddd, J = 10,6, 8,6, 2,0 Hz, 1H), 7,11 ― 7,01 (m, 3H), 6,46 (dd, J = 8,8, 2,2 Hz, 2H), 5,48 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 5,29 (dd, J = 4,7, 2,0 Hz, 1H), 4,74 (s, 2H), 4,46 (dd, J = 9,3, 4,0 Hz, 1H), 4,41 ― 4,26 (m, 1H), 3,59 (m, 1H), 3,53 ― 3,41 (m, 1H), 2,75 ― 2,50 (m, 1H), 2,41 ― 2,22 (m, 1H), 1,94 (d, J = 13,4 Hz, 1H), 1,21 ― 1,03 (m, 10H), 0,98 ― 0,79 (m, 1H), 0,72 ― 0,53 (m, 1H), 0,44 ― 0,28 (m, 2H), - 0,03 ― -0,11 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,01; MS (ES+) 661,5 (M+1), 683,5 (M+Na), (ES-) 659,5 (M-1), 695,6 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 21,9 [0,155, MeOH].
Etapa 2: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-aminofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (28b)
Reacţia (2R,4R)-N1-(4-aminofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (28a) (0,15 g, 0,227 mmoli) în etanol (10 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,208 mL, 2,497 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-aminofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (28b) (65 mg, 0,117 mmoli, 51,4 % randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,57 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,12 (dd, J = 7,7, 2,1 Hz, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,87 (t, J = 1,8 Hz, 1H), 7,67 ― 7,58 (m, 2H), 7,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,19 ― 7,08 (m, 2H), 7,08 ― 7,00 (m, 2H), 6,50 ― 6,40 (m, 2H), 5,26 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 4,75 (s, 2H), 4,45 (dd, J = 9,2, 4,1 Hz, 1H), 4,38 ― 4,23 (m, 1H), 3,59 (dd, J = 10,1, 4,9 Hz, 1H), 3,45 (dd, J = 10,0, 3,3 Hz, 1H), 2,41 ― 2,27 (m, 3H), 2,23 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 2,00 ― 1,86 (m, 1H), 1,02 (m, 2H), 0,72 ― 0,54 (m, 1H), 0,39 ― 0,27 (m, 2H), -0,02 ― -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -130,17; MS (ES+) 579,5 (M+Na), (ES-) 555,5 (M-1), 593,6 (M+Cl); Rotaţie optică [a]D = (+) 100,8 [0,25, MeOH]; Analiză calculată pentru C31H33FN6O3,0,5H2O: C, 65,83; H, 6,06; N, 14,86; Găsit: C, 65,67; H, 5,98; N, 14,58.
Prepararea (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (29e)
Etapa 1: Prepararea acidului (R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-oxopirolidin-2-carboxilic (29a)
La o soluţie de acid (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (14b) (51 g, 221 mmoli) în diclorometan (2023 mL) la 0 °C conţinând acid tricloroizocianuric (51,3 g, 221 mmoli) s-a adăugat TEMPO (1,723 g, 11,03 mmoli), s-a agitat la 0 °C timp de 30 min şi s-a lăsat să se încălzească peste noapte la temperatura camerei. Amestecul de reacţie s-a diluat cu apă (100 mL) s-a agitat timp de 30 min şi s-a concentrat în vid pentru a se îndepărta diclorometanul. Amestecul de reacţie s-a diluat cu 200 mL acetat de etil, s-a filtrat printr-un dop de Celite. Filtratul s-a acidulat cu 8 mL de HCl 1 M. Stratul de acetat de etil s-a separat s-a spălat cu apă (4 x 200 mL), saramură (100 mL), s-a uscat, s-a filtrat, şi s-a concentrat în vid pentru a se obţine acidul (R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-oxopirolidin-2-carboxilic (29a) (38 g, 166 mmoli, randament 75 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,00 (s, 1H), 4,53 (m, 1H), 3,82 (dd, J= 18,6, 10,6 Hz, 1H), 3,66 (dd, J= 18,4, 4,4 Hz, 1H), 3,44 (s, 1H), 3,12 (m, 1H), 1,40 (s, 9H); MS (ES-) 228,2 (M-1), 457,3 (2M-1).
Etapa 2: Prepararea acidului (2R,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-2-carboxilic (29b)
O soluţie de acid (R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-oxopirolidin-2-carboxilic (29a) (1,45 g, 6,33 mmoli) în THF (20 mL) s-a adăugat în picături, la 0 °C, la o soluţie 1,0 M de bromură de fenilmagneziu (17,40 mL, 17,40 mmoli). Amestecul de reacţie s-a agitat la 0 °C timp de 20 min, s-a stins cu clorură de amoniu saturată (15 mL) şi s-a concentrat în vid pentru a se îndepărta solvenţii organici. Amestecul de reacţie s-a partiţionat între acetat de etil (50 mL) şi HCl 1 M (20 mL). Stratul organic s-a separat, s-a spălat cu saramură, s-a uscat, s-a filtrat şi s-a concentrat la un volum de 25 mL soluţia s-a diluat cu agitare cu hexani (70 mL). Solidul obţinut s-a colectat prin filtrare s-a spălat cu hexani, s-a uscat în vid pentru a se obţine acidul (2R,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-2-carboxilic (29b) (900 mg, 2,93 mmoli, 46,3 % randament) ca un solid maroniu deschis; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,47 (s, 1H), 7,53 (d, J= 7,7 Hz, 2H), 7,41 (t, J= 7,5 Hz, 2H), 7,33 (q, J = 7,1, 6,5 Hz, 1H), 5,59 (s, 1H), 4,47 ― 4,29 (m, 1H), 3,76 ― 3,55 (m, 2H), 2,74 ― 2,61 (m, 1H), 2,31 (dd, J= 12,8, 6,7 Hz, 1H), 1,56 ― 1,40 (m, 9H); MS (ES+) 330,3 (M+Na), (ES-) 306,3 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 38,43 [0,255, MeOH].
Etapa 3: Prepararea (2R,4S)- 2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1-carboxilatului de terţ-butil (29c)
Reacţia acidului (2R,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-2-carboxilic (29b) (500 mg, 1,627 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (4e) (673 mg, 1,627 mmoli) în tetrahidrofuran (75 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (402 mg, 1,627 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 100%) 2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1-carboxilat de (2R,4S)-terţ-butil (29c) (345 mg, 0,491 mmoli, randament 30,2 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,78 (2s, 1H, rotameri), 8,40 ― 7,98 (2m, 1H, rotameri), 7,77 (m, 1H), 7,72 (m, 1H), 7,64 (m, 1H), 7,58 ― 746 (m, 3H), 7,37 (m, 2H), 7,33 ― 6,99 (m, 4H), 6,00 (2s, 1H, rotameri), 5,48 (2s, 1H, rotameri), 4,66 ― 4,30 (m, 1H), 3,82 ― 3,53 (m, 2H), 2,80 ― 2,55 (m, 2H), 2,33 ― 2,14 (m, 1H), 1,32 (2s, 9H, rotameri), 1,14 (2s, 10H, rotameri), 1,00 ― 0,75 (m, 1H), 0,71 ― 0,52 (m, 1H), 0,44 ― 0,26 (m, 2H), 0,01 ― -0,17 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,69, -129,87; MS (ES+) 725,5 (M+Na), (ES-) 701,6 (M-1), 737,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 71,10 [0,09, MeOH].
Etapa 4: Prepararea (2R,4S)-N-(5-((-)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamidei (29d)
Reacţia 2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1-carboxilatului de (2R,4S)-terţ-butil (29c) (335 mg, 0,477 mmoli) în HCl metanolic (2,383 mL, 7,15 mmoli) urmat de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4S)-N-(5-((-)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamida (29d) (260 mg, 0,455 mmoli, 95 % randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,56 (s, 1H), 10,26 (s, 1H), 9,45 (s, 3H), 8,78 (s, 1H), 7,90 (m, 2H), 7,86 (m, 1H), 7,72 ― 7,63 (m, 2H), 7,57 ― 7,51 (m, 2H), 7,49 ― 7,24 (m, 5H), 5,88 (s, 1H), 4,72 (m, 1H), 3,60 ― 3,41 (m, 3H), 2,79 (t, J= 12,4 Hz, 1H), 1,26 ― 1,14 (m, 1H), 1,14 ― 1,01 (m, 3H), 0,82 ― 0,59 (m, 1H), 0,48 ― 0,32 (m, 2H), 0,11 ― -0,06 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -123,49; MS (ES+) 521,5 (M+Na), (ES-) 533,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 56,67 [0,18, MeOH].
Etapa 5: Prepararea (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (29e)
Reacţia (2R,4S)-N-(5-((-)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamidei (29d) (99 mg, 0,173 mmoli) în tetrahidrofuran (20 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (43,1 mg, 0,173 mmoli) utilizând bicarbonat de sodiu (3,46 mL, 3,46 mmoli) ca bază conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 12 g, eluând cu 0-100% CMA-80 în cloroform) (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamida (29e) (65 mg, 0,100 mmoli, randament 57,5 %) ca un solid alb-murdar; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,74 (s, 1H), 9,24 (s, 1H), 8,30 (dd, J = 2,7, 0,8 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,91 (dd, J = 9,1, 0,8 Hz, 1H), 7,87 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,68 - 7,61 (m, 2H), 7,54 (dt, J = 6,6, 1,3 Hz, 2H), 7,47 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,42 - 7,34 (m, 2H), 7,33 - 7,26 (m, 1H), 7,20 - 7,11 (m, 2H), 5,95 (s, 1H), 4,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,02 - 3,96 (m, 1H), 3,90 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 2,68 (dd, J = 13,2, 9,7 Hz, 1H), 2,34 (s, 2H), 2,34 - 2,18 (m, 3H), 1,11 - 0,95 (m, 2H), 0,74 - 0,54 (m, 1H), 0,39 - 0,29 (m, 2H), -0,01 - -0,11 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,26; MS (ES+) 653,5 (M+1) 675,4, 677,5 (M+Na), (ES-) 651,5, 653,7 (M-1), 689,5 (M+Cl); IR (KBr) 2229 cm-1; Rotaţie optică [a]D = (+) 80 [0,295, MeOH].
Prepararea (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (30a) şi (2R,4S)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-(4-clorofenil)ureido)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (30b)
Reacţia (2R,4S)-N-(5-((-)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamidei (29d) (150 mg, 0,262 mmoli) în diclorometan (10 mL) cu 4-izocianat de clorofenil (1n) (0,034 mL, 0,262 mmoli) şi bicarbonat de sodiu (5,25 mL, 5,25 mmoli) conform procedurii raportate în etapa 9 Scheme 1 a dat, după purificare
1. (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamida (30a) (65 mg, 0,100 mmoli, randament 38,0 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,69 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,14 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 7,88 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,64 (m, 2H), 7,60 ― 7,53 (m, 4H), 7,48 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 7,45 ― 7,35 (m, 2H), 7,33 ― 7,25 (m, 3H), 7,18 ― 7,10 (m, 2H), 5,97 (s, 1H), 4,76 ― 4,60 (m, 1H), 3,93 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,83 (d, J= 10,1 Hz, 1H), 2,72 (dd, J = 13,2, 9,5 Hz, 1H), 2,35 ― 2,21 (m, 5H), 1,10 ― 0,96 (m, 2H), 0,71 ― 0,56 (m, 1H), 0,40 ― 0,28 (m, 2H), -0,00 ― -0,11 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,82; MS (ES+) 674,5, 677,5 (M+Na), (ES-) 650,5, 652,0 (M-1), 686,5, 688,6 (M+Cl); IR (KBr) 2229cm-1; Rotaţie optică [a]D = (+) 87,5 [0,32,MeOH]; Analiză calculată pentru C37H35ClFN5O3,0,25H2O; C, 67,68; H, 5,45; N, 10,67; Găsit: C, 67,73; H, 5,53; N, 10,51.
2. (2R,4S)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-(4-clorofenil)ureido)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamida (30b) (68 mg, 0,084 mmoli, randament 32,2 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,73 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,20 - 8,10 (m, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,67 (m, 2H), 7,58 - 7,49 (m, 5H), 7,43 - 7,18 (m, 10H), 7,14 (s, 1H), 7,08 (s, 1H), 5,96 (s, 1H), 4,68 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,93 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,83 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 2,80 - 2,61 (m, 3H), 2,30 (d, J = 13,6 Hz, 1H), 1,11 - 0,91 (m, 2H), 0,74 - 0,57 (m, 1H), 0,42 - 0,29 (m, 2H), -0,01 - -0,13 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,16; MS (ES+) 827,5, 828,6 (M+Na), (ES-) 803,5, 805,4 (M-1), 839,5, 840,6 (M+Cl); IR (KBr) 2229 cm-1; Rotaţie optică [a]D = (+) 52,0 [0,25, MeOH]; Analiză calculată pentru C44H39Cl2FN6O4,0,75H2O: C, 64,51; H, 4,98; N, 10,26; Găsit: C, 64,49; H, 5,06; N, 9,99.
Prepararea (2R,4S)-N2-(5-((-)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (31i)
Etapa-1: Prepararea (E)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)prop-2-en-1-onei (31b)
La o soluţie agitată de 2-acetilpiridină (31a) (53 g, 438 mmoli) în metanol (636 mL) răcită la 0 °C s-a adăugat ciclopropancarboxaldehidă (52,8 mL, 700 mmoli) şi hidroxid de potasiu apos (soluţie IN, 88 mL, 88 mmoli). Reacţia s-a lăsat să se încălzească la temperatura camerei peste noapte. Reacţia s-a concentrat în vid pentru a se îndepărta metanolul. Reziduul brut s-a dizolvat în acetat de etil (500 mL) s-a spălat cu apă (500 mL), saramură (200 mL), s-a uscat, s-a filtrat şi s-a concentrat în vid pentru a se obţine (E)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)prop-2-en-1-ona (31b) (80 g, 462 mmoli, randament 106 %) care s-a utilizat ca atare pentru etapa următoare. S-a preparat o probă analitică prin purificarea reziduului brut prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu acetat de etil în hexani 0 la 100%); 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,80 ― 8,68 (m, 1H), 8,07 ― 7,98 (m, 2H), 7,74 ― 7,63 (m, 2H), 6,63 (dd, J = 15,5, 10,4 Hz, 1H), 1,93 ― 1,76 (m, 1H), 1,08 ― 0,98 (m, 2H), 0,84 ― 0,71 (m, 2H).
Etapa-2: Prepararea 3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propan-1-onei (31c)
La o soluţie agitată de (E)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)prop-2-en-1-onă (31b) (80 g, 462 mmoli) în acetonitril (829 mL) s-a adăugat tributilstanan (256 mL, 924 mmoli) şi s-a încălzit la reflux timp de 9 h. Reacţia s-a răcit la temperatura camerei şi straturile s-au separat. Stratul de acetonitril s-a concentrat în vid şi reziduul obţinut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu acetat de etil în hexani 0 la 100%) pentru a se obţine 3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propan-1-ona (31c) (17,2 g, 98 mmoli, randament 21,25 %) ca un ulei
1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,94 (dt, J = 4,7, 1,5 Hz, 1H), 8,19 (m, 2H), 7,87 (m, 1H), 3,46 (td, J = 7,2, 2,0 Hz, 2H), 1,74 (qd, J = 7,2, 2,1 Hz, 2H), 1,03 ― 0,87 (m, 1H), 0,59 (m, 2H), 0,30 ― 0,20 (m, 2H).
Etapa-3: Prepararea (+)-N-(3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (31d)
Reacţia 3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propan-1-onei (31c) (15,2 g, 87 mmoli) în tetrahidrofuran (220 mL) cu (S)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (12,62 g, 104 mmoli) şi tetraizopropoxititan (51,2 mL, 173 mmoli) conform procedurii şi prelucrării raportate în Etapa-3 din Schema 1 a dat (+)-N-(3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (31d) (11,65 g, 41,8 mmoli, randament 48,2 %) ca un ulei galben ; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,70 (dt, J = 4,7, 1,4 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,94 (td, J = 7,6, 1,7 Hz, 1H), 7,56 (ddd, J = 7,5, 4,7, 1,4 Hz, 1H), 3,53 (m, 1H), 3,41 ― 3,35 (m, 1H), 1,49 (q, J= 7,5 Hz, 2H), 1,25 (s, 9H), 0,81 - 0,65 (m, 1H), 0,44 ― 0,28 (m, 2H), 0,03 (m, 2H); MS (ES+) 279,3 (M+1), 301,3 (M+Na); Rotaţie optică [α]D = (+) 50,8 [2,64, MeOH].
Etapa-4: Prepararea (S)-N-((+)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (31e) şi (S)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (31f)
Reacţia (+)-N-(3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (31d) (12,665 g, 45,5 mmoli) în toluen (400 mL) cu soluţie proaspăt preparată de bromură (3-(bis(trimetilsilil)amino)-4-fluorofenil)magneziu (1c) (142 mL, 114 mmoli) conform procedurii raportate în etapa 4 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 120 g eluând cu acetat de etil în hexani 0 la 60 la 100%)
1. (S)-N-((+)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (31e) (10g, 25,7 mmoli, randament 56,4 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,52 (dt, J = 4,6, 1,5 Hz, 1H), 7,73 (td, J = 7,8, 1,9 Hz, 1H), 7,26 (ddd, J = 7,5, 4,8, 1,0 Hz, 1H), 7,07 (dt, J = 8,0, 1,1 Hz, 1H), 6,88 (dd, J = 11,3, 8,5 Hz, 1H), 6,78 (dd, J = 8,8, 2,4 Hz, 1H), 6,43 (ddd, J = 8,6, 4,3, 2,3 Hz, 1H), 6,09 (s, 1H), 5,09 (s, 2H), 2,56 (m, 1H), 2,45 (m, 1H), 1,29 ― 1,15 (m, 1H), 1,10 (s, 9H), 0,63 ― 0,42 (m, 2H), 0,35 ― 0,23 (m, 2H), -0,07 (m, 1H), -0,20 (m, 1H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,14; MS: (ES+) 412,4 (M+Na), (ES-) 388,4 (M-1), 424,4 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 136,36 [0,55, MeOH].
2. (S)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (31f) (300 mg, 0,770 mmoli, randament 1,693 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,53 (ddd, J = 4,9, 1,9, 0,9 Hz, 1H), 7,71 (td, J = 7,7, 1,8 Hz, 1H), 7,35 ― 7,09 (m, 2H), 6,85 (dd, J = 11,3, 8,5 Hz, 1H), 6,71 (dd, J = 8,8, 2,4 Hz, 1H), 6,41 (ddd, J = 8,5, 4,3, 2,4 Hz, 1H), 5,82 (s, 1H), 5,06 (s, 2H), 2,55 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 1,13 (s, 9H), 1,08 ― 0,96 (m, 1H), 0,81 (m, 1H), 0,61 (m, 1H), 0,38 ― 0,29 (m, 2H), -0,10 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,42; MS (ES+) 390,4 (M+1), 412,4 (M+Na), (ES-) 388,4 (M-1), 424,4 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 3,28 [0,305, MeOH].
Etapa-5: Prepararea 2-(5-(3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1-carboxilatului de (2R,4S)-terţ-butil (31g)
Reacţia acidului (2R,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-2-carboxilic (29b) (158 mg, 0,513 mmoli), (S)-N-((+)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (31e) (200 mg, 0,513 mmoli) în tetrahidrofuran (20 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (127 mg, 0,513 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 100%) 2-(5-(3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1-carboxilat de (2R,4S)-terţ-butil (31g) (130 mg, 0,191 mmoli, randament 37,3 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,71 (2s, 1H, rotameri), 8,54 (2d, J = 4,8 Hz, 1H, rotameri), 8,37 ― 8,04 (m, 1H), 7,75 (m, 1H), 7,59 ― 7,44 (m, 2H), 7,37 (m, 2H), 7,33 ― 7,23 (m, 1H), 7,23 ― 6,94 (m, 2H), 6,14 (m, 1H), 5,95 (2s, 1H, rotameri), 4,44 (m, 1H), 3,67 (s, 2H), 2,79 ― 2,51 (m, 5H), 2,23 (m, 1H), 1,33 (2s, 9H, rotameri), 1,11 (s, 10H), 0,67 ― 0,46 (m, 2H), 0,31 (m, 2H), 0,01 (m, 1H), -0,18 (m, 1H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ - 128,48, -129,79; MS (ES+) 679,6 (M+1), 701,6 (M+Na), (ES-) 677,7 (M-1), 713,6 (M+Cl).
Etapa-6: Prepararea (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamidei (31h)
Reacţia 2-(5-(3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1-carboxilatului de (2R,4S)-terţ-butil (31g) (125 mg, 0,184 mmoli) în HCl metanolic (0,614 mL, 1,841 mmoli) urmată de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamida (31h) (106 mg, 0,182 mmoli, 99 % randament) ca un solid maroniu deschis; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,61 (s, 1H), 10,29 (s, 1H), 9,06 (s, 3H), 8,96 - 8,78 (m, 1H), 8,74 (m, 1H), 8,10-8,02 (m, 1H), 7,96 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,65 ― 7,56 (m, 2H), 7,56-7,35 (m, 5H), 7,31 (s, 1H), 4,77 (m, 1H), 3,94 ― 3,50 (m, 5H), 2,97-2,75 (m, 1H), 1,39 ― 1,20 (m, 1H), 1,16 (m, 2H), 1,14 ― 1,06 (m, 2H), 0,75 (m, 1H), 0,46 (m, 2H), 0,27 ― -0,13 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -123,51; MS (ES+) 475,5 (M+1), 497,5 (M+Na), (ES-) 473,6 (M-1), 509,5 (M+Cl).
Etapa-7: Prepararea (2R,4S)-N2-(5-((-)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (31i)
Reacţia (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamidei (31h) (50 mg, 0,086 mmoli) în diclorometan (10 mL) cu 4-izocianat de clorofenil (1n) (10,96 µL, 0,086 mmoli) şi bicarbonat de sodiu conform procedurii raportate în etapa 9 Scheme 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu CMA 80 în cloroform) (2R,4S)-N2-(5-((-)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamida (31i) (36 mg, 0,057 mmoli, randament 66,9 %) ca un solid alb murdar; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,64 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,48 (dt, J = 4,5, 1,5 Hz, 1H), 8,18 (dd, J = 7,8, 2,2 Hz, 1H), 7,70 (td, J = 7,7, 1,9 Hz, 1H), 7,60 ― 7,51 (m, 5H), 7,39 (t, J= 7,5 Hz, 2H), 7,33 ― 7,26 (m, 3H), 7,21 ― 7,06 (m, 3H), 5,98 (s, 1H), 4,68 (dd, J = 9,6, 2,8 Hz, 1H), 3,93 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,82 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 2,72 (dd, J = 13,1, 9,7 Hz, 1H), 2,40 ― 2,21 (m, 5H), 1,04 (m, 2H), 0,70 ― 0,55 (m, 1H), 0,40 ― 0,26 (m, 2H), -0,01 ― -0,12 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -130,30; MS (ES+) 650,5, 651,4 (M+Na), (ES-) 626,5 (M-1), 662,6, 664,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 56,25 [0,16, MeOH].
Prepararea (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (32a) şi (2R,4S)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-(1-(3-(5-cloropiridin-2-il)ureido)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (32b)
Reacţia (2R,4S)-N-(5-((-)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamidei (31h) (50 mg, 0,086 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (21,29 mg, 0,086 mmoli) utilizând bicarbonat de sodiu ca bază conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 12 g, eluând cu 0-100% CMA-80 în cloroform)
1. (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamida (32a) (29 mg, 0,046 mmoli, randament 53,8 %) ca un solid alb-murdar; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,70 (s, 1H), 9,23 (s, 1H), 8,56 - 8,41 (m, 1H), 8,30 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,21 - 8,07 (m, 1H), 7,92 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,7 Hz, 1H), 7,70 (td, J = 7,7, 1,9 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,8 Hz, 3H), 7,38 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,29 (m, 1H), 7,13 (m, 3H), 5,96 (s, 1H), 4,77 - 4,66 (m, 1H), 4,00 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 3,90 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 2,68 (dd, J = 13,2, 9,6 Hz, 1H), 2,38 - 2,32 (m, 3H), 2,34 - 2,22 (m, 2H), 1,12 - 0,94 (m, 2H), 0,70 - 0,54 (m, 1H), 0,40 - 0,25 (m, 2H), 0,00 - -0,15 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,71; MS (ES+) 629,5 (M+1) 652,5 (M+Na), (ES-) 627,5, 628,5 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 14,81 [0,27, MeOH].
2. (2R,4S)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-(1-(3-(5-cloropiridin-2-il)ureido)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamida (32b) (10 mg, 0,013 mmoli, randament 14,90 %) ca un solid alb-murdar; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,88 (s, 1H), 9,69 (s, 2H), 9,24 (s, 1H), 8,62 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,34 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,29 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,25 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,85 - 7,67 (m, 3H), 7,53 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,37 (m, 3H), 7,26 (m, 3H), 7,14 (m, 2H), 5,92 (s, 1H), 4,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,00 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 3,90 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 2,76 - 2,64 (m, 1H), 2,67 - 2,54 (m, 2H), 2,40 - 2,20 (m, 1H), 1,13 - 0,93 (m, 2H), 0,70 - 0,53 (m, 1H), 0,30 (m, 2H), -0,07 - -0,26 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,58; MS (ES+) 783,6 (M+1) 805,5, 807,5 (M+Na).
Prepararea (2R,4S)-4-amino-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (33d)
Etapa 1: Prepararea metansulfonatului de (3R,5R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-5-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)pirolidin-3-il (33a)
La o soluţie rece ca gheaţa de (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidă (4f) (110 mg, 0,162 mmoli) în diclorometan (10 mL) s-a adăugat trietilamină (0,09 mL, 0,647 mmoli), clorură de metansulfonil (0,019 mL, 0,243 mmoli) şi s-a agitat peste noapte la temperatura camerei. Reacţia s-a diluat cu diclorometan (100 mL), s-a spălat cu apă (2 x 20 mL), saramură (2 x 20 mL), s-a uscat, s-a filtrat şi s-a concentrat în vid pentru a se obţine metansulfonat de (3R,5R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-5-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)pirolidin-3-il (33a) (136 mg, 0,179 mmoli, randament 111 %) care s-a utilizat ca atare pentru etapa următoare; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,74 (s, 1H), 8,61 (s, 1H), 7,87 - 7,75 (m, 2H), 7,70 (dt, J = 7,4, 1,4 Hz, 1H), 7,64 - 7,44 (m, 4H), 7,40 - 7,25 (m, 2H), 7,24 - 7,10 (m, 2H), 5,46 (s, 1H), 5,36 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 4,01 - 3,91 (m, 1H), 3,86 (m, 1H), 3,35 (m, 2H), 3,18 (s, 3H), 2,75 - 2,55 (m, 1H), 2,44 - 2,24 (m, 2H), 1,13 (s, 10H), 0,98 - 0,80 (m, 1H), 0,63 (s, 1H), 0,39 - 0,30 (m, 2H), 0,01 - -0,14 (m, 2H); MS (ES+) 780,5, 782,4 (M+Na), (ES-) 792,5, 793,4 (M+Cl).
Etapa 2: Prepararea ((2R,4S)-4-azido-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (33b)
La o soluţie agitată de metansulfonat de 3R,5R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-5-(5-(1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)pirolidin-3-il (33a) (120 mg, 0,158 mmoli) în DMF (10 mL) s-a adăugat azidă de sodiu (41,1 mg, 0,633 mmoli) şi s-a încălzit la 70 °C timp de 16 h. Reacţia s-a diluat cu acetat de etil (100 mL), s-a spălat cu apă (2 x 25 mL), saramură (25 mL), s-a uscat, s-a filtrat şi s-a concentrat în vid. Reziduul brut obţinut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 100%) pentru a se obţine ((2R,4S)-4-azido-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (33b) (65 mg, 0,092 mmoli, 58,2 % randament) ca un solid incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,92 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 7,97 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,74 - 7,67 (m, 1H), 7,62 - 7,44 (m, 3H), 7,31 - 7,25 (m, 2H), 7,24 - 7,16 (m, 1H), 7,12 (m, 1H), 5,51 (s, 1H), 4,70 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 4,45 (m, 1H), 3,77 (dd, J = 11,0, 5,0 Hz, 1H), 3,62 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 2,44 (m, 2H), 2,41 - 2,22 (m, 1H), 2,16 (m, 1H), 1,12 (s, 11H), 0,97 - 0,80 (m, 1H), 0,70 - 0,53 (m, 1H), 0,39 - 0,27 (m, 2H), -0,01 - -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,00; MS (ES+) 727,5, 729,5 (M+Na), (ES-) 739,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 62,25 [0,71, MeOH].
Etapa 3: Prepararea (2R,4S)-4-amino-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (33c)
Hidrogenarea ((2R,4S)-4-azido-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((+)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (33b) (34 mg, 0,050 mmoli) în etanol (10 mL), utilizând paladiu pe cărbune 10% (9,05 mg, 8,51 µmol) drept catalizator timp de 3 h conform procedurii raportate în etapa 2 din Schema 13 a dat (2R,4S)-4-amino-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (33c) (34 mg, 0,050 mmoli, 58,8 % randament) ca un solid alb-murdar; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,81 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 7,91 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,75 - 7,68 (m, 1H), 7,64 - 7,44 (m, 4H), 7,35 - 7,24 (m, 2H), 7,23 - 7,06 (m, 1H), 5,51 (s, 1H), 4,65 (m, 1H), 3,81 - 3,70 (m, 1H), 3,69 - 3,55 (m, 1H), 3,23 - 3,10 (m, 1H), 2,80 - 2,40 (m, 4H), 2,06 - 1,73 (m, 3H), 1,12 (s, 10H), 0,99 - 0,78 (m, 1H), 0,71 - 0,54 (m, 1H), 0,43 - 0,25 (m, 2H), -0,00 - -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,77; MS (ES+) 701,6, 703,5 (M+Na), (ES-) 713,5, 715,6 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 5,07 [0,355, MeOH].
Etapa 4: Prepararea (2R,4S)-4-amino-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (33d)
Reacţia (2R,4S)-4-amino-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((-)-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (33c) (32 mg, 0,047 mmoli) în etanol (5 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,039 mL, 0,471 mmoli) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu CMA-80 în cloroform 0 la 100%) (2R,4S)-4-amino-N2-(5-((+)-1-amino-1-(3-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (33d) (10 mg, 0,017 mmoli, randament 36,9 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,76 (s, 1H), 8,44 (s, 1H), 7,92 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,86 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,69 - 7,40 (m, 4H), 7,30 - 7,25 (m, 2H), 7,13 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 4,64 (dd, J = 8,3, 4,4 Hz, 1H), 3,74 (dd, J = 9,4, 6,3 Hz, 1H), 3,62 (p, J = 6,6 Hz, 1H), 3,17 (dd, J = 9,4, 5,8 Hz, 1H), 2,43 - 2,31 (m, 5H), 2,22 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 2,10 - 1,87 (m, 2H), 1,11 - 0,91 (m, 2H), 0,71 - 0,54 (m, 1H), 0,40 - 0,26 (m, 2H), -0,00 - -0,15 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,63; MS (ES+) 597,4, 599,8 (M+Na), (ES-) 609,5, 610,4 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 136,0 [0,05, MeOH].
Prepararea (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamida (34d)
Etapa-1: Prepararea acidului (2R,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-2-carboxilic (34a)
La o suspensie de hidrură de sodiu (60% dispersie în ulei) (0,781 g, 19,52 mmoli) în tetrahidrofuran (40 mL) s-a adăugat la -10°C acid (2R,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-2-carboxilic (29b) (1 g, 3,25 mmoli), urmat de adiţia după 30 min de sulfat de dimetil (0,311 mL, 3,25 mmoli). Amestecul de reacţie s-a lăsat să se încălzească la temperatura camerei s-a agitat timp de 16 h şi s-a stins cu clorură de amoniu apoasă saturată. THF s-a îndepărtat sub vid şi reziduul obţinut s-a alcalinizat şi s-a spălat cu eter. Stratul apos s-a acidulat şi s-a extras cu acetat de etil (2 x 100 mL). stratul combinat de acetat de etil s-a spălat cu apă (50 mL), saramură (50 mL), s-a uscat, s-a filtrat şi s-a concentrat în vid pentru a se obţine acidul (2R,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-2-carboxilic (34a) (673 mg, 2,094 mmoli, 64,4 % randament) ca un solid maroniu deschis; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,49 (s, 1H), 7,52 - 7,15 (m, 5H), 4,26 (m, 1H), 3,82 - 3,65 (m, 1H), 3,53 (dd, J = 13,4, 11,3 Hz, 1H), 2,82 (2s, 3H, rotameri), 2,67 - 2,55 (m, 2H), 1,38 (2S, 9H, rotameri); MS (ES+) 344,3 (M+Na), (ES-) 320,3 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 44,0 [0,25, MeOH].
Etapa-2: Prepararea (2R,4S)-(5-((+)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-1-carboxilatului de terţ-butil- (34b)
Reacţia acidului (2R,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-2-carboxilic (34a) (111 mg, 0,347 mmoli), (S)-N-((+)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (31e) (86 mg, 0,347 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (127 mg, 0,513 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 100%) (2R,4S)-2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-1-carboxilat de terţ-butil (34b) (141 mg, 0,203 mmoli, randament 58,7 %) ca un solid; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,66 (2s, 1H, rotameri), 8,73 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,36 - 8,12 (m, 1H), 7,94 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,60 (m, 4H), 7,52 ― 7,19 (m, 4H), 6,34 (s, 1H), 4,57 (m, 1H), 3,96 (s, 2H), 3,02 (2s, 3H, rotameri), 2,95 ― 2,73 (m, 3H), 2,74 ― 2,53 (m, 2H), 1,52 (2s, 9H, rotameri), 1,31 (s, 9H), 1,24 ― 0,94 (m, 1H), 0,88 ― 0,66 (m, 2H), 0,57 ― 0,43 (m, 2H), 0,30 ― -0,06 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,09, -129,22 (rotameri); MS (ES+) 693,7 (M+1), 715,7 (M+Na), (ES-) 691,7 (M-1), 727,7 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 122,60 [0,075, MeOH].
Etapa-3: Prepararea (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamidei (34c)
Reacţia (2R,4S)- 2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-1-carboxilatului de terţ-butil (34b) (131 mg, 0,189 mmoli) în HCl metanolic (1,260 mL, 3,78 mmoli) urmat de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamida (34c) (125 mg, 0,209 mmoli, 111 % randament) ca o sare clorhidrat care s-a utilizat direct ca atare în etapa următoare; MS (ES+) 511,5 (M+Na), (ES-) 523,5 (M+Cl).
Etapa-4: Prepararea (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (34d)
Reacţia (2R,4S)-N-(5-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamidei (34c) (44 mg, 0,074 mmoli) în diclorometan (10 mL) cu 4-izocianat de clorofenil (1n) (9,42 µL, 0,074 mmoli) şi bicarbonat de sodiu conform procedurii raportate în etapa 9 Scheme 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu CMA 80 în cloroform) (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamida (34d) (36 mg, 0,056 mmoli, 76 % randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,41 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,47 (m, 1H), 8,00 ― 7,90 (m, 1H), 7,69 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,62 ― 7,50 (m, 3H), 7,45 (d, J = 5,0 Hz, 3H), 7,41 ― 7,35 (m, 1H), 7,33 ― 7,25 (m, 2H), 7,25 ― 7,18 (m, 1H), 7,18-7,05 (m, 2H), 4,62 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 4,11 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,79 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 2,85 (s, 3H), 2,74 ― 2,57 (m, 2H), 2,44 ― 2,19 (m, 5H), 1,12 ― 0,89 (m, 2H), 0,72 ― 0,51 (m, 1H), 0,42 ― 0,24 (m, 2H), -0,02 ― -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ - 129,42; MS (ES+) 664,5, 665,6 (M+Na), (ES-) 676,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 89,0 [ 0,155, MeOH].
Prepararea (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei
Reacţia (2R,4S)-N-(5-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamidei (34c) (50 mg, 0,084 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (20,79 mg, 0,084 mmoli) utilizând bicarbonat de sodiu ca bază conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 12 g, eluând cu 0-100% CMA-80 în cloroform) (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamida (35a) (36 mg, 0,056 mmoli, randament 66,9 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,41 (s, 1H), 9,21 (s, 1H), 8,47 (dd, J = 4,8, 1,9 Hz, 1H), 8,31 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,92 (m, 2H), 7,82 (dd, J = 9,0, 2,7 Hz, 1H), 7,69 (td, J = 7,7, 1,9 Hz, 1H), 7,54 (dt, J = 8,1, 1,1 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 4,0 Hz, 4H), 7,37 (m, 1H), 7,22 (m, 1H), 7,19 - 7,04 (m, 2H), 4,64 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 4,24 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,89 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 2,84 (s, 3H), 2,61 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 2,43 - 2,24 (m, 4H), 1,12 - 0,95 (m, 2H), 0,68 - 0,53 (m, 1H), 0,38 - 0,26 (m, 2H), -0,02 - -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,95; MS (ES+) 665,5 (M+Na), (ES-) 641,6, 642,3 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 85,30 [ 0,075, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (36d)
Etapa-1: Prepararea acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (36a)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (14b) (6 g, 26 mmoli) cu NaH (6,24 g, 156 mmoli; 60% suspensie în ulei) în THF (300 mL) şi sulfat de dimetil (3,9 g, 31 mmoli) conform procedurii raportate în etapa 1 din Schema 34 a dat acidul (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (36a) (5,82 g, 91 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 4,14 (td, J = 8,9, 3,7 Hz, 1H), 3,98 ― 3,85 (m, 1H), 3,52 (m, 1H), 3,27 ― 3,11 (m, 4H), 2,33 (m, 1H), 2,00 (dt, J = 13,3, 3,8 Hz, 1H), 1,37 (2s, 9H); MS (ES+) 268,4 (M+Na), MS (ES-) 244,3 (M-1), 280,3 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 45,28 [0,265, MeOH].
Etapa-2: Prepararea 2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (36b)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (36a) (95 mg, 0,388 mmoli), (S)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (31f) (151 mg, 0,388 mmoli) în tetrahidrofuran (25 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (96 mg, 0,388 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 100%) 2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilat de (2R,4R)-terţ-butil (36b) (135 mg, 0,219 mmoli, randament 56,5 %) ca un solid incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,43 (2s, 1H, rotameri), 8,61 - 8,45 (m, 1H), 7,89 - 7,66 (m, 2H), 7,33 - 7,23 (m, 2H), 7,15 (t, J = 9,6 Hz, 1H), 7,06 (s, 1H), 5,91 (2s, 1H, rotameri), 4,39 - 4,17 (m, 1H), 4,01 - 3,91 (m, 1H), 3,56 (dd, J = 11,0, 5,2 Hz, 1H), 3,21 (2s, 3H, rotameri), 2,70 - 2,52 (m, 2H), 2,50 - 2,37 (m, 1H), 2,16 - 1,86 (m, 1H), 1,34 (2s, 9H, rotameri), 1,14 (s, 10H), 1,11 - 0,94 (m, 1H), 0,97 - 0,79 (m, 1H), 0,71 - 0,54 (m, 1H), 0,42 - 0,26 (m, 2H), -0,01 - -0,16 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,64, -128,92 rotameri; MS (ES+) 639,5 (M+Na), (ES-) 615,6 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 11,42 [0,07, MeOH].
Etapa-3: Prepararea (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (36c)
Reacţia 2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (36b) (120 mg, 0,195 mmoli) în HCl metanolic 3N (0,973 mL, 2,92 mmoli) urmată de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamida (36c) (100 mg, 0,192 mmoli, randament 98 %) sare clorhidrat care s-a utilizat ca atare pentru etapa următoare; MS: (ES+) 413,5 (M+1), 435,5 (M+Na), (ES-) 447,5 (M+Cl).
Etapa-4: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (36d)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (36c) (95 mg, 0,182 mmoli) în tetrahidrofuran (25 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (40,7 mg, 0,164 mmoli) utilizând ca bază bicarbonatul de sodiu (306 mg, 3,64 mmoli), conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (36d) (30 mg, 0,053 mmoli, randament 29,1 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,42 (s, 1H), 9,14 (s, 1H), 8,53 - 8,42 (m, 1H), 8,30 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,91 (dd, J = 9,8, 2,5 Hz, 2H), 7,81 (dd, J = 9,1, 2,6 Hz, 1H), 7,69 (td, J = 7,7, 1,9 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,17 (m, 2H), 7,08 (m, 1H), 4,57 (dd, J = 9,1, 3,9 Hz, 1H), 4,12 - 3,98 (m, 1H), 3,81 - 3,61 (m, 2H), 3,22 (s, 3H), 2,45 - 2,23 (m, 5H), 2,10 (m, 1H), 1,11 - 0,93 (m, 2H), 0,69 - 0,53 (m, 1H), 0,39 - 0,23 (m, 2H), -0,05 - -0,17 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,86 ; MS (ES+) 567,4, 569,4 (M+1), (ES-) 565,4, 567,4 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 70,7 [0,065, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (37d)
Etapa-1: Prepararea (2R,4R)-2-((5-((+)-1-(((S)-terţ-butilsulfinil)amino)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)carbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de benzil (37a)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(benziloxicarbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (15b) (0,17 g, 0,6 mmoli), (S)-N-((+)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (31e) (0,2 g, 0,5 mmoli) în tetrahidrofuran (5 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (0,15 g, 0,6 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (2R,4R)-2-((5-((+)-1-(((S)-terţ-butilsulfinil)amino)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)carbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilat de benzil (37a) (0,29 g, 86%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,54 (2s, 1H, rotameri), 8,58 ― 8,50 (m, 1H), 7,97 (dd, J = 7,6, 2,3 Hz, 1H), 7,74 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,37 (s, 2H), 7,31 ― 6,99 (m, 7H), 6,16 (s, 1H), 5,16 ― 4,91 (m, 2H), 4,51 ― 4,34 (m, 1H), 4,05 ― 3,91 (m, 1H), 3,74 ― 3,58 (m, 1H), 3,47 ― 3,37 (m, 1H), 3,19 (d, J = 5,3 Hz, 3H), 2,58 (m, 2H), 1,09 (m, 9H, rotameri), 0,64 ― 0,47 (m, 3H), 0,38 ― 0,24 (m, 2H), -0,10 ― -0,25 (m, 2H); MS (ES+) 651,6 (M+1), 673,5 (M+Na), MS (ES-) 685,6 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D= (+) 131,3 [0,23, MeOH].
Etapa 2: Prepararea (2R,4R)-N-(5-(1-(((S)-terţ-butilsulfinil)amino)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (37b)
Debenzilarea prin hidrogenare a (2R,4R)-2-((5-((+)-1-(((S)-terţ-butilsulfinil)amino)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)carbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de benzil (37a) (0,28 g, 0,43 mmoli) în etanol (20 mL), utilizând paladiu pe cărbune 10% drept catalizator conform procedurii raportate în etapa 2 din Schema 13 a dat (2R,4R)-N-(5-(1-(((S)-terţ-butilsulfinil)amino)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamida (37b) (0,21 g, 95% randament) ca un solid cauciucos; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,09 (s, 1H), 8,58 ― 8,49 (m, 1H), 8,32 (dd, J = 7,8, 2,3 Hz, 1H), 7,74 (td, J = 7,8, 1,8 Hz, 1H), 7,31 ― 7,14 (m, 2H), 7,11 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,04 ― 6,96 (m, 1H), 6,14 (s, 1H), 3,91 ― 3,75 (m, 1H), 3,74 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 3,04 ― 2,98 (m, 1H), 2,90 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 2,66 ― 2,54 (m, 5H), 2,18 ― 1,95 (m, 2H), 1,08 (s, 9H), 0,68 ― 0,46 (m, 3H), 0,31 (m, 2H), -0,10 ― -0,25 (m, 2H); MS (ES+) 516,5 (M+1), 539,5 (M+Na), MS (ES-) 515,5 (M-1).
Etapa 3: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-(1-(((S)-terţ-butilsulfinil)amino)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (37c)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-(1-(((S)-terţ-butilsulfinil)amino)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (37b) (0,1 g, 0,19 mmoli) în THF (5 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (0,06 g, 0,23 mmoli) utilizând TEA (50 µL) ca bază conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (2R,4R)-N2-(5-(I-(((S)-terţ-butilsulfinil)amino)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (37c) (0,11 g, 84%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,50 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,53 (dd, J = 4,9, 1,8, Hz, 1H), 8,29 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,96 (dd, J = 7,6, 2,3 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,73 (td, J = 7,8, 1,8 Hz, 1H), 7,26 (m, 1H), 7,22 ― 7,07 (m, 2H), 7,10 - 6,99 (m, 1H), 6,14 (s, 1H), 4,58 (dd, J = 9,1, 3,9 Hz, 1H), 4,03 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 3,72 (m, 2H), 3,21 (s, 3H), 2,63 ― 2,52 (m, 2H), 2,45 ― 2,27 (m, 1H), 2,08 (m, 1H), 1,09 (s, 9H), 0,90 ― 0,78 (m, 2H), 0,64 ― 0,46 (m, 1H), 0,36 ― 0,23 (m, 2H), -0,19 (m, 2H).; MS (ES+) 671,5 (M+1), 693,5 (M+Na), MS (ES-) 669,5 (M-1), 705,5 (M+Cl).
Etapa 4: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (37d)
Reacţia (2R,4R)-N2-(5-(1-(((S)-terţ-butilsulfinil)amino)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (37c) (0,1 g, 0,15 mmoli) în etanol (5 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,12 mL) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (37d) (50 mg, randament 60%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,40 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 9,13 (s, 1H), 8,47 (ddd, J = 4,9, 1,8, 0,9 Hz, 1H), 8,30 (dd, J = 2,6, 0,8 Hz, 1H), 7,90 (dd, J = 8,2, 1,5 Hz, 2H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,69 (td, J = 7,7, 1,9 Hz, 1H), 7,53 (dt, J = 8,1, 1,1 Hz, 1H), 7,23 ― 7,03 (m, 3H), 4,56 (dd, J = 9,2, 3,9 Hz, 1H), 4,11 ― 3,96 (m, 1H), 3,81 ― 3,64 (m, 2H), 3,21 (s, 3H), 2,43 ― 2,20 (m, 4H), 2,09 (m, 1H), 1,02 (m, 2H), 0,71 ― 0,54 (m, 1H), 0,40 ― 0,30 (m, 2H), -0,08 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,01; MS (ES+) 567,5 (M+1), (ES-) 603,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D= (+) 70,7 [0,065, MeOH].
Prepararea (2R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-etil-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (38d)
Etapa 1: Prepararea acidului (2R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-etil-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (38a)
Reacţia acidului (R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-oxopirolidin-2-carboxilic (29a) (0,502 g, 2,19 mmoli) în THF (20 mL) cu 1,0 M soluţie de bromură de etilmagneziu (6,02 mL, 6,02 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 2 din Schema 29 a dat acid (2R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-etil-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (38a) (330 mg, 1,273 mmoli, randament 58,1 %) ca un ulei care s-a utilizat ca atare pentru etapa următoare; MS (ES+) 282,4 (M+Na), 541,6 (2M+Na), (ES-) 258,3 (M-1), 517,6 (2M-1).
Etapa 2: Prepararea 2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-etil-4-hidroxipirolidin-1-carboxilatului de (2R)-terţ-butil (38b)
Reacţia acidului (2R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-etil-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (38a) (300 mg, 1,157 mmoli), (S)-N-((+)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (31e) (451 mg, 1,157 mmoli) în tetrahidrofuran (25 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (402 mg, 1,627 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană 2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-etil-4-hidroxipirolidin-1-carboxilat de (2R)-terţ-butil (38b) (97 mg, 0,154 mmoli, randament 13,29 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,68 (2s, 1H, rotameri), 8,69 - 8,46 (m, 1H), 8,11 (2dd, 1H, rotameri), 7,74 (m, 1H), 7,41 - 6,95 (m, 3H), 6,14 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 5,08 (2s, 1H, rotameri), 4,41 - 4,21 (m, 1H), 3,30 - 3,17 (m, 1H), 2,67 - 2,54 (m, 4H), 2,32 - 2,11 (m, 1H), 1,98 - 1,80 (m, 1H), 1,52 (m, 2H), 1,31 (2s, 9H, rotameri), 1,10 (s, 9H), 0,88 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,57 (m, 3H), 0,38 - 0,26 (m, 2H), 0,05 - -0,28 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,40, -129,65 rotameri; MS (ES+) 631,7 (M+1), 653,7 (M+Na), (ES-) 629,7 (M-1), 665,7 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D= (+) 100,0 [ 0,07, MeOH].
Etapa 3: Prepararea (2R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-etil-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidei (38c)
Reacţia 2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-etil-4-hidroxipirolidin-1-carboxilatului de (2R)-terţ-butil (38b) (87 mg, 0,138 mmoli) în metanol (20 mL) utilizând HCl metanolic 3N (0,919 mL, 2,76 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-etil-4-hidroxipirolidin-2-carboxamida (38c) (69 mg, 0,138 mmoli, 100 % randament) ca o sare clorhidrat, care s-a utilizat ca atare în etapa următoare fără nicio altă purificare; MS (ES+) 449,4 (M+Na), (ES-) 461,2 (M+Cl).
Etapa 4: Prepararea (2R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-etil-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (38d)
Reacţia (2R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-etil-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidei (38c) (65 mg, 0,130 mmoli) în tetrahidrofuran (25 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (29,1 mg, 0,117 mmoli) utilizând ca bază bicarbonat de sodiu conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 12 g, eluând cu 0-100% CMA-80 în cloroform) (2R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-etil-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (38d) (28 mg, 0,048 mmoli, randament 37,0 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,68 (s, 1H), 9,13 (s, 1H), 8,47 (dd, J = 4,7, 1,9 Hz, 1H), 8,29 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 8,08 (dd, J = 7,8, 2,3 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,80 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,70 (m, 1H), 7,53 (m, 1H), 7,25 ― 7,03 (m, 3H), 5,77 (s, 1H), 5,11 (s, 1H), 4,63 ― 4,45 (m, 1H), 3,64 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 3,48 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 2,42 ― 2,15 (m, 4H), 2,01 ― 1,89 (m, 1H), 1,56 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 1,12 ― 0,97 (m, 2H), 0,92 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 0,71 ― 0,52 (m, 1H), 0,40 ― 0,26 (m, 2H), -0,02 ― -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,61; MS (ES+) 581,4 (M+1), 604,5, 606,4 (M+Na), (ES-) 579,4, 581,5 (M-1), 615,5, 616,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D= (+) 67,37 [ 0,19, MeOH].
Prepararea (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (39h)
Etapa-1 Prepararea (E)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)prop-2-en-1-onei (39b)
Reacţia 1-(piridin-4-il)etanonei (39a) (1,516 mL, 13,27 mmoli) în metanol (100 mL) cu ciclopropancarboxaldehidă (1,5 mL, 19,90 mmoli) şi hidroxid de potasiu apos (IN, 2,65 mL, 2,65 mmoli) utilizând reacţia şi procedura de prelucrare aşa cum este raportată în Schema 31 etapa 1 a dat (E)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)prop-2-en-1-ona (39b) (479 mg, 20,85 %); 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,89 ― 8,59 (m, 2H), 7,91 ― 7,71 (m, 2H), 7,19 (d, J = 15,1 Hz, 1H), 6,58 (dd, J = 15,1, 10,4 Hz, 1H), 1,88 ― 1,71 (m, 1H), 1,10 ― 0,96 (m, 2H), 0,87 ― 0,72 (m, 2H).
Etapa-2: Prepararea 3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propan-1-onei (39c)
Reacţia (E)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)prop-2-en-1-onei (39b) (18,35 g, 106 mmoli) în acetonitril (180 mL) şi tributilstanan (60,0 mL, 216 mmoli) utilizând procedura raportată în etapa 2 din Schema 31 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu 0-30% acetat de etil în hexan) 3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propan-1-ona (39c) (3,028 g, 15%) ca un ulei; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 3,14 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,52 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 0,75 (dddd, J = 12,0, 8,1, 7,0, 2,8 Hz, 1H), 0,47 ― 0,28 (m, 2H), 0,14 ― 0,02 (m, 2H).
Etapa-3: Prepararea (-)-N-(3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (39d)
Compusul (39d) s-a preparat din 3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propan-1-onă (39c) (1,8 g, 10,27 mmoli) şi (R)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (1,566 g, 12,84 mmoli) utilizând procedura aşa cum este raportată în etapa 3 din Schema 31 pentru a se obţine (-)-N-(3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39d) (1,838 g, 6,57 mmoli, 63,9 % randament) ca un sirop galben; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,76 ― 8,69 (m, 2H), 7,80 ― 7,73 (m, 2H), 3,49 ― 3,15 (m, 2H), 1,45 (q, J= 7,4 Hz, 2H), 1,24 (s, 9H), 0,84 ― 0,65 (m, 1H), 0,43 ― 0,30 (m, 2H), 0,10 ― -0,03 (m, 2H); MS (ES+) 301,3, (M+Na); (ES-) 277,3 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (-) 27,61 [0,355, MeOH].
Etapa-4: Prepararea (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (39e)
Compusul (39e) s-a preparat din (-)-N-(3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39d) (1,7 g, 6,11 mmoli), utilizând procedura aşa cum este raportată în etapa 4 din Schema 31 pentru a se obţine (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (39e) (1,443 g, 3,7 mmoli, randament 60,7 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,77 ― 8,68 (m, 2H), 7,62 ― 7,53 (m, 2H), 7,15 (dd, J = 11,3, 8,5 Hz, 1H), 7,00 ― 6,94 (m, 1H), 6,77 ― 6,70 (m, 1H), 5,50 (s, 1H), 5,35 (s, 2H), 2,90-2,60 (m, 2H), 1,47-1,27 (m, 1H), 1,38 (s, 9H), 1,25-1,05 (m, 1H), 0,97-0,80 (m, 1H), 0,65-0,55 (m, 2H), 0,32-0,10 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) -137,30; MS (ES+): 390,4 (M+1); Puritate chirală verificată prin efectuarea de HPLC chirală utilizând o coloană AD-H chirală, 1 mL/min, Solvent: 90% Hexan, 10%EtOH, 0,1% TEA, UV = 260 nM, 25 °C (>99,99 ee); Rotaţie optică [α]D = (-) 78,49 [0,265, MeOH].
Etapa-5: Prepararea 2-(5-((-)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1-carboxilatului de (2R,4S)-terţ-butil (39f)
Compusul 39f s-a preparat din acid (2R,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-2-carboxilic (29b) (225 mg, 0,732 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (39e) şi 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (181 mg, 0,732 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 pentru a se obţine 2-(5-((-)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1-carboxilatul de (2R,4S)-terţ-butil (39f) (235 mg, 0,346 mmoli, 47,3 % randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,78 (d, J = 93,3 Hz, 1H), 8,59 ― 8,47 (m, 2H), 8,32 (s, 1H), 8,29 ― 8,06 (m, 1H), 7,51 (dt, J= 6,6, 1,4 Hz, 2H), 7,43 ― 7,07 (m, 6H), 5,99 (2s, 1H, rotameri), 5,51 (m, 1H), 4,44 (m, 1H), 3,68 (m, 2H), 2,78 ― 2,51 (m, 2H), 2,35 ― 2,15 (m, 1H), 1,33 (2s, 9H, rotameri), 1,15 (s, 10H), 0,92 (m, 2H), 0,73 ― 0,57 (m, 1H), 0,42 ― 0,30 (m, 2H), 0,00 ― -0,13 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSOd6) δ -128,66, -130,04 (rotameri); MS (ES+) 679,5 (M+1), 701,5 (M+Na), (ES-) 677,5 (M-1), 713,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 55,55 [ 0,18, MeOH].
Etapa-6: Prepararea (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamidei (39g)
Reacţia 2-(5-((-)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1-carboxilatului de (2R,4S)-terţ-butil (39f) (200 mg, 0,295 mmoli) în metanol (10 mL) cu acid clorhidric (1,964 mL, 5,89 mmoli) a dat după prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamida (39g) (169 mg, 0,289 mmoli, 98 % randament) ca o sare clorhidrat care s-a utilizat ca atare pentru etapa următoare; MS (ES-) 509,4 (M+Cl).
Etapa-7: (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-ch1oropiridin-2-il)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamida (39h)
Reacţia (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamidei (39g) (160 mg, 0,274 mmoli) în tetrahidrofuran (25 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (61,3 mg, 0,247 mmoli) utilizând ca bază bicarbonat de sodiu conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamida (98 mg, 0,156 mmoli, randament 56,9 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,74 (s, 1H), 9,25 (s, 1H), 8,47 - 8,41 (m, 2H), 8,30 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,91 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,81 (dd, J = 8,9, 2,6 Hz, 1H), 7,54 (dt, J = 6,5, 1,3 Hz, 2H), 7,41 - 7,33 (m, 4H), 7,33 - 7,25 (m, 1H), 7,15 (dd, J = 7,3, 1,7 Hz, 2H), 5,95 (s, 1H), 4,80 - 4,65 (m, 1H), 4,00 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 3,90 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 2,68 (dd, J = 13,1, 9,6 Hz, 1H), 2,31 (m, 3H), 2,21 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 1,12 - 0,96 (m, 2H), 0,70 - 0,53 (m, 1H), 0,45 - 0,26 (m, 2H), -0,01 - -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,43; MS (ES+) 629,4 (M+1), 651,4, 653,4 (M+Na), (ES-) 627,4, 629,4 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 7,209 [0,265, MeOH]; Analiză calculată pentru C34H34ClFN6O3,0,5H2O; C, 63,99; H, 5,53; N, 13,17; Găsit: C, 64,02; H, 5,63; N, 12,86.
Prepararea (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (40a)
Reacţia (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamidei (39g) (250 mg, 0,428 mmoli) în diclorometan (20 mL) cu 4-izocianat de clorofenil (1n) (0,049 mL, 0,385 mmoli) şi bicarbonat de sodiu (719 mg, 8,56 mmoli) conform procedurii raportate în etapa 9 Scheme 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu CMA 80 în cloroform) (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamida (40a) (134 mg, 0,213 mmoli, 49,8 % randament) ca un solid alb-murdar; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,69 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,49 - 8,37 (m, 2H), 8,16 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,61 - 7,53 (m, 4H), 7,43 - 7,34 (m, 4H), 7,33 - 7,25 (m, 3H), 7,17 (s, 1H), 7,14 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 5,97 (s, 1H), 4,68 (dd, J = 9,7, 2,7 Hz, 1H), 3,93 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,83 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,72 (dd, J = 13,1, 9,8 Hz, 1H), 2,39 - 2,10 (m, 5H), 1,12 - 0,97 (m, 2H), 0,73 - 0,56 (m, 1H), 0,43 - 0,28 (m, 2H), -0,00 - -0,10 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,82; MS (ES-), 626,5, 628,5 (M-1); Analiză calculată pentru C35H35ClFN5O3,0,5H2O: C, 65,98; H, 5,70; N, 10,99; Găsit: C, 65,94; H, 5,86; N, 10,69; Rotaţie optică [α]D = (+) 65,14 [0,175, MeOH].
Prepararea (2R,4S)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(metilamino)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (41a)
La o soluţie de (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidă (39h) (100 mg, 0,159 mmoli) în metanol (10 mL) s-a adăugat acid acetic (1 picătură) paraformaldehidă (23,86 mg, 0,795 mmoli), borohidrură de sodiu (30,1 mg, 0,795 mmoli) şi s-a agitat la temperatura camerei timp de 8 h. La reacţie s-a adăugat paraformaldehidă suplimentară (23,86 mg, 0,795 mmoli) şi borohidrură de sodiu (30,1 mg, 0,795 mmoli) şi s-a agitat la temperatura camerei peste noapte. Reacţia s-a concentrat în vid şi reziduul obţinut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu CMA 80 în cloroform) pentru a se obţine ((2R,4S)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(metilamino)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamida (41a) (74 mg, 0,115 mmoli, 72,4 % randament) bază liberă ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,73 (s, 1H), 9,25 (s, 1H), 8,50 - 8,41 (m, 2H), 8,34 - 8,27 (m, 1H), 8,10 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,91 (dd, J = 9,1, 0,8 Hz, 1H), 7,82 (dd, J = 9,0, 2,7 Hz, 1H), 7,59 - 7,48 (m, 2H), 7,43 - 7,34 (m, 3H), 7,35 - 7,26 (m, 2H), 7,16 (dd, J = 10,5, 8,8 Hz, 1H), 7,11 - 7,00 (m, 1H), 5,94 (s, 1H), 4,71 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 4,10 - 3,85 (m, 2H), 2,75 - 2,63 (m, 1H), 2,25 (m, 3H), 1,94 (s, 4H, N-Me şi NH), 1,05 - 0,74 (m, 2H), 0,70 - 0,56 (m, 1H), 0,40 - 0,24 (m, 2H), -0,06 - -0,18 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ - 129,21; MS (ES+) 643,3 (M+1), 665,3, 667,3 (M+Na), (ES-) 641,4, 643,3 (M-1). Compusul 41a (100 mg, 0,159 mmoli) ca bază liberă s-a convertit la sarea de HCl în metanol (10 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,101 mL, 0,303 mmoli) pentru a se obţine prin liofilizare (2R,4S)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-l-(metilamino)-l-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamida (41a) (64 mg, 0,089 mmoli, randament 88 %) ca o pulbere albă; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,31 (s, 2H), 9,96 (s, 1H), 9,29 (s, 1H), 8,80 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 8,31 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 8,17 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,95 - 7,77 (m, 2H), 7,66 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 7,53 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,49 - 7,17 (m, 5H), 4,87 - 4,58 (m, 1H), 4,11 - 3,84 (m, 2H), 2,78 - 2,54 (m, 3H), 2,47 - 2,13 (m, 6H), 1,19 - 0,98 (m, 1H), 0,96 - 0,77 (m, 1H), 0,76 - 0,61 (m, 1H), 0,45 - 0,30 (m, 2H), -0,00 - -0,10 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -124,81; MS (ES+) 665,4, 667,4 (M+Na), (ES-) 641,5, 643,5 (M-1), 677,3, 679,4 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 6,0 [0,19, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-(3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (42l)
Etapa-1: Prepararea 3-ciclopropilacrilatului de (E)-etil (42b)
La o soluţie de 1-(trifenilfosforaniliden)pentan-2-onă (42a) (994 g, 2853 mmoli) în diclorometan (3000 mL) s-a adăugat ciclopropancarbaldehidă (200 g, 2853 mmoli) şi s-a agitat la temperatura camerei timp de 20 h. Amestecul de reacţie s-a concentrat la 1/3 volum s-a diluat cu hexan (1000 mL) şi s-a concentrat în vid pentru a se îndepărta diclorometanul. Amestecul de reacţie s-a diluat cu hexan (3000 mL) s-a agitat timp de 10 min. Solidul de oxid trifenilfospină obţinut s-a îndepărtat prin filtrare cu spălări cu hexan (2 x 400 mL). Filtratul s-a concentrat pentru a se obţine 3-ciclopropilacrilat de (E)-etil (42b) (410 g, 2925 mmoli, randament 103 %) ca un ulei incolor, care s-a utilizat ca atare pentru etapa următoare fără purificare; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 6,38 (dd, J = 15,4, 10,2 Hz, 1H), 5,93 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 4,08 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 1,64 (dtt, J = 10,2, 8,0, 4,6 Hz, 1H), 1,19 (td, J= 7,1, 1,0 Hz, 3H), 0,98 ― 0,82 (m, 2H), 0,75 ― 0,62 (m, 2H).
Etapa-2: Prepararea 3-ciclopropilpropanoatului de etil (42c)
La o soluţie 3-ciclopropilacrilat de (E)-etil (42b) (290 g, 2069 mmoli) în metanol (2000 mL) răcit la 5 °C s-a adăugat clorură de cobalt (II) hexahidrat (24,61 g, 103 mmoli) urmat de adiţia în picături a unei soluţii de tetrahidroborat de sodiu (157 g, 4138 mmoli) în DMF (500 mL) ca atare la o astfel de viteză încât temperatura internă nu a fost lăsată să crească peste 10 °C. Amestecul de reacţie s-a agitat timp de 1h la 5 °C, s-a turnat în apă (5000 mL) şi s-a agitat timp de 15 min. Soluţia sub formă de suspensie neagră rezultată s-a filtrat pe un dop de celite, s-a spălat cu diclorometan (3 x 800 mL). Stratul apos s-a separat şi s-a extras cu diclorometan (2 x 600 mL). Straturile de diclorometan s-au combinat s-au spălat cu apă (2 x 1500 mL), saramură, s-au uscat pe MgSO4, s-au filtrat şi s-au concentrat sub vid cu temperatura băii sub 40 °C pentru a se obţine 3-ciclopropilpropanoat de etil (42c) (260 g, randament 88 %) ca un lichid incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 4,03 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,33 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 1,41 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 1,16 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 0,75 ― 0,59 (m, 1H), 0,40 ― 0,31 (m, 2H), 0,06 ― -0,06 (m, 2H).
Etapa-3: Prepararea 3-ciclopropil-N-metoxi-N-metilpropanamidei (42d)
La o soluţie de 3-ciclopropilpropanoat de etil (42c) (260 g, 1828 mmoli) în THF (2000 mL) răcită la -10 °C s-a adăugat clorhidrat de N,O-dimetilhidroxilamină (268 g, 2743 mmoli), urmat de adiţia în picături de clorură izopropilmagneziu (2743 mL, 5485 mmoli, 2 M în THF). Amestecul s-a agitat la -10 °C timp de 2 h, s-a stins cu soluţie sat. de NH4Cl (4000 mL) şi s-a lăsat să se încălzească la temperatura camerei. Stratul de THF s-a separat şi stratul apos s-a extras cu EtOAc (2 x 1000 mL). Straturile organice s-au combinat s-au spălat cu saramură, s-au uscat pe MgSO4, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid pentru a se obţine 3-ciclopropil-N-metoxi-N-metilpropanamida (42d) (240 g, 1527 mmoli, randament 83 %) ca un lichid portocaliu; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 3,66 (s, 3H), 3,07 (s, 3H), 2,44 (t, J= 7,6 Hz, 2H), 1,39 (q, J= 7,3 Hz, 2H), 0,76 ― 0,62 (m, 1H), 0,42 ― 0,31 (m, 2H), 0,08 ― -0,09 (m, 2H).
Etapa-4: Prepararea 1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropan-1-onei (42e)
La o soluţie de 3-ciclopropil-N-metoxi-N-metilpropanamidă (42d) (240 g, 1527 mmoli) în THF (2000 mL) răcită la 5°C s-a adăugat în picături o soluţie proaspăt preparată de bromură de (3-(bis(trimetilsilil)amino)-4-fluorofenil)magneziu (1c) (1908 mL, 1527 mmoli, 1 M în THF) menţinând temperatura internă în jur de 5°C în timpul adiţiei. Reacţia s-a agitat la 5°C timp de 2 h, s-a stins cu HCl 3 N (1000 mL) şi s-a agitat timp de 2 h. Amestecul s-a alcalinizat cu NaHCO3 solid şi s-a extras cu acetat de etil (2 x 500 mL). Straturile organice combinate s-au spălat cu saramură, s-au uscat pe MgSO4, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid pentru a se obţine 42e brut. Materialul brut s-a dizolvat izopropanol (150 mL) şi s-a agitat peste noapte. Solidul obţinut s-a colectat prin filtrare, s-a spălat cu izopropanol şi s-a uscat pentru a se obţine 1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropan-1-ona (42e) (90 g, 28,46% prima recoltă) ca un solid alb. Filtratul s-a concentrat, s-a ţinut la temperatura camerei timp de 6 h şi solidul obţinut s-a colectat prin filtrare pentru a se obţine 1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropan-1-ona (42e) (50 g, 15,81%, a doua recoltă) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,38 (dd, J = 8,9, 2,2 Hz, 1H), 7,18 (ddd, J = 8,4, 4,7, 2,2 Hz, 1H), 7,09 (dd, J = 11,1, 8,4 Hz, 1H), 5,41 (s, 2H), 2,98 (t, J= 7,3 Hz, 2H), 1,48 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 0,82 ― 0,65 (m, 1H), 0,41 ― 0,33 (m, 2H), 0,10 ― -0,02 (m, 2H); MS (ES+) 208,2 (M+1), (ES-) 206,2 (M-1); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,24;
Etapa-5: Prepararea 1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropan-1-olului (42f)
La o soluţie de 1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropan-1-onă (42e) (13,63 g, 65,8 mmoli) în THF (150 mL) şi Metanol (300 mL) s-a adăugat la 0 oC borohidrură de sodiu (5,08 g, 132 mmoli) şi s-a agitat la 0 oC timp de 1 h. Amestecul de reacţie s-a lăsat să se încălzească peste noapte la temperatura camerei. Amestecul de reacţie s-a diluat cu acetat de etil (800 mL), s-a neutralizat cu acid acetic, s-a spălat cu apă (2 x 300 mL), saramură (300 mL), s-a uscat pe MgSO4, s-a filtrat şi s-a concentrat în vid. Reziduul s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană [silicagel, eluând cu hexani/ acetat de etil (1:0 la 4:1)] pentru a se obţine 1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropan-1-ol (42f) (11,47 g, 53,8 mmoli, randament 83%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 6,86 (dd, J = 11,5, 8,2 Hz, 1H), 6,72 (dd, J = 9,1, 2,1 Hz, 1H), 6,42 (ddd, J = 8,3, 4,5, 2,1 Hz, 1H), 5,03 (s, 2H), 4,98 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 4,40 ― 4,30 (m, 1H), 1,71 ― 1,48 (m, 2H), 1,26 ― 1,01 (m, 2H), 0,73 ― 0,54 (m, 1H), 0,45 ― 0,24 (m, 2H), 0,02 ― -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO) δ -138,16; MS (ES+) 210,1 (M+1); (ES-) 208,1 (M-1)
Etapa-6: Prepararea 2-(5-(3-ciclopropil-1-hidroxipropil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (42g)
Compusul 42g s-a preparat din 1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropan-1-ol (42f) (700 mg, 3,35 mmoli), acid (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (36a) (820 mg, 3,35 mmoli) şi 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (827 mg, 3,35 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 pentru a se obţine 2-(5-(3-ciclopropil-1-hidroxipropil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilat de (2R,4R)-terţ-butil (42g) (1,273 g, 2,92 mmoli, randament 87 %) ca un sirop incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,42 (2s, 1H, rotameri), 7,87 (dd, J = 35,9, 7,7 Hz, 1H, rotameri), 7,17 (dd, J = 10,8, 8,4 Hz, 1H), 7,06 (s, 1H), 5,19 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 4,49 (q, J= 5,9 Hz, 1H), 4,29 (m, 1H), 3,99 (m, 1H), 3,59 (dd, J = 11,0, 5,5 Hz, 1H), 3,34-3,30 (m, 1H), 3,22 (2s, 3H, rotameri), 2,45 ― 2,25 (m, 1H), 2,19 ― 1,89 (m, 1H), 1,77 ― 1,51 (m, 2H), 1,36 (2s, 9H, rotameri ), 1,26 ― 1,05 (m, 2H), 0,74 ― 0,53 (m, 1H), 0,46 ― 0,22 (m, 2H), -0,011- -0,098 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,81, -130,11 rotameri.
Etapa-7: Prepararea 2-(5-(1-bromo-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (42h)
La o soluţie de trifenilfosfină (451 mg, 1,718 mmoli) în diclorometan (15 mL) la 0 °C s-a adăugat brom (70,8 µL, 1,374 mmoli) şi s-a agitat timp de 15 min. La reacţie s-a adăugat la 0 °C o soluţie preamestecată conţinând 2-(5-(3-ciclopropil-1-hidroxipropil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilat de (2R,4R)-terţ-butil (42g) (300 mg, 0,687 mmoli) şi imidazol (117 mg, 1,718 mmoli) în diclorometan (15 mL). Reacţia s-a lăsat să se încălzească la temperatura camerei pe o perioadă de 1 h şi s-a concentrat în vid. Reziduul obţinut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu acetat de etil în hexani 20 la 30%) pentru a se obţine 2-(5-(1-bromo-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilat de (2R,4R)-terţ-butil (42h) (279 mg, 0,559 mmoli, randament 81 %) ca un semisolid maroniu deschis; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,56 (2s, 1H, rotameri), 8,05 (2m, 1H, rotameri), 7,37 - 7,04 (m, 2H), 5,30 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 4,32 (m, 1H), 4,07 - 3,90 (m, 1H), 3,59 (dd, J = 11,1, 5,4 Hz, 1H), 3,43 - 3,28 (m, 1H), 3,23 (2s, 3H, rotameri), 2,62 - 2,23 (m, 2H), 2,20 - 1,89 (m, 1H), 1,37 (2s, 9H, rotameri), 1,30 - 1,02 (m, 3H), 0,79 - 0,63 (m, 1H), 0,48 - 0,29 (m, 2H), 0,03 --0,049 (m, 2H). 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,1 rotameri. MS (ES+) 499,46, 501,47 (M+1), 521,45, 523,46 (M+Na), (ES-) 497,41, 499,37 (M-1).
Etapa-8: Prepararea 2-(5-(3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (42j)
La o soluţie agitată de piridin-2-ol (42i) (252 mg, 2,65 mmoli) în acetonitril (25 mL) s-a adăugat carbonat de potasiu (381 mg, 2,76 mmoli), s-a încălzit la reflux timp de 1 h şi s-a răcit la temperatura camerei. La amestecul de reacţie s-a adăugat o soluţie de 2-(5-(1-bromo-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilat de (2R,4R)-terţ-butil (42h) (265 mg, 0,531 mmoli) în acetonitril (15 mL) şi s-a încălzit peste noapte la reflux. Amestecul de reacţie s-a concentrat în vid şi reziduul s-a suspendat în apă (25 mL), s-a extras cu acetat de etil (3 x 50 mL). Straturile de acetat de etil s-au combinat, s-au spălat cu apă (2 x 25 mL), saramură (25 mL), s-au uscat şi s-au concentrat în vid. Reziduul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu un amestec de acetat de etil şi metanol 9:1 în hexani 0 la 60%) pentru a se obţine 2-(5-(3 -ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatul de (2R,4R)-terţ-butil (42j) (120 mg, 0,234 mmoli, randament 44,0 %) ca un solid alb-murdar; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,55 (2s, 1H, rotameri), 7,79 (s, 1H, rotameri), 7,62 (s, 1H), 7,42 - 7,31 (m, 1H), 7,25 (dd, J = 10,5, 8,6 Hz, 1H), 7,18 (bs, 1H), 6,39 (dd, J = 9,2, 1,4 Hz, 1H), 6,23 (tt, J = 6,7, 1,6 Hz, 1H), 6,06 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 4,27 (m, 1H), 3,97 (m, 1H), 3,58 (m, 1H), 3,45 - 3,23 (m, 1H), 3,21 (2s, 3H, rotameri), 2,61 - 2,23 (m, 1H), 2,23 - 2,08 (m, 2H), 2,00 - 1,83 (m, 1H), 1,34 (2s, 9H, rotameri), 1,17 - 0,96 (m, 2H), 0,79 - 0,61 (m, 1H), 0,48 - 0,28 (m, 2H), 0,10 - -0,10 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,20, -127,58 rotameri; MS (ES+) 514,6 (M+1), 536,6 (M+Na), (ES-) 512,5 (M-1), 548,6 (M+Cl).
Etapa-9: Prepararea (2R,4R)-N-(5-(3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (42k)
Compusul 42k s-a preparat din 2-(5-(3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilat de (2R,4R)-terţ-butil (42j) (110 mg, 0,214) utilizând HCl 3N în metanol (0,714 mL, 2,142 mmoli) conform procedurii raportate în etapa 6 din Schema 4 pentru a furniza clorhidrat de (2R,4R)-N-(5-(3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidă (42k) (96 mg, 0,213 mmoli, randament 100 %) ca un solid maroniu deschis; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,46 (s, 1H), 10,08 (s, 1H), 8,79 (s, 1H), 7,89 - 7,56 (m, 2H), 7,50 - 7,11 (m, 2H), 6,40 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 6,25 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,07 (s, 1H), 4,49 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 4,09 (s, 1H), 3,39 (s, 1H), 3,35 - 3,21 (m, 1H), 3,19 (2s, 3H doi diastereomeri), 2,64 - 2,51 (m, 1H), 2,31 - 2,15 (m, 4H), 1,25 - 0,93 (m, 2H), 0,79 - 0,61 (m, 1H), 0,49 - 0,28 (m, 2H), 0,07 - -0,10 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -124,71, -124,73 (diastereomeri); MS (ES+) 414,5 (M+1), 436,5 (M+Na), (ES-) 4112,5 (M-1), 448,5 (M+Cl).
Etapa-10: Prepararea (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-(3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (42l)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-(3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (42k) (96 mg, 0,213 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (80 mg, 0,320 mmoli) utilizând ca bază bicarbonat de sodiu apos 1 N (4,27 mL, 4,27 mmoli), conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-(3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (42i) (113 mg, 0,199 mmoli, randament 93 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,55 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,30 (dd, J = 2,6, 0,7 Hz, 1H), 7,90 (dd, J = 9,1, 0,8 Hz, 1H), 7,87 - 7,77 (m, 2H), 7,65 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 7,35 (ddd, J = 8,8, 6,5, 2,0 Hz, 1H), 7,29 - 7,12 (m, 2H), 6,38 (dd, J = 9,2, 1,3 Hz, 1H), 6,22 (t, J = 6,7 Hz, 1H), 6,05 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,59 (dd, J = 9,2, 3,8 Hz, 1H), 4,08 - 3,97 (m, 1H), 3,82 - 3,60 (m, 2H), 3,22 (2s, 3H, diastereomeri), 2,42 - 2,32 (m, 1H), 2,29 - 2,04 (m, 3H), 1,18 - 0,93 (m, 2H), 0,78 - 0,62 (m, 1H), 0,44 - 0,29 (m, 2H), 0,04 - -0,11 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,35; MS (ES+) 568,6, 570,6 (M+1), 590,5, 592,5 (M+Na), (ES-) 566,5, 568,5 (M-1); IR (KBr) 3420, 3077, 2998, 2932, 1659, 1520 cm-1; Analiză calculată pentru C29H31ClFN504,0,5H2O: C, 60,36; H, 5,59; N, 12,14; Găsit: C, 60,76; H, 5,66; N, 11,82.
Prepararea ((2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (43m)
Etapa-1: Prepararea (S)(+)-N-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (43a)
Compusul (43a) s-a preparat din 1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropan-1-onă (42e) (100,865 g, 487 mmoli), (S)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (86 g, 681 mmoli) şi tetraizopropoxititan (287 mL, 973 mmoli) utilizând procedura aşa cum este raportată în etapa 3 din Schema 31 pentru a se obţine (S)(+)-N-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (43a) (64 g, 206 mmoli, randament 42,4 %) ca un solid maroniu deschis; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,33 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 5,39 (s, 2H), 3,33 - 3,05 (m, 2H), 1,54 - 1,37 (m, 2H), 1,21 (s, 9H), 0,85 - 0,63 (m, 1H), 0,46 - 0,32 (m, 2H), 0,15 - 0,02 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ - 129,79; MS (ES+) 311,4 (M+1), 333,4 (M+Na), (ES-) 309,4 (M-1), 345,3 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 20,0 [0,18, MeOH].
Etapa-2: Prepararea (S)-N-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (43b)
La o soluţie de (S)(+)-N-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (43a) (64 g, 206 mmoli) în tetrahidrofuran (1,5 L) răcită la - 78 °C s-a adăugat trietilborhidrură de litiu (618 mL, 618 mmoli) lent pe o perioadă de 2 h menţinând temperatura de reacţie sub -75 °C. Reacţia s-a agitat la -78 °C timp de 3 h şi s-a lăsat să se încălzească la temperatura camerei peste noapte. Amestecul de reacţie s-a răcit la 0 °C şi s-a stins cu NH4Cl apos saturat (600 mL). Straturile s-au separat şi stratul apos s-a extras cu acetat de etil (2 x 1000 mL). Straturile organice combinate s-au spălat cu apă (2 x 1000 mL), saramură (500 mL), s-au uscat pe MgSO4 s-au filtrat şi s-au concentrat în vid pentru a se obţine (S)-N-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (43b) (127 g, 203 mmoli, randament 99 %) care s-a utilizat fără purificare în continuare; MS (ES+) 313,4 (M+1), 335,4 (M+Na), (ES-) 311,4 (M-1), 347,3 (M+Cl).
Etapa-3: Prepararea 5-((+)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil) -2-fluorofenilcarbamatului de metil (43c)
La o soluţie bifazică de (S)-N-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (43b) (127 g, 203 mmoli) în acetat de etil (635 mL) şi NaHCO3 apos saturat (635 mL) s-a adăugat cloroformiat de metil (23,61 mL, 305 mmoli) şi s-a agitat energic, peste noapte, la temperatura camerei. Straturile s-au separat şi stratul apos s-a extras cu acetat de etil (2 x 1L). Straturile organice combinate s-au spălat cu saramură, s-au uscat, s-au filtrat, s-au concentrat în vid şi s-au purificat prin cromatografie pentru a se obţine 5-((+)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamat de metil (43c) (75,344 g, 203 mmoli, randament 100 %) ca un solid cauciucos; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,29 (s, 1H), 7,56 (dd, J = 7,9, 2,2 Hz, 1H), 7,15 (dd, J = 10,6, 8,4 Hz, 1H), 7,05 (ddd, J = 8,5, 4,8, 2,2 Hz, 1H), 5,31 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,28 - 4,09 (m, 1H), 3,65 (s, 3H), 2,06 - 1,88 (m, 1H), 1,78 - 1,61 (m, 1H), 1,25 - 1,11 (m, 1H), 1,06 (s, 9H), 1,06 - 0,88 (m, 1H), 0,74 - 0,55 (m, 1H), 0,42 - 0,29 (m, 2H), -0,01 - -0,09 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,77; MS (ES+) 371,5 (M+1), 393,5 (M+Na), (ES-) 369,4 (M-1), 405,4 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 74,4 [0,18, MeOH].
Etapa-4: Prepararea 5-(1-amino-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenilcarbamatului de (-)-metil (43d)
La o soluţie de 5-((+)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenilcarbamat de metil (43c) (75 g, 202 mmoli) în metanol (1000 mL) s-a adăugat HCl 3M în Metanol (337 mL, 1012 mmoli) s-a agitat timp de 30 min şi s-a concentrat în vid la sec. Reziduul s-a dizolvat în apă (500 mL) s-a alcalinizat cu bicarbonat de sodiu saturat şi s-a extras cu acetat de etil (3 x 1500 mL). Straturile organice combinate s-au spălat cu apă (2 x 300 mL), saramură (500 mL), s-au uscat, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid pentru a se obţine 5-(1-amino-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenilcarbamat de (-)-metil (43d) (63,5 g, 238 mmoli, randament 118 %) ca un sirop gros; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,26 (s, 1H), 7,55 (dd, J = 8,0, 2,0 Hz, 1H), 7,20 - 7,06 (m, 1H), 3,77 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 3,65 (s, 3H), 3,50 - 3,14 (m, 2H), 2,50 - 2,28 (m, 1H), 1,60 (m, 2H), 1,24 - 0,94 (m, 2H), 0,72 - 0,53 (m, 1H), 0,41 - 0,27 (m, 2H), -0,02 - -0,11 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,37; MS (ES+) 267,4 (M+1), (ES-) 265,3 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (-) 3,0 [0,2, MeOH].
Etapa-5: Prepararea 5-(3-ciclopropil-1-(2,6-dioxopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenilcarbamatului de (+)-metil (43f)
La o soluţie de 5-(1-amino-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenilcarbamat de (-)-metil (43d) (63 g, 237 mmoli) în diclorometan (1000 mL) s-a adăugat dihidro-2H-piran-2,6(3H)-dionă (43e) (29,7 g, 260 mmoli) la temperatura camerei şi s-a agitat timp de 30 min. La reacţie s-a adăugat clorură de acetil (336 mL, 4731 mmoli) s-a încălzit la reflux 2 h şi s-a concentrat în vid la sec. Solidul separat s-a (greutate brută 100 g) cristalizat din izopropanol (250 mL) pentru a se obţine 5-(3-ciclopropil-1-(2,6-dioxopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenilcarbamat de (+)-metil (43f) (51,5 g, 142 mmoli, randament 60,1 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,29 (s, 1H), 7,65 - 7,41 (m, 1H), 7,19 - 6,86 (m, 2H), 5,71 (dd, J = 9,2, 6,5 Hz, 1H), 3,65 (s, 3H), 2,61 (qd, J = 7,6, 7,0, 3,2 Hz, 4H), 2,42 - 2,11 (m, 2H), 1,81 (p, J = 6,5 Hz, 2H), 1,22 - 0,99 (m, 2H), 0,76 - 0,56 (m, 1H), 0,44 - 0,28 (m, 2H), 0,11 - -0,12 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,82; MS (ES+) 363,5 (M+1), 385,5 (M+Na), (ES-) 361,5; Rotaţie optică [α]D = (+) 101,9 [0,21, MeOH].
Etapa-6: Prepararea 5-(3-ciclopropil-1-(2-hidroxi-6-oxopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenilcarbamatului de metil (43g)
La o soluţie de 5-(3-ciclopropil-1-(2,6-dioxopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenilcarbamat de (+)-metil (43f) (51 g, 141 mmoli) în diclorometan (1407 mL) la -78 °C s-a adăugat hidrură diizobutilaluminiu (422 mL, 422 mmoli) şi s-a agitat la -78 °C timp de 1 h. Reacţia s-a stins cu metanol (30 mL), tartarat de sodiu potasiu apos saturat (1L) şi s-a lăsat la 0 °C. Suspensia s-a agitat timp de 2 h, straturile s-au separat şi stratul apos s-a extras cu diclorometan (2 x 500 mL). Straturile organice combinate s-au spălat cu apă (2 x 500 mL), saramură (200 mL) s-au uscat, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid pentru a se obţine 5-(3-ciclopropil-1-(2-hidroxi-6-oxopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenilcarbamat de metil (43g) (51,3 g, 141 mmoli, randament 100 %) care s-a utilizat ca atare în etapa următoare fără purificare; MS (ES-) 363,5 (M-1).
Etapa-7: Prepararea 5-(3-ciclopropil-1-(2-oxo-3,4-dihidropiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilcarbamatului de (+)-metil (43h)
La o soluţie agitată de 5-(3-ciclopropil-1-(2-hidroxi-6-oxopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenilcarbamat de metil (43g) (52 g, 143 mmoli) în diclorometan (1586 mL) s-a adăugat trietilamină (119 mL, 856 mmoli), s-a răcit la 0 °C şi s-a adăugat clorură de metansulfonil (22,24 mL, 285 mmoli). Reacţia s-a agitat la temperatura camerei peste noapte, s-a diluat cu diclorometan (100 mL) şi apă (500 mL). Straturile s-au separat şi stratul apos s-a extras cu diclorometan (2 x 500 mL). Straturile organice s-au combinat s-au spălat cu apă (2 x 250 mL), saramură (250 mL), s-au uscat, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid. Reziduul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu acetat de etil în hexani 0 la 100%) pentru a se obţine 5-(3-ciclopropil-1-(2-oxo-3,4-dihidropiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilcarbamat de (+)-metil (43h) (51,6 g, 149 mmoli, randament 104 %) ca un sirop incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,35 (s, 1H), 7,66 - 7,50 (m, 1H), 7,18 (dd, J = 10,7, 8,5 Hz, 1H), 7,06 (m, 1H), 6,15 (dt, J = 7,9, 1,6 Hz, 1H), 5,64 (dd, J = 9,8, 6,3 Hz, 1H), 5,17 (dt, J = 8,2, 4,4 Hz, 1H), 3,66 (s, 4H, Me, NH), 2,50 - 2,36 (m, 2H), 2,26 - 2,14 (m, 1H), 2,06 - 1,87 (m, 1H), 1,43 (m, 1H), 1,28 - 0,99 (m, 2H), 0,72 (m, 1H), 0,44 - 0,30 (m, 2H), 0,11 - -0,13 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,08; MS (ES+) 369,5 (M+Na), (ES-) 345,4 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 123,9 [0,255, MeOH].
Etapa-8: Prepararea 5-(3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilcarbamatului de (+)-metil (43i)
La o soluţie agitată 5-(3-ciclopropil-1-(2-oxo-3,4-dihidropiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilcarbamat de (+)-metil (43h) (5,95 g, 17,18 mmoli) în diclorometan (200 mL) s-a adăugat dioxid de mangan (7,47 g, 86 mmoli) şi s-a încălzit la reflux timp de 10 h. S-a adăugat dioxid de mangan suplimentar (7,47 g, 86 mmoli) în 7 rate pe o perioadă de 72 h. Amestecul de reacţie s-a filtrat s-a spălat cu diclorometan şi s-a concentrat în vid. Reziduul brut obţinut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu acetat de etil în hexani 0 la 100%) pentru a se obţine 5-(3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilcarbamat de (+)-metil (43i) (2,962 g, 8,60 mmoli, 50,1 % randament) ca un ulei negru uşor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,40 (s, 1H), 7,75 - 7,59 (m, 2H), 7,38 (ddd, J = 8,8, 6,5, 2,0 Hz, 1H), 7,28 - 7,14 (m, 2H), 6,45 - 6,37 (m, 1H), 6,25 (td, J = 6,7, 1,5 Hz, 1H), 6,08 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 3,67 (s, 3H), 2,22 (q, J = 7,7 Hz, 2H), 1,28 - 0,93 (m, 2H), 0,84 - 0,62 (m, 1H), 0,47 - 0,31 (m, 2H), 0,11 - -0,13 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -125,29; MS (ES+) 345,4 (M+1), 367,4 (M+Na), (ES-) 343,4 (M-1), 379,3 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 240,0 [0,05, MeOH].
Etapa-9: Prepararea (+)-1-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropil)piridin-2(1H)-onei (43j)
La o soluţie 5-(3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilcarbamat de (+)-metil (43i) (2,9 g, 8,42 mmoli) în metanol (75 mL) s-a adăugat hidroxid de sodiu apos (14,03 mL, 84 mmoli, 6N), s-a încălzit la reflux timp de 10 h şi s-a concentrat în vid. Reziduul s-a diluat cu apă (200 mL) s-a extras cu acetat de etil (3 x 200 mL). Straturile organice s-au combinat, s-au spălat cu apă (2 x 100 mL), saramură (100 mL), s-au uscat, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid. Reziduul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu acetat de etil în hexani 0 la 60 la 100%) pentru a se obţine (+)-1-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropil)piridin-2(1H)-ona (43j) (2,173 g, 7,59 mmoli, randament 90 %) ca un sirop; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,58 (dd, J = 6,9, 2,0 Hz, 1H), 7,35 (ddd, J = 8,8, 6,5, 2,0 Hz, 1H), 6,94 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,75 (dd, J = 8,7, 2,3 Hz, 1H), 6,53 (ddd, J = 8,4, 4,3, 2,3 Hz, 1H), 6,39 (dd, J = 9,1, 1,3 Hz, 1H), 6,21 (td, J = 6,7, 1,5 Hz, 1H), 5,99 (dd, J = 9,1, 7,0 Hz, 1H), 5,19 (s, 2H), 2,23 - 2,03 (m, 2H), 1,11 (m, 1H), 0,99 (m, 1H), 0,79 - 0,62 (m, 1H), 0,46 - 0,28 (m, 2H), 0,08 - -0,12 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -136,31; MS (ES+) 287,4 (M+1), 309,4 (M+Na), 573,7 (2M+1), 595,7 (2M+Na), (ES-) 285,3 (M-1), 321,3 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 296,25 [0,16, MeOH].
Etapa-10: Prepararea 2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (43k)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (36a) (158 mg, 0,513 mmoli), (+)-1-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropil)piridin-2(1H)-onei (43j) (286 mg, 1,0 mmoli) în tetrahidrofuran (20 mL) cu 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (247 mg, 1,0 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu acetat de etil în hexani 0 la 100%) 2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1 (2H)-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilat de (2R,4R)-terţ-butil (43k) (462 mg, 0,900 mmoli, 90 % randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,51 (2s, 1H, rotameri), 7,87 (m, 1H), 7,71 - 7,56 (m, 1H), 7,36 (ddd, J = 8,8, 6,5, 2,0 Hz, 1H), 7,25 (dd, J = 10,5, 8,5 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,39 (dd, J = 9,1, 1,4 Hz, 1H), 6,23 (td, J = 6,7, 1,4 Hz, 1H), 6,07 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,42 - 4,21 (m, 1H), 4,00 - 3,92 (m, 1H), 3,59 (dd, J = 11,1, 5,5 Hz, 1H), 3,35 - 3,26 (m, 1H), 3,21 (2s, 3H, rotameri), 2,51 - 2,28 (m, 1H), 2,20 (m, 2H), 2,11 - 1,85 (m, 1H), 1,34 (2s, 9H, rotameri), 1,26 - 0,93 (m, 2H), 0,72 (m, 1H), 0,37 (m, 2H), 0,10 - - 0,10 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -125,99, -127,39; MS (ES+) 514,6 (M+1), 536,6 (M+Na), (ES-) 512,6 (M-1), 548,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 248 [0,115, MeOH].
Etapa-11: Prepararea (2R,4R)-N-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (43l)
Compusul 43l s-a preparat din 2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilat de (2R,4R)-terţ-butil (43k) (450 mg, 0,876 mmoli) utilizând HCl 3 N în metanol (2,92 mL, 8,76 mmoli) conform procedurii raportate în etapa 6 din Schema 4 pentru a furniza sarea clorhidrat de (2R,4R)-N-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidă (43l) (394 mg, 0,876 mmoli, randament 100 %) ca un sirop maroniu deschis; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,45 (s, 1H), 10,17 - 9,94 (m, 1H), 8,95 - 8,64 (m, 2H), 7,73 (ddd, J = 32,9, 7,3, 2,1 Hz, 2H), 7,37 (ddd, J = 8,8, 6,5, 2,0 Hz, 1H), 7,33 - 7,25 (m, 2H), 6,40 (dd, J = 9,1, 1,3 Hz, 1H), 6,24 (td, J = 6,8, 1,5 Hz, 1H), 6,07 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 4,63 - 4,35 (m, 1H), 4,09 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 3,50 - 3,21 (m, 1H), 3,19 (s, 3H), 2,63 - 2,52 (m, 1H), 2,22 (m, 3H), 1,11 (m, 2H), 0,71 (m, 1H), 0,38 (m, 2H), 0,06 - -0,11 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -124,56; MS (ES+) 414,5 (M+1), 436,5 (M+Na), 827,8 (2M+1), (ES-) 412,5 (M-1), 448,4 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 170,9 [0,055, MeOH].
Etapa-12: Prepararea ((2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (43m)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (43l) (394 mg, 0,876 mmoli) în tetrahidrofuran (50 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (327 mg, 1,314 mmoli) utilizând ca bază bicarbonat de sodiu apos 1 N (17,52 mL, 17,52 mmoli) conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană ((2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(2-oxopiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (43m) (245 mg, 0,431 mmoli, randament 49,2 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,55 (s, 1H), 9,17 (s, 1H), 8,30 (dd, J = 2,7, 0,7 Hz, 1H), 7,90 (dd, J = 9,0, 0,8 Hz, 1H), 7,88 - 7,78 (m, 2H), 7,65 (dd, J = 7,0, 2,0 Hz, 1H), 7,35 (ddd, J = 8,9, 6,5, 2,0 Hz, 1H), 7,24 (dd, J = 10,5, 8,6 Hz, 1H), 7,19 - 7,12 (m, 1H), 6,38 (dd, J = 9,2, 1,4 Hz, 1H), 6,22 (td, J = 6,7, 1,5 Hz, 1H), 6,05 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,59 (dd, J = 9,2, 4,0 Hz, 1H), 4,12 - 3,96 (m, 1H), 3,83 - 3,62 (m, 2H), 3,22 (s, 3H), 2,44 - 2,30 (m, 1H), 2,29 - 2,04 (m, 3H), 1,24 - 0,91 (m, 2H), 0,79 - 0,61 (m, 1H), 0,45 - 0,29 (m, 2H), 0,04 - -0,09 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,21; MS (ES+) 568,5, 570,6 (M+1), 590,5, 592 (M+Na), (ES-) 566,5, 568,5 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 229,54 [0,325, MeOH]; Analiză calculată pentru C29H31ClFN5O4: C, 61,32; H, 5,50; Cl, 6,24; N, 12,33; Găsit: C, 61,06; H, 5,53; Cl, 6,02; N, 12,27.
Prepararea (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(2-oxopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (44e)
Etapa-1: Prepararea (+)-1-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropil)-3,4-dihidropiridin-2(1H)-onei (44a)
Compusul (44a) s-a preparat din 5-(3-ciclopropil-1-(2-oxo-3,4-dihidropiridin-1(2H)-il)propil)-2-fluorofenilcarbamat de (+)-metil (43h) (4 g, 11,55 mmoli) şi NaOH apos (19,25 mL, 115 mmoli 6 N) utilizând procedura aşa cum este raportată în etapa 9 din Schema 43 pentru a se obţine (+)-1-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropil)-3,4-dihidropiridin-2(1H)-ona (44a) (3,22 g, 11,17 mmoli, randament 97 %) ca un sirop; 1H RMN (300 MHz, DMSOd6) δ 6,91 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,69 (dd, J = 8,8, 2,3 Hz, 1H), 6,44 (ddd, J = 8,5, 4,4, 2,3 Hz, 1H), 6,09 (dt, J = 7,7, 1,6 Hz, 1H), 5,56 (dd, J = 10,1, 5,9 Hz, 1H), 5,21 - 5,04 (m, 3H), 2,48 - 2,36 (m, 2H), 2,27 - 2,12 (m, 2H), 1,98 - 1,80 (m, 2H), 1,21 - 0,94 (m, 2H), 0,81 - 0,61 (m, 1H), 0,45 - 0,28 (m, 2H), 0,07 - 0,01 (m, 1H), -0,01 - -0,08 (m, 1H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -136,82; MS (ES+) 289,4 (M+1), 311,4 (M+Na), (ES-) 287,4 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 144,4 [0,205, MeOH].
Etapa-2: Prepararea (+)-1-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropil)piperidin-2-onei (44b)
Compusul 44b s-a preparat prin reducerea (+)-1-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropil)-3,4-dihidropiridin-2(1H)-onei (44a) (3,2 g, 11,10 mmoli) timp de 1 h conform reacţiei şi procedurii de lucru raportate în etapa 2 din Schema 13 utilizând hidroxid de paladiu (0,779 g, 1,11 mmoli) în acetat de etil (50 mL) pentru a se obţine (+)-1-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropil)piperidin-2-ona (44b) (2,846 g, 9,80 mmoli, randament 88 %) ca un ulei galben deschis; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 6,91 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,70 (dd, J = 8,9, 2,2 Hz, 1H), 6,42 (ddd, J = 8,4, 4,3, 2,2 Hz, 1H), 5,68 (dd, J = 9,3, 6,7 Hz, 1H), 5,11 (s, 2H), 3,12 - 2,93 (m, 1H), 2,82 - 2,63 (m, 1H), 2,28 (m, 2H), 1,95 - 1,75 (m, 2H), 1,75 - 1,42 (m, 4H), 1,25 - 0,95 (m, 2H), 0,82 - 0,67 (m, 1H), 0,42 - 0,35 (m, 2H), 0,11 - -0,05 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,07; MS (ES+) 291,4, 313,4 (M+Na), ES-) 289,4 (M-1), 325,4 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 164,0 [0,15, MeOH].
Etapa-3: Prepararea (2R,4R)-terţ-butil 2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(2-oxopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de metil (44c)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (36a) (245 mg, 1 mmoli), (+)-1-(1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropilpropil)piperidin-2-onei (44b) (290 mg, 1,0 mmoli) în tetrahidrofuran (20 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (247 mg, 1,0 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu acetat de etil în hexani 0 la 100%) (2R,4R)-terţ-butil 2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(2-oxopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilat de metil (44c) (453 mg, 0,875 mmoli, 88 % randament) ca un sirop incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,50 (2s, 1H, rotameri), 8,04 - 7,66 (m, 1H), 7,22 (dd, J = 10,8, 8,5 Hz, 1H), 7,10 - 6,99 (m, 1H), 5,78 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,48 - 4,20 (m, 1H), 4,06 - 3,91 (m, 1H), 3,59 (dd, J = 11,1, 5,6 Hz, 1H), 3,41 (s, 1H), 3,22 (2s, 3H, rotameri), 3,14 - 3,01 (m, 1H), 2,82 - 2,67 (m, 1H), 2,50 - 2,04 (m, 2H), 2,01 - 1,79 (m, 4H), 1,77 - 1,56 (m, 3H), 1,60 - 1,46 (m, 1H), 1,36 (2s, 9H, rotameri), 1,29 - 0,98 (m, 2H), 0,85 - 0,64 (m, 1H), 0,47 - 0,30 (m, 2H), 0,14 - -0,08 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,42, - 128,68 rotameri; MS (ES+) 518,6 (M+1), 540,6 (M+Na), (ES-) 516,5 (M-1), 552,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+)126,6 [0,15, MeOH].
Etapa-4: Prepararea (2R,4R)-N-(5-(3-ciclopropil-1-(2-oxopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (44d)
Compusul 44d s-a preparat din (2R,4R)-terţ-butil 2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(2-oxopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilat de metil (44c) (400 mg, 0,773 mmoli) utilizând HCl 3N în metanol (2,58 mL, 7,73 mmoli) conform procedurii raportate în etapa 6 din Schema 4 pentru a furniza (2R,4R)-N-(5-(3-ciclopropil-1-(2-oxopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamida (44d) (351 mg, 0,773 mmoli, 100 % randament) ca un sirop maroniu deschis; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,51 (s, 1H), 10,37 (s, 1H), 8,78 (s, 1H), 7,73 (dd, J = 7,6, 2,2 Hz, 1H), 7,27 (dd, J = 10,6, 8,5 Hz, 1H), 7,14 (ddd, J = 8,1, 4,8, 2,2 Hz, 1H), 5,79 (dd, J = 9,5, 6,5 Hz, 1H), 4,71 - 4,35 (m, 1H), 4,22 - 4,02 (m, 1H), 3,47 - 3,35 (m, 1H), 3,36 - 3,20 (m, 1H), 3,20 (s, 3H), 3,14 - 3,04 (m, 1H), 2,82 - 2,67 (m, 1H), 2,65 - 2,52 (m, 1H), 2,39 - 2,18 (m, 3H), 2,06 - 1,85 (m, 2H), 1,79 - 1,44 (m, 4H), 1,31 - 0,98 (m, 2H), 0,84 - 0,64 (m, 1H), 0,48 - 0,31 (m, 2H), 0,12 - -0,07 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSOd6) δ -125,55; MS (ES+) 418,6 (M+1), 440,5 (M+Na), (ES-) 416,5 (M-1), 452,5 (M+Cl).
Etapa-5: Prepararea (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(2-oxopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (44e)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-(3-ciclopropil-1-(2-oxopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (44d) (340 mg, 0,749 mmoli) în tetrahidrofuran (50 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (280 mg, 1,125 mmoli) utilizând bicarbonat de sodiu apos 1 N (15mL, 15,00 mmoli) ca bază conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu CMA 80 în cloroform 0-100%) pur (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(2-oxopiperidin-1-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (44e) (210 mg, 0,367 mmoli, randament 48,9 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,53 (s, 1H), 9,18 (s, 1H), 8,30 (dd, J = 2,6, 0,8 Hz, 1H), 7,91 (dd, J = 9,0, 0,8 Hz, 1H), 7,87 - 7,73 (m, 2H), 7,21 (dd, J = 10,7, 8,5 Hz, 1H), 7,10 - 6,99 (m, 1H), 5,85 - 5,68 (m, 1H), 4,60 (dd, J = 9,1, 3,9 Hz, 1H), 4,12 - 3,98 (m, 2H), 3,83 - 3,65 (m, 2H), 3,24 (s, 3H), 3,14 - 3,00 (m, 1H), 2,83 - 2,64 (m, 1H), 2,47 - 2,32 (m, 1H), 2,35 - 2,20 (m, 1H), 2,18 - 2,03 (m, 1H), 2,01 - 1,81 (m, 2H), 1,75 - 1,56 (m, 3H), 1,61 - 1,44 (m, 1H), 1,27 - 0,97 (m, 2H), 0,83 - 0,64 (m, 1H), 0,47 - 0,30 (m, 2H), 0,10 - -0,07 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,47; MS (ES+) 572,6 (M+1), 594,5, 596,5 (M+Na), (ES-) 570,5, 572,5 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 174,3 [0,21, MeOH].
Prepararea (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (45c)
Etapa-1: Prepararea 2-(5-((-)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-1-carboxilatului de (2R,4S)-terţ-butil (45a)
Reacţia acidului (2R,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-2-carboxilic (34a) (160 mg, 0,498 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (39e) (194 mg, 0,498 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (123 mg, 0,498 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 25 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 100%) 2-(5-((-)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-1-carboxilatul de (2R,4S)-terţ-butil (45a) (287 mg, 0,414 mmoli, randament 83 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,49 (2s, 1H, rotameri), 8,77 - 8,28 (m, 2H), 8,04 (m, 1H), 7,53 - 7,08 (m, 8H), 5,48 (m, 1H), 4,35 (m, 1H), 3,77 (s, 1H), 3,41 (s, 2H), 2,85 (2s, 3H, rotameri), 2,78 - 2,35 (m, 3H), 1,33 (2s, 9H, rotameri), 1,15 (m, 10H), 1,02 - 0,82 (m, 2H), 0,64 (m, 1H), 0,36 (m, 2H), 0,04 - -0,15 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,09, -129,50 rotameri; MS (ES+) 693,7 (M+1), 715,7 (M+Na), (ES-) 691,7 (M-1), 727,7 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 8,0 [0,075, MeOH].
Etapa-2: Prepararea (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamidei (45b)
Reacţia 2-(5-((-)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-1-carboxilatului de (2R,4S)-terţ-butil (45a) (280 mg, 0,404 mmoli) în HCl metanolic (2,694 mL, 8,08 mmoli) urmat de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat sarea clorhidrat de (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamidă (45b) (227 mg, 0,404 mmoli, randament 100 %) care s-a utilizat ca atare pentru etapa următoare; MS (ES+) 489,5 (M+1), (ES-) 487,4 (M-1), 523,5 (M+Cl).
Etapa-3: Prepararea (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (45c)
Reacţia (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-2-carboxamidei (45b) (111 mg, 0,444 mmoli) în tetrahidrofuran (50 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (227 mg, 0,404 mmoli) utilizând ca bază bicarbonat de sodiu apos 1 N (8,08 mL, 8,08 mmoli) conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu CMA 80 în cloroform 0-100%), (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxi-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamida (45c) (50 mg, 0,078 mmoli, randament 19,24 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,46 (s, 1H), 9,23 (s, 1H), 8,59 - 8,36 (m, 2H), 8,31 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,97 - 7,88 (m, 2H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 4,2 Hz, 4H), 7,40 - 7,32 (m, 3H), 7,21 - 7,09 (m, 2H), 4,65 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 4,23 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,90 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 2,84 (s, 3H), 2,62 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 2,40 - 2,25 (m, 2H), 2,26 - 2,12 (m, 2H), 1,12 - 0,94 (m, 2H), 0,73 - 0,54 (m, 1H), 0,43 - 0,27 (m, 2H), 0,01 - -0,17 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,48; MS (ES+) 643,6, 645,7 (M+1), (ES-) 641,6, 643,6 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 99,23 [0,26, MeOH].
Prepararea ((2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (46k)
Etapa-1: Prepararea acidului 2-metil-izonicotinic (46b)
La o soluţie de 2, 4-dimetil-piridină (46a) (100 g, 933,245 mmoli) în apă (1000 mL) s-a adăugat permanganat de potasiu (294,97 g, 1866,489 mmoli) în porţii pe o perioadă de 2 h. Amestecul de reacţie rezultat s-a încălzit la 80°C timp de 12 h. Amestecul de reacţie s-a răcit la temperatura camerei, s-a filtrat printr-un pat de celite şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă la un volum de 250 mL la 50°C. Soluţia obţinută s-a răcit la 0°C şi pH-ul s-a ajustat la 3 utilizând HCl 1N (temperatura între 0°C şi 5°C). Solidul obţinut s-a colectat prin filtrare s-a spălat cu apă rece ca gheaţa şi s-a uscat pentru a se obţine acidul 2-metilizonicotinic (46b) (22,3 g, randament: 17,42%); 1H RMN (D2O) 8 8,52 (s, 1H), 7,94-7,90 (m, 2H), 2,69 (s, 3H); MS (+) 138,1 (M+1).
Etapa-2: Prepararea N-metoxi-N,2-dimetilizonicotinamidei (46c)
La o soluţie agitată de acid 2-metilizonicotinic (46b) (17,8 g, 129,798 mmoli) în N,N-dimetilformamidă (180 mL) s-a adăugat, la temperatura camerei, N,N-diizopropiletilamină (67,105 gm, 519,192 mmoli) şi clorhidrat 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimidă (EDCI, 40,299 g, 259,596 mmoli) şi hidroxibenzotriazol (HOBt, 39,753 g, 259,596 mmoli). Amestecul de reacţie rezultat s-a agitat timp de 0,5 h la temperatura camerei urmată de adiţia de clorhidrat de N, O dimetil hidroxilamină (13,8 g, 141,479 mmoli). Amestecul de reacţie s-a agitat la temperatura camerei timp de 12 h, s-a stins cu apă (500 mL) şi s-a extras cu acetat de etil (5 x 500 mL). Straturile organice combinate s-au uscat pe sulfat de sodiu, s-au filtrat şi s-au concentrat. Reziduul obţinut s-a purificat prin cromatografie pe coloană pentru a se obţine N-metoxi-N,2-dimetilizonicotinamida (46c) (23 g, randament 98,4%) ca un solid gros roşiatic; 1H RMN (CDCl3) δ 8,29-8,27 (s, 1H), 7,08-7,01 (m, 2H), 3,27 (s, 3H), 3,07 (s, 3H), 2,32 (s, 3H); MS (ES+) 181,1 (M+1).
Etapa-3: Prepararea 1-(2-metilpiridin-4-il)etanonei (46d)
La o soluţie agitată de N-metoxi-N,2-dimetilizonicotinamidă (46c) (26 g, 144,281mmoli) în THF (520 mL) s-a adăugat, la -78°C, MeLi (6,342 g, 288,562 mmoli, soluţie 1 M în THF) sub atmosferă de azot. Amestecul de reacţie s-a încălzit la temperatura camerei pe o perioadă de 1 h, s-a stins cu soluţie saturată de NH4Cl la 0°C. Amestecul de reacţie rezultat s-a extras cu acetat de etil şi stratul organic s-a spălat cu apă şi saramură, s-a uscat pe sulfat de sodiu, s-a filtrat şi s-a concentrat. Reziduul obţinut s-a purificat prin cromatografie pe coloană pentru a se obţine 1-(2-metilpiridin-4-il)etanonă (46d) (11 g, 56,4% randament) ca un lichid gros roşiatic; 1H RMN (CDCl3) δ 8,61-8,59 (d, 1H), 7,51-7,45 (d, 1H), 7,45-7,44 (m, 1H), 4,05-4,02 (s, 3H); MS (ES+) 136,1(M+1).
Etapa-4: Prepararea 3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)prop-2-en-1-onei (46e)
Compusul 46e s-a preparat din 1-(2-metilpiridin-4-il)etanonă (46d) (11.g, 81,383 mmoli) conform procedurii raportate în etapa 1 din Schema 31 a dat, după purificarea prin cromatografie pe coloană 3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)prop-2-en-1-ona (46e) (4,5 g, 29,5% randament) ca un lichid roşiatic; MS (ES+) 188,1 (M+1).
Etapa-5: Prepararea 3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propan-1-one (46f)
Compusul 46f preparat din 3-ciclopropil-1-piridin-4-il-propenona (46e) (8 g, 42,726 mmoli) conform procedurii raportate în etapa 2 din Schema 31 a dat, după purificarea prin cromatografie pe coloană 3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propan-1-ona (46f) (5,5 g 68,1% randament) ca un lichid galben; 1H RMN (CDCl3) δ 8,61-8,59 (d, 1H), 7,53-7,48 (m, 1H), 7,46-7,20 (m, 1H), 3,02-2,97 (m, 2H), 2,58 (s, 3H), 1,60-1,53 (m, 2H), 0,85-0,71 (m, 1H), 0,71-0,67 (m, 2H), 0,42-0,37 (m, 2H); MS (ES+) 190,2 (M+1).
Etapa-6: Prepararea (R)-N-(3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (46g)
Compusul 46g preparat din 3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propan-1-ona (46f) (5,5 g, 29,062 mmoli) şi R-2-metil propan-2-sulfinamidă (4,209g, 34,729 mmoli) conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 31 a dat, după purificarea prin cromatografie pe coloană (R)-N-(3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (46g) (7 g, randament 82,44%) ca un lichid galben; 1H RMN (CDCl3) δ 8,59-8,49 (m, 1H), 7,51-7,33 (m, 2H), 3,32-2,98 (m, 2H), 2,54 (s, 3H), 1,54-1,49 (m, 2H), 1.,42-1,13 (m, 9H), 0,85-0,71(m, 1H), 0,71-0,67 (m, 2H), 0,42-0,37 (m, 2H); MS (ES+) 293,2 (M+1).
Etapa-7: Prepararea (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (46h)
Compusul 46h preparat din (R)-N-(3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (46g) (5,5 g, 29,062 mmoli) şi R-2-metil propan-2-sulfinamidă (2 g, 6,839 mmoli) şi bromură de (3-(bis(trimetilsilil)amino)-4-fluorofenil)magneziu proaspăt preparată (1c) (19,10 mL, 15,28 mmoli) conform procedurii raportate în etapa 4 din Schema 31 a dat, după purificarea prin cromatografie pe coloană (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (46h) (0,8 g, 29,0% randament) ca un lichid roşiatic gros; 1H RMN (DMSO-d6) δ 8,36-8,34 (d, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,12-7,10 (d, 1H), 6,95-6,88 (m, 1H), 6,76-6,73 (m, 1H), 5,38-5,32 (s, 1H), 5,17-5,11 (s, 2H), 2,58-2,45 (s, 3H), 2,05-2,01 (m, 2H), 1,55-1,51 (m, 2H), 1,28-1,10 (m, 9H), 0,67-0,45 (m, 1H), 0,39-0,37 (m, 2H), 0,03-0,00 (m, 2H); MS (ES+) 404,3 (M+1); Rotaţie optică [α]D = (-) 55,0 [0,28,MeOH]
Etapa-8: Prepararea 2-(5-((-)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (46i)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (36a) (245 mg, 1,0 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (46h) (404 mg, 1,0 mmoli) în tetrahidrofuran (50 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (247 mg, 1,0 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană 2-(5-((-)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatul de (2R,4R)-terţ-butil (46i) (485 mg, 0,769 mmoli, randament 77 %) ca un solid incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,47 (2s, 1H, rotameri), 8,33 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,09 - 7,77 (m, 1H), 7,26 - 7,15 (m, 3H), 7,08 (dd, J = 5,3, 1,7 Hz, 1H), 5,41 (2s, 1H, rotameri), 4,46 - 4,16 (m, 1H), 3,97 (dd, J = 9,1, 4,1 Hz, 1H), 3,57 (dd, J = 11,0, 5,4 Hz, 1H), 3,36 - 3,24 (m, 1H), 3,21 (m, 3H), 2,65 - 2,53 (m, 1H), 2,45 - 2,39 (m, 4H), 2,01 - 1,84 (m, 1H), 1,33 (2s, 9H, rotameri), 1,14 (m, 10H), 0,90 (m, 2H), 0,71 - 0,54 (m, 1H), 0,42 - 0,32 (m, 2H), -0,00 - -0,17 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,87 (q, J = 8,1, 7,2 Hz), -128,88 rotameri; MS (ES+) 631,7 (M+1), 653,7 (M+Na), (ES-) 629,6 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (-) 50,2 [0,175, MeOH].
Etapa-9: Prepararea (2R,4R)-N-(5-(-1-amino-3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (46j)
Reacţia 2-(5-((-)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (46i) (475 mg, 0,753 mmoli) în HCl metanolic 3N (5,020 mL, 15,06 mmoli) urmată de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat sarea clorhidrat de (2R,4R)-N-(5-(-1-amino-3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidă (46j) (376 mg, 0,753 mmoli, randament 100 %) ca un solid alb-murdar; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,69 (s, 1H), 10,40 (s, 1H), 9,76 (s, 3H), 9,55 (bs, 1H), 8,90 - 8,67 (m, 2H), 7,89 - 7,76 (m, 2H), 7,76 - 7,62 (m, 1H), 7,53 - 7,28 (m, 2H), 4,61 - 4,43 (m, 1H), 4,22 - 3,98 (m, 1H), 3,49 - 3,33 (m, 1H), 3,33 - 3,22 (m, 1H), 3,17 (s, 3H), 2,69 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 2,66 - 2,50 (m, 1H), 2,50 - 2,39 (m, 1H), 2,31 - 2,12 (m, 1H), 1,34 - 1,15 (m, 1H), 1,16 - 0,94 (m, 1H), 0,79 - 0,60 (m, 1H), 0,46 - 0,33 (m, 2H), 0,10 - 0,00 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -122,19; MS (ES+) 427,5 (M+1), (ES-) 425,5 (M-1), 461,4 (M+Cl).
Etapa-10: Prepararea ((2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (46k)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-(-1-amino-3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (46j) (370 mg, 0,741 mmoli) în tetrahidrofuran (55 mL) cu 5-cloropiridin-2-il carbamat de fenil (13b) (203 mg, 0,815 mmoli) utilizând ca bază bicarbonat de sodiu (14,82 mL, 14,82 mmoli, apos 1 N) conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană ((2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (46k) (190 mg, 0,327 mmoli, randament 44,1 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,45 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,33 - 8,24 (m, 2H), 7,95 - 7,82 (m, 2H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,16 - 7,09 (m, 3H), 4,57 (dd, J = 9,2, 3,9 Hz, 1H), 4,11 - 3,97 (m, 1H), 3,85 - 3,63 (m, 2H), 3,20 (s, 3H), 2,48 - 2,38 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,35 - 2,21 (m, 2H), 2,24 - 2,03 (m, 3H), 1,11 - 0,93 (m, 2H), 0,73 - 0,51 (m, 1H), 0,41 - 0,25 (m, 2H), -0,02 - -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,45; MS (ES+) 581,6, 583,6 (M+1), 603,6 (M+Na), 579,5 (M-1), 615,5, 617,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 92,12 [0,33,MeOH]; Analiză calculată pentru C30H34ClFN6O3,0,75H2O: C, 60,60; H, 6,02; N, 14,13; Găsit: C, 60,90; H, 6,00; N, 14,17.
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (47d)
Etapa-1: Prepararea 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-fenilpirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (47b)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-fenilpirolidin-2-carboxilic (47a) (230 mg, 0,789 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (39e) (308 mg, 0,789 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (195 mg, 0,789 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-fenilpirolidin-1-carboxilat de (2R,4R)-terţ-butil (47b) (255 mg, 0,385 mmoli, 48,7 % randament) ca un ulei limpede. MS (ES+) 663,7 (M+1).
Etapa-2: Prepararea (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-fenilpirolidin-2-carboxamidei (47c)
Reacţia 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-fenilpirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (47b) (255 mg, 0,385 mmoli) în metanol (10 mL) utilizând HCl 4N în dioxan (1,282 mL, 3,85 mmoli) urmată de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-fenilpirolidin-2-carboxamida (47c) (95 mg, 0,207 mmoli, randament 53,9 %) ca un ulei limpede. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 10,26 (s, 1H), 8,65 - 8,57 (m, 1H), 8,54 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 7,41 - 7,30 (m, 4H), 7,30 - 7,21 (m, 3H), 7,12 - 6,95 (m, 2H), 4,15 (dd, J = 9,8, 2,8 Hz, 1H), 3,56 - 3,44 (m, 1H), 3,42 - 3,25 (m, 1H), 3,17 (t, J= 9,3 Hz, 1H), 2,67 - 2,52 (m, 4H), 2,42 - 2,30 (m, 3H), 1,29 - 1,03 (m, 2H), 0,80 - 0,59 (m, 1H), 0,53 - 0,34 (m, 2H), -0,00 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, CDCl3) δ -132,94; MS (ES+) 459,4 (M+1).
Etapa-3: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (47d)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-fenilpirolidin-2-carboxamidei (47c) (95 mg, 0,207 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (46,4 mg, 0,186 mmoli) utilizând ca bază carbonat de potasiu (71,6 mg, 0,518 mmoli) conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu CMA 80 în cloroform 0-50%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-fenilpirolidin-1,2-dicarboxamida (47d) (68 mg, 0,111 mmoli, randament 53,5 %) ca bază liberă, ca un solid alb, care a suferit conversia la sare clorhidrat (72 mg, 0,105 mmoli, randament 50,7 %) cu HCl (3N în MeOH, 3 mL). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,23 - 10,13 (m, 1H), 9,79 (s, 3H), 9,26 (s, 1H), 9,01 - 8,88 (m, 2H), 8,30 (dd, J = 2,6, 0,8 Hz, 1H), 8,10 (dd, J = 7,2, 2,5 Hz, 1H), 7,97 - 7,77 (m, 4H), 7,46 - 7,19 (m, 7H), 4,95 - 4,76 (m, 1H), 4,28 - 4,02 (m, 1H), 3,63 - 3,58 (m, 1H), 2,62 - 2,53 (m, 2H), 2,32 (td, J = 15,7, 12,5, 6,1 Hz, 3H), 1,31 - 1,00 (m, 2H), 0,69 (m, 1H), 0,48 - 0,31 (m, 2H), 0,09 - 0,01 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO) δ -123,88; MS (ES+) 613,5 (M+1); Rotaţie optică [α]D = (+) 101,4 [0,28, MeOH].
Prepararea (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (48d)
Etapa-1: Prepararea 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metilpirolidin-1-carboxilatului de (2R,4S)-terţ-butil (48b)
Reacţia acidului (2R,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metilpirolidin-2-carboxilic (48a) (145 mg, 0,632 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (39e) (246 mg, 0,632 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (156 mg, 0,632 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu 0-60% EtOAc în Hexan) 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metilpirolidin-1-carboxilat de (2R,4S)-terţ-butil (48b) (248 mg, 0,413 mmoli, randament 65,3 %) ca un ulei limpede. MS (ES+) 601,7 (M+1).
Etapa-2: Prepararea (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metilpirolidin-2-carboxamidei (48c)
Reacţia 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metilpirolidin-1-carboxilatului de (2R,4S)-terţ-butil (48b) (246 mg, 0,409 mmoli) în metanol (10 mL) utilizând HCl 4N în dioxan (1,365 mL, 4,09 mmoli) urmată de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metilpirolidin-2-carboxamida (48c) (100 mg, 0,252 mmoli, randament 61,6 %) ca un ulei limpede. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 10,22 (s, 1H), 8,61 - 8,44 (m, 3H), 7,43 - 7,25 (m, 3H), 7,13 - 6,91 (m, 2H), 4,13 - 4,01 (m, 1H), 3,31 - 3,13 (m, 1H), 2,79 - 2,67 (m, 1H), 2,44 - 2,32 (m, 3H), 2,32 - 2,17 (m, 2H), 1,96 - 1,76 (m, 1H), 1,27 - 0,95 (m, 6H), 0,80 - 0,71 (m, 1H), 0,71 - 0,60 (m, 1H), 0,54 - 0,31 (m, 2H), 0,00 (s, 2H); 19F RMN (282 MHz, CDCl3) δ -132,78; MS (ES+) 551,5 (M+1).
Etapa-3: Prepararea (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (48d)
Reacţia (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metilpirolidin-2-carboxamidei (48c) (95 mg, 0,207 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (46,4 mg, 0,186 mmoli) utilizând ca bază carbonat de potasiu (71,6 mg, 0,518 mmoli) conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu CMA 80 în cloroform 0-50%) (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metilpirolidin-1,2-dicarboxamida (48d) (68 mg, 0,111 mmoli, randament 53,5 %) bază liberă, ca un solid alb, care a suferit conversia la sare clorhidrat (72 mg, 0,105 mmoli, randament 50,7 %) cu HCl (3 N în MeOH, 3 mL). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,23 - 10,13 (m, 1H), 9,79 (s, 3H), 9,26 (s, 1H), 9,01 - 8,88 (m, 2H), 8,30 (dd, J = 2,6, 0,8 Hz, 1H), 8,10 (dd, J = 7,2, 2,5 Hz, 1H), 7,97 - 7,77 (m, 4H), 7,46 - 7,19 (m, 7H), 4,95 - 4,76 (m, 1H), 4,28 - 4,02 (m, 1H), 3,63 - 3,58 (m, 1H), 2,62 - 2,53 (m, 2H), 2,32 (td, J = 15,7, 12,5, 6,1 Hz, 3H), 1,31 - 1,00 (m, 2H), 0,69 (m, 1H), 0,48 - 0,31 (m, 2H), 0,09 - 0,01 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -123,88; MS (ES+) 613,5 (M+1); Rotaţie optică [α]D = (+) 144,4 [0,29, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (49d)
Etapa-1: Prepararea 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metilpirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (49b)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metilpirolidin-2-carboxilic (49a) (90 mg, 0,393 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (39e) (153 mg, 0,393 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (97 mg, 0,393 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metilpirolidin-1-carboxilatul de (2R,4R)-terţ-butil (49b) brut (160mg, 67,8%), care s-a utilizat ca atare în etapa următoare fără altă purificare. MS (ES+) 601,7 (M+1).
Etapa-2: Prepararea (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metilpirolidin-2-carboxamidei (49c)
Reacţia 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metilpirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (49b) (160 mg, 0,266 mmoli) în metanol (10 mL) utilizând HCl 4N în dioxan (0,888 mL, 2,66 mmoli) urmată de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metilpirolidin-2-carboxamida (49c) brută (66 mg, randament 62,5%), care s-a utilizat ca atare în etapa următoare fără altă purificare. MS (ES+) 419,4 (M+Na).
Etapa-3: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-Nl-(5-cloropiridin-2-il)-4-metilpirolidin-1,2-dicarboxamidei (49d)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metilpirolidin-2-carboxamidei (49c) (66 mg, 0,166 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (37,3 mg, 0,150 mmoli) utilizând carbonat de potasiu (57,5 mg, 0,416 mmoli) ca bază conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu CMA 80 în cloroform 0-50%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metilpirolidin-1,2-dicarboxamida (49d) bază liberă ca un solid alb, care a suferit conversia la sare clorhidrat (12 mg, 0,019 mmoli, randament 11,55 %) cu HCl (3N în MeOH, 3 mL); 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,99 (s, 1H), 9,38 (s, 3H), 9,14 (s, 1H), 8,75 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 8,28 (dd, J = 2,6, 0,9 Hz, 1H), 8,03 (dd, J = 7,3, 2,5 Hz, 1H), 7,87 - 7,68 (m, 2H), 7,51 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 7,38 (dd, J = 10,5, 8,8 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,60 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 3,90 - 3,74 (m, 1H), 3,10 (t, J = 9,9 Hz, 1H), 2,67 - 2,20 (m, 4H), 1,44 (m, 1H), 1,30 - 1,08 (m, 2H), 1,03 (d, J = 6,3 Hz, 3H), 0,68 (m, 1H), 0,37 (m, 2H), 0,01 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO) δ -124,26; MS (ES+) 551,5 (M+1); Rotaţie optică [α]D = (+) 130,9 [0,055, MeOH].
Prepararea 2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-etoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-benzil (50d)
Etapa-1: Prepararea acidului (2R,4R)-1-(benziloxicarbonil)-4-etoxipirolidin-2-carboxilic (50b)
La o soluţie de acid (2R,4R)-1-(benziloxicarbonil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (15a) (1,14 g, 4,30 mmoli) în THF (20 mL) s-a adăugat o soluţie 4-metilbenzensulfonat de etil (50a) (1,721 g, 8,60 mmoli) în THF (2 mL), urmată de NaOH (0,688 g, 17,19 mmoli) şi apă (5 mL). Amestecul rezultat s-a încălzit la 55 °C peste noapte şi s-a concentrat la sec în vid. Reziduul s-a dizolvat în apă (10 mL), s-a spălat cu diclorometan (3 x 25 mL) şi s-a acidulat la pH 2 cu HCl (1,5 N). Amestecul de reacţie s-a extras cu diclorometan (3 x 25 mL) şi straturile organice s-au combinat, s-au uscat pe MgSO4, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid. Reziduul s-a purificat prin cromatografie rapidă (silicagel, eluând cu 0-20% MeOH în cloroform) pentru a se obţine acid (2R,4R)-1-(benziloxicarbonil)-4-etoxipirolidin-2-carboxilic (50b) (301 mg, 1,026 mmoli, 23,88 % randament) ca un ulei limpede. MS (ES+) 316,3 (M+Na).
Etapa-2: Prepararea 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-etoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-benzil (50c)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(benziloxicarbonil)-4-etoxipirolidin-2-carboxilic (50b) (300 mg, 1,023 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (39e) (398 mg, 1,023 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (253 mg, 1,023 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-etoxipirolidin-1-carboxilatul de (2R,4R)-benzil (50c) (240 mg, 0,361 mmoli, 35,3 % randament) ca un ulei limpede. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,51 (d, J = 24,2 Hz, 1H), 8,49 (d, J= 4,4 Hz, 2H), 7,87 (s, 1H), 7,45 - 7,27 (m, 5H), 7,27 - 7,07 (m, 5H), 5,52 (d, J = 12,7 Hz, 1H), 5,06 (dd, J = 21,2, 3,4 Hz, 2H), 4,45 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 4,07 (s, 1H), 3,67 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 3,38 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 2,05 (s, 1H), 1,13 (s, 11H), 1,04 - 0,94 (m, 3H), 0,83 (m, 2H), 0,62 (s, 1H), 0,34 (s, 2H), -0,08 (s, 2H); MS (ES+) 665,5 (M+1).
Etapa-3: (2R,4R)- 2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-etoxipirolidin-1-carboxilat de benzil (50d)
Reacţia 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-etoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-benzil (50c) (50 mg, 0,075 mmoli) în metanol (5 mL) utilizând HCl 3N în metanol (0,15 mL, 0,451 mmoli) urmată de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat 2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-etoxipirolidin-carboxilatul de (2R,4R)-benzil (50d) (24 mg, 0,043 mmoli, randament 56,9 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,73 (d, J= 17,2 Hz, 1H), 9,64 - 9,53 (m, 6H), 8,82 (d, J= 5,4 Hz, 2H), 7,99 - 7,82 (m, 1H), 7,65 (m, 3H), 7,42 - 7,32 (m, 3H), 7,29 - 7,12 (m, 3H), 5,15 - 4,97 (m, 2H), 4,47 (m, 1H), 4,09 (s, 1H), 3,71 (s, 1H), 3,39 (q, J= 7,0 Hz, 3H), 2,01 (m, 1H), 1,27 - 1,04 (m, 2H), 1,00 (t, J= 7,0 Hz, 3H), 0,69 (m, 1H), 0,39 (m, 2H), 0,08 - -0,00 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -124,55; MS (ES+) 561,5 (M+1); 559,5 (M-1); Analiză calculată pentru C32H37FN4O4,2HCl,2H2O: C, 57,40; H, 6,47; N, 8,37; Găsit: C, 57,37; H, 6,25; N, 8,32; Rotaţie optică [α]D = (+) 43,6 [0,165, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-etoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (51b)
Etapa-1: Prepararea (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-etoxipirolidin-2-carboxamidei (51a)
Debenzilarea prin hidrogenare a 2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-etoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-benzil (50d) (190 mg, 0,286 mmoli) în metanol (5 mL), utilizând paladiu pe cărbune 10% (15,21 mg, 0,086 mmoli) drept catalizator conform procedurii raportate în etapa 2 din Schema 13 a dat (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-etoxipirolidin-2-carboxamida (51a) (105 mg, 0,198 mmoli, 69,2 % randament), care s-a utilizat ca atare în etapa următoare fără altă purificare. MS (ES+) 531,4 (M+1).
Etapa-2: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-etoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (51b)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-etoxipirolidin-2-carboxamidei (51a) (105 mg, 0,198 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (49,2 mg, 0,198 mmoli) utilizând carbonat de potasiu (68,4 mg, 0,495 mmoli) ca bază conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu CMA 80 în cloroform 0-50%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-etoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (51b) bază liberă ca un solid alb, care a suferit conversia la sarea clorhidrat (60 mg, 0,092 mmoli, randament 46,4 %) cu HCl (3N în MeOH, 3 mL); 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,74 (s, 4H), 9,71 ― 9,68 (m, 1H), 9,28 (s, 1H), 8,97 ― 8,86 (m, 2H), 8,30 (dd, J = 2,5, 0,9 Hz, 1H), 7,96 (dd, J= 7,3, 2,5 Hz, 1H), 7,90 ― 7,80 (m, 4H), 7,39 (dd, J = 10,4, 8,7 Hz, 1H), 7,26 (ddd, J = 8,7, 4,4, 2,4 Hz, 1H), 4,61 (dd, J = 8,9, 4,4 Hz, 1H), 4,13 (p, J = 4,9 Hz, 1H), 3,79 (dd, J = 10,7, 5,3 Hz, 1H), 3,64 (dd, J = 10,7, 3,8 Hz, 1H), 3,46 ― 3,35 (m, 2H), 2,65 ― 2,48 (m, 2H), 2,40 (ddd, J= 14,0, 9,0, 5,1 Hz, 1H), 2,07 ― 1,98 (m, 1H), 1,34 ― 1,15 (m, 1H), 1,14 ― 1,02 (m, 1H), 1,01 (t, J= 7,0 Hz, 3H), 0,76 ― 0,59 (m, 1H), 0,45 ― 0,31 (m, 2H), 0,07 ― 0,00 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -124,72; Rotaţie optică [α]D = (+) 7,209 [0,54, MeOH]; Analiză calculată pentru C30H34ClFN6O3,3HCl,1,5H2O: C, 50,22; H, 5,62; Cl, 19,77; N, 11,71; Găsit: C, 50,55; H, 5,63; Cl, 19,51; N, 11,49.
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-propoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (52d)
Etapa-1: Prepararea acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-propoxipirolidin-2-carboxilic (52a)
Alchilarea acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (14b) (30,5 g, 132 mmoli) cu sulfat de diizopropil (33,4 mL, 203 mmoli) utilizând NaH (60% dispersie în ulei) (32,5 g, 813 mmoli) ca bază conform procedurii raportate în schema 15 etapa 1 a dat acidul (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-propoxipirolidin-2-carboxilic (52a) (23 g, 84 mmoli, randament 63,7 %) ca un ulei limpede, care s-a utilizat ca atare în etapa următoare fără altă purificare. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,41 (s, 1H), 4,23 ― 4,04 (m, 1H), 4,05 ― 3,93 (m, 1H), 3,62 ― 3,44 (m, 1H), 3,37 ― 3,22 (m, 2H), 3,23 ― 3,11 (m, 1H), 2,43 ― 2,21 (m, 1H), 2,04 ― 1,91 (m, 1H), 1,56 ― 1,23 (m, 11H), 0,82 (t, J= 7,4 Hz, 3H); MS (ES-) 272,3 (M-1).
Etapa-2: Prepararea 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-propoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (52b)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-propoxipirolidin-2-carboxilic (52a) (20 g, 73,0 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (39e) (26,5 g, 68,1 mmoli) în tetrahidrofuran (300 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (18,09 g, 73,2 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-propoxipirolidin-1-carboxilatul de (2R,4R)-terţ-butil (52b) (43 g, 66,7 mmoli, randament 98 %), care s-a utilizat ca atare în etapa următoare fără altă purificare. MS (ES+) 667,7 (M+Na).
Etapa-3: Prepararea (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metilpirolidin-2-carboxamidei (52c)
Reacţia 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-propoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (52b) (43 g, 66,7 mmoli) în metanol (600 mL) utilizând HCl 4N în dioxan (133 mL, 533 mmoli) urmată de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metilpirolidin-2-carboxamida (52c) (24,5 g, 55,6 mmoli, 83 % randament) ca un ulei galben, care s-a utilizat ca atare în etapa următoare fără altă purificare. MS (ES+) 441,6 (M+1).
Etapa-4: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-propoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (52d)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metilpirolidin-2-carboxamidei (52c) (24,5 g, 55,6 mmoli) în tetrahidrofuran (550 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) 12,45 g, 50,1 mmoli) utilizând bicarbonat de sodiu (28,0 g, 334 mmoli) ca bază conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu acetat de etil/MeOH (9:1) în hexan 0-50%) urmat de coloană cu fază inversă (eluând cu metanol în apă 0-100%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-propoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (52d) ca o bază liberă, care a suferit conversia la sare de HCl cu HCl 3N în MeOH (30 mL) pentru a se obţine compusul 52d (13,2 g, randament 39,5 %) sare clorhidrat ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,89 (s, 2H), 9,73 (s, 1H), 9,37 (s, 1H), 8,97 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 8,31 (dd, J= 2,5, 0,8 Hz, 1H), 8,05 - 7,91 (m, 3H), 7,90 - 7,80 (m, 2H), 7,46 - 7,22 (m, 2H), 4,68 - 4,57 (m, 1H), 4,18 - 4,06 (m, 1H), 3,81 (dd, J = 10,6, 5,4 Hz, 1H), 3,64 (dd, J= 10,5, 3,5 Hz, 1H), 3,32 (t, J= 6,6 Hz, 2H), 2,65 - 2,52 (m, 2H), 2,49 - 2,33 (m, 1H), 2,12 - 1,99 (m, 1H), 1,41 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 1,30 - 1,02 (m, 2H), 0,77 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,76 - 0,60 (m, 1H), 0,43 - 0,30 (m, 2H), 0,09 - -0,02 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -124,57; MS (ES+) 595,6 (M+1); Rotaţie optică [α]D = (+) 87,31 [0,52, MeOH]; Analiză calculată pentru C31H36ClFN6O3,2HCl,3H2O: C, 51,56; H, 6,14; Cl, 14,73; N, 11,64; Găsit: C, 51,25; H, 5,82; Cl, 14,94; N, 11,53.
Prepararea (R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4,4-difluoropirolidin1,2-dicarboxamidei (53d)
Etapa-1: Prepararea 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4,4-difluoropirolidin-1-carboxilatului de (R)-terţ-butil (53b)
Reacţia acidului (R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4,4-difluoropirolidin-2-carboxilic (53a) (225 mg, 0,896 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (39e) (349 mg, 0,896 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (221 mg, 0,896 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4,4-difluoropirolidin-1-carboxilatul de (R)-terţ-butil (53b) care s-a utilizat ca atare pentru etapa următoare; MS (ES+) 623,6 (M+1).
Etapa-2: Prepararea (R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4,4-difluoropirolidin-2-carboxamidei (53c)
Reacţia 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4,4-difluoropirolidin-1-carboxilatului de (R)-terţ-butil (53b) (243 mg, 0,39 mmoli) în metanol (10 mL) utilizând HCl 4N în dioxan (1,301 mL, 3,9 mmoli) urmată de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4,4-difluoropirolidin-2-carboxamida (53c) care s-a utilizat ca atare în etapa următoare fără altă purificare. MS (ES+) 441,4 (M+Na).
Etapa-3: Prepararea (R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4,4-difluoropirolidin-1,2-dicarboxamidei (53d)
Reacţia (R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4,4-difluoropirolidin-2-carboxamidei (53c) (90 mg, 0,215 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (48,1 mg, 0,194 mmoli) utilizând carbonat de potasiu (74,3 mg, 0,538 mmoli) ca bază conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu CMA 80 în cloroform 0-50%) (R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4,4-difluoropirolidin-1,2-dicarboxamida (53d) bază liberă ca un solid alb, care a suferit conversia la sare clorhidrat utilizând HCl (3N în MeOH, 3 mL) pentru a se obţine sarea clorhidrat a compusului 53d (16 mg, 0,025 mmoli, randament 11,52 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,24 - 10,15 (m, 1H), 9,61 (s, 3H), 9,51 (s, 1H), 8,84 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 8,32 (dd, J = 2,1, 1,3 Hz, 1H), 8,01 (dd, J = 7,3, 2,5 Hz, 1H), 7,84 (dd, J = 1,7, 1,1 Hz, 2H), 7,70 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 7,40 (dd, J = 10,4, 8,8 Hz, 1H), 7,22 (q, J = 5,4, 4,6 Hz, 1H), 4,92 (dd, J = 9,0, 5,1 Hz, 1H), 4,11 (dq, J = 26,3, 12,5 Hz, 2H), 3,05 - 2,78 (m, 1H), 2,59 - 2,54 (m, 2H), 2,46 - 2,41 (m, 1H), 1,14 (m, 2H), 0,81 - 0,55 (m, 1H), 0,47 - 0,31 (m, 2H), 0,02 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -97,03, -123,95; MS (ES+) 573,4 (M+1); Rotaţie optică [α]D = (+) 72,3 [0,155, MeOH]; Analiză calculată pentru C28H28ClF3N6O2,4HCl,2H2O: C, 44,55; H, 4,81; N, 11,13; Găsit: C, 44,49; H, 4,92; N, 11,07
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxi-4-(trifluorometil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (54g)
Etapa-1: Prepararea 2-metil 4-oxopirolidin-1,2-dicarboxilatului de (R)-1-terţ-butil (54b)
Oxidarea 2-metil 4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxilatului de (2R,4R)-1-terţ-butil (54a) (9,5 g, 38,7 mmoli) în DCM anhidru (50 mL) utilizând acid tricloroizocianuric (9,45 g, 40,7 mmoli) şi TEMPO (0,303 g, 1,937 mmoli) conform procedurii raportate în etapa 1 din Schema 29 a dat 2-metil 4-oxopirolidin-1,2-dicarboxilatul de (R)-1-terţ-butil (54b) (9,197 g, randament 98 %) ca un ulei galben. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 4,70 ― 4,56 (m, 1H), 3,91 ― 3,75 (m, 1H), 3,68 (m, 4H), 3,19 ― 3,01 (m, 1H), 2,67 ― 2,50 (m, 1H), 1,39 (2s, 9H, rotameri).
Etapa-2: Prepararea acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-carboxilic (54c)
La o soluţie de 2-metil 4-oxopirolidin-1,2-dicarboxilat de (R)-1-terţ-butil (54b) (3,5 g, 14,39 mmoli) în THF (100 mL) răcită la 0 °C s-a adăugat trimetil(trifluorometil)silan (2,189 g, 15,40 mmoli), TBAF (0,113 g, 0,432 mmoli) şi s-a agitat peste noapte la temperatura camerei. Reacţia s-a stins cu NH4Cl saturat apos (75 mL), s-a agitat timp de 20 min s-a adăugat fluorură de tetrabutilamoniu (6,02 g, 23,02 mmoli) şi s-a agitat la temperatura camerei timp de 3 h. Stratul organic s-a separat şi stratul apos s-a extras cu acetat de etil (3 x 100 mL). Fazele organice combinate s-au spălat cu apă, saramură, s-au uscat pe MgSO4 anhidru, s-au filtrat şi s-au concentrat la sec în vid. Reziduul obţinut s-a purificat prin cromatografie rapidă (silicagel, eluând cu 0-40% acetat de etil în hexani) pentru a se obţine 2-metil 4-hidroxi-4-(trifluorometil)pirolidin-1,2-dicarboxilatul de (2R,4R)-1-terţ-butil (54c) (2,818 g, 9,0 mmoli, randament 62,5 %) ca un ulei limpede. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 6,59 (s, 1H), 4,70 ― 4,38 (m, 1H), 3,76 ― 3,61 (m, 3H, rotameri), 3,63 ― 3,47 (m, 2H), 2,66 ― 2,53 (m, 1H), 2,11 (dd, J= 13,2, 5,4 Hz, 1H), 1,47 ― 1,27 (m, 9H, rotameri); MS (ES+) 336,3 (M+Na).
Etapa-3: Prepararea acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-carboxilic (54d)
La o soluţie 2-metil 4-hidroxi-4-(trifluorometil)pirolidin-1,2-dicarboxilat de (2R,4R)-1-terţ-butil (54c) (850 mg, 2,71 mmoli) în THF/H2O (1:1, 20 mL) s-a adăugat hidroxid de litiu (325 mg, 13,57 mmoli) şi s-a încălzit la reflux timp de 1h. Amestecul de reacţie s-a filtrat şi s-a concentrat în vid pentru a se obţine acidul (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-carboxilic (54d) (842 mg, 2,81 mmoli, randament 104 %), care s-a utilizat ca atare în etapa următoare fără altă purificare. MS (ES-), 298,3 (M-1).
Etapa-4: Prepararea 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxi-4-(trifluorometil)pirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (54e)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-carboxilic (54d) (842 mg, 2,82 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (39e) (850 mg, 2,71 mmoli) în tetrahidrofuran (20 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (695 mg, 2,82 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxi-4-(trifluorometil)pirolidin-1-carboxilatul de (2R,4R)-terţ-butil (54e) (420 mg, randament 23,08 %); MS (E+), 693,4 (M+23).
Etapa-5: Prepararea (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-carboxamidei (54f)
Reacţia 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxi-4-(trifluorometil)pirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (54e) (420 mg, 0,626 mmoli) în etanol (20 mL) utilizând HCl 4N în dioxan (1,565 mL, 6,26 mmoli) urmată de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-carboxamida (54f) (113 mg, randament 38,7 %). MS (E+), 467,4 (M+1).
Etapa-6: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxi-4-(trifluorometil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (54g)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-carboxamidei (54f) (113 mg, 242 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (60,2 mg, 242 mmoli) utilizând carbonat de potasiu (100 mg, 727 mmoli) ca bază conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu CMA 80 în cloroform 0-50%) urmată de cromatografie pe coloană cu fază inversă (coloană C-18, eluând cu 0-100% MeOH în apă) (2R,4R)-N2-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxi-4-(trifluorometil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (54g) ca o bază liberă, care a suferit conversia la sare de HCl utilizând HCl (3N în MeOH, 2mL) pentru a se obţine sarea clorhidrat a compusului 54g (42 mg, randament 28 %) ca un solid alb. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,00 (s, 1H), 9,69 (s, 3H), 9,46 (s, 1H), 9,00 - 8,79 (m, 2H), 8,31 (dd, J = 2,4, 1,0 Hz, 1H), 8,06 (dd, J = 7,2, 2,5 Hz, 1H), 7,92 - 7,74 (m, 4H), 7,39 (dd, J = 10,1, 8,5 Hz, 1H), 7,29 - 7,04 (m, 2H), 4,84 (dd, J = 9,1, 4,6 Hz, 1H), 4,05 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,77 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 2,65 (m, 1H), 2,51 (m, 2H), 2,26 - 2,14 (m, 1H), 1,23 (m, 1H), 1,08 (m, 1H), 0,67 (m, 1H), 0,36 (m, 2H), 0,02 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO) δ -75,03, -80,20, - 124,32. MS (ES+): 521,3 (M+1); 519,3 (M-1).
Prepararea (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(metilsulfonamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-etoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (55a)
La o soluţie de (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-etoxipirolidin-1,2-dicarboxamidă (51b) (240 mg, 0,413 mmoli) la 0 °C în diclorometan (10 mL) s-a adăugat piridină (163 mg, 2,065 mmoli), anhidridă metansulfonică (144 mg, 0,826 mmoli) şi s-a agitat peste noapte la temperatura camerei. S-au adăugat piridină (98 mg, 1,239 mmoli) şi anhidridă metansulfonic (71,9 mg, 0,413 mmoli) suplimentar şi amestecul s-a agitat timp de 2 h la temperatura camerei. Amestecul de reacţie s-a stins cu apă (10 mL) şi s-a extras cu DCM (3 x 20 mL). Straturile organice s-au combinat, s-au uscat, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid. Reziduul s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g, eluând cu 0-40% CMA80 în CHCl3) pentru a da (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(metilsulfonamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-etoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (55a) (158 mg, 0,240 mmoli, randament 58,0 %) bază liberă ca un solid alb. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,52 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,51 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 8,29 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,92 - 7,78 (m, 4H), 7,30 - 7,18 (m, 3H), 7,14 - 7,03 (m, 1H), 4,59 (dd, J = 9,0, 3,8 Hz, 1H), 4,12 (s, 1H), 3,76 (dd, J = 10,8, 5,1 Hz, 1H), 3,65 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 3,40 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,40 - 2,35 (m, 1H), 2,27 (s, 3H), 2,19 - 2,06 (m, 1H), 1,34 - 1,20 (m, 2H), 0,99 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 0,91 - 0,78 (m, 2H), 0,63 - 0,44 (m, 1H), 0,37 - 0,21 (m, 2H), -0,09 - -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,31; MS (ES+): 659,3 (M+1).
Baza liberă (132 mg, 0,20 mmoli) a suferit conversia la sare clorhidrat în MeOH (10 mL) utilizând HCl (3N în MeOH) (0,03 mL, 1,001 mmoli) pentru a se obţine (136 mg, 0,196 mmoli, randament 98 %) sarea clorhidrat a compusului 55a ca un solid galben. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,62 (s, 1H), 8,87 (d, J= 6,6 Hz, 2H), 8,30 (d, J= 2,0 Hz, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,96 (d, J= 6,5 Hz, 3H), 7,93 - 7,79 (m, 2H), 7,34 - 7,21 (m, 1H), 7,16 - 7,05 (m, 1H), 4,61 (dd, J = 8,9, 3,9 Hz, 1H), 4,19 - 4,06 (m, 2H), 3,84 - 3,72 (m, 2H), 3,66 (dd, J = 10,7, 3,2 Hz, 2H), 3,41 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,77 - 2,62 (m, 1H), 2,46 - 2,29 (m, 5H), 2,16 - 1,99 (m, 1H), 1,00 (t, J = 7,0 Hz, 4H), 0,88 - 0,69 (m, 1H), 0,64 - 0,50 (m, 1H), 0,32 (d, J = 7,9 Hz, 2H), -0,01 - -0,15 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO) δ -125,42; MS (ES+): 659,3 (M+1); Rotaţie optică [α]D = (+) 76,47 [0,17, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-acetamido-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-etoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (56a)
Reacţia (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-etoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (51b) (200 mg, 0,344 mmoli) la 0 °C în diclorometan utilizând piridină şi anhidridă acetică aşa cum este raportat în Schema 55 a dat (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-acetamido-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-etoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (56a) (156 mg, randament 72,7 %) bază liberă ca un solid alb. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,45 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,47 - 8,40 (m, 2H), 8,32 - 8,24 (m, 2H), 7,94 - 7,82 (m, 2H), 7,80 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,29 - 7,22 (m, 2H), 7,20 - 7,06 (m, 2H), 4,58 (dd, J = 9,0, 3,9 Hz, 1H), 4,17 - 4,06 (m, 1H), 3,82 - 3,70 (m, 1H), 3,70 - 3,60 (m, 1H), 3,49 - 3,30 (m, 2H), 2,60 - 2,50 (m, 1H), 2,42 - 2,26 (m, 1H), 2,17 - 2,03 (m, 1H), 1,90 (s, 3H), 1,30 - 1,20 (m, 2H), 1,03 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 0,91 - 0,78 (m, 1H), 0,70 - 0,52 (m, 1H), 0,38 - 0,27 (m, 2H), -0,04 - -0,18 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,98; Rotaţie optică [α]D = (+) 70,59 [0,255, MeOH]. Baza liberă a suferit conversia la sare clorhidrat în metanol (10 mL) utilizând HCl (3N în MeOH) (2,5 mL, 82 mmoli) pentru a se obţine sarea clorhidrat a compusului 56a (148 mg, 0,224 mmoli, randament 98 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,58 (s, 1H), 9,28 (s, 1H), 8,83 - 8,69 (m, 3H), 8,30 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,95 (m, 3H), 7,92 - 7,79 (m, 2H), 7,33 - 7,17 (m, 2H), 4,60 (dd, J = 9,0, 4,3 Hz, 1H), 4,18 - 4,08 (m, 2H), 3,84 - 3,72 (m, 1H), 3,66 (dd, J = 10,7, 3,2 Hz, 1H), 3,42 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,53 (m, 2H), 2,45 - 2,31 (m, 1H), 2,11 - 2,01 (m, 1H), 1,94 (s, 3H), 1,03 (t, J = 7,0 Hz, 5H), 0,71 - 0,57 (m, 1H), 0,40 - 0,30 (m, 2H), -0,03 - -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,67; MS (ES+): 623,3 (M+1); (ES-) 621,3 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 70,59 [0,255, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxi-4-(trifluorometil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (57d)
Etapa-1: Prepararea acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-carboxilic (57a)
Alchilarea acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-carboxilic (54d) (2,26 g, 7,55 mmoli) în THF (50 mL) cu dimetil sulfat (1,905 g, 15,10 mmoli) utilizând hidrură de sodiu (60% dispersie în ulei mineral, 1,812 g, 45,3 mmoli) ca bază conform procedurii raportate în schema 15 etapa 1 a dat acidul (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-carboxilic (57a) (1,6 g, 5,11 mmoli, randament 67,6 %) ca un solid alb. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,84 (s, 1H), 4,35 (t, J= 9,3 Hz, 1H), 3,73 ― 3,53 (m, 2H), 3,36 (s, 3H), 2,71 ― 2,51 (m, 1H), 2,38 ― 2,24 (m, 1H), 1,39 (2s, 9H, rotameri).
Etapa-2: Prepararea 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxi-4-(trifluorometil)pirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (57b)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-carboxilic (57a) (400 mg, 1,277 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (39e) (497 mg, 1,277 mmoli) în tetrahidrofuran (20 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (316 mg, 1,277 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxi-4-(trifluorometil)pirolidin-l-carboxilatul de (2R,4R)-terţ-butil (57b) (640 mg, 0,935 mmoli, randament 73,2 %) ca un solid alb-murdar.
Etapa-3: Prepararea (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-carboxamidei (57c)
Reacţia 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxi-4-(trifluorometil)pirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (57b) (640 mg, 0,935 mmoli) în etanol (200 mL) utilizând HCl 3N în metanol (16 mL) urmată de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-carboxamida (57c) (340 mg, 0,708 mmoli, randament 76 %) ca un solid alb. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,92 (s, 1H), 8,47 - 8,38 (m, 2H), 8,20-8,11 (m, 1H), 7,39 - 7,31 (m, 2H), 7,20 - 7,11 (m, 2H), 3,93 (q, J = 6,9 Hz, 1H), 3,70 - 3,56 (m, 1H), 3,24 (s, 4H), 3,23 - 3,09 (m, 1H), 2,36 - 2,25 (m, 4H), 2,25 - 2,16 (m, 2H), 1,11 - 1,02 (m, 2H), 0,69 - 0,57 (m, 1H), 0,39 - 0,30 (m, 2H), -0,01 - -0,12 (m, 2H).
Etapa-4: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxi-4-(trifluorometil)pirolidin-1,2-dicarboxamidei (57d)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxi-4-(trifluorometil)pirolidin-2-carboxamidei (57c) (340 mg, 0,708 mmoli) în tetrahidrofuran/apă (60 mL, 5:1) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (167 mg, 0,672 mmoli) utilizând carbonat de potasiu (489 mg, 3,54 mmoli) ca bază conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu CMA 80 în cloroform 0-25%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxi-4-(trifluorometil)pirolidin-1,2-dicarboxamida (57d) (35 mg, 0,055 mmoli, randament 8,85 %) ca o bază liberă, care a suferit conversia la sare clorhidrat în MeOH (10 mL) utilizând HCl (3N în MeOH) (0,367 mL, 1,102 mmoli) pentru a se obţine sarea clorhidrat a compusului 57d (34 mg, randament 87 %) ca un solid; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,00 (s, 1H), 9,67 (s, 3H), 9,45 (s, 1H), 8,84 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 8,37 - 8,21 (m, 1H), 7,92 - 7,79 (m, 3H), 7,71 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 7,43 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,41 - 7,35 (m, 1H), 7,34 - 7,23 (m, 1H), 4,85 (dd, J = 9,2, 3,8 Hz, 1H), 4,02 (q, J = 12,1 Hz, 2H), 3,31 (s, 3H), 2,75 - 2,55 (m, 1H), 2,51 (m, 2H), 2,47 - 2,30 (m, 1H), 1,30 - 0,99 (m, 2H), 0,68 (m, 1H), 0,43 - 0,29 (m, 2H), 0,10 - -0,05 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -75,82, -123,56; Rotaţie optică [α]D = (+) 56,0 [0,05, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-Nl-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-(3-cianofenil)(ciclopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenil)-4-etoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (58j)
Etapa-1: Prepararea (-)-N-(3-cianobenziliden)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (58a)
La o soluţie agitată de 3-formilbenzonitril (45,4 g, 347 mmoli) în tetrahidrofuran (460 mL) s-a adăugat (R)-2,4,6-triizopropilbenzensulfinamidă (35 g, 289 mmoli), tetraizopropoxititan (173 mL, 578 mmoli) şi s-a încălzit la reflux timp de 10 h. Prelucrarea s-a efectuat aşa cum este raportat în etapa 1 din Schema 1 pentru a furniza după cromatografia pe coloană (silicagel 1,5 kg, eluând cu 20% acetat de etil în hexan) (-)-N-(3-cianobenziliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (58a) (37,4 g, 160 mmoli, 55,3 % randament) ca un solid incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,63 (s, 1H), 8,42 (dd, J= 1,9, 1,3 Hz, 1H), 8,28 (dt, J= 7,9, 1,4 Hz, 1H), 8,07 (dt, J = 7,7, 1,4 Hz, 1H), 7,76 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 1,21 (s, 9H); MS (ES+) 257,2 (M+Na); Rotaţie optică: [α]D = (-) 83,21 [2,55, CHCl3].
Etapa-2: Prepararea (R)-N-((3-amino-4-fluorofenil)(3-cianofenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (58b)
Compusul 58b s-a preparat din (-)-N-(3-cianobenziliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (58a) (72 g, 307 mmoli) şi bromură de 3-(bis(trimetilsilil)amino)-4-fluorofenil)magneziu (1c) (430 mL, 430 mmoli) aşa cum este descris în etapa 4 din Schema 1 pentru a se obţine (R)-N-((3-amino-4-fluorofenil)(3-cianofenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (58b) (47,32 g, 137 mmoli, randament 44,6 %) ca un ulei galben gros.
Etapa-3: Prepararea 3-(amino(3-amino-4-fluorofenil)metil)benzonitrilului (58c)
La o soluţie agitată de (R)-N-((3-amino-4-fluorofenil)(3-cianofenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (58b) (238,82 g, 691 mmoli, raport de diastereoizomeri 55/45) în MTBE (1200 mL) s-a adăugat clorură de hidrogen în 1,4-Dioxan (363 mL, 1452 mmoli) şi s-a agitat la temperatura camerei timp de 7 h. S-a adăugat clorură de hidrogen în dioxan suplimentară (346 mL, 1383 mmoli) şi s-a agitat până când tot materialul de pornire a dispărut (24 h). Solidul obţinut s-a colectat prin filtrare s-a spălat cu MTBE (2 x 250 mL), s-a uscat în aer pentru a furniza 3-(amino(3-amino-4-fluorofenil)metil)benzonitrilul (58c) ca o sare de HCl (uşor higroscopică); 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,39 ― 9,10 (m, 3H), 7,57 ― 7,49 (m, 2H), 7,45 ― 7,34 (m, 3H), 7,26 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,15 (dd, J = 8,0, 2,0 Hz, 1H), 5,58 (d, J = 5,5 Hz, 1H); 19F RMN (282 MHz, DMSO) δ -129,75; MS (ES-) 240,2 (M-1). Solidul de mai sus s-a dizolvat în apă (500 mL), s-a alcalinizat prin adiţia de NaOH (3 N, 922 mL, 2765 mmoli). Amestecul s-a extras cu acetat de etil (2 x 1000 mL). Straturile organice s-au combinat s-au spălat cu saramură, s-au uscat, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid pentru a furniza 3-(amino(3-amino-4-fluorofenil)metil)benzonitrilul racemic (58c) (194 g, 804 mmoli, 116 % randament) bază liberă ca un ulei maroniu; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,38 ― 7,35 (m, 2H), 7,30 ― 7,24 (m, 2H), 6,86 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,79 (dd, J = 9,0, 2,2 Hz, 1H), 6,55 (ddd, J = 8,3, 4,5, 2,2 Hz, 1H), 5,03 (s, 2H), 4,94 (s, 1H), 2,13 (s, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO) δ - 138,23.
Etapa-4: Prepararea (+)-3-(amino(3-amino-4-fluorofenil)metil)benzonitrilului (58d)
La o soluţie de 3-(amino(3-amino-4-fluorofenil)metil)benzonitril (58c) racemic (raport 55/45 pentru doi distereomeri,141,38 g, 586 mmoli) în 85% terţ-butanol (5600 mL, obţinut din terţ-butanol şi apă) s-a adăugat acid D (-)-tartric (88 g, 586 mmoli) şi s-a încălzit 80 °C. Soluţia limpede s-a lăsat să se răcească la 29,8 °C (8 h). În acest moment cristalele obţinute s-au colectat prin filtrare, s-au spălat cu 200 mL de terţ-butanol 85%, s-au uscat în vid pentru a se obţine (+)-3-(amino(3-amino-4-fluorofenil)metil)benzonitrilul (58d) (36,4 g, 93 mmoli, 15,87 % randament global) ca o sare de 2,3-dihidroxisuccinat; MS (ES+) 225,2 (M+1); Puritate chirală prin HPLC 96,077% ee. Sarea de 2,3-dihidroxisuccinat de (+)-3-(amino(3-amino-4- fluorofenil)metil)benzonitril (58d) (18 g, 46,0 mmoli) în 85% terţ-butanol (388 mL) s-a încălzit la 80 °C (temperatură internă) până când a devenit omogenă. Amestecul s-a lăsat să ajungă la temperatura camerei şi cristalele albe formate s-au colectat prin filtrare şi s-au uscat în aer pentru a se obţine sarea de 2,3-dihidroxisuccinat de (+)-3-(amino(3-amino-4-fluorofenil)metil)benzonitril (58d) pură (16,7 g, 42,7 mmoli, randament 93 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,90 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 7,78 (dt, J = 7,6, 1,4 Hz, 1H), 7,72 (dt, J = 8,0, 1,4 Hz, 1H), 7,59 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,99 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,74 (dd, J = 8,7, 2,3 Hz, 1H), 6,59 (ddd, J = 8,4, 4,4, 2,3 Hz, 1H), 5,34 (s, 1H), 5,24 (s, 2H), 4,02 (s, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -135,95; MS (ES-) 240,2 (M-1); Puritate chirală prin HPLC >99,99%; Rotaţie optică: [α]D = (+) 0,59 [1,025, MeOH].
Etapa-5: Prepararea (+)-3-((ciclopropilmetilamino)(3-(ciclopropilmetilamino)-4-fluorofenil)metil)benzonitrile (58e) şi (+)-3-((3-amino-4-fluorofenil)(ciclopropilmetilamino)metil)benzonitrilului (58f)
La o soluţie agitată de (+)-3-(amino(3-amino-4-fluorofenil)metil)benzonitril (58d) (8,321 g, 34,5 mmoli, care a suferit conversia la bază liberă utilizând NaOH apos şi extracţia cu acetat de etil) în MeOH (20 mL) s-a adăugat la 0 °C ciclopropanecarboxaldehidă (3,25 mL, 43,1 mmoli) şi s-a agitat timp de 30 min. La această s-a adăugat borohidrură de sodiu (2,61 g, 69,0 mmoli) şi s-a agitat la 0 °C timp de 1 hr. Reacţia s-a concentrat în vid pentru a se îndepărta metanolul şi reziduul s-a dizolvat în acetat de etil (200 mL), s-a spălat cu apă (2 x 50 mL), saramură (50 mL), s-a uscat şi s-a concentrat. Reziduul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 120 g, eluând cu acetat de etil în hexani 0-100%) pentru a se obţine (+)-3-((ciclopropilmetilamino)(3-(ciclopropilmetilamino)-4-fluorofenil)metil)benzonitrilul (58e) (1,087 g, 3,11 mmoli, randament 9,02 %) ca un sirop incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,88 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,75 (dt, J = 7,9, 1,5 Hz, 1H), 7,64 (dt, J = 7,7, 1,4 Hz, 1H), 7,48 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 6,90 (dd, J = 11,9, 8,2 Hz, 1H), 6,84 (dd, J = 8,9, 2,1 Hz, 1H), 6,57 (ddd, J = 8,2, 4,5, 2,0 Hz, 1H), 5,34 (td, J = 6,0, 2,4 Hz, 1H), 4,81 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 2,96 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 2,59 (m, 1H), 2,27 (m, 2H), 1,03 (m, 1H), 0,98 - 0,84 (m, 1H), 0,40 (m, 4H), 0,26 - 0,17 (m, 2H), 0,05 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,04; MS (ES-) 348,4 (M-1); Rotaţie optică: [α]D = (+) 17,96 [0,245, MeOH], urmat de (+)-3-((3-amino-4-fluorofenil)(ciclopropilmetilamino)metil)benzonitril (58f) (7,891 g, 26,7 mmoli, randament 77 %) ca un sirop incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,84 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 7,71 (dt, J = 7,9, 1,5 Hz, 1H), 7,68 ― 7,63 (m, 1H), 7,49 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 6,88 (dd, J = 11,5, 8,3 Hz, 1H), 6,81 (dd, J = 9,0, 2,2 Hz, 1H), 6,56 (ddd, J = 8,3, 4,5, 2,1 Hz, 1H), 5,08 (s, 2H), 4,76 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 2,48 (m, 1H), 2,26 (m, 2H), 0,91 (m, 1H), 0,42 ― 0,34 (m, 2H), 0,09 ― 0,01 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,18 ; MS (ES+) 296,3 (M+1), (ES-) 294,3 (M-1); Rotaţie optică: [α]D = (+) 22,05 [0,88, CHCl3].
Etapa-6: Prepararea acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-etoxipirolidin-2-carboxilic (58g)
Alchilarea acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (14b) (26 g, 112 mmoli)) în THF (600 mL) cu sulfat de dietil (34,7 g, 225 mmoli) utilizând hidrură de sodiu (60% dispersie în ulei mineral, 27,0 g, 675 mmoli) ca bază conform procedurii raportate în schema 15 etapa 1 a dat acidul (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-etoxipirolidin-2-carboxilic (58g) (21,98 g, 85 mmoli, randament 75 %) ca un semisolid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,45 (s, 1H), 4,20 - 4,05 (m, 1H), 4,00 (m, 1H), 3,61 - 3,47 (m, 1H), 3,47 - 3,27 (m, 1H), 3,23 - 3,10 (m, 1H), 2,44 - 2,21 (m, 1H), 2,02 - 1,85 (m, 2H), 1,39, 1,34 (2s, 9H, rotameri), 1,14 - 0,93 (m, 3H); MS (ES+) 282,3 (M+Na); 258,3 (M-1)
Etapa-7: Prepararea (2R,4R)- 2-(5-(3-cianofenil)(ciclopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-etoxipirolidin-1-carboxilatului de terţ-butil (58h)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-etoxipirolidin-2-carboxilic (58g) (676 mg, 2,61 mmoli), (+)-3-((3-amino-4-fluorofenil)(ciclopropilmetilamino)metil)benzonitrilului (58f) (770 mg, 2,61 mmoli) în tetrahidrofuran (20 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (645 mg, 2,61 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat (2R,4R)- 2-(5-(3-cianofenil)(ciclopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-etoxipirolidin-1-carboxilatul de terţ-butil (58h) (1,21 gm, randament 86 %) ca un solid alb, care s-a utilizat ca atare pentru etapa următoare
Etapa-8: Prepararea (2R,4R)-N-(5-(3-cianofenil)(ciclopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenil)-4-etoxipirolidin-2-carboxamidei (58i)
Reacţia 2-(5-(3-cianofenil)(ciclopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-etoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (58h) (590 mg, 1,099 mmoli) în metanol (20 mL) utilizând HCl 3 N în metanol (1,832 mL, 5,50 mmoli) urmată de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4R)-N-(5-(3-cianofenil)(ciclopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenil)-4-etoxipirolidin-2-carboxamida (58i) (220 mg, randament 45,8 %) ca un ulei limpede. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,09 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 8,34 ― 8,21 (m, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,77 ― 7,67 (m, 1H), 7,66 (m, 1H), 7,49 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,23 ― 7,09 (m, 2H), 4,90 (s, 1H), 3,99 ― 3,87 (m, 1H), 3,73 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 3,29 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 3,02 (dd, J = 10,5, 4,0 Hz, 1H), 2,86 (dd, J = 11,0, 2,0 Hz, 1H), 2,62 (s, 1H), 2,26 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 2,13 ― 2,01 (m, 3H), 0,88 (m, 4H), 0,43 ― 0,28 (m, 2H), 0,12 ― -0,00 (m, 2H); MS (E+) 437,3 (M+1).
Etapa-9: Prepararea (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-(3-cianofenil)(ciclopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenil)-4-etoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (58j)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-(3-cianofenil)(ciclopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenil)-4-etoxipirolidin-2-carboxamidei (58i) (183 mg, 0,419 mmoli) în tetrahidrofuran/apă (10 mL, 5:1) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (94 mg, 0,377 mmoli) utilizând bicarbonat de sodiu (264 mg, 3,14 mmoli) ca bază conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu CMA 80 în cloroform 0-40%) (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-(3-cianofenil)(ciclopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenil)-4-etoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (58j) (95 mg, 0,161 mmoli, 43,6 % randament) bază liberă ca un solid alb. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,45 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,30 (dd, J = 2,6, 0,7 Hz, 1H), 7,93 - 7,84 (m, 3H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,75 - 7,68 (m, 1H), 7,66 (dt, J = 7,6, 1,3 Hz, 1H), 7,49 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,26 - 7,12 (m, 2H), 4,89 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 4,58 (dd, J = 9,0, 4,0 Hz, 1H), 4,17 - 4,06 (m, 1H), 3,81 - 3,71 (m, 1H), 3,71 - 3,59 (m, 1H), 3,41 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,66 - 2,57 (m, 1H), 2,25 (m, 2H), 2,16 - 2,04 (m, 1H), 1,04 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 0,95 - 0,82 (m, 1H), 0,41 - 0,32 (m, 2H), 0,07 - 0,01 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO) δ -127,31; MS (ES+) 591,3 (M+1). Baza liberă a compusului 58j (83 mg, 0,140 mmoli) a suferit conversia la sare clorhidrat în MeOH (5 mL) utilizând HCl (3N în MeOH) (0,234 mL, 0,14 mmoli) pentru a se obţine sarea clorhidrat a compusului 58j (80 mg, randament 91 %) ca un solid alb. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,42 (2s, 2H), 9,70 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,30 (d, J= 11,8 Hz, 2H), 8,18 - 7,99 (m, 2H), 7,99 - 7,81 (m, 3H), 7,65 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,39 (t, J = 9,4 Hz, 1H), 6,68 (s, 2H), 5,77 (s, 1H), 4,70 - 4,55 (m, 1H), 4,15 (s, 1H), 3,90 - 3,75 (m, 1H), 3,71 - 3,55 (m, 1H), 3,42 (q, J = 6,5 Hz, 2H), 2,71 (d, J = 4,1 Hz, 2H), 2,47 - 2,35 (m, 1H), 2,06 (m, 1H), 1,28 - 1,10 (m, 1H), 1,03 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 0,62-0,50 (m, 2H), 0,36-0,25 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO) δ -124,07; MS (ES+) 591,3 (M+1); Analiză calculată pentru C31H32ClFN6O3. 1,7HCl,2H2O: C, 54,03; H, 5,51; Cl, 13,89; N, 12,20; Găsit: C, 53,71; H, 5,64; Cl, 13,58; N, 11,88; Rotaţie optică [α]D = (+) 73,14 [0,175, MeOH].
Prepararea (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-ciclopropil-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (59d)
Etapa-1: Prepararea 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-oxopirolidin-1-carboxilatului de (R)-terţ-butil (59a)
Reacţia acidului (R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-oxopirolidin-2-carboxilic (29a) (1,5 g, 6,54 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (39e) (2,55 g, 6,54 mmoli) în tetrahidrofuran (50 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (1,651 g, 6,54 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-oxopirolidin-1-carboxilatul de (R)-terţ-butil (59a) (1,215 g, 2,022 mmoli, randament 30,9 %) ca un compus colorat uşor în crem; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,08 (s, 1H), 8,57 ― 8,45 (m, 2H), 8,05 ― 7,86 (m, 1H), 7,35 ― 7,13 (m, 4H), 5,52 (s, 1H), 5,01 ― 4,78 (m, 1H), 3,88 ― 3,71 (m, 2H), 3,17 ― 2,99 (m, 1H), 2,68 ― 2,55 (m, 2H), 2,49 ― 2,39 (m, 1H), 1,38 (2s, 9H, rotameri), 1,29 ― 1,17 (m, 1H), 1,14 (s, 9H), 1,00 ― 0,80 (m, 1H), 0,72 ― 0,56 (m, 1H), 0,42 ― 0,28 (m, 2H), -0,03 ― -0,09 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,64, - 126,84 (rotameri)
Etapa-2: Prepararea 4-ciclopropil-2-(5-((S)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-1-carboxilatul de (2R,4S)-terţ-butil (59b)
La o suspensie de clorură de ceriu (III) (2,462 g, 9,99 mmoli) în tetrahidrofuran (40 mL) răcită la -78°C s-a adăugat în picături bromură de ciclopropilmagneziu (0,5 M soluţie în THF, 18,64 mL, 9,32 mmoli) menţinând temperatura internă sub -70°C. Reacţia s-a agitat la -78°C timp de 30 min urmată de adiţia în picături a unei soluţii de 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-oxopirolidin-1-carboxilat de (R)-terţ-butil (59a) (1 g, 1,665 mmoli) în THF menţinând temperatura internă în timpul adiţiei sub -70°C. Amestecul de reacţie s-a încălzit la 0°C peste 2 h, s-a diluat cu acetat de etil (50 mL) şi s-a filtrat pentru a se îndepărta materialul insolubil. Filtratul s-a diluat cu apă şi stratul organic s-a separat, s-a spălat cu saramură, s-a uscat, s-a filtrat şi s-a concentrat în vid pentru a furniza 4-ciclopropil-2-(5-((S)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-1-carboxilatul de (2R,4S)-terţ-butil (59b) care s-a utilizat ca atare în etapa următoare fără purificare.
Etapa-3: Prepararea (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-ciclopropil-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidei (59c)
Reacţia 4-ciclopropil-2-(5-((S)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4S)-terţ-butil brut (59b) obţinut din etapa 2 de mai sus, în metanol (10 mL) utilizând HCl 3N în metanol (15 mL) urmată de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu 0-60% CMA-80 în CHCl3) (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-ciclopropil-4-hidroxipirolidin-2-carboxamida (59c) (163 mg, randament 22,33 % pentru două etape), MS (439,5, M+1).
Etapa-4: Prepararea (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-ciclopropil-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (59d)
Reacţia (2R,4S)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-ciclopropil-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidei (59c) (160 mg, 0,365 mmoli) în tetrahidrofuran/apă (10 mL, 5:1) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (82 mg, 0,328 mmoli) utilizând hidrogen carbonat de sodiu (184 mg, 2,189 mmoli) ca bază conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g eluând cu 9:1 acetat de etil/metanol în hexan 0-50%) (2R,4S)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-ciclopropil-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (59d) ca o bază liberă care a suferit conversia la sare clorhidrat (HCl 3 N în MeOH) pentru a da sarea clorhidrat a compusului 59d (25 mg, 0,042 mmoli, randament 12,84 %) ca un solid alb. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,94 (s, 1H), 9,83 (s, 2H), 9,31 (s, 1H), 8,96 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 8,31 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,99 ― 7,88 (m, 2H), 7,88 ― 7,76 (m, 2H), 7,46 ― 7,32 (m, 1H), 4,68 ― 4,60 (m, 3H), 3,63 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 3,50 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 2,57 (m, 2H), 2,28 (m, 1H), 1,95 (m, 1H), 1,32 ― 1,19 (m, 1H), 1,15 ― 0,94 (m, 2H), 0,82 ― 0,61 (m, 1H), 0,47 ― 0,20 (m, 5H), 0,13 ― -0,02 (m, 4H); 19F RMN (282 MHz, DMSO) δ -124,96; MS (ES+): 593,6 (M+1); Rotaţie optică [α]D = (+) 102,6 [0,15, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((R)-(3-cianofenil)(ciclopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (60a)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (1o) (0,14 g, 0,5 mmoli), (+)-3-((3-amino-4-fluorofenil)(ciclopropilmetilamino)metil) benzonitrilului (58f) (0,15 g, 0,5 mmoli) în tetrahidrofuran (5 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (0,12 g, 0,5 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă (silicagel 24 g, eluând cu CMA80 în cloroform 0 la 30%) (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((R)-(3-cianofenil)(ciclopropilmetilamino)metil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (60a) (96 mg, randament 34%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,65 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,69 (m 2H), 7,58 ― 7,45 (m, 2H), 7,30 ― 7,24 (m, 2H), 7,20 (m, 3H), 5,31 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,91 (s, 1H), 4,51 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,34 (q, J = 4,8 Hz, 1H), 3,69 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 2,44 ― 2,32 (m, 1H), 2,27 (s, 2H), 1,90 (m, 1H), 1,03 ― 0,78 (m, 1H), 0,49 ― 0,29 (m, 2H), 0,10 ― 0,02 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,01; MS (ES+) 562,4 (M+1), 584,4 (M+Na), (ES-) 596,5, 598,4 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 83,49 [0,355, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-((S)-1, 1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (61b)
Etapa-1: Prepararea (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (61a)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (1o) (0,28 g, 1,0 mmoli), (S)-N-((+)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (31e) (0,39 g, 1,0 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (0,25 g, 1,0 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă (silicagel 24 g, eluând cu CMA80 în cloroform 0 la 30%) (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (61a) (0,43 g, 65%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,83 (s, 1H), 8,78 ― 8,64 (m, 2H), 8,41 ― 8,27 (m, 1H), 7,99 ― 7,86 (m, 1H), 7,80 ― 7,67 (m, 2H), 7,52 ― 7,41 (m, 3H), 7,41 ― 7,31 (m, 1H), 7,28 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,22 (m, 1H), 6,35 (s, 1H), 5,49 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 4,70 (dd, J = 9,0, 4,6 Hz, 1H), 4,54 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 3,87 (dd, J = 10,1, 5,2 Hz, 1H), 3,73 ― 3,60 (m, 1H), 2,76 (m, 2H), 2,62 ― 2,47 (m, 1H), 2,16 ― 2,01 (m, 1H), 1,29 (s, 9H), 1,04 (m, 2H), 0,75 (m, 1H), 0,49 (m, 2H), 0,01 (m, 2H); MS (ES+) 656,5 (M+1), 678,5 (M+Na).
Etapa-2: Prepararea (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (61b)
Reacţia (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei brute (61a) (0,13 g, 0,2 mmoli) în etanol (5 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,12 mL) urmată de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 24 g, eluând cu 0-30% CMA-80 în cloroform) (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (61b) (95 mg, 86% randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,56 (s, 1H), 8,55 ― 8,42 (m, 2H), 8,07 (dd, J = 7,9, 2,2 Hz, 1H), 7,69 (td, J = 7,7, 1,9 Hz, 1H), 7,62 ― 7,47 (m, 3H), 7,32 ― 7,22 (m, 2H), 7,22 ― 7,12 (m, 2H), 7,08 (dd, J= 10,5, 8,7 Hz, 1H), 5,30 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 4,49 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,33 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 3,68 (dd, J = 10,1, 5,2 Hz, 1H), 3,50 ― 3,42 (m, 1H), 2,40 ― 2,21 (m, 5H), 1,89 (m, 1H), 1,03 (m, 2H), 0,60 (m, 1H), 0,39 ― 0,27 (m, 2H), -0,03 ― -0,13 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,58; MS (ES+) 552,5 (M+), MS (ES-) 586,4 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 91,1 [0,18, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (62c)
Etapa-1: Prepararea 2-(5-(3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (62a)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (14b) (0,15 g, 0,65 mmoli), (S)-N-((+)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (31e) (0,25 g, 0,65 mmoli) în tetrahidrofuran (50 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (0,175 g, 0,71 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat 2-(5-(3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-1-carboxilatul de (2R,4R)-terţ-butil (62a) (0,24 g, 61%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,71 (s, 1H), 8,57 ― 8,48 (m, 1H), 7,97 (d, J= 7,4 Hz, 1H), 7,80 ― 7,66 (m, 1H), 7,33 ― 6,97 (m, 4H), 6,14 (s, 1H), 5,33 ― 5,15 (m, 1H), 4,23 (m, 2H), 3,55 ― 3,41 (m, 1H), 3,27 ― 3,14 (m, 1H), 2,65 ― 2,53 (m, 2H), 2,41 ― 2,29 (m, 1H), 1,78 (m, 1H), 1,44 ― 1,13 (m, 11H), 1,09 (s, 9H), 0,65 ― 0,44 (m, 1H), 0,38 ― 0,23 (m, 2H), -0,13 ― -0,27 (m, 2H); MS (ES+) 603,6 (M+1), MS (ES-) 601,6 (M-1).
Etapa-2: Prepararea (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidei (62b)
Reacţia 2-(5-(3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (62a) (0,24 g, 0,4 mmoli) în metanol (5 mL) utilizând HCl conc urmată de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidă (62b) ca un ulei galben, care s-a utilizat ca atare în etapa următoare fără altă purificare.
Etapa-3: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (62c)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidei (62b) obţinute în etapa 2 de mai sus, în tetrahidrofuran/apă (20 mL/1 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (0,09 g, 0,35 mmoli) utilizând bicarbonat de sodiu (0,33 g, 4 mmoli) ca bază conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 12 g, eluând cu CMA-80 în cloroform 0-30%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidă (62c) (0,11 g, 50%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,63 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,50 ― 8,43 (m, 1H), 8,32 ― 8,26 (m, 1H), 8,08 ― 8,00 (m, 1H), 7,88 (dd, J = 9,0, 0,8 Hz, 1H), 7,79 (dd, J = 9,0, 2,7 Hz, 1H), 7,74 ― 7,64 (m, 1H), 7,52 (dt, J = 8,0, 1,0 Hz, 1H), 7,22 ― 7,02 (m, 2H), 5,30 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 4,60 ― 4,47 (m, 1H), 4,36 ― 4,23 (m, 1H), 3,78 ― 3,64 (m, 1H), 3,58 ― 3,42 (m, 2H), 2,40 ― 2,19 (m, 5H), 1,88 (m, 1H), 1,10 ― 0,92 (m, 2H), 0,70 ― 0,51 (m, 1H), 0,40 ― 0,25 (m, 2H), -0,04 ― -0,17 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,34; MS (ES+) 553,4 (M+1), MS (ES-) 551,3 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 74,44 [0,36, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(4-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (63g)
Etapa: 1 Prepararea (E)-4-(3-ciclopropilacriloil)benzonitrilului (63b)
La o soluţie agitată de 4-acetilbenzonitril (63a) (5 g, 34,4 mmoli) în etanol (100 mL) s-a adăugat la 0 °C ciclopropanecarboxaldehidă (4,15 mL, 55,1 mmoli) urmată de hidroxid de potasiu (soluţie apoasă 2 M, 3,44 mL, 6,89 mmoli). Amestecul de reacţie a fost lăsat să atingă temperatura camerei şi s-a agitat timp de 24 h. Reacţia s-a acidulat cu HCl la pH 6 şi s-a concentrat în vid menţinând temperatura băii sub 35 °C. Reziduul obţinut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel eluând cu acetat de etil în hexani 0 la 20%) pentru a se obţine (E)-4-(3-ciclopropilacriloil)benzonitril (63b) (512 mg, 2,60 mmoli, randament 7,54 %) ca un lichid incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,12 ― 8,08 (m, 2H), 8,02 ― 7,99 (m, 2H), 7,25 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 6,57 (dd, J = 15,1, 10,4 Hz, 1H), 1,80 (dddd, J = 12,4, 10,4, 7,9, 4,5 Hz, 1H), 1,08 ― 0,99 (m, 2H), 0,79 (tt, J = 4,8, 2,4 Hz, 2H); MS (ES-) 196,1 (M-1).
Etapa 2: Prepararea 4-(3-ciclopropilpropanoil)benzonitrilului (63c)
La o soluţie agitată de (E)-4-(3-ciclopropilacriloil)benzonitril (63b) (1,1 g, 5,58 mmoli) în acetonitril (10 mL) s-a adăugat hidrură de tri-n-butilstaniu (1,489 mL, 5,58 mmoli) şi s-a încălzit timp de 6 h la reflux. Amestecul de reacţie s-a răcit la temperatura camerei şi s-a concentrat în vid. Reziduul obţinut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel eluând cu acetat de etil în hexani 0 la 100%) pentru a se obţine 4-(3-ciclopropilpropanoil)benzonitril (63c) (457mg, 2,294 mmoli, randament 41,1 %) ca un ulei incolor; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,08 ― 8,03 (m, 2H), 7,98 ― 7,91 (m, 2H), 3,09 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,46 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 0,77 ― 0,59 (m, 1H), 0,38 ― 0,26 (m, 2H), 0,06 ― -0,04 (m, 2H); MS (ES-) 198,2 (M-1).
Etapa-3: Prepararea (+)-N-(1-(4-cianofenil)-3-ciclopropilpropiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (63d)
Compusul (63d) s-a preparat din 4-(3-ciclopropilpropanoil)benzonitril (63c) (0,814 g, 4,08 mmoli) şi (R)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (0,45 g, 3,71 mmoli), utilizând procedura aşa cum este raportată în etapa 3 din Schema 31 pentru a se obţine (+)-N-(1-(4-cianofenil)-3-ciclopropilpropiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (63d) (720 mg, 2,38 mmoli, 64,1 % randament) ca un sirop galben deschis; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,11 ― 7,93 (m, 4H), 3,34 (m, 2H), 1,44 (m, 1H), 1,24 (s, 10H), 0,73 (m, 1H), 0,45 ― 0,29 (m, 2H), 0,03 (m, 2H).; Rotaţie optică: [α]D = (+) 16,55 [0,29, MeOH].
Etapa-4: Prepararea (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(4-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (63e)
Compusul (63e) s-a preparat din (+)-N-(1-(4-cianofenil)-3-ciclopropilpropiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (63d) (0,5 g, 1,653 mmoli), utilizând procedura aşa cum este raportată în etapa 4 din Schema 31 pentru a se obţine (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(4-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (63e) (538 mg, 1,301 mmoli, randament 79 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,83 ― 7,66 (m, 2H), 7,61 ― 7,44 (m, 2H), 6,90 (dd, J = 11,3, 8,5 Hz, 1H), 6,70 (dd, J = 8,7, 2,4 Hz, 1H), 6,47 (ddd, J= 8,6, 4,3, 2,4 Hz, 1H), 5,27 (s, 1H), 5,11 (s, 2H), 2,62 ― 2,55 (m, 1H), 2,46 ― 2,39 (m, 1H), 1,12 (s, 9H), 1,06 (s, 1H), 0,99 ― 0,80 (m, 1H), 0,64 (s, 1H), 0,36 (m, 2H), - 0,02 ― -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -137,54 ; MS (ES+) 414,396 (M+1); Rotaţie optică: [α]D = (-) 83,24 [0,185, MeOH].
Etapa-5: Prepararea (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(1-(4-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (63f)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (1o) (0,14 g, 0,5 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-1-(4-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (63e) (0,2 g, 0,5 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (0,12 g, 0,5 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă (silicagel 24 g, eluând cu CMA80 în cloroform 0 la 30%) (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(1-(4-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidă (63f) (0,13 g, 38%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,85 (s, 1H), 8,71 (s, 1H), 8,28 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,80 ― 7,64 (m, 4H), 7,48 (dd, J = 8,9, 2,3 Hz, 2H), 7,38 (t, J = 9,8 Hz, 1H), 7,28 (s, 1H), 5,68 (s, 1H), 5,52 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 4,71 (dd, J = 9,2, 4,6 Hz, 1H), 4,54 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 3,88 (dd, J = 9,9, 5,2 Hz, 1H), 3,70 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,79 (m, 1H), 2,61 (m, 1H), 1,42 (m, 2H), 1,33 (s, 9H), 1,14 ― 0,98 (m, 2H), 0,83 (m, 1H), 0,54 (m, 2H), 0,17 ― 0,04 (m, 2H); MS (ES+) 680,5 (M+1), 702,5 (M+Na), MS (ES-) 678,6 (M-1), 714,5 (M+Cl).
Etapa-6: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(4-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (63g)
Reacţia (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(1-(4-cianofenil)-3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (63f) (0,13 g, 0,2 mmoli) în etanol (5 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,12 mL) urmată de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 24 g, eluând cu 0-30% CMA-80 în cloroform) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-1-(4-cianofenil)-3-ciclopropilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidă (63g) (70 mg, randament 61%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,60 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,10 ― 7,96 (m, 1H), 7,78 ― 7,67 (m, 2H), 7,61 ― 7,52 (m, 4H), 7,30 ― 7,24 (m, 2H), 7,14 ― 7,08 (m, 2H), 5,30 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 4,48 (td, J = 9,2, 4,0 Hz, 1H), 4,33 (q, J = 4,8 Hz, 1H), 3,68 (dd, J = 10,0, 5,4 Hz, 1H), 3,50 ― 3,41 (m, 1H), 2,23 (m, 5H), 1,95 ― 1,83 (m, 1H), 1,13 ― 0,91 (m, 2H), 0,80 ― 0,53 (m, 1H), 0,40 ― 0,27 (m, 2H), -0,04 ― -0,13 (m, 2H),19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ - 129,19; MS (ES+) 598,5 (M+Na),(ES-) 574,4 (M-1), 610,4 (M+Cl); Rotaţie optică: [α]D = (+) 81,7 [0,225, CH3OH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-3-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (64g)
Etapa-1: Prepararea (E)-3-ciclopropil-1-(piridin-3-il)prop-2-en-1-onei (64b)
La o soluţie agitată de 3-acetilpiridină (64a) (9,07 mL, 83 mmoli) în metanol (200 mL) răcită la 0 °C s-a adăugat ciclopropanecarboxaldehidă (9,95 mL, 132 mmoli) şi hidroxid de potasiu apos (1 N soluţie, 16,51 mL, 16,51 mmoli). Reacţia s-a lăsat să se încălzească peste noapte la temperatura camerei. Reacţia s-a acidulat cu acid clorhidric şi s-a concentrat în vid pentru a se îndepărta metanolul. Reziduul brut s-a dizolvat în acetat de etil (300 mL), s-a spălat cu soluţie de carbonat de sodiu, apă (2 x 100 mL), saramură (50 mL), s-a uscat, s-a filtrat şi s-a concentrat în vid. Reziduul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 80 g, eluând cu acetat de etil în hexani 0 la 100%) pentru a se obţine (E)-3-ciclopropil-1-(piridin-3-il)prop-2-en-1-onă (64b) (5,99 g, 41,9 %); 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,14 (td, J = 2,7, 0,9 Hz, 1H), 8,80 (ddd, J = 4,9, 3,3, 1,7 Hz, 1H), 8,36 - 8,27 (m, 1H), 7,57 (ddt, J = 8,0, 4,8, 1,2 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 15,1 Hz, 1H), 6,58 (dd, J = 15,1, 10,3 Hz, 1H), 1,80 (dddd, J = 12,5, 10,4, 7,8, 4,5 Hz, 1H), 1,08 - 0,99 (m, 2H), 0,85 - 0,76 (m, 2H); MS (ES+) 196,1 (M+Na).
Etapa-2: Prepararea 3-ciclopropil-1-(piridin-3-il)propan-1-onei (64c)
La o soluţie agitată de (E)-3-ciclopropil-1-(piridin-3-il)prop-2-en-1-onă (64b) (5,93 g, 34,2 mmoli) în benzen (150 mL) s-a adăugat tributilstanan (18,42 mL, 68,5 mmoli) şi s-a încălzit la reflux. Reacţia s-a agitat la reflux timp de 5 h şi s-a răcit la temperatura camerei. Benzenul s-a evaporat şi reziduul s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 80 g, eluând cu acetat de etil în hexani 0 la 100%) pentru a se obţine 3-ciclopropil-1-(piridin-3-il)propan-1-onă (64c) (5,29 g, 88 %); 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,07 (dd, J = 2,3, 0,9 Hz, 1H), 8,72 (dd, J = 4,8, 1,7 Hz, 1H), 8,24 (ddd, J = 8,0, 2,4, 1,8 Hz, 1H), 7,50 (ddd, J = 8,0, 4,9, 0,9 Hz, 1H), 3,09 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,47 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 0,70 (dddd, J= 12,0, 8,1, 5,1, 2,2 Hz, 1H), 0,40 ― 0,21 (m, 2H), 0,06 ― -0,05 (m, 2H). Etapa-3: Prepararea (-)-N-(3-ciclopropil-1-(piridin-3-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (64d)
Compusul (64d) s-a preparat din 3-ciclopropil-1-(piridin-3-il)propan-1-onă (64c) (3,98 g, 22,69 mmoli) şi (R)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (2,5 g, 20,63 mmoli) utilizând procedura aşa cum este raportată în etapa 3 din Schema 31 pentru a se obţine (-)-N-(3-ciclopropil-1-(piridin-3-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (64d) (2,5 g, 8,98 mmoli, randament 43,5 %) ca un sirop galben; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,04 (s, 1H), 8,72 (dd, J= 4,8, 1,6 Hz, 1H), 8,24 (d, J= 8,1 Hz, 1H), 7,53 (dd, J= 8,1, 4,8 Hz, 1H), 3,40 (m, 1H), 3,30 (m, 1H), 1,47 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 1,24 (s, 9H), 0,82 ― 0,66 (m, 1H), 0,44 ― 0,29 (m, 2H), 0,12 ― 0,01 (m, 2H); Rotaţie optică [α]D = (-) 17,29 [0,59,MeOH].
Etapa-4: Prepararea (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-3-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (64e)
La o soluţie agitată de (-)-N-(3-ciclopropil-1-(piridin-3-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (64d) (82 g, 295 mmoli) în toluen (1700 mL) la -20 °C s-a adăugat în picături o soluţie proaspăt preparată de bromură de (3-(bis(trimetilsilil)amino)-4-fluorofenil)magneziu (1c) (920 mL, 736 mmoli) pe o perioadă de 120 min. Amestecul de reacţie s-a agitat la -20 °C timp de 1 h şi s-a stins cu KHSO4 apos (1600 mL). Amestecul de reacţie s-a agitat timp de 1 h la temperatura camerei, s-a alcalinizat cu NaOH 2 N la pH ∼ 8 şi s-a extras cu acetat de etil (1500, 700 mL). Straturile organice s-au combinat s-au spălat cu apă (2 × 700 mL), saramură (700 mL), s-au uscat şi s-au concentrat în vid. Reziduul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu (9:1) acetat de etil/metanol în hexani 0 la 50%) pentru a se obţine (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-3-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (64e) (54,155 g, 139 mmoli, randament 47,2 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,53 ―8,48 (m, 1H), 8,39 (dd, J = 4,7, 1,5 Hz, 1H), 7,70 (dt, J = 8,1, 2,0 Hz, 1H), 7,32 (dd, J = 8,0, 4,7 Hz, 1H), 6,90 (dd, J = 11,2, 8,5 Hz, 1H), 6,73 (dd, J = 8,8, 2,4 Hz, 1H), 6,56 ― 6,45 (m, 1H), 5,26 (s, 1H), 5,10 (s, 2H), 2,67 ― 2,54 (m, 2H), 1,28 ― 1,11 (m, 1H), 1,12 (s, 9H), 0,91 (m, 1H), 0,64 (m, 1H), 0,40 ― 0,30 (m, 2H), -0,02 ― -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO d6) δ -137,67; MS (ES+) 390,4 (M+1); (ES-) 388,4 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (-) 105,71 [0,28, MeOH].
Etapa-5: Prepararea (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-3-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (64f)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (1o) (0,14 g, 0,5 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-3-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (64e) (0,2 g, 0,5 mmoli) în tetrahidrofuran (5 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (0,12 g, 0,5 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă (silicagel 24 g, eluând cu CMA80 în cloroform 0 la 30%) (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-3-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (64f) (0,09 g, 27%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,97 (s, 1H), 8,83 (d, J = 2,5 Hz, 2H), 8,72 (dd, J = 4,5, 2,8 Hz, 1H), 8,40 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,92 ― 7,81 (m, 2H), 7,70 ― 7,56 (m, 3H), 7,54 ― 7,38 (m, 2H), 5,81 (s, 1H), 5,64 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 4,82 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 4,66 (m, 1H), 3,99 (m, 1H), 3,82 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 2,42 - 2,32 (m, 3H), 2,23 (m, 1H), 1,45 (m, 10H), 1,31 ― 1,10 (m, 1H), 0,96 (s, 1H), 0,65 (s, 2H), 0,33 ― 0,24 (m, 2H); MS (ES+) 656,5 (M+1), 678,5 (M+Na), MS (ES-) 654,4 (M-1), 690,5 (M+Cl).
Etapa-6: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-3-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (64g)
Reacţia (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-3-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (64f) (0,08 g, 0,12 mmoli) în etanol (4 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,12 mL) urmată de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 24 g, eluând cu 0-30% CMA-80 în cloroform) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-3-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (64g) (35 mg, randament 50%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s, 1H), 8,58 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,35 (dd, J = 4,7, 1,5 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,73 (dt, J = 8,1, 2,0 Hz, 1H), 7,58 ― 7,49 (m, 2H), 7,32 ― 7,23 (m, 3H), 7,18 ― 7,09 (m, 2H), 5,30 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 4,50 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,33 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 3,68 (dd, J = 10,0, 5,3 Hz, 1H), 3,49 (s, 1H), 2,38 (m, 3H), 2,23 (m, 1H), 1,03 (m, 2H), 0,64 (m, 1H), 0,41 ― 0,27 (m, 2H), -0,03 ― -0,13 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,28; MS (ES+) 552,5 (M+1), 574,5, 576,5 (M+Na), (ES-) 550,5, 552,4 (M-1), 586,5, 588,5 (M+Cl); Rotaţie optică: [α]D = (+) 68,0 [0,25, CH3OH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (65b)
Etapa-1: Prepararea (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (65a)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-(3-ciclopropil-1-((S)-1, 1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (37b) (0,1 g, 0,19 mmoli) cu 4-izocianat de clorofenil (0,045 g, 0,3 mmoli) utilizând TEA (80 µL) ca bază în THF (5 mL) conform procedurii raportate în etapa 9 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (65a) (0,105 g, 80%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,48 (s, 1H), 8,57 ― 8,47 (m, 2H), 8,04 ― 7,94 (m, 1H), 7,73 (td, J = 7,7, 1,7 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,27 (dd, J = 10,5, 7,5 Hz, 3H), 7,23 ― 7,05 (m, 2H), 6,14 (s, 1H), 4,53 (dd, J = 9,2, 3,9 Hz, 1H), 4,06 (s, 1H), 3,78 ― 3,55 (m, 2H), 3,21 (s, 3H), 2,68 ― 2,52 (m, 2H), 2,42 ― 2,24 (m, 1H), 2,15 ― 2,02 (m, 1H), 1,21 (m, 1H), 1,09 (s, 9H), 0,91 ― 0,65 (m, 2H), 0,62 ― 0,47 (m, 1H), 0,29 (m, 2H), -0,16 ― -0,21 (m, 2H); MS (ES+) 670,5 (M+1), 692,5 (M+Na), MS (ES-) 668,5 (M-1), 704,5 (M+Cl).
Etapa 2: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (65b)
Reacţia (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(3-ciclopropil-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (65a) (0,1 g, 0,43 mmoli) în etanol (5 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (0,12 mL) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 12 g, eluând cu CMA80 în cloroform 0 la 30%) sarea clorhidrat a (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-2-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (65b) (65 mg, randament 65%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 9,65 (s, 1H), 8,90 (s, 3H), 8,69 ― 8,64 (m, 1H), 8,57 (s, 1H), 7,99 (dd, J = 7,4, 2,5 Hz, 1H), 7,87 (td, J = 7,8, 1,8 Hz, 1H), 7,61 ― 7,52 (m, 2H), 7,47 ― 7,41 (m, 1H), 7,38 ― 7,25 (m, 4H), 7,17 ― 7,08 (m, 1H), 4,55 (dd, J = 9,2, 4,2 Hz, 1H), 4,15 ― 4,04 (m, 1H), 3,75 (dd, J = 10,5, 5,3 Hz, 1H), 3,61 (dd, J = 10,4, 3,5 Hz, 1H), 3,23 (s, 3H), 2,52 ― 2,33 (m, 3H), 2,14 ― 2,00 (m, 1H), 1,10 (m, 2H), 0,67 (m, 1H), 0,45 ― 0,34 (m, 2H), -0,01 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -125,63; MS (ES+) 566,5 (M+1), (ES- ) 600,5 (M+Cl); Rotaţie optică: [α]D = (+) 94,4 [0,25, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (66c)
Etapa 1: Prepararea (2R,4R)- 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de benzil (66a)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(benziloxicarbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (15b) (2 g, 7,16 mmoli), (R)-N-((-)-(3-amino-4-fluorofenil)(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (1e) (2,41 g, 7,52 mmoli) în tetrahidrofuran (50 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (1,86 g, 7,52 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 40 g, eluând cu CMA 80 în cloroform 0 la 100%) (2R,4R)- 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatul de benzil (66a) (3,11 g, 75%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,54 (2s, 1H, rotameri), 7,81 (m, 1H), 7,45 ― 7,09 (m, 12H), 6,00 (s, 1H), 5,47 (s, 1H), 5,17 ― 4,93 (m, 2H), 4,44 (m, 1H), 3,99 (m, 1H), 3,69 (m, 1H), 3,50 ― 3,36 (m, 1H), 3,18 (m, 3H), 2,11 ― 1,98 (m, 2H), 1,13 (s, 9H); MS (ES+) 582,5 (M+1).
Etapa 2: Prepararea (2R,4R)-N-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (66b)
Debenzilarea prin hidrogenare a 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-benzil (66a) (3,0 g, 5,15 mmoli) în etanol (50 mL), utilizând paladiu pe cărbune 10% (0,3 g) drept catalizator conform procedurii raportate în etapa 2 din Schema 13 a dat (2R,4R)-N-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamida (66b) (1,45 g, randament 63%) ca un solid alb; MS (ES+) 448,4 (M+1), (ES-) 446,3 (M-1).
Etapa-3: Prepararea (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (66c)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (66b) (0,18 g, 0,4 mmoli) în tetrahidrofuran (20 mL), (5-cloropiridin-2-il)carbamatului de fenil (13b) (0,13 g, 0,52 mmoli), utilizând ca bază trietilamina (0,08 g, 0,8 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (66c) (0,12 g, randament 52%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,78 (s, 1H), 9,45 (s, 1H), 8,60 (m, 1H), 8,25 ― 8,03 (m, 3H), 7,72 ― 7,43 (m, 7H), 6,29 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 5,77 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 4,88 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,34 (m, 1H), 4,02 (m, 2H), 3,50 (s, 3H), 2,75 ― 2,59 (m, 1H), 2,39 (m, 1H), 1,42 (s, 9H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,17; MS (ES+) 624,5, 626,4 (M+Na), (ES-) 601,5,5, 602,5 (M-1); Rotaţie optică [α]D= (+) 22,22 [0,135, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(etilamino)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (67b)
Etapa-1: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (67a)
Reacţia (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (66c) (0,8 g, 1,3 mmoli) în etanol (50 mL) utilizând soluţie conc. de HCl (1 mL) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 12 g, eluând cu CMA80 în cloroform 0 la 40%) (2R,4R)-N2-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (67a) (0,32 g, 49%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,44 (s, 1H), 9,13 (s, 1H), 8,36 ― 8,24 (m, 1H), 7,96 ― 7,74 (m, 3H), 7,43 ― 7,32 (m, 2H), 7,32 ― 7,21 (m, 2H), 7,21 ― 7,10 (m, 3H), 5,06 (s, 1H), 4,57 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,04 (s, 1H), 3,73 (m, 2H), 3,21 (m, 3H), 2,45 ― 2,28 (m, 3H), 2,09 (m, 1H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,12; MS(ES+) 498,4 (M+1); MS (ES-) 532,4 (M+Cl).
Etapa 2: Prepararea (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(etilamino)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (67b)
Aminarea reductivă a (2R,4R)-N2-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (67a) (0,075 g, 0,15 mmoli) în MeOH (3 mL) utilizând acetaldehidă (0,02 g, 0,45 mmoli) şi borohidrură de sodiu (0,017 g, 0,45 mmoli) conform procedurii raportate în Schema 41 a dat după prelucrare şi purificare prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 12 g, eluând cu metanol în cloroform 0 la 10%) (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(etilamino)-1-fenilpropil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (67b) (0,055 g, randament 69%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,51 ― 9,42 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,30 (dd, J = 2,7, 0,8 Hz, 1H), 7,94 ― 7,85 (m, 2H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 7,27 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,22 ― 7,09 (m, 4H), 4,76 (s, 1H), 4,58 (dd, J = 9,2, 4,0 Hz, 1H), 4,09 ― 3,97 (m, 2H), 3,84 ― 3,63 (m, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,46 ― 2,27 (m, 3H), 2,09 (m, 1H), 1,03 (t, J = 6,9 Hz, 3H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,09; MS(ES+) 526,4 (M+1), 548,4 (M+Na) MS (ES-) 524,4 (M-1), 560,4 (M+Cl); Rotaţie optică: [α]D = (+) 72,31 [0,26, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (68a)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(4-clorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (0,095 g, 0,03 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (39e) (0,13 g, 0,3 mmoli) în tetrahidrofuran (5 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (0,085 g, 0,3 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (68a) (0,04 g, 21%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,67 (s, 1H), 8,56 ― 8,44 (m, 3H), 8,09 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,61 ― 7,48 (m, 2H), 7,34 ― 7,24 (m, 4H), 7,24 ― 7,14 (m, 1H), 7,10 (m, 1H), 5,51 (s, 1H), 5,33 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 4,51 (dd, J = 9,1, 4,7 Hz, 1H), 4,34 (m, 1H), 3,68 (m, 1H), 3,54 ― 3,45 (m, 1H), 2,42 ― 2,27 (m, 3H), 1,25 ― 1,16 (m, 1H), 1,14 (s, 9H), 0,89 (m, 1H), 0,63 (m, 1H), 0,34 (m, 2H), -0,07 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,49; MS (ES+) 656,5 (M+1), 678,5, 680,5 (M+Na) (ES-) 654,5, 655,5 (M-1), 690,5, 692,6 (M+Cl).
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (69a)
Reacţia (2R,4R)-N1-(4-clorofenil)-N2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (68a) (0,17 g, 0,26 mmoli) în metanol (5 mL) utilizând HCl 3M în metanol aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 12 g, eluând cu CMA80 în cloroform 0 la 40%) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamida (69a) (0,1 g, 70%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,47 ― 8,40 (m, 2H), 8,05 (d, J= 7,7 Hz, 1H), 7,59 ― 7,49 (m, 2H), 7,38 ― 7,31 (m, 2H), 7,31 ― 7,23 (m, 2H), 7,13 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 5,30 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,50 (dd, J = 9,0, 4,7 Hz, 1H), 4,40 ― 4,26 (m, 1H), 3,68 (dd, J = 10,0, 5,3 Hz, 1H), 3,51 ― 3,41 (m, 1H), 2,39 ― 2,12 (m, 5H), 1,96 ― 1,81 (m, 1H), 1,12 ― 0,92 (m, 2H), 0,72 ― 0,54 (m, 1H), 0,41 ― 0,26 (m, 2H), -0,02 ― -0,15 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -129,12 (q, J = 7,7 Hz); MS (ES+) 552,5 (M+1), 554,5 (M+2); Rotaţie optică: [α]D = (+) 76,66 [0,06, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (70c)
Etapa-1 Prepararea 2-(5-((-)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (70a)
Compusul 70a s-a preparat din acid (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (36a) (22 g, 90 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (39e) (34,2 g, 88 mmoli) şi 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (24,2 g, 98 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 pentru a se obţine, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu 0-100% 9:1 acetat de etil/metanol în hexani) 2-(5-((-)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatul de (2R,4R)-terţ-butil (70a) (38,8 g, 70%) ca o spumă incoloră. Datele 1H RMN au arătat produsul ca rotameri; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,52 (s, 1H), 8,54 ― 8,45 (m, 2H), 7,89 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,36 ― 7,27 (m, 2H), 7,20 (d, J = 10,3 Hz, 2H), 5,47 (s, 1H), 4,39 ― 4,21 (m, 1H), 4,01 ― 3,89 (m, 1H), 3,63 ― 3,50 (m, 1H), 3,27 ― 3,12 (m, 3H), 2,64 ― 2,53 (m, 4H), 1,94 ― 1,83 (m, 1H), 1,47 ― 1,06 (m, 19H), 1,00 ― 0,79 (m, 1H), 0,73 ― 0,55 (m, 1H), 0,42 ― 0,26 (m, 2H), -0,02 ― -0,16 (m, 2H); MS (ES+) 617,7 (M+1), MS(ES-) 615,6 (M-1), 651,6 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (-) 48,2 [0,17, MeOH].
Etapa-2: Prepararea (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (70b)
Reacţia 2-(5-((-)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (70a) (30 g, 48,7 mmoli) în metanol (300 mL) cu HCl 3 N în metanol (130 mL, 400 mmoli) a dat după prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamida (70b) (25 g, randament 100 %) ca o sare clorhidrat care a fost suficient de pură pentru a fi utilizată ca atare în etapa următoare.
Etapa-3: (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (70c)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (70b) (25,9 g, 48,7 mmoli) în tetrahidrofuran/apă (600/40 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (10,8 g, 43,8 mmoli) utilizând bicarbonat de sodiu (33 g, 400 mmoli) ca bază conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu 0-100% CMA-80 în Cloroform) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (70c) (14 g, 47%) bază liberă ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,45 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,48 ― 8,40 (m, 2H), 8,30 (dd, J= 2,6, 0,8 Hz, 1H), 7,95 ― 7,85 (m, 2H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,38 ― 7,30 (m, 2H), 7,19 ― 7,10 (m, 2H), 4,57 (dd, J = 9,2, 4,0 Hz, 1H), 4,03 (m, 1H), 3,72 (qd, J = 10,8, 4,3 Hz, 2H), 3,20 (s, 3H), 2,40 ― 2,24 (m, 2H), 2,19 (t, J= 8,0 Hz, 2H), 2,09 (m, 1H), 1,03 (m, 2H), 0,62 (m, 1H), 0,40 ― 0,28 (m, 2H), -0,07 (s, 2H). Baza liberă (8,5 g, 15 mmoli) a suferit conversia la sare clorhidrat utilizând soluţie conc. de HCl (2,87 mL) în etanol (30 mL) pentru a se obţine clorhidratul compusului 70c (9,3 g) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,76 ― 9,69 (m, 1H), 9,63 (s, 4H), 9,23 (s, 1H), 8,85 (s, 2H), 8,31 (dd, J = 2,6, 0,8 Hz, 1H), 8,01 ― 7,92 (m, 1H), 7,85 (qd, J = 9,0, 1,7 Hz, 2H), 7,72 (brs, 2H), 7,38 (dd, J = 10,4, 8,8 Hz, 1H), 7,23 (s, 1H), 4,61 (dd, J = 9,2, 4,2 Hz, 1H), 4,05 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 3,78 (dd, J = 10,9, 5,2 Hz, 1H), 3,73 ― 3,62 (m, 1H), 3,21 (s, 3H), 2,41 (m, 2H), 2,06 (m, 1H), 1,14 (m, 2H), 0,68 (m, 1H), 0,43 ― 0,29 (m, 2H), 0,03 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ-125,00; MS (ES+) 567,3 (M+1), 569,3 (M+2), MS (ES-) 601,2 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 96,4 [0,5, MeOH]; Analiză calculată pentru C29H32ClFN6O3,2,25HCl,2,0H2O: C, 50,84; H, 5,63; Cl, 16,82; N, 12,27; Găsit: C, 50,98; H, 5,67; Cl, 16,72; N, 12,12.
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (71a)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (70b) (0,5 g, 0,97 mmoli) în tetrahidrofuran/apă (20/2 mL) cu 4-izocianat de clorofenil (1n) (0,13g, 0,87 mmoli) utilizând bicarbonat de sodiu (0,33 g, 0,4 mmoli) ca bază conform procedurii raportate în etapa 9 din Schema 1 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu utilizând 0-30% CMA-80 în Cloroform) (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(4-clorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (71a) (0,1 g, randament 18%) ca o spumă incoloră; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,60 (s, 1H), 8,62 ― 8,50 (m, 3H), 7,94 (dd, J = 7,4, 2,4 Hz, 1H), 7,61 ― 7,49 (m, 2H), 7,38 ― 7,22 (m, 5H), 7,16 ― 7,06 (m, 1H), 4,55 (dd, J = 9,2, 4,1 Hz, 1H), 4,07 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 3,79 ― 3,69 (m, 1H), 3,61 (dd, J = 10,3, 3,4 Hz, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,48 ― 2,23 (m, 3H), 2,14 ― 2,02 (m, 1H), 1,08 (m, 2H), 0,67 (m, 1H), 0,44 ― 0,30 (m, 2H), -0,03 (m, 2H); HPLC: 6,602 (98 %); MS (ES+) 565,4 (M+), 567,4 (M+2), MS (ES-) 564,5 (M+), 600,5 (M+Cl); Analiză calculată pentru C30H33ClFN5O3,3H2O: C, 58,11; H, 6,34; N, 11,29; Găsit: C, 58,01; H, 5,98; N, 10,96.
Baza liberă a compusului 71a a suferit conversia la sare clorhidrat utilizând soluţie conc. de HCl în etanol pentru a se obţine compusul 71a sare clorhidrat ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO- d6) δ 9,71 (s, 1H), 9,55 (s, 3H), 8,81 (d, J = 5,1 Hz, 2H), 8,59 (s, 1H), 7,98 (dd, J = 7,3, 2,5 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,60 ― 7,50 (m, 2H), 7,38 (dd, J = 10,5, 8,8 Hz, 1H), 7,32 ― 7,25 (m, 2H), 7,21 (s, 1H), 4,57 (dd, J = 9,2, 4,2 Hz, 1H), 4,07 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 3,81 ― 3,69 (m, 1H), 3,62 (dd, J = 10,3, 3,4 Hz, 1H), 3,23 (s, 3H), 2,45 ― 2,35 (m, 3H), 2,14 ― 2,00 (m, 1H), 1,30 ― 0,98 (m, 2H), 0,69 (m, 1H), 0,38 (m, 2H), 0,07 ― 0,01 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -125,33; MS (ES+) 565,4 (M+1), 567,4 (M+2), 588,4, 590,4 (M+Na), MS (ES-) 564,5 (M-1), 600,4 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 67,9 [0,28, MeOH]; Analiză calculată pentru C30H33ClFN5O3,2HCl,2,75H2O: C, 52,33; H, 5,93; Cl, 15,45; N, 10,17; Găsit: C, 52,68; H, 5,94; Cl, 15,30; N, 9,89.
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (72c)
Etapa-1: Prepararea 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (72a)
Reacţia acidului (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxilic (14b) (0,16 g, 0,69 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (39e) (0,27 g, 0,69 mmoli) în tetrahidrofuran (5 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (0,17 g, 0,7 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare astfel cum este raportat în etapa 10 din Schema 1 a dat 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-1-carboxilatul de (2R,4R)-terţ-butil (72a) (0,17 g, 40%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,80 (s, 1H), 8,48 (dt, J= 6,1, 2,3 Hz, 2H), 7,98 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,35 ― 7,26 (m, 2H), 7,20 (d, J = 11,7 Hz, 2H), 5,49 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 5,36 ― 5,17 (m, 1H), 4,35 ― 4,15 (m, 2H), 3,57 ― 3,42 (m, 1H), 3,29 ― 3,16 (m, 1H), 2,44 ― 2,30 (m, 1H), 1,89 ― 1,73 (m, 1H), 1,46 ― 1,01 (m, 19 H), 0,97 ― 0,79 (m, 1H), 0,70 ― 0,50 (m, 1H), 0,43 ― 0,27 (m, 2H), -0,03 ― -0,15 (m, 2H); MS (ES+) 603,5 (M+1), 625,5 (M+Na), MS (ES-) 601,5 (M-1).
Etapa-2: Prepararea (2R,4R)-N-(5-((S)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidei (72b)
Reacţia 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-hidroxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (72a) (0,17 g, 0,27 mmoli) în metanol (10 mL) utilizând 3N HCl în metanol (1 mL) urmat de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat (2R,4R)-N-(5-((S)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxamida (72b) ca un ulei galben, care s-a utilizat ca atare în etapa următoare fără altă purificare.
Etapa-3: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-hidroxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (72c)
Reacţia (2R,4R)-N-(5-((S)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-hidroxipirolidin-2-carboxamidei (72b) obţinute în etapa 2 de mai sus în tetrahidrofuran/apă (8 mL/1 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (0,06 g, 0,25 mmoli) utilizând bicarbonat de sodiu (0,23 g, 2,7 mmoli) ca bază, conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 24 g, eluând cu CMA-80 în cloroform 0-30%) (0,1 g, randament 74%) bază liberă ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,67 (s, 1H), 9,17 (s, 1H), 8,47 ― 8,38 (m, 2H), 8,32 (s, 1H), 8,29 (dd, J = 2,6, 0,8 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,88 (dd, J = 9,1, 0,8 Hz, 1H), 7,79 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,39 ― 7,30 (m, 2H), 7,13 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 5,31 (s, 1H), 4,54 (dd, J = 9,0, 4,8 Hz, 1H), 4,30 (s, 1H), 3,72 (dd, J = 10,4, 5,3 Hz, 1H), 3,50 (q, J = 5,0, 4,1 Hz, 1H), 2,45 ― 2,09 (m, 5H), 1,96 ― 1,80 (m, 1H), 1,10 ― 0,90 (m, 2H), 0,70 ― 0,53 (m, 1H), 0,41 ― 0,22 (m, 2H), -0,02 ― -0,16 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ - 125,05; MS (ES+) 553,5 (M+1), 555,4 (M+2), 575,4, 577,4 (M+Na), MS (ES-) 587,4 (M+Cl). Baza liberă a suferit conversia la sare de HCl utilizând HCl conc în etanol (5 mL) pentru a se obţine sarea de HCl a compusului 72c ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,93 (s, 1H), 9,70 (s, 3H), 9,27 (s, 1H), 8,95 ― 8,86 (m, 2H), 8,30 (dd, J = 2,5, 0,9 Hz, 1H), 8,10 (dd, J = 7,2, 2,5 Hz, 1H), 7,90 ― 7,76 (m, 4H), 7,39 (dd, J = 10,5, 8,8 Hz, 1H), 7,23 (dd, J = 7,3, 4,5 Hz, 1H), 4,57 (dd, J = 8,9, 5,1 Hz, 1H), 4,33 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 3,75 (dd, J = 10,4, 5,4 Hz, 1H), 3,56 ― 3,45 (m, 1H), 2,60 ― 2,53 (m, 2H), 2,47 ― 2,33 (m, 2H), 1,87 (m, 1H), 1,30 ― 0,96 (m, 2H), 0,69 (m, 1H), 0,37 (m, 2H), 0,08 ― 0,01 (m, 2H). 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -125,05; MS (ES+) 553,5 (M+1), 555,4 (M+2), 575,4, 577,4 (M+Na), MS (ES-) 587,4 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 82,96 [0,27, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-acetamido-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (73a)
Reacţia (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (70c) (113 mg, 0,2 mmoli) la 0 °C în diclorometan (3 mL) utilizând piridină (126 mg, 1,6 mmoli) şi anhidridă acetică (81 mg, 0,8 mmoli) aşa cum este raportat în Schema 55 a dat (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-acetamido-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (73a) (91 mg, 75%) ca bază liberă ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,49 (s, 1H), 9,17 (s, 1H), 8,45 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 8,30 (dd, J = 2,7, 0,8 Hz, 2H), 7,94 ― 7,76 (m, 3H), 7,30 ― 7,23 (m, 2H), 7,22 ― 7,05 (m, 2H), 4,58 (dd, J = 9,2, 4,0 Hz, 1H), 4,04 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 3,73 (td, J = 11,3, 6,2 Hz, 3H), 3,21 (s, 3H), 2,43 ― 2,23 (m, 2H), 2,10 (m, 1H), 1,90 (s, 3H), 0,91 (m, 2H), 0,62 (m, 1H), 0,38 ― 0,33 (m, 2H), -0,13 ― -0,13 (m, 2H). 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,00; MS (ES+) 609,4 (M+1), 631,4 (M+Na), MS (ES-) 607,4 (M-), 643,4 (M+Cl); Bază liberă a suferit conversia la sarea de HCl pentru a se obţine sarea de HCl a compusului 73a ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,60 (s, 1H), 9,22 (s, 1H), 8,75 (d, J = 6,2 Hz, 2H), 8,69 (s, 1H), 8,30 (dd, J = 2,6, 0,9 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 7,94 ― 7,88 (m, 3H), 7,86 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 7,81 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,31 ― 7,18 (m, 2H), 4,59 (dd, J = 9,2, 4,1 Hz, 1H), 4,10 ― 4,00 (m, 1H), 3,73 (qd, J = 10,8, 4,3 Hz, 2H), 3,22 (s, 3H), 2,78 ― 2,53 (m, 2H), 2,47 ― 2,32 (m, 1H), 2,15 ― 2,00 (m, 1H), 1,94 (s, 3H), 1,09 ― 0,93 (m, 2H), 0,74 ― 0,57 (m, 1H), 0,34 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 0,04 ― -0,14 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -127,10; MS (ES+) 609,3 (M+1) 631,3 (M+Na); MS (ES-) 643,3 (M+Cl); puritate prin HPLC (87,9048%); Rotaţie optică [α]D = (+) 105,84 [0,565, MeOH]; Analiză calculată pentru C31H34ClFN6O4,1,75HCl,2H2O: C, 52,52; H, 5,65; Cl, 13,75; N, 11,85; Găsit: C, 52,28; H, 5,81; Cl, 13,92; N, 11,67.
Prepararea (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(metilsulfonamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (74a)
Reacţia (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (70a) (57 mg, 0,1 mmoli) la 0 °C în diclorometan (3 mL) utilizând piridină (78 mg, 1 mmoli) şi anhidridă metansulfonică (68 mg, 0,4 mmoli) conform procedurii aşa cum este raportată în Schema 55 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 12 g, eluând cu MeOH în cloroform 0 la 10%) (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(metilsulfonamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (74a) (25 mg, randament 40 %) ca bază liberă ca un solid alb.; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,58 (s, 1H), 9,18 (s, 1H), 8,42 ― 8,25 (m, 2H), 8,01 ― 7,75 (m, 5H), 7,33 ― 7,17 (m, 1H), 7,08 (s, 1H), 4,68 ― 4,53 (m, 1H), 4,04 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 3,89 ― 3,61 (m, 2H), 3,19 (s, 3H), 2,61 ― 2,31 (m, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,10 (m, 1H), 1,14 ― 0,96 (m, 1H), 0,86 (m, 1H), 0,65 ― 0,49 (m, 1H), 0,43 ― 0,22 (m, 2H), -0,01 ― -0,23 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -126,45; MS (ES+) 645,3 (M+1), 667,3 (M+Na), (ES-) 643,4 (M-1). Baza liberă a suferit conversia la sarea de HCl pentru a furniza clorhidratul compusului 74a ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,63 (s, 1H), 9,19 (s, 1H), 8,81 (d, J = 6,2 Hz, 2H), 8,30 (d, J = 2,6, Hz, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,97 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,88 (q, J = 4,1, 2,8 Hz, 3H), 7,82 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1H), 7,29 (dd, J = 10,3, 8,8 Hz, 1H), 7,11 (m, 1H), 4,61 (dd, J = 9,2, 4,1 Hz, 1H), 4,05 (t, J = 4,4 Hz, 1H), 3,78 (m, 1H), 3,21 (s, 3H), 2,78 ― 2,59 (m, 1H), 2,42 (s, 3H), 2,40 ― 2,34 (m, 1H), 2,17 ― 2,02 (m, 1H), 1,37 ― 0,95 (m, 2H), 0,91 ― 0,70 (m, 2H), 0,60 (m, 1H), 0,33 (m, 2H), -0,03 ― -0,13 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -125,93; MS (ES+) 645,3 (M+1), 667,3 (M+Na), MS (ES-) 679,4 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 82,96 [0,27, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(3-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (75e)
Etapa-1 Prepararea (R)-N-((-)-1-(3-aminofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (75b)
Compusul (75b) s-a preparat din bromură de (-)-N-(3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (39d) (4,3 g, 15,5 mmoli) şi (3-(bis(trimetilsilil)amino)fenil)magneziu (34 mL, 34 mmoli, soluţie 1 M în THF) utilizând procedura aşa cum este raportată în etapa 4 din Schema 31 pentru a se obţine (R)-N-((-)-1-(3-aminofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamida (75b) (1,9 g, 33 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,51 ― 8,42 (m, 2H), 7,37 ― 7,29 (m, 2H), 6,94 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,52 (t, J= 2,0 Hz, 1H), 6,47 (dd, J= 7,8, 1,4 Hz, 1H), 6,42 ― 6,34 (m, 1H), 5,15 (s, 1H), 5,05 (s, 2H), 1,14 (s, 10H), 1,05 ― 0,75 (m, 1H), 2,73 ― 2,33 (m, 2H), 0,75 ― 0,53 (m, 1H), 0,43 ― 0,27 (m, 2H), -0,00 ― -0,21 (m, 2H); Rotaţie optică [α]D = (-) 90,34 [0,23, MeOH].
Etapa-2: Prepararea 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (75c)
Compusul 75c s-a preparat din acid (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (36a) (245 mg, 1 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-aminofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (75b) (0,37 g, 1 mmoli) şi 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (250 mg, 1 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 pentru a se obţine 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatul de (2R,4R)-terţ-butil (75c) 0,44 g, 73% randament) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,76 (2s, 1H, rotameri), 8,54 ― 8,43 (m, 2H), 7,65 ― 7,38 (m, 2H), 7,37 ― 7,18 (m, 3H), 7,06 (2 dd, 1H, rotameri), 5,39 (2s, 1H, rotameri), 4,19 (m, 1H), 3,97 (m, 1H), 3,64 (dd, J= 10,6, 6,1 Hz, 1H), 3,20 (2s, 3H, rotameri), 2,44 (m, 3 H), 1,94 ― 1,76 (m, 1H), 1,23 (2s, 9H, rotameri), 1,19 ― 1,04 (m, 10H), 0,99 ― 0,79 (m, 2H), 0,73 ― 0,54 (m, 1H), 0,42 ― 0,28 (m, 2H), 2,75 ― 2,37 (m, 3H), -0,03 ― -0,18 (m, 2H).
Etapa-3: Prepararea (2R,4R)-N-(3-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (75d)
Reacţia 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilatului de (2R,4R)-terţ-butil (75c) (0,44 g, 0,73 mmoli) în metanol (10 mL) cu HCl 3N în MeOH (1 mL) a dat după prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 (2R,4R)-N-(3-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamida (75d) ca o sare clorhidrat, care s-a utilizat ca atare pentru etapa următoare.
Etapa-4: (2R,4R)-N2-(3-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (75e)
Reacţia (2R,4R)-N-(3-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (75d) (0,37 g, 0,73 mmoli) în tetrahidrofuran/apă (25 mL/1 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (0,173 g, 0,7 mmoli) utilizând bicarbonat de sodiu (0,47 g, 5,6 mmoli) ca bază conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 24 g, CMA80 în Cloroform 0 la 30%) (2R,4R)-N2-(3-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (75e) (0,31 g, 80%) ca bază liberă ca un solid alb, care a suferit conversia la sare clorhidrat pentru a furniza sarea de HCl a compusului 75c ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,99 (s, 1H), 9,41 (s, 3H), 9,18 (s, 1H), 8,80 (s, 2H), 8,30 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,92 ― 7,75 (m, 2H), 7,71 ― 7,54 (m, 4H), 7,39 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,08 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,50 (m, 1H), 4,04 (t, J = 5,2 Hz, 1H), 3,85 (dd, J = 10,7, 5,8 Hz, 1H), 3,58 (dd, J = 10,6, 4,4 Hz, 1H), 3,20 (s, 3H), 2,44 (m, 3H), 1,97 (m, 1H), 1,12 (m, 2H), 0,70 (m, 1H), 0,38 (m, 2H), 0,00 (m, 2H); MS (ES+) 562,4 (M+Na), 549,6 (M+), (ES-) 583,5, (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 95,32 [0,235, MeOH]; Analiză calculată pentru C29H33ClN6O3,2,5HCl,3,25H2O: C, 49,85; H, 6,06; Cl, 17,76; N, 12,03; Găsit: C, 49,73; H, 5,89; Cl, 17,83; N, 11,88
Prepararea (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(2-(4-clorofenil)acetil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (76e)
Etapa-1 Prepararea acidului (2R,4R)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (76a)
Compusul 76a s-a preparat prin hidroliza grupării protectoare Boc de pe acidul (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (36a) (0,49 g, 2 mmoli) în metanol (3 mL) cu HCl 3N în MeOH (3 mL) aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4. Aceasta a dat după prelucrare sarea clorhidrat a acidului (2R,4R)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (76a) ca un solid alb-murdar, care s-a utilizat fără altă purificare.
Etapa-2: Prepararea acidului (2R,4R)-1-(2-(4-clorofenil)acetil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (76c)
La o soluţie de acid (2R,4R)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (76a) (2 mmoli, obţinut în etapa 1) în diclorometan (20 mL) s-a adăugat piridină (1 g, 12,5 mmoli), clorură de 4-cloro fenil acetil (76b) (0,38 g, 2 mmoli) şi s-a agitat peste noapte la temperatura camerei. Reacţia s-a diluat cu diclorometan (20 mL), soluţie apoasă saturată de NaHCO3 (40 mL) şi s-a agitat timp de câteva min. Stratul apos s-a separat, s-a acidulat cu HCl 1N (5 mL), şi s-a extras cu acetat de etil (2 x 30 mL). Straturile de acetat de etil s-au combinat, s-au spălat cu saramură, s-au uscat (MgSO4), s-au filtrat şi s-au concentrat pentru a se obţine acidul (2R,4R)-1-(2-(4-clorofenil)acetil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (76c) (0,25 g, randament 42%) ca un solid cauciucos; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,38 (s, 1H), 7,43 ― 7,17 (m, 4H), 4,34 (m, 1H), 4,05 ― 3,95 (m, 1H), 3,87 ― 3,77 (m, 2H), 3,68 (s, 2H), 3,52 ― 3,42 (m, 2H), 3,17 (2s, 3H); MS (ES+) 320,2 (M+Na); (ES-) 296,2 (M-1), 332,2 (M+Cl). Etapa-3: Prepararea (2R,4R)-1-(2-(4-clorofenil)acetil)-N-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (76d)
Compusul 76d s-a preparat din acid (2R,4R)-1-(2-(4-clorofenil)acetil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (76c) (80 mg, 0,27 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (39e) (0,1 g, 0,27 mmoli) şi 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (100 mg, 0,27 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 pentru a se obţine, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 24 g, CMA80 în cloroform 0 la 30%) (2R,4R)-1-(2-(4-clorofenil)acetil)-N-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamida (76d) (0,135 g, 75%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,42 (s, 1H), 8,55 ― 8,44 (m, 2H), 7,89 (d, J= 7,0 Hz, 1H), 7,41 ― 7,05 (m, 8H), 5,54 (s, 1H), 4,57 ― 4,42 (m, 1H), 4,07 ― 3,77 (m, 3H), 3,78 ― 3,68 (m, 2H), 3,65 ― 3,55 (m, 1H), 3,18 (s, 3H), 2,61 (m, 3H), 2,40 ― 2,22 (m, 2H), 1,18 ― 1,08 (m, 10H), 1,01 ― 0,81 (m, 1H), 0,70 ― 0,54 (m, 1H), 0,42 ― 0,29 (m, 2H), -0,02 ― -0,14 (m, 2H); MS (ES+) 669,5 (M+), 691,5 (M+Na), MS (ES-) 667,5 (M-1).
Etapa-4: Prepararea (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(2-(4-clorofenil)acetil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (76e)
Reacţia (2R,4R)-1-(2-(4-clorofenil)acetil)-N-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1, 1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (76d) (0,13 g, 0,19 mmoli) în etanol (10 mL) cu HCl conc (0,2 mL) a dat după prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(2-(4-clorofenil)acetil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamida (76e) (0,09 g, randament 86%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6, la 350 Kelvin) δ 9,07 (s, 1H), 8,49 ― 8,40 (m, 2H), 7,92 (s, 1H), 7,40 ― 7,22 (m, 6H), 7,20 ― 7,05 (m, 3H), 4,58 (m, 1H), 4,04 (m, 1H), 3,90 ― 3,46 (m, 4H), 3,23 (s, 3H), 2,42 ― 2,10 (m, 5H), 1,21 ― 1,01 (m, 2H), 0,77 ― 0,55 (m, 1H), 0,43 ― 0,24 (m, 2H), 0,01 ― - 0,16 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,37; MS (ES+) 565,4, 567,3 MS (ES-) 563,4, 599,3; Rotaţie optică [α]D = (+) 60,3 [0,335, MeOH]; Analiză calculată pentru C31H34ClPN4O3,0,25H20: C; 65,37, H; 6,11, N; 9,84; Găsit: C; 65,18, H; 6,09, N; 9,63.
Prepararea (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(etilamino)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (77a)
Aminarea reductivă a (2R,4R)-N2-(5-((S)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (70c) (0,1 g, 0,17 mmoli) în MeOH (3 mL) utilizând acetaldehidă (0,1 mL, 1,7 mmoli) şi borohidrură de sodiu (0,02 g, 0,53 mmoli) conform procedurii raportate în Schema 41 a dat după prelucrare şi purificare (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(etilamino)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (77a) (55 mg, randament 52,4 %) ca bază liberă ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,46 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,44 (d, J= 6,0 Hz, 2H), 8,30 (dd, J= 2,6, 0,8 Hz, 1H), 7,95 ― 7,74 (m, 3H), 7,31 (d, J= 6,0 Hz, 2H), 7,17 ― 7,05 (m, 2H), 4,58 (d, J= 5,6 Hz, 1H), 4,09 ― 3,97 (m, 1H), 3,81 ― 3,63 (m, 2H), 3,20 (s, 3H), 2,44 ― 2,31 (m, 4H), 2,23 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 2,16 ― 2,03 (m, 2H), 0,99 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 0,94 ― 0,77 (m, 2H), 0,69 ― 0,53 (m, 1H), 0,39 ― 0,27 (m, 2H), -0,09 ― -0,19 (m, 2H); Baza liberă a suferit conversia la sarea de HCl utilizând HCl conc în etanol pentru a se obţine clorhidratul compusului 77a ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,99 (s, 1H), 9,74 (s, 1H), 9,24 (s, 1H), 8,81 (s, 3H), 8,31 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,92 ― 7,79 (m, 2H), 7,79 ― 7,63 (m, 1H), 7,49 ― 7,33 (m, 1H), 7,33 ― 7,19 (m, 1H), 4,61 (dd, J = 8,8, 4,0 Hz, 1H), 4,13 ― 3,98 (m, 1H), 3,87 ― 3,61 (m, 2H), 3,21 (s, 3H), 2,96 ― 2,73 (m, 1H), 2,70 ― 2,54 (m, 4H), 2,46 ― 2,30 (m, 2H), 2,17 ― 1,97 (m, 1H), 1,22 (t, J = 6,6 Hz, 3H), 1,10 ― 0,77 (m, 2H), 0,73 ― 0,54 (m, 1H), 0,46 ― 0,26 (m, 2H), 0,02 ― -0,15 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ - 124,33; MS (ES+) 595,3 (M+1), 617,3 (M+Na), (ES-) 593,3 (M-1), 529,3 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 77,78 [0,27, MeOH]; Analiză calculată pentru C31H36ClPN6O3,2,25HCl,2,5H2O: C, 51,56; H, 6,04; Cl, 15,95; N, 11,64; Găsit: C, 51,48; H, 5,89; Cl, 16,23; N, 11,43.
Prepararea (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(etilamino)-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (78a)
Aminarea reductivă a (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (46k) (0,68 g, 1,169 mmoli) în THF/MeOH (25 mL, 4:1) utilizând acetaldehidă (6,8 mL), acid acetic (1 mL) şi borohidrură de sodiu (0,619 g, 16,366 mmoli) conform procedurii raportate în Schema 41 a dat după prelucrare şi purificare (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(etilamino)-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (78a) (120 mg, 16,79%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,45 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,42 ― 8,09 (m, 2H), 7,98 ― 7,64 (m, 3H), 7,34 ― 6,98 (m, 4H), 4,68 ― 4,47 (m, 1H), 4,13 ― 3,90 (m, 1H), 3,84 ― 3,60 (m, 2H), 3,21 (s, 3H), 2,49 (s, 2H), 2,41 (s, 3H), 2,27 ― 2,17 (m, 2H), 2,14 ― 2,01 (m, 3H), 0,99 (t, J = 6,5 Hz, 3H), 0,93 ― 0,78 (m, 2H), 0,70 ― 0,50 (m, 1H), 0,42 ― 0,18 (m, 2H), -0,04 ― -0,24 (m, 2H); MS (ES+) 609,5, 610,5, 611,5 (M+1); Rotaţie optică [α]D = (+) 74,87 [0,195, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((+)-3-ciclopropil-1-(metilamino)-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (79a)
Aminarea reductivă a (2R,4R)-N2-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (46k) (0,3 g, 0,516 mmoli) în THF/MeOH (20 mL, 4:1) utilizând paraformaldehidă (0,465g, 5,16 mmoli), acid acetic (0,5 mL) şi borohidrură de sodiu (0,195 g, 0,516 mmoli) conform procedurii raportate în Schema 41 a dat după prelucrare şi purificare (2R,4R)-N1-(5-cloropiridin-2-il)-N2-(5-((S)-3-ciclopropil-1-(metilamino)-1-(2-metilpiridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (79a) (80 mg, 25,97%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,45 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,37 - 8,20 (m, 2H), 7,96 - 7,74 (m, 3H), 7,30 - 6,97 (m, 4H), 4,58 (dd, J = 9,1, 3,9 Hz, 1H), 4,07 - 3,98 (m, 1H), 3,82 - 3,60 (m, 2H), 3,20 (s, 3H), 2,43 - 2,38 (m, 2H), 2,40 (s, 3H), 2,20 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 2,13-2,06 (m, 1H), 1,92 (s, 3H), 0,93 - 0,75 (m, 2H), 0,68 - 0,52 (m, 1H), 0,39 - 0,29 (m, 2H), -0,05 - -0,21 (m, 2H); MS (ES-) 593,5, 595,5 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 29,19 [0,185, MeOH].
Prepararea (1R,3R,5R)-N3-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N2-(5-cloropiridin-2-il)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-2,3-dicarboxamidei (80d)
Etapa-1: Prepararea 3-(5-(3-ciclopropil-1-((-)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-2-carboxilatului de (1R,3R,5R)-terţ-butil (80b)
Reacţia acidului (1R,3R,5R)-2-(terţ-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-3-carboxilic (80a) (98 mg, 0,431 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidei (39e) (168 mg, 0,431 mmoli) în tetrahidrofuran (15 mL) utilizând 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (107 mg, 0,431 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 a dat 3-(5-(3-ciclopropil-1-((-)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-2-carboxilatul de (1R,3R,5R)-terţ-butil (80b) (132mg, randament 51%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,80 (s, 1H), 8,49 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 7,99 - 7,82 (m, 1H), 7,32 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 7,24 - 7,03 (m, 2H), 5,51 (s, 1H), 4,80 - 4,61 (m, 1H), 1,97 - 1,79 (m, 1H), 1,55 - 1,47 (m, 1H), 1,44 - 1,37 (m, 3H), 1,26 (s, 9H), 1,13 (s, 9H), 1,03 - 0,84 (m, 4H), 0,70 - 0,56 (m, 2H), 0,41 - 0,29 (m, 2H), -0,02 - -0,12 (m, 2H); MS (ES+) 599,7 (M+1), 621,7 (M+Na); Rotaţie optică [α]D = (-) 30,0 [0,08, MeOH].
Etapa-2: Prepararea (1R,3R,5R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-3-carboxamidei (80c)
Reacţia 3-(5-(3-ciclopropil-1-((-)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-2-carboxilatului de (1R,3R,5R)-terţ-butil (80b) (132 mg, 0,220 mmoli) în etanol (10 mL) utilizând soluţie conc. de HCl în metanol (0,033 mL, 1,102 mmoli) urmată de prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 a dat sarea clorhidrat de (1R,3R,SR)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-3-carboxamidă (80c) (111 mg, 0,224 mmoli, randament 100 %) ca un solid galben, care s-a utilizat în etapa următoare fără altă purificare; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,63 (s, 2H), 9,74 (s, 2H), 9,02 - 8,76 (m, 3H), 7,81 - 7,68 (m, 3H), 7,48 - 7,30 (m, 2H), 4,78 (s, 1H), 3,37 (s, 2H), 2,75 - 2,55 (m, 2H), 2,18 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 1,84 - 1,72 (m, 1H), 1,22 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 0,87 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 0,73 (d, J = 20,9 Hz, 2H), 0,39 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 0,04 (s, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO) δ -122,43; MS (ES+) 395,5 (M+1); Rotaţie optică [α]D = (+) 6,67 [0,09, MeOH].
Etapa-3: Prepararea (1R,3R,SR)-N3-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N2-(5-cloropiridin-2-il)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-2,3-dicarboxamidei (80d)
Reacţia (1R,3R,5R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-3-carboxamidei (80c) obţinute în etapa 2 de mai sus (49,3 mg, 0,198 mmoli) în tetrahidrofuran (10 mL) cu 5-cloropiridin-2-ilcarbamat de fenil (13b) (49,3 mg, 0,198 mmoli) utilizând carbonat de potasiu (76 mg, 0,551 mmoli) ca bază conform procedurii raportate în etapa 3 din Schema 13 a dat, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 24 g, eluând cu CMA-80 în cloroform 0-40%) (1R,3R,5R)-N3-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N2-(5-cloropiridin-2-il)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-2,3-dicarboxamida (80d) (52 mg, 0,095 mmoli, randament 47,8 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,77 (s, 1H), 9,23 (s, 1H), 8,52 ― 8,34 (m, 2H), 8,29 (s, 1H), 7,98 ― 7,72 (m, 3H), 7,44 ― 7,21 (m, 2H), 7,13 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 4,93 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,83 (s, 1H), 2,68 ― 2,55 (m, 1H), 2,45 ― 2,30 (m, 1H), 2,27 ― 2,07 (m, 2H), 1,95 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 1,76 ― 1,55 (m, 1H), 1,24 (s, 1H), 1,16 ― 0,95 (m, 2H), 0,91 ― 0,76 (m, 1H), 0,75 ― 0,53 (m, 2H), 0,43 ― 0,22 (m, 2H), -0,04 ― -0,24 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO) δ -122,43; 19F RMN (282 MHz, DMSO) δ -127,55; MS (ES+) 549,6 (M+1); Rotaţie optică [α]D = (+) 68,46 [0,26, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-clorotiofen-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (81h)
Etapa-1 Prepararea 2-metil 4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxilatului de (2R,4R)-1-terţ-butil (81a)
La o soluţie de acid (2R,4R)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (36a) (2,45 g, 9,99 mmoli) în DMF (30 mL) s-a adăugat K2CO3 (1,381 g, 9,99 mmoli), CH3I (1,249 mL, 19,98 mmoli), s-a agitat la temperatura camerei timp de 48 h, s-a diluat cu apă (200 mL) şi EtOAc (100 mL). Stratul apos s-a extras cu EtOAc (100 mL) şi straturile organice combinate s-au spălat cu apă (100 mL), saramură, s-au uscat (MgSO4), s-au filtrat, s-au concentrat în vid pentru a se obţine 2-metil 4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxilatul de (2R,4R)-1-terţ-butil (81a) (2,5 g, 9,64 mmoli, 97 %) ca un sirop gros colorat în portocaliu deschis; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 4,34 ― 4,17 (m, 1H), 3,99 ― 3,84 (m, 1H), 3,67 ― 3,57 (m, 3H), 3,56 ― 3,45 (m, 1H), 3,29 ― 3,19 (m, 1H), 3,19 ― 3,10 (2s, 3H, rotameri), 2,45 ― 2,23 (m, 1H), 2,08 ― 1,94 (m, 1H), 1,45 ― 1,28 (2s, 9H, rotameri).
Etapa-2: Prepararea 4-metoxipirolidin-2-carboxilatului de (2R,4R)-metil (81b)
Reacţia 2-metil 4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxilat de (2R,4R)-1-terţ-butil (81a) (2,4 g, 9,26 mmoli) în metanol (40 mL) cu HCl 3 N în metanol (9,26 mL, 27,8 mmoli) a dat, după prelucrare, aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4, 4-metoxipirolidin-2-carboxilatul de (2R,4R)-metil (81b) (1,75 g, 8,94 mmoli, randament 97 %) ca un solid alb-murdar; MS (ES+) 160,2 (M+1).
Etapa-3: Prepararea azidei de 5-clorotiofen-2-carbonil (81d)
La o soluţie de acid 5-clorotiofen-2-carboxilic (81c) (0,5 g, 3,08 mmoli) în acetonă (20 mL) răcită la 0 °C s-a adăugat trietilamină (0,471 mL, 3,38 mmoli), cloroformiat de etil (0,325 mL, 3,38 mmoli) şi s-a agitat la 0°C timp de 1 h. La amestecul de reacţie s-a adăugat azidă de sodiu (0,360 g, 5,54 mmoli) şi s-a continuat agitarea la 0°C timp de 2 h, amestecul de reacţie s-a turnat în 50 mL apă cu gheaţă şi s-a extras cu CH2Cl2 (2 × 40). Straturile organice combinate s-au spălat cu apă (2 × 30) şi saramură, s-au uscat, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid pentru a se obţine azida de 5-clorotiofen-2-carbonil (81d) (0,35 g, 1,866 mmoli, randament 60,7 %) ca un semisolid alb; 1H RMN (300 MHz, CDCl3,) δ 7,67 (d, 1H), 6,99 (d, 1H).
Etapa-4: Prepararea 1-(5-clorotiofen-2-ilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilat de (2R,4R)-metil (81e)
O soluţie de azidă de 5-clorotiofen-2-carbonil (81d) (0,35 g, 1,866 mmoli) în toluen s-a încălzit la 100 °C timp de 2 h, s-a răcit la temperatura camerei şi s-a adăugat o soluţie de clorhidrat de 4-metoxipirolidin-2-carboxilat de (2R,4R)-metil (0,365 g, 1,866 mmoli) în diclorometan (15 mL) şi piridină (0,754 mL, 9,33 mmoli). Amestecul de reacţie s-a agitat la temperatura camerei timp de 16 h, s-a turnat în apă (50 mL) şi stratul apos separat s-a extras cu diclorometan (2 × 30 mL). Straturile de diclorometan s-au combinat, s-au spălat cu saramură, s-au uscat, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid. Reziduul obţinut s-a purificat prin cromatografie rapidă [silicagel 24 g, eluând cu MeOH-EtOAc (9:1) în hexan 0 la 100%] pentru a se obţine 1-(5-clorotiofen-2-ilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilatul de (2R,4R)-metil (81e) ca o spumă roz deschis (0,24 g, 0,753 mmoli, randament 40,4 %); 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,78 (s, 1H), 6,77 (d, J= 4,1 Hz, 1H), 6,39 (d, J= 4,1 Hz, 1H), 4,52 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,01 (s, 1H), 3,61 (s, 4H), 3,49 ― 3,38 (m, 1H), 3,17 (s, 3H), 2,35 ― 2,11 (m, 2H); MS (ES+) 341,2 (M+Na), MS (ES-) 317,3 (M-1).
Etapa-5: Prepararea acidului (2R,4R)-1-(5-clorotiofen-2-ilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (81f)
Compusul (81f) s-a preparat prin hidroliza 1-(5-clorotiofen-2-ilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilatului de (2R,4R)-metil (81e) (0,24 g, 0,753 mmoli) în THF (5 mL) utilizând LiOH (0,018 g, 0,753 mmoli) în apă (3 mL) la temperatura camerei conform procedurii raportate în schema 54 etapa 3 pentru a se obţine, după prelucrare, acidul (2R,4R)-1-(5-clorotiofen-2-ilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (81f) (0,205 g, 0,673 mmoli, randament 89 %) ca o spumă violet; MS(ES+) 305,4 (M+1), 327,4 (M+Na), MS(ES-) 303,3 (M-1). Etapa-6: Prepararea (2R,4R)-N1-(5-clorotiofen-2-il)-N2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (81g)
Compusul 81g s-a preparat din acid (2R,4R)-1-(5-clorotiofen-2-ilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxilic (81f) (0,1 g, 0,328 mmoli), (R)-N-((-)-1-(3-amino-4-fluorofenil)-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-metilpropan-2-sulfinamidă (39e) (0,128 g, 0,328 mmoli) şi 2-etoxichinolin-1(2H)-carboxilat de etil (0,089 g, 0,361 mmoli) prin utilizarea condiţiilor de reacţie şi de prelucrare aşa cum sunt raportate în etapa 10 din Schema 1 pentru a se obţine, după purificarea prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel 12 g, eluând cu 0-100% 9:1 acetat de etil/metanol în hexani) (2R,4R)-N1-(5-clorotiofen-2-il)-N2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (81g) (0,037 g, 0,055 mmoli, randament 16,67 %) ca un solid alb-murdar; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,88 (s, 1H), 9,51 (s, 1H), 8,56 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 7,88 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 7,19 (q, J = 10,8, 9,8 Hz, 2H), 6,78 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 6,44 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 5,62 (s, 1H), 4,57 ― 4,46 (m, 1H), 4,15 ― 4,01 (m, 1H), 3,75 ― 3,62 (m, 1H), 3,62 ― 3,48 (m, 1H), 3,21 (s, 3H), 2,66 ― 2,53 (m, 3H), 2,16 ― 2,04 (m, 1H), 1,14 (s, 9H), 1,01 ― 0,78 (m, 2H), 0,72 ― 0,56 (m, 1H), 0,41 ― 0,28 (m, 2H), -0,04 ― - 0,14 (m, 2H); MS (ES+) 676,6 (M+1), 698,6 (M+Na).
Etapa-7: Prepararea (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-clorotiofen-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (81h)
Reacţia (2R,4R)-N1-(5-clorotiofen-2-il)-N2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamidei (81g) (0,03 g, 0,044 mmoli) în metanol (3 mL) cu HCl 3 N în metanol (0,074 mL, 0,222 mmoli) a dat, după prelucrare şi purificare aşa cum este raportat în etapa 6 din Schema 4 (2R,4R)-N2-(5-((-)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-N1-(5-clorotiofen-2-il)-4-metoxipirolidin-1,2-dicarboxamida (81h) (0,015 g, 0,026 mmoli, randament 59,1 %) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,86 (s, 1H), 9,46 (s, 1H), 8,44 (d, J = 4,9 Hz, 2H), 7,85 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,39 - 7,31 (m, 2H), 7,23 - 7,10 (m, 2H), 6,78 (dd, J = 4,1, 1,3 Hz, 1H), 6,44 (dd, J = 4,2, 1,3 Hz, 1H), 4,51 (dd, J = 9,2, 3,7 Hz, 1H), 4,06 (d, J= 5,7 Hz, 1H), 3,69 (dd, J= 10,5, 5,4 Hz, 1H), 3,53 (s, 1H), 3,20 (s, 3H), 2,25 (m, 6H), 1,17 - 0,92 (m, 2H), 0,72 - 0,56 (m, 1H), 0,41 - 0,30 (m, 2H), -0,04 - -0,10 (m, 2H); MS 572,6 (M+1); 570,5 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (-) 27,42 [0,175, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N-(5-(-(+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(1H-indol-6-carbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (82a)
La o soluţie de (2R,4R)-N-(3-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidă (75d) (0,2 g, 0,41mmoli) în DMF (3,0 mL) s-a adăugat DIPEA (0,3 mL); HATU(0,15 g, 0,41mmoli) şi acid 1H-indol-6-carboxilic (0,72g, 0,37 mmoli). Amestecul de reacţie s-a agitat peste noapte la temperatura camerei, s-a stins cu apă (40 mL) şi s-a extras cu acetat de etil (2 × 40 mL). Straturile organice s-au combinat, s-au spălat cu saramură, s-au uscat, s-au filtrat şi s-au concentrat la sec în vid. Reziduul obţinut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, 12 g, eluând cu 0-10% metanol în acetat de etil) pentru a se obţine (2R,4R)-N-(5-(-(+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(1H-indol-6-carbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamida (82a) (0,02 g, randament 10%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 11,32 (s, 1H), 9,64 (s, 1H), 8,50 ― 8,36 (m, 2H), 7,96 (s, 1H), 7,71 ― 7,41 (m, 3H), 7,41 ― 7,29 (m, 2H), 7,19 (m, 3H), 6,48 (s, 1H), 4,84 ― 4,66 (m, 1H), 4,09 ― 3,88 (m, 1H), 3,88 ― 3,68 (m, 1H), 3,68 ― 3,50 (m, 1H), 3,20 (s, 3H), 2,37 ― 2,06 (m, 4H), 2,06 ― 1,85 (m, 1H), 1,02 (m, 2H), 0,64 (m, 1H), 0,34 (m, 2H), -0,03 ― -0,14 (m, 2H); MS (ES+) 556,7 (M+1), 578,6 (M+Na), MS (ES-) 554,6 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 54,19 [0,155, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(3-cloro-1H-indol-6-carbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (83a)
Reacţia (2R,4R)-N-(3-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (75d) (0,2 g, 0,41 mmoli) în DMF (3,0 mL) utilizând DIPEA (0,3 mL); HATU (0,15 g, 0,41 mmoli) şi acid 3-cloro-1H-indol-6-carboxilic (0,72 g, 0,37 mmoli) conform procedurii aşa cum este raportată în Schema 82 a dat (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(3-cloro-1H-indol-6-carbonil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamida (83a) (0,05 g, randament 28%) ca un solid alb; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 11,61 (s, 1H), 9,66 (s, 1H), 8,44 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 7,97 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 7,54 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,37 (m, 3H), 7,16 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 4,75 (t, J= 6,9 Hz, 1H), 3,99 (m, 2H), 3,76 (m, 1H), 3,65 ― 3,49 (m, 1H), 3,19 (s, 3H), 2,32 ― 2,09 (m, 4H), 2,06 ― 1,87 (m, 1H), 1,13 ― 0,92 (m, 2H), 0,71 ― 0,56 (m, 1H), 0,42 ― 0,25 (m, 2H), -0,02 ― -0,13 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,16; MS (ES+) 590,7 (M+1), 612,6 (M+Na), MS(ES-) 588,6 (M-1); Rotaţie optică [α]D = (+) 51,43 [0,21, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(3-amino-4-clorobenzoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (84a)
Reacţia (2R,4R)-N-(3-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (75d) (0,44 g, 0,852 mmoli) în DMF (5,0 mL) utilizând DIPEA (0,7 mL, 3,99 mmoli); EDCI (0,197 g, 1,275 mmoli), HOBt (0,195 g, 1,275 mmoli) şi acid 3-amino-4-clorobenzoic (0,184 g, 1,064 mmoli) conform procedurii aşa cum este raportată în Schema 82 a dat (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(3-amino-4-clorobenzoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamida (84a) (0,06 g, randament 12%) ca un solid alb-murdar; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,64 (s, 1H), 8,53 ― 8,37 (m, 2H), 7,97 (d, J= 7,7 Hz, 1H), 7,42 ― 7,32 (m, 2H), 7,25 (d, J= 8,2 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 6,98 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,72 (dd, J = 8,2, 1,9 Hz, 1H), 5,57 (s, 2H), 4,69 (t, J= 7,7 Hz, 1H), 4,05 ― 3,90 (m, 1H), 3,80 ― 3,65 (m, 1H), 3,54 ― 3,41 (m, 1H), 3,20 (s, 3H), 2,35 ― 2,10 (m, 5H), 2,00 ― 1,84 (m, 1H), 1,12 ― 0,89 (m, 2H), 0,72 ― 0,52 (m, 1H), 0,34 (d, J = 7,6 Hz, 2H), -0,07 (s, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,56; MS (ES+) 589,8 (M+Na), MS (ES-) 601,7 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 57,23 [0,325, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(3-amino-4-fluorobenzoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (85a)
Reacţia (2R,4R)-N-(3-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (75d) (0,44 g, 0,852 mmoli) în DMF (5,0 mL) utilizând DIPEA (0,7 mL, 3,99 mmoli); EDCI (0,198 g, 1,276 mmoli), HOBt (0,195 g, 1,276 mmoli) şi acid 3-amino-4-fluorobenzoic (0,165 g, 1,064 mmoli) conform procedurii aşa cum este raportată în Schema 82 a dat (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(3-amino-4-fluorobenzoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamida (85a) (0,05 g, randament 10,7%) ca un solid alb-murdar; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s, 1H), 8,52 ― 8,38 (m, 2H), 7,98 (s, 1H), 7,48 ― 7,29 (m, 2H), 7,23 ― 6,92 (m, 4H), 6,73 (s, 1H), 5,30 (s, 2H), 4,76 ― 4,60 (m, 1H), 4,06 ― 3,87 (m, 1H), 3,80 ― 3,64 (m, 1H), 3,58 ― 3,34 (m, 1H), 3,20 (s, 3H), 2,37 ― 2,10 (m, 5H), 2,03 ― 1,82 (m, 1H), 1,11 ― 0,90 (m, 2H), 0,73 ― 0,53 (m, 1H), 0,42 ― 0,25 (m, 2H), -0,03 ― -0,16 (m, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -128,63, - 132,44; MS (ES+) 550,7 (M+1), 572,7 (M+Na), MS (ES-) 548,6 (M-1), 584,5 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 55,43 [0,35, MeOH].
Prepararea (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(3-cianobenzoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (86a)
Reacţia (2R,4R)-N-(3-(1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)fenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (75d) (0,7 g, 1,355 mmoli) în DMF (10,0 mL) utilizând DIPEA (0,7 mL, 3,99 mmoli); HATU (0,772 g, 2,032 mmoli) şi acid 3-cianobenzoic (0,25 g, 1,693 mmoli) conform procedurii aşa cum este raportată în Schema 82 a dat (2R,4R)-N-(5-((+)-1-amino-3-ciclopropil-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-1-(3-cianobenzoil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamida (86a) (0,07g, randament 22,4%) ca un solid alb-murdar; 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,62 (s, 1H), 8,44 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 8,08 (s, 1H), 7,98 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,94 - 7,80 (m, 3H), 7,69 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,40 - 7,29 (m, 2H), 7,17 (d, J = 9,3 Hz, 2H), 4,82 - 4,65 (m, 1H), 3,99 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 3,69 (dd, J = 10,5, 5,9 Hz, 1H), 3,55 (dd, J = 10,3, 5,6 Hz, 1H), 3,19 (d, J = 1,1 Hz, 3H), 2,33 - 1,90 (m, 5H), 1,13 - 0,93 (m, 2H), 0,64 (s, 1H), 0,34 (d, J = 7,5 Hz, 2H), -0,07 (s, 2H); 19F RMN (282 MHz, DMSO- d6) δ - 127,51; MS (ES+) 542,7 (M+1), MS (ES-) 540,7 (M-1), 576,6 (M+Cl); Rotaţie optică [α]D = (+) 49,70 [0,33, MeOH].
Exemplul 88
Prepararea (2R,4R)-1-(6-cloronaftalen-2-ilsulfonil)-N-(5-((S)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (87b)
Etapa-1 Prepararea (2R,4R)-N-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (87a)
La o soluţie agitată de 2-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenilcarbamoil)-4-metoxipirolidin-1-carboxilat de (2R,4R)-terţ-butil (75c) (1 g, 1,623 mmoli) în DCM (20 mL) s-a adăugat TFA (3 mL), s-a agitat la temperatura camerei timp de 3h şi s-a concentrat sub vid pentru a se obţine sarea de TFA a (2R,4R)-N-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (87a) 1,3 g ca un solid alb-murdar, care s-a utilizat ca atare în următoarea etapă; MS (ES+) 517,3 (M+1), MS (ES-) 515,2 (M-1).
Etapa-2: Prepararea (2R,4R)-1-(5-cloronaftalen-1-ilsulfonil)-N-(5-((+)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidei (87b)
La o soluţie agitată de (2R,4R)-N-(5-(3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamidă (87a) (0,7 g, 1,355 mmoli) în DCM (20 mL) s-a adăugat N, N-diizopropiletilamină (1,2 mL, 6,775 mmoli) urmată de clorură de 5-cloronaftalen-1-sulfonil (0,354 g, 1,355 mmoli) sub azot. Amestecul de reacţie s-a agitat la temperatura camerei timp de 3 h şi s-a concentrat în vid. Reziduul obţinut s-a purificat prin cromatografie rapidă pe coloană (silicagel, eluând cu 0-2% metanol în acetat de etil) pentru a se obţine (2R,4R)-1-(6-cloronaftalen-2-ilsulfonil)-N-(5-((S)-3-ciclopropil-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-1-(piridin-4-il)propil)-2-fluorofenil)-4-metoxipirolidin-2-carboxamida (87b) (0,06 g, 6,96 %) ca un solid alb-murdar. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,44 - 9,29 (m, 1H), 8,64 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 8,49 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 8,32 - 8,21 (m, 2H), 8,17 (d, J= 8,7 Hz, 1H), 8,07 ― 7,95 (m, 2H), 7,73 (dd, J = 8,8, 2,2 Hz, 1H), 7,45 ― 7,33 (m, 2H), 7,25 ― 7,11 (m, 2H), 4,39 (dd, J = 9,6, 2,9 Hz, 1H), 3,87 - 3,72 (m, 1H), 3,58 (dd, J= 10,5, 2,1 Hz, 1H), 3,11 (s, 3H), 2,34 ― 2,07 (m, 3H), 1,97 ― 1,77 (m, 1H), 1,36 - 1,14 (m, 9H), 1,10 - 1,03 (m, 3H), 0,93 - 0,59 (m, 2H), 0,49 - 0,26 (m, 2H), -0,01 - -0,10 (m, 2H). 19F RMN (282 MHz, DMSO-d6) δ -130,08; MS (ES+): 637,7 (M+1, pierdere a grupării de sulfinamină); (ES-) 635,7 (M-1, pierdere a grupării de sulfinamină), 671,6 (M+Cl, pierdere a grupării de sulfinamină); Rotaţie optică: [α]D = (+) 83,28 [0,305, MeOH].
Exemplul 88
Testul activităţii kalikreinei plasmatice. Efectul compuşilor conform invenţiei asupra activităţii kalikreinei plasmatice umane a fost determinat utilizând substraturile (DiaPharma Group, Inc., West Chester, OH, SUA). În aceste experimente, kalikreina 2 nM (Enzyme Research Laboratories, South Bend, IN, SUA) a fost incubată cu 80 µM S2302 (H-D-Pro-Phe-Arg-p-nitroanilină) în absenţa sau prezenţa unor concentraţii crescătoare de compuşi conform invenţiei într-un volum final de 200 µL tampon Tris-HCl (200 mM NaCl; 2,5 mM CaCl2; 50 mM Tris-HCl, pH 7,8).
După incubarea la 30 °C, activitatea kalikreinei a fost măsurată ca o modificare a absorbanţei la OD 405 nm folosind cititorul de microplăci BioTek PowerWave X340 (Winooski, VT, SUA). Datele au fost analizate folosind software-ul SigmaPlot (Systat Software, Inc., San Jose, CA, SUA) (Curba logistică cu patru parametri). Valorile Ki ale inhibitorilor au fost determinate folosind ecuaţia Cheng-Prusoff (Biochem. Pharmacol. 1973, 22, 3099). Compuşii dezvăluiţi în această cerere au valori Ki mai mici de 1 micromolar (µM) pentru enzima kalikreină plasmatică. Vezi Tabelul 1.

Claims (22)

1. Compus reprezentat prin Formula (I), sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia:
în care, pentru fiecare incidenţă, independent: R1 reprezintă ―OH, ―ORc, ―NH2, ―NHRc, ―NRcRd, alchil (C1-C10), aril (C6-C10), aril (C6-C10) alchil (C1-C10), heteroaril, heteroaril alchil (C1-C10), halo, halo alchil (C1-C10), cicloalchil (C3-C12), (cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10), ―C(O)Rc, ―C(O)OH, ―C(O)ORc, ―OC(O)Rc, ―C(O)NH2, ―C(O)NHRc,―C(O)NRcRd, ―NHC(O)Rc, sau -NRcC(O)Rd; sau două incidenţe geminale ale lui R1 luate împreună cu carbonul la care sunt ataşate reprezintă -C(O)-; sau două incidenţe vicinale sau geminale ale lui R1 luate împreună formează un inel carbociclic (C3-C12) sau heterociclic condensat sau spirociclic opţional substituit; W este ―C(O)NH― sau ―C(O)N(Rc); R2 reprezintă aril (C6-C10) substituit opţional sau heteroaril; V reprezintă aril (C6-C10) substituit opţional sau heteroaril; Z este absent sau reprezintă unul sau mai mulţi substituenţi selectaţi independent din grupul care constă din halo, halo alchil (C1-C10), ―NO2, -CN, ―C(O)Rc, ―C(O)OH, ―C(O)ORc, ―OC(O)Rc, ―C(O)NH2, ―C(O)NHRc, ―C(O)NRcRd, ―NHC(O)Rc, ―N(Rc)C(O)Rd, ―OS(O)p(Rc), ―NHS(O)p(Rc), şi ―NRcS(O)p(Rc); X reprezintă ―C(NH2)―, ―C(NH(Rc))―, ―C(NRcRd)―, ―C(NHS(O)pRc)―, ―C(NHC(O)Rc)―, ―C(NHC(O)NH2)―, ―C(NHC(O)NHRc)―, ―C(NHC(O)NRcRd)―, ―C(OH)―, ―C(O(alchil (C1-C10)))―, ―C(N3)―, ―C(CN)―, ―C(NO2)―, ―C(S(O)nRa)―, ―C[-C(=O)Rc]―, ―C[-C(=O)NRcRd]―, ―C[-C(=O)SRc]―, ―C[-S(O)Rc]―, ―C[-S(O)2Rc]―, ―C[S(O)(ORc)]―, ―C[-S(O)2(ORc)]―, ―C[-SO2NRcRd]―, ―C(halogen)―, ―C(alchil (C1-C10)), -C((cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10)), ―C(alchenil (C2-C10))―, ―C(alchinil (C2-C10))―, sau ―C(aril (C6-C10) alchil (C1-C10))―; R3 reprezintă aril (C6-C10), heteroaril, cicloalchil (C3-C12), sau heterocicloalchil opţional substituit; R3a este absent sau reprezintă unul sau mai mulţi substituenţi selectaţi independent din grupul care constă din halo, hidroxi, alchil (C1-C10), -CF3, -OCF3, alcoxi (C1-C10), aril (C6-C10), heteroaril, ariloxi (C6-C10), amino, amino alchil (C1-C10), -C(O)NH2, ciano,-NHC(O) alchil (C1-C10), -SO2 alchil (C1-C10), -SO2NH2, cicloalchil (C3-C12), -(CH2)rORa, -NO2, -(CH2)rNRaRb, -(CH2)rC(O)Ra, -NRaC(O)Rb, -C(O)NRcRd, -NRaC(O)NRcRd,-C(=NRa)NRcRd, -NHC(=NRa)NRcRd, -NRaRb, -SO2NRcRd, -NRaSO2NRcRd,-NRaSO2 alchil (C1-C10), -NRaSO2Ra, -S(O)pRa, -(CF2)rCF3, -NHCH2Ra, -OCH2Ra,-SCH2Ra, -NH(CH2)2(CH2)rRa, -O(CH2)2(CH2)rRa, sau -S(CH2)2(CH2)rRa ; Y reprezintă o legătură; sau -Y-R4 reprezintă alchilen(C1-C10) -R4,-CH2C(O)-R4, -CH2NH-R4, -CH2N(alchil (C1-C10))-R4, -CRaRb-R4, -NH-R4, -NHCH2-R4, -NHC(O)-R4, -N((C1-C10)alchil)-R4, -N(alchil (C1-C10))CH2-R4, -N((CH2)2OH)-R4, -N((cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10))R4, -heterociclil-R4, -OR4, -OCH2-R4, -OC(O)-R4, -OC(O)NRaRb, -SCH2R4, sau -SR4 substituit opţional; R4 reprezintă hidrogen, hidroxi, alchil (C1-C10), (C3-C12)cicloalchil, (heterocicloalchil) alchil (C1-C10), (cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10), -CH2OH,-CH(alchil (C1-C10))OH, -CH(NH2)CH(alchil (C1-C10))2, aril (C6-C10), aril (C6-C10) alchil (C1-C10), heteroaril, heteroaril alchil (C1-C10), -CH2S(alchil (C1-C10)), amino, sau ciano opţional substituit; sau -(CRaRb)r(CRaRb)p- condensat la poziţia a 4-a a inelului care poartă Z pentru a forma un inel heterociclic cu 5 la 7 membri cu substituenţi opţionali; sau, atunci când fiecare R3 este fenil, R4 poate reprezenta -NRa- condensat la poziţia orto la X pe acel fenil; Ra şi Rb este independent H, alchil (C1-C10), alchenil (C2-C10), alchinil (C2-C10), aril (C6-C10) alchil (C1-C10), (cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10), -C(=O)Rc, -C(=O)ORc,-C(=O)NRcRd, -C(=O)SRc, -S(O)Rc, -S(O)2Rc, -S(O)(ORc), sau ―SO2NRcRd; Rc şi Rd reprezintă, independent pentru fiecare incidenţă, alchil (C1-C10), alchenil (C2-C10), alchinil (C2-C10), halo alchil (C1-C10), aril (C6-C10), aril (C6-C10) alchil (C1-C10), heteroaril, heteroaril alchil (C1-C10), cicloalchil (C3-C12), (cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10), heterocicloalchil, (heterocicloalchil) alchil (C1-C10), -C(O) alchil (C1-C10), sau -S(O)p(alchil (C1-C10)), opţional substituit; sau Rc şi Rd pot fi luaţi împreună pentru a forma un inel heterociclic opţional substituit; r este 0, 1, 2, sau 3; n este un întreg de la 0 la 6; şi p este 0,1, sau 2; în care în plus: "heteroaril" înseamnă un inel aromatic monociclic, biciclic, sau policiclic având 3-12 atomi în total şi cel puţin un heteroatom selectat din grupul care constă din azot, oxigen, şi sulf; "heterociclic," "heterocicloalchil," şi "heterociclil" înseamnă un inel non-aromatic monociclic, biciclic, sau triciclic având 3-12 atomi în total şi cel puţin un heteroatom selectat din grupul care constă din azot, oxigen, şi sulf; şi "opţional substituit" înseamnă nesubstituit sau substituit cu unul sau mai mulţi substituenţi fiecare selectaţi independent din grupul care constă din halogen, azidă, alchil (C1-Cio), aril (C6-C10) alchil (C1-C10), alchenil (C2-C10), alchinil (C2-C10), cicloalchil (C3-C12), hidroxil, alcoxi (C1-C10), amino (de exemplu, -NH2, -NH(alchil (C1-C6)), - N(alchil (C1-C6))2), nitro, sulfhidril, imino, amido, fosfonat, fosfinat, carbonil, carboxil, silil, eter, alchiltio (C1-C10), sulfonil, sulfonamido, cetonă, aldehidă, ester, heterociclil, aril (C6-C10), heteroaril, fluoro alchil (C1-C10), ciano, -C(O)O alchil (C1-C6), -C(O)NH2, -C(O)NH alchil (C1-C6), -C(O)N(alchil (C1-C6))2, şi haloalchil (C1-C6).
2. Compus conform revendicării 1, în care R1 reprezintă ―OH, -ORc, -NH2, ―NHRc, ―NRcRd, alchil (C1-C10), aril (C6-C10), heteroaril, halo, halo alchil (C1-C10), cicloalchil (C3-C12), ―OC(O)Rc, ―NHC(O)Rc, sau ―NRcC(O)Rd; sau două incidenţe geminale ale lui R1 luate împreună cu carbonul la care sunt ataşate reprezintă -C(O)-; sau două incidenţe vicinale sau geminale ale lui R1 luate împreună formează un inel carbociclic (C3-C12) sau heterociclic condensat sau spirociclic opţional substituit.
3. Compus conform revendicării 2, în care R1 reprezintă ―OH, -ORc, -NH2, alchil (C1-C10), (C6-C10)aril, halo, halo(C1-C10)alchil, (C3-C12)cicloalchil, sau ―OC(O)Rc; şi în care n este 1 sau n este 2.
4. Compus conform revendicării 3, în care n este 1; şi în care R1 reprezintă ―OH, ―O(alchil (C1-C6)), ―OC(O)(alchil (C1-C6)), -NH2, sau alchil (C1-C6).
5. Compus conform revendicării 3, în care n este 2; şi în care cele două incidenţe ale R1 sunt geminale.
6. Compus conform revendicării 5, în care: (a) o incidenţă a lui R1 reprezintă -OH sau ―ORc; şi cealaltă incidenţă a lui R1 reprezintă aril (C6-C10) sau heteroaril; (b) o incidenţă a lui R1 reprezintă -OH sau ―ORc; şi cealaltă incidenţă a lui R1 reprezintă halo alchil (C1-C10); sau (c) albele incidenţe ale lui R1 sunt halo.
7. Compus conform revendicării 2, în care două incidenţe geminale ale lui R1 luate împreună cu carbonul la care sunt ataşate reprezintă -C(O)-.
8. Compus conform revendicării 3, în care n este 2; şi în care cele două incidenţe ale R1 sunt vicinale; şi cele două incidenţe vicinale ale lui R1 luate împreună formează un inel carbociclic (C3-C12) condensat opţional substituit.
9. Compus conform revendicării 1, în care R2 reprezintă aril (C6-C10) sau heteroaril, substituită cu unul sau mai mulţi substituenţi selectat din grupul care constă din ―OH, halo, -NH2, -NH(alchil (C1-C6)), -N(alchil (C1-C6))2, -CN, -NO2, alchil (C1-C6), haloalchil (C1-C6), alcoxi (C1-C6), -C(O)OH, -C(O)O alchil (C1-C6), -C(O)NH2, -C(O)NH alchil (C1-C6), şi -C(O)N(alchil (C1-C6))2; preferabil în care R2 reprezintă (halo) aril (C6-C10) sau (halo)heteroaril.
10. Compus conform oricăreia dintre revendicările 1-9, în care V reprezintă aril (C6-C10) opţional substituit.
11. Compus conform oricăreia dintre revendicările 1-10, în care Z este absent, sau în care Z reprezintă unul sau mai mulţi substituenţi selectaţi independent din grupul care constă din halo, halo alchil (C1-C10), ―NO2, şi -CN.
12. Compus conform revendicării 11, în care Z reprezintă într-o circumstanţă halo; sau în care Z reprezintă într-o circumstanţă fluoro.
13. Compus conform oricăreia dintre revendicările 1-12, în care X reprezintă ―C(NH2)―, ―C(NH(Rc))―, ―C(NRcRd)―,―C(NHS(O)pRc)―, ―C(NHC(O)Rc)―, ―C(NHC(O)NH2)―, ―C(NHC(O)NHRc)―, sau ―C(NHC(O)NRcRd)―.
14. Compus conform revendicării 13 în care X reprezintă ―C(NH2)―; ―C(NH(cicloalchil (C3-C12))- alchil (C1-C10))―; ―C(NH alchil (C1-C6))―; ―C(NHS(O)p alchil (C1-C6))―, în care p este 1 sau 2; ―C(NHC(O)NH(aril (C6-C10)))- opţional substituit; C(NHC(O)NH(heteroaril))― opţional substituit; sau ―C(NHC(O)(alchil (C1-C6)))―.
15. Compus conform oricăreia dintre revendicările 1-14, în care R3 reprezintă (aril (C6-C10) opţional substituit sau heteroaril opţional substituit, preferabil în care R3 reprezintă fenil, opţional substituit cu unul sau mai mulţi substituenţi selectaţi din grupul care constă din ―CN, halo, -NO2, alchil (C1-C6), şi haloalchil (C1-C6); sau în care R3 reprezintă piridil.
16. Compus conform oricăreia dintre revendicările 1-15, în care R3a este absent sau reprezintă halo, alchil (C1-C10), -CF3, -OCF3, aril (C6-C10), heteroaril, -C(O)NH2, ciano, -NHC(O) alchil (C1-C10), -SO2 alchil (C1-C10), -SO2NH2, -NO2, -NRaC(O)Rb, -C(O)NRcRd, - NRaC(O)NRcRd, -C(=NRa)NRcRd, -NHC(=NRa)NRcRd, -SO2NRcRd, -NRaSO2NRcRd, -NRaSO2 alchil (C1-C10), -NRaSO2Ra, -S(O)pRa, sau -(CF2)rCF3.
17. Compus conform oricăreia dintre revendicările 1-16, în care Y reprezintă o legătură şi/sau în care R4 reprezintă H, (cicloalchil (C3-C12)) alchil (C1-C10), sau (ciclopropil) alchil (C1-C6).
18. Compus conform revendicării 1, selectat din următorul tabel:
19. Compoziţie farmaceutică, care cuprinde un compus conform oricăreia dintre revendicările 1-18, sau a sare acceptabilă farmaceutic a acestuia; şi un purtător acceptabil farmaceutic, în care, opţional, compoziţia farmaceutică este formulată pentru administrarea parenterală sau administrarea orală.
20. Compus conform oricăreia dintre revendicările 1-18, sau sare acceptabilă farmaceutic a acestuia, pentru utilizarea în tratamentul sau prevenirea unei boli sau stări caracterizate printr-o activitate nedorită a kalikreinei plasmatice; în care boala sau starea caracterizată prin activitatea nedorită a kalikreinei plasmatice este selectată din grupul care constă din accident vascular, inflamaţie, leziune de reperfuzie, infarct miocardic acut, tromboză venoasă profundă, stare post tratament fibrinolitic, angină, edem, angioedem, angioedem ereditar, sepsis, artrită, hemoragie, pierderi de sânge în timpul bypass-ului cardiopulmonar, boală inflamatorie intestinală, diabet zaharat, retinopatie, retinopatie diabetică, edem macular diabetic, degenerescenţă maculară diabetică, edem macular legat de vârstă, degenerescenţă maculară legată de vârstă, retinopatie proliferativă, neuropatie, hipertensiune, edem cerebral, excreţie crescută de albumină, macroalbuminurie, şi nefropatie.
21. Compus pentru utilizarea conform revendicării 20, în care boala sau starea caracterizată prin activitatea nedorită a kalikreinei plasmatice este un angioedem.
22. Compus pentru utilizarea conform revendicării 20, în care boala sau starea caracterizată prin activitatea nedorită a kalikreinei plasmatice este un angioedem ereditar.
MDE20180777T 2015-10-01 2016-09-30 Inhibitori de kalikreină plasmatică umană MD3355890T2 (ro)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562235754P 2015-10-01 2015-10-01
PCT/US2016/054619 WO2017059178A1 (en) 2015-10-01 2016-09-30 Human plasma kallikrein inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
MD3355890T2 true MD3355890T2 (ro) 2022-03-31

Family

ID=58424336

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MDE20180777T MD3355890T2 (ro) 2015-10-01 2016-09-30 Inhibitori de kalikreină plasmatică umană

Country Status (31)

Country Link
US (3) US10562850B2 (ro)
EP (2) EP3355890B1 (ro)
JP (2) JP6916171B2 (ro)
KR (1) KR102696432B1 (ro)
CN (2) CN114591212B (ro)
AR (1) AR106241A1 (ro)
AU (2) AU2016330926B2 (ro)
CA (1) CA2999164A1 (ro)
CO (1) CO2018004572A2 (ro)
CY (1) CY1124907T1 (ro)
DK (2) DK3355890T3 (ro)
EA (2) EA038492B1 (ro)
ES (2) ES2905401T3 (ro)
FI (1) FI4019022T3 (ro)
HR (2) HRP20220059T1 (ro)
HU (2) HUE066999T2 (ro)
IL (3) IL291268B2 (ro)
LT (2) LT3355890T (ro)
MA (1) MA43052B1 (ro)
MD (1) MD3355890T2 (ro)
MX (2) MX385687B (ro)
MY (1) MY198346A (ro)
PH (2) PH12022550143A1 (ro)
PL (2) PL4019022T3 (ro)
PT (2) PT4019022T (ro)
RS (2) RS62807B1 (ro)
SG (1) SG10202003705WA (ro)
SI (2) SI3355890T1 (ro)
SM (2) SMT202200075T1 (ro)
TW (2) TWI796714B (ro)
WO (1) WO2017059178A1 (ro)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EA038492B1 (ru) 2015-10-01 2021-09-07 Байокрист Фармасьютикалз, Инк. Ингибиторы плазменного калликреина человека
EP4494698A3 (en) 2017-08-04 2025-04-23 Takeda Pharmaceutical Company Limited Inhibitors of plasma kallikrein and uses thereof
EP3841086B1 (en) 2018-08-20 2025-04-23 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compounds for the treatment of complement factor d medical disorders
JP7443375B2 (ja) 2018-09-06 2024-03-05 アキリオン ファーマシューティカルズ， インコーポレーテッド 医学的障害の治療のための大環状化合物
CN110938077B (zh) * 2019-12-25 2021-04-27 武汉九州钰民医药科技有限公司 合成Avapritinib的方法
TW202144331A (zh) * 2020-02-13 2021-12-01 德商百靈佳殷格翰國際股份有限公司 作為血漿激肽釋放酶抑制劑之雜芳族甲醯胺衍生物
JP2023515073A (ja) 2020-02-20 2023-04-12 アキリオン ファーマシューティカルズ， インコーポレーテッド 補体因子ｄ媒介障害の処置用のヘテロアリール化合物
CN116444485B (zh) * 2023-03-30 2024-01-23 广西中医药大学 吡啶基取代不对称脲的非金属催化、免柱层析合成方法

Family Cites Families (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4559157A (en) 1983-04-21 1985-12-17 Creative Products Resource Associates, Ltd. Cosmetic applicator useful for skin moisturizing
LU84979A1 (fr) 1983-08-30 1985-04-24 Oreal Composition cosmetique ou pharmaceutique sous forme aqueuse ou anhydre dont la phase grasse contient un polyether oligomere et polyethers oligomeres nouveaux
LU86084A1 (fr) 1985-09-20 1987-04-02 Faco Sa Apparei de massage electrique
US5102417A (en) 1985-11-07 1992-04-07 Expandable Grafts Partnership Expandable intraluminal graft, and method and apparatus for implanting an expandable intraluminal graft
US4800882A (en) 1987-03-13 1989-01-31 Cook Incorporated Endovascular stent and delivery system
US4820508A (en) 1987-06-23 1989-04-11 Neutrogena Corporation Skin protective composition
US4886062A (en) 1987-10-19 1989-12-12 Medtronic, Inc. Intravascular radially expandable stent and method of implant
US4992478A (en) 1988-04-04 1991-02-12 Warner-Lambert Company Antiinflammatory skin moisturizing composition and method of preparing same
US4938949A (en) 1988-09-12 1990-07-03 University Of New York Treatment of damaged bone marrow and dosage units therefor
WO1990013332A1 (en) 1989-05-11 1990-11-15 Cedars-Sinai Medical Center Stent with sustained drug delivery
EP0470246B1 (en) 1990-02-28 1995-06-28 Medtronic, Inc. Intralumenal drug eluting prosthesis
US5419760A (en) 1993-01-08 1995-05-30 Pdt Systems, Inc. Medicament dispensing stent for prevention of restenosis of a blood vessel
US5429634A (en) 1993-09-09 1995-07-04 Pdt Systems Biogenic implant for drug delivery and method
WO1995007986A1 (en) * 1993-09-14 1995-03-23 Genentech, Inc. Pharmaceutical compositions containing ecotin and homologs thereof
US6774278B1 (en) 1995-06-07 2004-08-10 Cook Incorporated Coated implantable medical device
WO1998006694A1 (en) 1996-08-16 1998-02-19 Du Pont Pharmaceuticals Company Amidinophenyl-pyrrolidines, -pyrrolines, and -isoxazolidines and derivatives thereof
EP1217000A1 (en) 2000-12-23 2002-06-26 Aventis Pharma Deutschland GmbH Inhibitors of factor Xa and factor VIIa
GEP20074098B (en) 2001-09-21 2007-05-10 Bristol Myers Squibb Co Lactam-containing compounds and derivatives thereof as factor xa inhibitors
US7030141B2 (en) * 2001-11-29 2006-04-18 Christopher Franklin Bigge Inhibitors of factor Xa and other serine proteases involved in the coagulation cascade
US6770729B2 (en) 2002-09-30 2004-08-03 Medtronic Minimed, Inc. Polymer compositions containing bioactive agents and methods for their use
DE10301300B4 (de) * 2003-01-15 2009-07-16 Curacyte Chemistry Gmbh Verwendung von acylierten 4-Amidino- und 4-Guanidinobenzylaminen zur Inhibierung von Plasmakallikrein
US7122557B2 (en) 2003-03-18 2006-10-17 Bristol-Myers Squibb Company Sulfonyl-amidino-containing and tetrahydropyrimidino-containing compounds as factor Xa inhibitors
KR20050118708A (ko) * 2003-04-03 2005-12-19 메르크 파텐트 게엠베하 혈전-색전 질환의 치료에서 응고 인자 ｘａ의 저해제로서사용하기 위한피롤리디노-１,２-디카르복시-１-(페닐아미드)-２-(４-(３-옥소-모르폴리노-４-일)-페닐아미드) 유도체 및 관련화합물
DE10315377A1 (de) * 2003-04-03 2004-10-14 Merck Patent Gmbh Carbonylverbindungen
US7199149B2 (en) 2003-10-01 2007-04-03 Bristol Myers Squibb Company Monocyclic and bicyclic lactams as factor Xa inhibitors
DE102004014945A1 (de) 2004-03-26 2005-10-13 Merck Patent Gmbh Prolinylderivate
TW201311689A (zh) 2011-08-05 2013-03-16 必治妥美雅史谷比公司 作為因子ｘｉａ抑制劑之新穎巨環化合物
EP2807156A1 (en) 2012-01-27 2014-12-03 Novartis AG Aminopyridine derivatives as plasma kallikrein inhibitors
US20140378474A1 (en) 2012-01-27 2014-12-25 Novartis Ag 5-membered heteroarylcarboxamide derivatives as plasma kallikrein inhibitors
MY169986A (en) 2012-06-04 2019-06-19 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Benzimidazole-proline derivatives
GB201300304D0 (en) 2013-01-08 2013-02-20 Kalvista Pharmaceuticals Ltd Benzylamine derivatives
WO2015107724A1 (ja) 2014-01-14 2015-07-23 大日本住友製薬株式会社 縮合５－オキサゾリジノン誘導体
SG11201607267SA (en) * 2014-03-07 2016-09-29 Biocryst Pharm Inc Human plasma kallikrein inhibitors
GB201421083D0 (en) 2014-11-27 2015-01-14 Kalvista Pharmaceuticals Ltd Enzyme inhibitors
SI3261639T1 (sl) 2015-02-27 2023-01-31 Verseon International Corporation Substituirane pirazolne spojine kot zaviralci serinskih proteaz
EA038492B1 (ru) 2015-10-01 2021-09-07 Байокрист Фармасьютикалз, Инк. Ингибиторы плазменного калликреина человека

Also Published As

Publication number Publication date
HRP20240557T8 (hr) 2024-09-27
FI4019022T3 (fi) 2024-04-19
AU2016330926A1 (en) 2018-04-26
HRP20240557T1 (hr) 2024-07-05
HRP20220059T1 (hr) 2022-04-15
IL291268A (en) 2022-05-01
WO2017059178A1 (en) 2017-04-06
MX385687B (es) 2025-03-18
KR20180058815A (ko) 2018-06-01
AR106241A1 (es) 2017-12-27
IL291268B1 (en) 2023-08-01
ES2985200T3 (es) 2024-11-04
PT4019022T (pt) 2024-03-11
SI3355890T1 (sl) 2022-04-29
PH12022550143A1 (en) 2022-11-21
LT4019022T (lt) 2024-03-25
EA202191548A1 (ru) 2021-09-02
EP4019022A1 (en) 2022-06-29
CN108289893A (zh) 2018-07-17
CN114591212A (zh) 2022-06-07
EP3355890A4 (en) 2019-04-24
CY1124907T1 (el) 2023-01-05
SI4019022T1 (sl) 2024-06-28
US20220098151A1 (en) 2022-03-31
DK3355890T3 (da) 2022-01-03
JP2018529721A (ja) 2018-10-11
IL258104A (en) 2018-05-31
US20200361867A1 (en) 2020-11-19
LT3355890T (lt) 2021-12-27
IL281066A (en) 2021-04-29
JP2021169505A (ja) 2021-10-28
EP3355890B1 (en) 2021-11-10
TWI734702B (zh) 2021-08-01
IL281066B (en) 2022-04-01
AU2016330926B2 (en) 2021-04-29
IL291268B2 (en) 2023-12-01
SG10202003705WA (en) 2020-06-29
CN114591212B (zh) 2025-01-28
US11066360B2 (en) 2021-07-20
US20180362458A1 (en) 2018-12-20
HK1254865A1 (en) 2019-07-26
CA2999164A1 (en) 2017-04-06
TW201716381A (zh) 2017-05-16
CN108289893B (zh) 2022-04-12
RS65443B1 (sr) 2024-05-31
TWI796714B (zh) 2023-03-21
PH12018500678A1 (en) 2018-10-01
DK4019022T3 (en) 2024-02-19
PT3355890T (pt) 2022-01-19
NZ741030A (en) 2024-12-20
KR102696432B1 (ko) 2024-08-16
PL4019022T3 (pl) 2024-06-24
EP3355890A1 (en) 2018-08-08
TW202136212A (zh) 2021-10-01
AU2021201924A1 (en) 2021-04-29
HUE057106T2 (hu) 2022-04-28
MX2018003930A (es) 2018-09-18
ES2905401T3 (es) 2022-04-08
US11807605B2 (en) 2023-11-07
JP7431778B2 (ja) 2024-02-15
CO2018004572A2 (es) 2018-10-31
MA43052B1 (fr) 2021-11-30
MY198346A (en) 2023-08-28
JP6916171B2 (ja) 2021-08-11
MA43052A (fr) 2021-05-12
AU2021201924B2 (en) 2022-10-13
EA038492B1 (ru) 2021-09-07
BR112018005843A2 (pt) 2018-10-16
EP4019022B1 (en) 2024-01-31
SMT202200075T1 (it) 2022-03-21
MX2021010297A (es) 2021-10-22
EA201890862A1 (ru) 2018-10-31
SMT202400111T1 (it) 2024-05-14
RS62807B1 (sr) 2022-02-28
PL3355890T3 (pl) 2022-02-21
IL258104B (en) 2021-03-25
US10562850B2 (en) 2020-02-18
HUE066999T2 (hu) 2024-10-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7431778B2 (ja) ヒト血漿カリクレイン阻害剤
JP2021169499A (ja) ヒト血漿カリクレイン阻害剤
TWI290136B (en) Ethylenediamine derivatives
CA2936886A1 (en) Heterocyclic compounds as nav channel inhibitors and uses thereof
HK40075971B (en) Human plasma kallikrein inhibitors
HK40075971A (en) Human plasma kallikrein inhibitors
HK1254865B (en) Human plasma kallikrein inhibitors
BR112018005843B1 (pt) Compostos inibidores de calicreína de plasma humano
EA048195B1 (ru) Ингибиторы плазменного калликреина человека